蒽醌的测定方法
虎杖中蒽醌类成分的提取分离鉴定及含量测定
氢氧化铝-2%氢氧化铵混合碱分次提取至无色，合并碱
液，用少量氯仿洗涤，碱液调整至一定体积，碱液若不
澄清，垂熔漏斗过滤，滤液在沸水浴中加热4分钟，用
冷水冷却至室温，30分钟后在490nm比色，由标准曲线
计算含量。
四、 实验讨论及注意事项
1.常压蒸馏回收溶剂之前，应该加入沸石，以免暴 沸。
2.什么是梯度pH萃取法，适用于哪些物质的分离？ 试解释本次试验中pH萃取法应该注意哪些事项？
2、薄层色谱(TLC)： 吸附剂：硅胶G－CMCNa板，用前活化 展开剂：石油醚—乙酸乙酯 (2：1) 样 品：a,b,c乙醇液，大黄素标准品 显 色：①先置可见光下观察色斑， 后紫外灯下观察荧光斑点 ②再用2%NaOH喷洒显色 结果及计算比移值
（三）含量测定
虎杖中游离蒽醌的测定
▪ 1. 标准曲线的制备
三、实验内容
(一)虎杖中蒽醌苷元的提取与分离 1、虎杖中蒽醌类成分的提取： 2、蒽醌苷与苷元的分离： 3、不同酸性蒽醌苷元的分离（梯度pH萃取法）
流程图
（二）鉴定
1、颜色反应 (l)、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中，
加少量乙醇溶解后，加2％NaOH溶液数滴，观察颜 色变化。 （2）、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中， 加少量乙醇溶解后，再滴加1%醋酸镁的乙醇溶液 数滴，观察颜色变化。 （3）、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中， 加少量乙醇溶解后，再滴加1%三氯化铁的乙醇溶 液数滴，观察颜色变化。
3.两相萃取时，不可猛力振摇，只能轻轻旋转摇动， 以免造成严重乳化现象而影响分层。如果出现乳 化现象，如何破除？
4.TLC鉴定a,b,c时，解释三者相对比移值的大小关 系？
▪
称取1,8-二羟基蒽醌25mg置于200ml容量瓶中，乙
实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数
实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数实验七紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数一、实验目的1.掌握紫外吸收光谱法测定物质含量的原理和方法。
2.学习使用紫外分光光度计进行定量和定性分析。
3.通过实验测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。
二、实验原理紫外吸收光谱法是一种基于物质分子吸收紫外光后产生的特定波长处的吸光度与物质浓度的关系来进行定量分析的方法。
在本实验中，蒽醌分子在紫外光照射下会产生特征吸收，其吸光度与浓度之间存在线性关系。
通过测定试样在特定波长处的吸光度，可以计算出蒽醌的含量。
同时，通过标准曲线法，可以测定出该波长下蒽醌的摩尔吸光系数。
三、实验步骤1.准备实验仪器和试剂：紫外分光光度计、100mL容量瓶、电子天平、蒽醌标准品、蒽醌试样、实验用水。
2.配制标准溶液：分别称取一定量的蒽醌标准品，用实验用水溶解并定容至100mL容量瓶中，得到不同浓度的蒽醌标准溶液。
3.绘制标准曲线：分别测定不同浓度蒽醌标准溶液在特定波长处的吸光度，绘制吸光度与浓度之间的标准曲线。
4.测定试样：将蒽醌试样用实验用水溶解，并定容至100mL容量瓶中。
测定试样在特定波长处的吸光度。
5.数据处理：根据标准曲线，计算试样中蒽醌的含量；同时，通过摩尔吸光系数的计算公式，得出试样中蒽醌的摩尔吸光系数。
四、结果与讨论1.结果：实验数据包括标准曲线的数据以及试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。
通过线性回归分析，可以得出标准曲线的斜率和截距，进而计算出试样中蒽醌的含量。
摩尔吸光系数的计算公式为：ε = (斜率/截距) × 100% × 稀释倍数。
2.讨论：本实验通过紫外吸收光谱法成功地测定了蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸光系数。
这种方法具有操作简便、快速、准确度高等优点，适用于各种化合物的定量和定性分析。
此外，实验过程中需要注意以下几点：（1）在选择波长时，应选择具有最大摩尔吸光系数的波长进行测定，以提高测定的灵敏度和准确性。
蒽醌
蒽醌2.1标准曲线的绘制：精密量取上述标准溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别至于25ml容量瓶中，在水浴上挥净乙醚，放凉，分别加5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在490nm下，以1cm比色杯测定吸光度，用回归法求标准曲线方程。
2.2供试品溶液的制备及总蒽醌含量的测定：取本品50粒，倾出内容物，精密称定供试品内容物3g，于250ml烧瓶中，加5N硫酸45ml，直火加热水解2h，加入氯仿40ml，萃取3次（40ml，30ml，30ml），萃取液用蒸馏水洗涤2次（20ml，20ml），再用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取4次（30ml，20 ml ，20ml，20ml），合并萃取液，用氯仿洗涤数次至氯仿层无色，弃去氯仿层，用5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液定容至100ml，摇匀，以5%氢氧化钠—2%氢氧化铵混合碱液为空白对照，在490nm下，以1cm比色杯测定吸光度，由线性方程计算即得供试品溶液的浓度。
蒽醌类化合物按结构的不同可分成羟基蒽醌类、氧化蒽酚及蒽酚类、二蒽酮类。
目前其提取方法主要采用溶剂提取法，如浸渍、渗漉、连续回流提取等方式，所用的溶剂主要有乙醇、甲醇、氯仿、乙醚、苯、石油醚、吡啶、丙酮、硫酸溶液、盐酸溶液及氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化铵等溶液。
其含量测定方法有重量法、荧光法、比色法、极谱法、薄层扫描法、高效液相色谱法等，而单味植物药或其复方制剂中的蒽醌化合物含量，一般以大黄素或大黄酸、1，8-二羟基蒽醌为标准测定游离蒽醌或总蒽醌，结合蒽醌的量等于总蒽醌减去游离蒽醌。
1 比色法根据蒽醌类及其苷大多数是黄色或橙红色的，羟基蒽醌能溶于碱溶液中而显红或紫红色；蒽酚和二蒽醌与碱液不显红色，只能呈黄色，需经氧化成羟基蒽醌后才与碱作用显红色；羟基蒽醌类因结构不同与醋酸镁的甲醇溶液反应可显橙、红、蓝、紫等色的性质而比色测定。
紫外吸收光谱测定蒽醌
实验八紫外吸收光谱测定蒽醌粗品中蒽醌的含量和摩尔吸收系数ε实验目的1．学习应用紫外吸收光谱进行定量分析方法及ε的测定方法；2．掌握测定粗蒽醌试样时测定波长的选择方法。
基本原理利用紫外吸收光谱进行定量分析，同样须借助郎伯—比耳定律，而选择合适的测定波长是紫外吸收光谱定量分析的重要环节。
在蒽醌粗品中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图10-6所示，图10-6 蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱恩醌在波长251nm处有一强烈吸收蜂（ε 4.6×104），在波长323nm处有一中等强度的吸收蜂（ε 4.7×103）。
若考虑测定灵敏度，似应选择251nm作为测定恩醌的波长，但是在251nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax224nm（ε 3.3×104）,测定将受到严重干扰。
而在323波长处邻苯二甲酸酐却无吸收，为此选用323nm波长作为蒽醌定量分析的测定波长更为合适。
摩尔吸光系数ε是吸收光度分析中的一个重要参数，在吸收蜂的最大吸收波长处的ε，既可用于定性鉴定，也可用于衡量物质对光的吸收能力，且是衡量吸光度定量分析方法灵敏程度的重要指标，其值通常利用求取标准曲线斜率的方法求得。
一、仪器730G型紫外—可见光分光光度计，或其它型号仪器二、试剂1．蒽醌、乙醇、邻苯二甲酸酐均为分析纯2．蒽醌粗品生产厂提供3．蒽醌标准储备液（2.000mg.ml-1）准确称取0.2000g蒽醌置于100mL烧杯中，用乙醇溶解后，转移到100mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用4．蒽醌标准使用液（0.040mg.mL-1）吸取1mL上述蒽醌标准储备液于50mL容量瓶中，并用乙醇稀释至刻度，摇匀备用三、实验条件蒽醌和邻苯二甲酸酐的紫外线吸收光谱绘制蒽醌的定量分析及ε测定1．测定波长 323.0nm2．狭缝 0.01～2mm3. 参比溶液乙醇四、实验步骤1. 配制蒽醌标准溶液系列用吸量管分别吸取0.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL上述蒽醌标准使用液于6只10mL容量瓶中，然后分别用乙醇稀释至刻度，摇匀备用。
紫外光谱测定蒽醌含量流程
紫外光谱测定蒽醌含量流程英文回答：UV spectroscopy is a commonly used technique for determining the concentration of a compound in a sample. In the case of anthraquinone, a UV-visible spectrophotometer can be used to measure the absorbance of light at specific wavelengths. This absorbance is directly proportional tothe concentration of anthraquinone in the sample.To begin the analysis, a calibration curve is first constructed using known concentrations of anthraquinone. This curve relates the absorbance of light to the concentration of anthraquinone. By measuring the absorbance of the sample at the same wavelength, the concentration of anthraquinone can be determined using the calibration curve.The next step is to prepare the sample for analysis. This involves dissolving the anthraquinone in a suitable solvent, such as ethanol or methanol, to obtain a knownconcentration. The sample is then placed in a cuvette and inserted into the UV-visible spectrophotometer.Once the sample is in the spectrophotometer, the instrument is set to the desired wavelength for analysis. In the case of anthraquinone, a common wavelength used is around 254 nm. The spectrophotometer measures the absorbance of light at this wavelength and provides a reading.Using the calibration curve, the absorbance reading obtained from the sample can be converted into the concentration of anthraquinone. This concentration is then reported as the result of the analysis.In summary, the UV spectroscopy method for determining anthraquinone concentration involves constructing a calibration curve using known concentrations of the compound, preparing the sample for analysis, measuring the absorbance of light at a specific wavelength, and converting the absorbance reading into the concentration using the calibration curve.中文回答：紫外光谱是一种常用的测定样品中化合物浓度的技术。
蒽醌的测定方法
附录AIII（标准的附录）总蒽醌衍生物的测定1 材料与方法1.1试剂与仪器无水乙醚、盐酸、冰乙酸、氢氧化钠、氨水均为分析纯，蒸馏水标准对照溶液：称取于105℃干燥2小时的1,8-二羟基蒽醌27.5 mg置于200 mL 容量瓶中，加少量冰乙酸溶解，用无水乙醚定容至刻度，混匀，该溶液1.00 mL 含1,8-二羟基蒽醌0.138 mg。
混合酸溶液：25%盐酸+冰乙酸=2+18混合碱液： 10%氢氧化钠+4%的氨水=1+12501P紫外分光光度计1.2 方法1.2.1标准曲线绘制精密吸取标准对照溶液0.00mL、0.25mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL至25mL比色管中，水浴挥去乙醚，加混合碱液溶解并定容至刻度，摇匀，放置30分钟，以混合碱溶液为空白，1cm比色杯，于525nm比色测定吸光度，绘制标准曲线，计算曲线回归方程。
1.2.2 样品测定精密称取25mg样品，置于100 mL平底烧瓶中，加混合酸溶液6.0mL，于沸水浴回流15分钟，放冷，加乙醚30 mL提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣2次，每次5.0mL，残渣再加4.0 mL混合酸溶液，于沸水浴回流15分钟，放冷，加乙醚20提取，并用乙醚洗涤残渣2次，每次5.0mL，过滤合并提取液，提取液用水30mL，20mL洗2次，弃去水洗液，乙醚层再加混合碱液50mL，20mL，20mL提取3次，合并碱提取液，置于100 mL容量瓶中，用混合碱液定容至刻度，混匀，放置30分钟后，以混合碱溶液为空白，1cm比色杯，于525nm比色测定吸光度。
1.3 计算公式：C×100×1000×100X=m×1000×10001Q/TSS001-2006注：X—待测样品中总蒽醌衍生物的含量， g/100g；C—由标准曲线查得的样品溶液中总蒽醌衍生物的浓度，μg/mL；m—样品质量，mg。
紫外吸收光谱测定蒽醌实验报告
一、实验目的1. 熟悉紫外-可见分光光度计的仪器结构和工作原理。
2. 掌握紫外-可见吸收光谱的基本原理和应用。
3. 通过实验，测定蒽醌在紫外-可见光区域的吸收光谱，分析其分子结构对吸收光谱的影响。
二、实验原理紫外-可见吸收光谱法是一种基于物质分子对紫外-可见光的选择性吸收而建立起来的分析方法。
当分子中的电子从基态跃迁到激发态时，会吸收特定波长的光，产生吸收光谱。
蒽醌分子中含有共轭体系，其紫外-可见吸收光谱可以反映分子结构的信息。
实验中，通过将蒽醌溶液置于紫外-可见分光光度计中，测定其在不同波长下的吸光度，绘制出吸收光谱曲线。
根据吸收光谱曲线，可以分析蒽醌的分子结构，确定其最大吸收波长（λmax）和摩尔吸光系数（ε）。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、移液器、容量瓶、比色皿、电子天平、电子分析天平。
2. 试剂：蒽醌标准品、无水乙醇、蒸馏水。
四、实验步骤1. 配制标准溶液：准确称取一定量的蒽醌标准品，用无水乙醇溶解，配制成一系列不同浓度的标准溶液。
2. 比色皿清洗与干燥：使用蒸馏水清洗比色皿，然后用无水乙醇清洗并干燥。
3. 吸收光谱测定：将标准溶液分别倒入比色皿中，将比色皿置于紫外-可见分光光度计的样品池中，在波长范围为200-400nm内进行扫描，记录吸光度。
4. 绘制吸收光谱曲线：以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准溶液的吸收光谱曲线。
5. 未知样品测定：将待测样品用无水乙醇溶解，按照标准溶液的步骤进行吸光度测定，根据吸收光谱曲线，确定未知样品的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准溶液吸收光谱曲线：根据实验结果，绘制出标准溶液的吸收光谱曲线，可以看出蒽醌在约258nm处有一个明显的吸收峰。
2. 未知样品浓度测定：根据吸收光谱曲线，确定未知样品的浓度为C1。
3. 结果讨论：通过实验结果可以看出，蒽醌在紫外-可见光区域有明显的吸收峰，这与其分子结构中的共轭体系有关。
实验结果与文献报道相符，证明了实验方法的可行性。
大黄中游离蒽醌的提取和含量测定
然后用752式紫外—分光光度计测定500nm—520nm的吸光度。
再取提取出来的游离蒽醌按照上面方法测定吸光度
2，标准对照法
六 数据处理
2，标准对照法
Beer定律A=ELC,因标准溶液与供试品溶液是同物质，同仪器，及同一波长于厚度相同的吸收池中测定，顾L和E都相同，所以有
C样=A样C标\A标 大黄中游离蒽醌含量的计算式为： 含量﹪﹦m样/m大黄×100﹪
七 注意事项及讨论
a 理想的标准曲线应该是一条通过原点的直线。如若不过原点的原因可能有 （1）空白溶液的选择不当； （2）显色反应的灵敏度不够； （3）吸收池的光学性能不一致等。 b 采用标准曲线应注意的问题： （1）制备一条标准曲线至少应6-9个点，并不得随意延长。 （2）待测液浓度应包括在标准曲线范围内；不然则应进行适当的稀释或浓缩，或改变稀释池的厚度。 （3）供试品试液和对照品试液必须使用相同的溶剂系统和显色系统，并在相同的条件下进行测定。
02
试剂 大黄粉末、 1.8-二羟基蒽醌标准品、 氯仿溶液、甲醇溶液、醋酸镁。四 仪器和试剂源自五 实验内容与步骤05
06
03
04
01
02
<2>开始实验
（二）游离蒽醌含量的测定
取上面所制备的1.8-二羟基蒽醌标准溶液加入吸收池中。
取醋酸镁甲醇溶液于另一个吸收池作为空白溶剂调整透光率100%和吸光度为0。
大黄中游离蒽醌的提取和含量测定
202X
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演讲人姓名
一 实验背景
03
掌握标准曲线的测绘步骤及原理。
02
会用紫外—分光光度计测1，8-二羟基蒽醌及游离蒽醌的吸光度。
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附录AIII
（标准的附录）
总蒽醌衍生物的测定
1 材料与方法
1.1试剂与仪器
无水乙醚、盐酸、冰乙酸、氢氧化钠、氨水均为分析纯，蒸馏水
标准对照溶液：称取于105℃干燥2小时的1,8-二羟基蒽醌27.5 mg置于200 mL 容量瓶中，加少量冰乙酸溶解，用无水乙醚定容至刻度，混匀，该溶液1.00 mL 含1,8-二羟基蒽醌0.138 mg。
混合酸溶液：25%盐酸+冰乙酸=2+18
混合碱液： 10%氢氧化钠+4%的氨水=1+1
2501P紫外分光光度计
1.2 方法
1.2.1标准曲线绘制
精密吸取标准对照溶液0.00mL、0.25mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL至25mL比色管中，水浴挥去乙醚，加混合碱液溶解并定容至刻度，摇匀，放置30分钟，以混合碱溶液为空白，1cm比色杯，于525nm比色测定吸光度，绘制标准曲线，计算曲线回归方程。
1.2.2 样品测定
精密称取25mg样品，置于100 mL平底烧瓶中，加混合酸溶液6.0mL，于沸水浴回流15分钟，放冷，加乙醚30 mL提取，提取液通过脱脂棉滤入分液漏斗中，继续用乙醚洗涤残渣2次，每次5.0mL，残渣再加4.0 mL混合酸溶液，于沸水浴回流15分钟，放冷，加乙醚20提取，并用乙醚洗涤残渣2次，每次5.0mL，过滤合并提取液，提取液用水30mL，20mL洗2次，弃去水洗液，乙醚层再加混合碱液50mL，20mL，20mL提取3次，合并碱提取液，置于100 mL容量瓶中，用混合碱液定容至刻度，混匀，放置30分钟后，以混合碱溶液为空白，1cm比色杯，于525nm比色测定吸光度。
1.3 计算公式：
C×100×1000×100
X=
m×1000×1000
1
Q/TSS001-2006
注：X—待测样品中总蒽醌衍生物的含量， g/100g；
C—由标准曲线查得的样品溶液中总蒽醌衍生物的浓度，μg/mL；
m—样品质量，mg。