Jagged 1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化
grem1蛋白结构 -回复
grem1蛋白结构-回复Grem1蛋白结构蛋白质是生命的基本组成单元之一，扮演着极其重要的生理功能角色。
其结构多样，其中包括Grem1蛋白。
Grem1蛋白是一种由人类基因Grem1编码的分泌性蛋白，它在胚胎发育、组织再生以及癌症等多个生理病理过程中发挥着重要的作用。
在本文中，我们将对Grem1蛋白的结构进行详细探讨。
Grem1蛋白的基本结构可以从以下几个方面来讨论：氨基酸序列、三维结构以及功能域。
1. 氨基酸序列：Grem1蛋白的氨基酸序列是由含有数百个氨基酸残基的多肽链组成的。
通过由Grem1基因进行转录和翻译，这个蛋白合成出来。
Grem1蛋白的氨基酸序列对于其后续的三维结构和功能起着至关重要的作用。
2. 三维结构：Grem1蛋白的三维结构是指该蛋白分子的立体构型。
通过如X射线晶体学、核磁共振等技术手段，科学家们可以获取到Grem1蛋白的具体结构信息。
三维结构揭示了蛋白分子的形状以及各个功能域的相互作用方式。
对于Grem1蛋白而言，其三维结构对于了解其功能和与其他蛋白的相互作用至关重要。
3. 功能域：Grem1蛋白在其氨基酸序列中存在着多个功能域。
功能域是指蛋白质中具有特定功能的区域。
在Grem1中，有报道指出其N端含有一个肌动蛋白相关结构域（ARM）和一个胚泡发育蛋白结构域（EPD）。
这些功能域在Grem1的生物学功能中起到了至关重要的作用。
在研究Grem1蛋白的结构中，科学家们不仅关注其原子级别的结构，也非常重视其长梯度结构特征。
张力梯度被认为在胚胎发育中起到了很重要的作用，而Grem1蛋白扮演了其维持和调控张力梯度的关键角色。
研究人员利用计算模型和实验验证，揭示了Grem1蛋白在胚胎发育中对于组织形态的调控。
不仅如此，Grem1蛋白的结构还与其功能紧密相关。
研究发现，Grem1蛋白通过与其他蛋白发生结合，从而对信号通路的激活和抑制产生影响。
具体而言，Grem1蛋白与胚泡发育和生长因子家族等一系列蛋白发生相互作用，调控细胞分化和增殖。
疾病病理学的分子机制和研究方法
疾病病理学的分子机制和研究方法疾病病理学是研究疾病的发生、发展和转归的学科，它是现代医学领域中不可或缺的一部分。
疾病的病理过程涉及很多复杂的生物学、化学和物理学机制，这些机制与分子水平上的生物化学反应息息相关。
因此，疾病病理学的分子机制研究具有十分重要的实际意义，可以对医学治疗的效果产生重要影响。
疾病病理学的分子机制从根本上说是由各种不同的分子水平上的生物化学反应造成的。
这些反应可以涉及不同的蛋白质、酶或其他化学分子。
例如，肿瘤的发生和发展被认为是一系列精细调控的信号传导通路复杂互动的结果。
血管生长因子（VEGF）是参与血管生成的主要因子，在肿瘤细胞中的表达水平提升，会引起由于缺氧所激活的转录因子上调表达。
这导致肿瘤细胞极可能向四周成长并转移。
细胞周期调控也是肿瘤细胞增殖的关键因子。
周期蛋白D1(CD1)是在肿瘤细胞中被过度表达的一个基因，它能够启动细胞周期的G1/S转换，加速肿瘤细胞的增殖。
对于疾病病理学的分子机制研究，科学家们使用各种不同的研究方法。
其中，分子生物学和遗传学研究是其中最重要的一种。
分子生物学技术包括对基因表达水平进行的研究，包括定量实时PCR、DNA芯片和RNA测序等技术。
这些技术可以检测基因在疾病发生和发展中的表达变化情况。
例如，通过检测肿瘤细胞中基因表达，科学家们能够更好地理解肿瘤细胞至关重要的基因信号通路，从而为治疗肿瘤提供新的思路。
在遗传学研究中，科学家们将探索疾病病理学的分子机制与遗传学的联系。
通过研究特定的基因与疾病之间的关系，科学家们能够确定有哪些基因异常可能会引起疾病的发生和发展。
例如，痴呆与阿尔茨海默病有关。
阿尔茨海默病的发生与遗传基因的突变有很大的关系，其中可溶性β-淀粉样蛋白前体(SAPP)和胆碱乙酰转移酶(CHT)的基因突变事件都是阿尔茨海默病的发病因素。
此外，分子生物学和遗传学研究方法还可以为治疗疾病提供基础。
例如，在抗肿瘤治疗中，抑制VEGF的药物（如贝伐单抗）已成为采用抗VEGF治疗的常用药物，可以用于阻止肿瘤血管生成，起到抗癌作用、同时还可以结合别的免疫调节药物使用。
血管重塑的名词解释
血管重塑的名词解释血管重塑是指在人体的血管系统中，由于各种原因导致血管结构和功能发生改变及适应性调整的过程。
这一概念最早是在心血管领域中被提出的，但现在已经逐渐被应用于其他领域，包括肿瘤研究和神经科学等。
血管重塑通常被视为一种适应性的生物学反应，旨在满足机体对氧气和养分的需求。
通过此过程，血管可以重新组织并调整其结构和功能，以适应环境的变化。
血管重塑的原因多种多样，包括生理和病理因素。
在生理状态下，血管重塑可能是由于运动、妊娠和新生儿发育等因素引起的。
在病理状态下，血管重塑可能是由于缺血性心脏病、高血压、糖尿病、肿瘤和炎症等引起的。
血管重塑过程主要包括两种机制：血管生成和血管重建。
血管生成是指新的血管形成，通常发生在新组织形成的过程中。
这种新生血管能够从已存在的毛细血管中分化出来，填补供血不足的区域。
血管生成对于生物体的生长发育和组织修复至关重要。
血管重建则是指已有血管结构的重组和改变。
在某些情况下，原有的血管结构无法满足机体对养分和氧气的需求，例如在肿瘤生长过程中。
为了满足肿瘤的需求，周围的血管可能会重新排列、扩张或增加密度，以提供更多的供血。
这种血管重塑现象被广泛应用于抗肿瘤治疗的研究领域。
血管重塑的研究对于许多领域具有重要意义。
在心血管领域中，了解血管重塑机制可以帮助我们更好地理解心血管疾病的发生和发展，并为寻找新的治疗方法提供指导。
对于肿瘤研究而言，血管重塑的研究可以为抗肿瘤治疗策略的制定提供依据。
在神经科学领域，血管重塑的研究可以帮助我们理解神经退行性疾病如阿尔茨海默病和帕金森病等的发生机制，为治疗这些疾病提供新的思路和方法。
虽然血管重塑是一种复杂的生物学过程，但通过研究和深入了解，我们能够更好地利用血管重塑的机制，从而改善人体健康。
未来，随着科技的不断进步，血管重塑研究将更加深入，我们对其了解将更加全面，为人类健康提供更多新的突破和发现。
总而言之，血管重塑是一种由于各种原因引起的血管结构和功能的改变和适应性调整的过程。
蛋白激酶SGK-1在高血压性心脏纤维化中的表达及影响
心肺血管病杂志 ２ １ ０ ２年 ３月第 ３ １卷第 ２期
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Ｓ Ｋ 可能是高血压导致心脏纤维化的关键信号分子 ， ＧＩ 并且 Ｓ Ｋ Ｇ １可能通过调节炎症 反应促进心脏纤维
化 的进展 。
［ 关键词 ］ 血清和糖皮质激素诱导 的蛋 白激酶一； １ 炎症反应 ； 高血压 ； 心脏纤维化 ； 血管紧张素 Ⅱ ［ 中图分类号］ Ｒ５ ４ ［ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ １０ －０ ２ ２ １ ）２２ ４０ ０７５６ （ ０２ ０ －０ －５
ａ ｄ ｔ ｅｈ ａ ｔ ｅ ｅｅ ｃｓ ｄ ａ ｄ ｉ ｎ ｈ ｅ ｒｓｗ ｒ ｘ ｉｅ ｎ ｍｍｅ ｉｔｌ ｒ ｃ ｓ ｅ ｒｍｏ ｐ ｏｏ ｉａ ｎ ｅ ｅｅ ｐ ｅ ｓｏ ａｙ ｉ．ＨＥ ｓａ－ ｄ ａｅｙ ｐ ｏ ｅ ｓ ｄ ｆ ｒ ｈ ｌｇｃ ａ ｄ ｇ ｎ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ａ ｌｓｓ ｏ ｌ ｎ ｔ ｉ ｎ ｎ ，ｉ ｉ ｇ ｍｍｕ ｏ ｉｔｃ ｅ ｓ ｙ ａ ｄ Ｍａ ｓ ｎ ｓ ｉ ｉ ｇ ｗ ｒ ｓ ｄ ｔ ｎ ｙ ｅ ｉｆ ｍｍａｏｙ ｅ ｌ ｉ ｌ ａｉｎ，ｃ ｌ ｇ ｎ ｎ ｈ ｓ ｈ ｍｉｔ ｎ ｓ ｏ ｔ ｎ ｎ ｅ ｅ ｕ ｅ ｏ ａ ａ ｚ ｎ ａ ｏ ｒ ａ ｌ ｌ ｔｒ ｅ ｎ ｔ ｔ ｉ ｆ ｒ ｏ ｏｌ ｅ ａ ｄ ｐ ｓｔ ｎ ａ ｄ ｃ ｒ ｉｃｆ ｒｓｓ ｈ ｅ ｅ ｓｏ ｅ ｏ ｉ ｏ ａｄ ａ ｂ ｏ ｉ．Ｔ ｅｌ ｖ ｌ ｆｍＲＮＡ ａ ｄ ｐ ｏｅｎ ｏ Ｇ ｅ ｅ ｍｅ ｓ ｒ ｄ ｂ ａ－ｉ Ｃ ａ ｄ ｉ ｎ ｉ ｎ ｒｔ ｉ ｆ ｌｔ ｓ ｎ ｂｏ ．Ｒｅ ｕ ｔ ： ｍｐ ｒ ｄ ｗ ｔ ｏ ｍａ ａｉ ｅｔ ａｍｅ ｔ ｒ ｕ ｂ ｏ ｄ ｐ ｅ ｓ ｒ ｓ ｉｎ ｆ ａ ｔ ｎ ｒ ａ ｅ ｅ ｓ ｌ Ｃｏ ａ ｅ ｈ ｎ ｒ ｌ ｓ ｎ ｅ ｔ ｎ ｏ ｐ， ｌｏ ｒ ｓ ｕ ｅｗａ ｓ ｉ ｃ ｎ ｙｉ ｃ ｅ ｄ ｓ ｉ ｌ ｒ ｇ ｇ ｉ ｌ ｓ
TWIST1在人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及血管形成中的作用
生物技术进展2022年第12卷第1期142~148Current BiotechnologyISSN 2095‑2341研究论文ArticlesTWIST1在人脐静脉内皮细胞增殖、迁移及血管形成中的作用谢月樵，郭丹，王楠，尤娜，黄琬玲，马小彤*中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所），北京协和医学院，实验血液学国家重点实验室，国家血液系统疾病临床医学研究中心，细胞生态海河实验室，天津300020摘要：探讨TWIST1在原代人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells ，HUVECs ）增殖、迁移及体外血管生成中的作用。
用有靶向人TWIST1基因shRNA （pLL3.7-shTwist1-GFP ）的慢病毒液感染试验组细胞，同时以携带Scramble shRNA 的慢病毒液（pLL3.7-shCtrl -GFP ）感染对照组细胞，用流式细胞术测定细胞感染效率，实时荧光定量PCR（real -time fluorescent quantitative PCR ，qRT -PCR ）检测shRNA 的基因沉默效率。
通过制作细胞生长曲线、Annexin V/7AAD 染色流式细胞术、细胞划痕实验、小管形成实验、qRT -PCR 检测TWIST1表达降低对HUVECs 的增殖、凋亡、迁移、血管形成能力以及血管生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2，VEGFR2）基因表达的影响。
试验组TWIST1基因表达下降为对照组的30%，表明shTWIST1能有效降低TWIST1基因的表达。
与对照组相比，敲降TWIST1能明显抑制HUVECs 的增殖（P <0.01），诱导细胞凋亡（P <0.05）。
试验组HUVECs 划痕愈合率、体外生成的血管样结构数目和总小管分支长度均显著低于对照组（P <0.01）；与对照组相比，试验组HUVECs 中VEGFR2的表达显著降低（P <0.01）。
新生血管的类型病理
新生血管的类型病理新生血管的类型病理随着医学技术的不断进步，新生血管在多种疾病的发生发展中扮演着至关重要的角色。
而对新生血管的类型病理的深入研究，能够更好地帮助医生诊断和治疗相关疾病。
本文将介绍几种常见的新生血管类型病理及其相关疾病。
一、毛细血管扩张毛细血管扩张是一种新生血管类型病理，它的血管腔直径较正常毛细血管大，并伴有膨出和扩张的表现。
毛细血管扩张病理常见于神经纤维瘤、异色癌等疾病。
二、毛细血管增生毛细血管增生是指毛细血管数目的增加，与其他新生血管类型病理不同的是，它的血管腔直径与正常毛细血管相当。
毛细血管增生病理常见于肝硬化等疾病。
三、毛细血管异常重构毛细血管异常重构是指毛细血管的大小和形态异常，不仅存在扩张和增生的现象，还伴有分叉、环形或者两端膨出的情况。
毛细血管异常重构病理常见于肿瘤、炎症和其他疾病。
四、葡萄状新生血管瘤葡萄状新生血管瘤是一种表面较为光滑的血管肿瘤，它的血管壁薄且容易破裂出血。
葡萄状新生血管瘤病理常见于感染性疾病、非感染性炎症等。
五、毛细血管瘤毛细血管瘤是新生血管类型病理中较为常见的一种，它具有富血管网的结构，可以细分为母细胞型、乳头状型和圆血管型等多种类型。
毛细血管瘤病理多见于皮肤、口腔和消化道等部位中。
以上是新生血管的类型病理的介绍，它们都与不同的疾病发生有关，对医生诊疗相关疾病具有一定的指导意义。
不同的新生血管类型病理，它们的治疗方式也不同，需要根据具体情况制定合理的治疗方案。
未来，随着医学技术的不断发展，对新生血管病理的研究也将越来越深入，为人类健康事业做出更大的贡献。
Notch信号通路在肝再生中的作用
Notch信号通路在肝再生中的作用肝脏是损伤后能够快速再生的实质性器官，但是这种再生能力并不是无限的。
在许多疾病条件下，由于各种病理因素的影响，其再生能力并不能完全代偿肝细胞及肝功能的缺失，这使得移植仍是治疗爆发性肝衰竭及末期慢性肝病的最终选择，在肝源愈发短缺的今天研究肝再生非常必要。
1 肝再生过程肝再生过程是一个复杂的过程，不仅生成的结构复杂，而且参与再生的细胞类型多样。
肝再生过程中，肝细胞是首先进行分裂的细胞类型，在各种因子的刺激下，细胞表达多种与再生有关的基因，由 G0 期进入分裂期，通常在 2 ～ 3 d内就能完成 1 ～ 2 次细胞分裂周期。
随后，肝星状细胞、Kupffer 细胞和胆囊上皮细胞先后进入细胞分裂周期。
同时，血管内皮细胞增殖，出现血管再生，有助于重建肝脏的血管结构。
另外，肝脏受损会激活肝祖细胞( hepatic progenitor cell，HPC) ，后者能够分化为肝细胞或胆管上皮细胞。
当肝细胞启动再生过程受阻或肝脏损伤严重时，肝脏肝细胞库将被激活，生成卵原细胞。
生理状态下卵原细胞数量极少，但是一旦被激活，这些位于门脉周围的卵圆细胞将大量增殖。
动物研究证实，部分肝切除后约 22 d，卵原细胞生成的肝细胞和胆管上皮细胞将逐渐恢复原有的肝组织质量。
肝再生的过程受到多种因素的影响，其中 Notch 信号通路几乎涉及所有细胞的增殖和分化活动，因此 Notch 信号通路在肝再生中的作用近年来受到越来越多的重视。
2 Notch 信号通路Notch 指果蝇翅缘缺口( notch) 表型，由现代遗传学的奠基人之一 Morgan 在果蝇的大规模突变研究中首先鉴定。
现代分子生物学研究表明，果蝇 Notch 为一个相对分子质量( Mr) 约 300 000 的单次 1 型跨膜受体蛋白，由 2 条链通过二硫键连接组成。
Notch 信号转导通路由受体、配体和 DNA 结合蛋白 3 部分组成。
Notch 信号从分泌到释放出 Notch 胞内段共发生 3 次裂解，分别被称为 S1、S2 和 S3 裂解，在发生 S1裂解后形成的异源二聚体，共有 4 个类型( Notch 1 ～ 4) ，Notch 的配体( Delta 家族蛋白) 共有 5 类，分别为Dll-1、Dll-3、Dll-4，Jagged-1 和 Jagged-2，也属于跨膜蛋白。
Notch信号通路与血管发育
Notch信号通路与血管发育【关键词】血管形成; Notch信号; 血管发生血管发育是复杂的血管网络形成的过程，在个体发育、组织再生、肿瘤发生发展中发挥重要作用，因此具有重要的研究价值。
以往研究已经证明，血管发育与细胞因子、组织缺氧、基因调控等多种因素有关。
现就Notch信号通路在血管发育中的作用的研究进展作一综述。
1 Notch信号通路Notch信号通路是进化中高度保守的信号转导通路，其调控细胞增殖、分化和凋亡的功能涉及几乎所有组织和器官［1］。
哺乳动物中有4个notch基因，编码4种Notch受体（Notch1， 2， 3， 4）。
Notch前体蛋白经内质网O�惭以逄腔�转移酶(POFUT1)作用后，在高尔基体中被Furin蛋白酶裂解成两部分，二者通过非共价键相连，形成细胞表面的异二聚体受体。
胞外结构域（NECD）含29～36个EGF样重复序列（EGF��like repeats）和3个富含半胱氨酸的Notch/LIN��12重复序列(Notch/LIN��12 repeats)，其中， EGF样重复序列是配体结合所必需的，而Notch/LIN��12重复序列与抑制配体非依赖的Notch信号活化有关。
胞内结构域（NICD）主要由核定位信号序列（NLS）， 6个串联的富含天冬酰胺的锚蛋白重复序列（tandem ankyrin repeats）和羧基端的PEST序列组成，其中锚蛋白重复序列介导胞内结构域与下游信号分子结合， PEST序列有助于加速蛋白水解酶对NICD的降解。
目前在哺乳动物发现5种Notch配体，分别为Delta��like1、 3、 4（Dll1、 3、 4）和Jagged1、 2（与果蝇Serrate/Lag��2蛋白同源)，亦可被共同称为DSL（Delta/Serrate/Lag��2）。
该配体的胞外部分由氨基端的DSL结构域和下游数目可变的EGF样重复序列构成， DSL结构域主要介导与受体的结合，该结构域的泛素化是Notch配体活化的关键步骤，这一过程需要E3泛素连接酶Mindbomb（Mib）的催化。
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Jagged 1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化目的观察Jagged 1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化，为肿瘤的治疗寻找新的靶点。
方法体外培养血管内皮细胞免疫细胞化学法检测其Jagged 1的表达。
建立鸡胚尿囊膜动态血管发育模型，免疫荧光化学和Western blot检测不同发育时期尿囊膜血管中Jagged 1的表达。
免疫组织化学和Western blot检测正常结直肠组织和大、中、小三种尺寸的结直肠癌肿块中Jagged 1的表达。
结果（1）免疫细胞化学结果显示，Jagged 1是细胞跨膜蛋白，表达于细胞膜上。
（2）成功建立鸡胚尿囊膜动态血管发育模型，其免疫荧光和Western blot 结果显示，Jagged 1随着血管的发育而表达，随血管密度、血流量增加而表达上调。
（3）免疫组化结果显示Jagged 1在结直肠癌中广泛表达，而在正常皮肤及结直肠组织中表达较少，Jagged 1的表达量同肿瘤的体积有关。
结论Jagged 1在内皮细胞、血管发育初期和肿瘤新生血管中表达上调，表明其可能是新生血管形成的早期事件，参与诱导下游新生血管形成基因的表达。
[Abstract] Objective To research the role of Jagged 1 in physiological and pathological neovascularization. Methods The expression of Jagged 1 were detected in endothelial cells by immunocytochemistry.The expression of Jagged 1 were detected in blood vessel of chick chorioallantoic membrane by immunofluorescence and Western blot.The expression of Jagged 1 were detected in normal colorectal mucosa tissue and three colorectal cancers with large，median and small volume by immunohistochemistry and Western blot. Results （1）Results of immunocytochemistry showed that Jagged 1 is a cell transmembrane protein and express in the cell membrane. （2）Successfully established the dynamic blood vessel developmental model of chick chorioallantoic membrane，The dynamic blood vessel developmental model of chick chorioallantoic membrane showed that the vascular network in chorioallantoic membrane develops gradually with embryo age and reveals the process of neovascularization，vigorous growth and wilt dynamically.Results of immunofluorescence and Western blot revealed that Jagged 1 has different expression profiling at different period of vascular development.The expression of Jagged 1 increased with the increasing of physiologic vessels，vessel density，blood supply. （3）Results of immunohistochemistry performed on hemangioma and colorectal cancer，Jagged 1 was widely expressed in neonatal vessels originated from hemangioma proliferation and few expressed in normal skin tissue.The expression of Jagged 1 was related to the tumor size in colorectal cancer. Conclusion The expression of Jagged 1 up-regulated in endothelial cells，primary period of vascular development and tumor angiogenesis，which may be an early event in neovascularization involved in inducing the expression of downstream gene.[Key words] Jagged 1;Angiogenesis;Chick chorioallantoic membrane肿瘤的生长和转移，均呈明显的新生血管依赖性。
因为新生血管是提供病理组织养分保证肿瘤生长增殖的基础，同时，肿瘤新生的血管使得肿瘤细胞与个体的血管循环系统直接相通，这也是恶性肿瘤发生远处转移播散的必要条件。
在实体肿瘤中，微血管网络承担着输送营养物质和排泄代谢废物的作用，是肿瘤生长和复发不可缺少的前提条件之一。
肿瘤要达到1～2 mm3以上[1]，必须生成新的血管以阻止肿瘤细胞的凋亡。
因此，如何有效的截断肿瘤的血供、抑制新生血管，已经成为肿瘤治疗及防止肿瘤扩散的研究方向。
血管生成方面的研究很多，目前已有药物应用于临床，通过阻断肿瘤血管生成抑制其生长、复发和转移，其疗效不令人满意，因为血管生成的关键调控因素尚不清楚。
Jagged 1是哺乳动物中第一个被证实的Notch受体的配体，参与调控许多组织的生长发育，在肌肉形成、神经、血管发生和维持正常造血前体细胞及其增殖等过程中起着重要作用[2]，Jagged 1在肿瘤新生血管形成中也起了重要的作用，它在新生血管形成与肿瘤浸润、转移中的作用受到越来越多的关注。
本研究建立鸡胚绒毛尿囊膜模型，动态观察血管发育不同时期Jagged 1的表达，探讨Jagged 1与血管发育的关系，并在正常的结直肠组织和不同大小结直肠癌组织中观察Jagged 1的表达，为肿瘤的治疗寻找新的靶点。
1 材料与方法1.1 实验材料人脐静脉内皮细胞株EA.HY926，由中南大学湘雅医学院细胞中心引进。
种蛋购自衡阳联合养鸡公司，选用新鲜、大小适中的优质种蛋，半自动孵化箱自行孵育。
在解放军169医院批准同意和告知患者家属同意后，收集解放军169医院外科手术切除的结直肠癌旁正常黏膜组织5例，结直肠癌新鲜标本15例，其中男11例，女4例；年龄28～75（平均56.9）岁；肿块直径≤3 cm患者、3 cm＜肿块直径≤5 cm患者、肿块直径＞5 cm患者各5例，手术切除的血管瘤旁正常皮肤组织和皮肤血管瘤新鲜标本各8例，其中男4例，女4例；年龄8～32（平均20.1）岁，所有标本均由病理组织学诊断证实。
1.2 实验方法1.2.1 细胞培养内皮细胞用含10%新生牛血清的DMEM培养液培养于37℃、5% CO2的恒湿培养箱中。
细胞呈单层生长，铺满培养瓶后传代。
传代时常规吸去培养液，用2.5 g/L胰蛋白酶消化，在显微镜下观察，发现胞质回缩、细胞间隙增大后，立即倾去胰酶，加适量含血清培养液吹打成单细胞悬液，调整细胞浓度用于实验。
1.2.2 鸡胚的培养及鸡胚绒毛尿囊膜模型的制备新鲜受精鸡卵以1‰新洁尔灭清洗后放入60%相对湿度的孵育箱内孵育，呈45°夹角，有气室的一头向上，1～10 d温度设定为37.8℃，11～19 d设定为37℃，20～21 d设定为36.8℃，每天翻蛋2～3次。
从鸡胚发育的第1天开始，每隔24 h剥开一批种蛋（每批5枚），观察鸡胚绒毛尿囊膜的生长情况，直到第21天。
剥制时，用眼科镊在种蛋的气室一端轻敲一个直径为0.5 cm的小洞，沿着洞的周围，用眼科镊慢慢夹掉卵壳，轻轻揭开卵壳膜，注意勿伤及血管，暴露整个尿囊膜部分。
以甲醇和丙酮混合液（1︰1）室温固定15 min，剥离尿囊膜，铺在培养皿中，阴干保存。
1.2.3 免疫组织化学染色染色方法按照链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法试剂盒说明书步骤操作。
用已知阳性表达的组织做阳性对照，PBS代替一抗做阴性对照，结果以细胞膜和（或）胞浆出现黄色或棕黄色颗粒为阳性反应。
1.2.4 Western blotting 冰上称取组织100 mg，加蛋白裂解液进行蛋白抽提，应用Bradford法测定蛋白质含量。
每样本取30 μg进行SDS-PAGE电泳，然后电转移至PVDF膜上，5%脱脂奶粉-PBST室温封闭1 h，PVDF膜分别与Jagged 1抗体、β-actin抗体4℃孵育过夜，再与HRP标记的二抗体37℃孵育1 h，化学发光显色后用凝胶成像系统扫描，半定量分析显影带。
1.3 统计学处理实验均重复3次。
各组数据均以均数±标准差（）表示，采用SPSS10.0统计软件对数据进行单因素方差分析。
P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 Jagged 1在人脐静脉内皮细胞EA.HY926中的表达免疫细胞化学结果显示，Jagged 1主要在内皮细胞胞膜上呈阳性表达，胞浆中呈弱阳性表达，核表达为阴性。
2.2 鸡胚绒毛尿囊膜动态血管发育模型观察第4.5天的鸡胚绒毛尿囊膜发育情况，胚胎继续发育，卵黄膜已覆盖大部分表面，肉眼可见鸡胚心脏跳动，尿囊膜开始发育，为一小水泡状，尿囊膜上可以看到细小的血管，但血管网不完善，只能观察到较细的血管和外周的血管环，血管内血液充盈不足，颜色偏淡不易观察，所以取第4.5天为鸡胚绒毛尿囊膜血管发育初生期的时间点。
第8天的鸡胚绒毛尿囊膜发育情况，这时到了鸡胚器官发育末期，鸡胚绒毛尿囊膜已包围了大部分卵黄囊，尿囊膜上出现主干血管由胚胎向四周延伸，纹理清晰，大血管继续发育增粗，血管网进一步发育，可以观察到毛细血管网，小血管的数量及分支都有增加。