微生物菌落计数及

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微生物菌落计数方法公式

微生物菌落计数方法公式

微生物菌落计数方法公式
微生物菌落计数方法是一种常用的微生物检测方法,具有快速、简便、实用的特点。

下面我们详细介绍微生物菌落计数方法,并给出具体的
计算公式。

一、微生物菌落计数方法
1. 样品制备:将待检样品用无菌物质稀释到合适的浓度,以便以下操作。

2. 平板涂布:将稀释后的样品倒入培养基中,用无菌铁环平均涂布在
琼脂平板上,使每个平板上菌液涂布均匀。

3. 培养:将涂好的琼脂平板置于恒温恒湿培养箱内,在适宜的培养条
件下进行菌落生长。

4. 计数:菌落生长一定时间后,在合适的光照条件下观察并计数。

二、微生物菌落计数公式
1. 常见单位及定义:
(1)CFU:Colony Forming Unit,即菌落形成单位。

(2)MPN:Most Probable Number,即最可能数量。

2. CFU计算公式:
CFU = (菌落数 / 涂样量)×稀释倍数
3. MPN计算公式:
(1)假定重复涂法:MPN = (a / b)×所需稀释倍数
其中,a为总正涂数,b为总涂数。

(2)浓度穿网法:MPN = 浓度对应格数
对于MPN计算法,还需根据不同的稀释方法,选择相应的查表文献进行计算。

在使用MPN方法时,计算前应根据实际情况,选择合适的稀释倍数。

以上就是微生物菌落计数方法及计算公式的详细介绍。

通过该方法,可以快速、简便、准确地对微生物进行检测,是一种常用的微生物质量控制手段。

微生物菌落总数计数方法

微生物菌落总数计数方法

微生物菌落总数计数方法微生物菌落总数计数方法有很多种,下面列举了其中的50种方法并对其进行详细描述:1. 胶平板法:将微生物样品通过稀释后均匀涂布在富营养培养基上,培养后统计菌落数量。

2. 液体计数法:使用专门的装置进行微生物菌落计数,例如波形计数器。

3. 膜过滤法:将微生物样品通过膜过滤器,然后将膜放到富养分培养基上进行培养和计数。

4. 容积法:将微生物样品通过稀释,然后使用容积计数器对其进行计数。

5. 水平采样法:将微生物样品通过固体培养基,然后根据采样水平进行菌落计数。

6. 微阵列计数法:使用微阵列技术进行微生物菌落计数,高通量,自动化程度高。

7. 波数计数法:通过光学检测装置对微生物样品的波数进行计数。

8. 流式细胞技术:通过流式细胞仪对微生物样品中的细胞进行计数和分析。

9. PCR技术:通过定量PCR对微生物样品中的特定基因进行定量,从而间接计算出微生物菌落总数。

10. 分光光度计法:通过分光光度计测定微生物样品中生物的光学密度,进而计算其菌落总数。

11. 过膜法:利用薄膜将微生物分布均匀后计数。

12. 电子计数法:通过电子显微镜进行微生物菌落计数。

13. 温度计数法:根据微生物在不同温度下的生长特性进行计数。

14. 荧光法:利用荧光染料对微生物菌落进行标记并计数。

15. 光学显微镜法:利用光学显微镜对微生物进行直接观察和计数。

16. 超声波法:利用超声技术将微生物分散均匀后计数。

17. 图像分析法:对微生物样品在图像上的特征进行分析,并计算菌落总数。

18. 颜色计数法:通过颜色反应对微生物菌落进行计数。

19. 电泳计数法:通过蛋白电泳对微生物进行计数。

20. 微型生物反应器法:利用微型生物反应器的特性对微生物进行计数。

21. 电化学法:通过电化学技术对微生物样品进行计数。

22. 生物传感器法:利用生物传感器对微生物进行快速计数。

23. 感光计数法:利用光敏感材料对微生物进行计数。

24. 气溶胶计数法:利用气溶胶技术对微生物进行计数。

微生物菌落计数实验报告

微生物菌落计数实验报告

微生物菌落计数实验报告实验目的:本实验旨在通过微生物菌落计数方法,确定水样中细菌和真菌的菌落数,以评估水质的卫生安全水平。

实验原理:微生物菌落计数是一种常用的微生物计数方法,通过将待检测样品在适当培养基上培养,促使微生物菌落形成,然后用目镜进行观察计数。

细菌和真菌在不同培养基上生长的特性不同,利用这一特性可以分别计数。

瓶子计数法和平板计数法是常用的微生物菌落计数方法。

实验步骤:1. 做好消毒准备,将取样瓶开盖,取适量水样。

2. 用无菌移液管分别移取水样至含有不同培养基的培养皿中。

3. 均匀涂抹样品,覆膜,进行培养。

4. 培养后观察培养皿上的菌落形成情况,用计数板进行计数。

5. 计算出每毫升水样中的微生物菌落数。

实验结果:根据观察和计数,得出水样中细菌和真菌的菌落数分别为XXX CFU/mL和XXX CFU/mL。

实验分析:通过微生物菌落计数实验,我们可以了解水质中微生物的富集情况,评估水样的卫生安全性。

根据实验结果,可以判断水样是否存在污染,进而采取相应措施提高水质。

结论:微生物菌落计数实验是一种简单而有效的水样检测方法,可以帮助我们及时了解水质情况,保障人们的健康。

在日常生活中,我们应该重视水质安全问题,做好水质检测和管理工作。

实验注意事项:1. 操作时要保持无菌环境,避免外界微生物的污染。

2. 操作时要注意个人防护,避免实验中发生意外伤害。

3. 实验后要及时处理实验用具,保持实验室整洁。

通过微生物菌落计数实验,我们可以更深入了解水质情况,及时采取措施改善水质,保障人们的生活健康。

愿我们在未来的生活中,都能享受清洁卫生的水资源,健康快乐地生活。

微生物学 实验三 平板菌落计数法

微生物学 实验三 平板菌落计数法

微生物学实验三平板菌落计数法微生物学实验三平板菌落计数法微生物学实验三平板菌落计数法实验三平板菌落计数学习菌种的平板菌落计数的基本原理和方法。

平板菌落计数法就是将试样样品经适度吸收之后,其中的微生物充份集中成单个细胞,挑一定量的吸收样液注射至平板上,经过培育,由每个单细胞生长产卵而构成肉眼可知的菌落,即为一个单菌落应当代表原样品中的一个单细胞。

统计数据菌落数,根据其吸收倍数和采样注射量即可折算出来样品中的含菌数。

但是,由于试样样品往往难于全然集中成单个细胞,所以,孵出的一个单菌落也可能将源自样品中的2~3或更多个细胞。

因此平板菌落计数的结果往往相对较低,为了确切地阐释平板菌落计数的结果,现在已女性主义采用菌落形成单位(colony-formingunits,cfu)而不以绝对菌落数去则表示样品的活菌含量。

平板菌落计数法虽然操作较繁,结果需要培养一段时间才能取得,而且测定结果易受多种因素的影响,但是该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息,所以被广泛用于生物制品检验(如活菌制剂),以及食品、饮料和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。

1.菌种:大肠杆菌菌悬液。

2.培养基:lb培养基。

3.仪器或其他用具:1ml无菌液体,无菌平皿,器皿4.5ml无菌水的试管,试管架,恒温培养箱等。

取无菌平皿9套,分别用记号笔标明10、10、10(稀释度)各3套,另-1-2-3-4-5挑6支盛存有4.5ml无菌水的试管,依次标是10、10、10、10、10、用1ml无菌吸管吸取1ml已充分混匀的大肠杆菌菌悬液(待测样品),精确地放-10.5ml至10的试管中,此即为10倍吸收。

将多余的菌液送回原菌液中。

-6-4-5-6将10试管置试管振荡器上振荡,使菌液充分混匀。

另取一支1ml吸管插入10试管中来回吹吸菌悬液三次,进一步将菌体分散、混匀。

吹吸菌液时不要太猛太快,吸时吸管伸入管底,吹时离开液面,以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。

实验四 微生物的菌落形态观察、平板菌落计数及菌种保藏(张理珉)

实验四 微生物的菌落形态观察、平板菌落计数及菌种保藏(张理珉)

浊度与微生物生物量测定
原理:
①细胞的存在会 造成光的散射, 降低光线的透过;
②在一定范围内 细胞浓度与吸光 度成正比
二、平板菌落计数的优缺点
优点:反映的是微生物活菌数量,可获 得活菌的信息,所以被广泛用于生物制 品检验(如活菌制剂),以及食品、饮 料和水(包括水源水)等的含菌指数或 污染程度的检测。 缺点:操作较繁,所需时间较长,测定 结果易受多种因素的影响。
(3)菌体浊度的测定(只针对单细胞微 生物); 利用分光光度计在600nm测定吸光度 值。 (4)细胞干重和湿重的测定(有时湿重 以体积计量); (5)各种细胞物质含量的测定(蛋白质、 核酸、 ATP、磷、叶绿素等定量测 定)——建立了多种快速检测方法; 说明:后两种对丝状菌比较有意义。
2、常见微生物检测项目
10-3
3 平均 1 2
10-4
3 平均
霉 菌
cfu数/平板 每毫升中的cfu数
实验内容四
——介绍菌种保藏的原理和方法
一、菌种保藏的重要性
微生物基本特性所决定的——微生 物个体微小、代谢活跃、生长繁殖 快、易变异、易污染。 研究工作的连续性需要。 工业及科研菌种要注意菌种的衰退 和复壮。
4、若所有稀释度的平均菌落数均大于 300,则应按稀释度(倍数)最高的平均菌落数 乘以稀释倍数(见下表,例4)。
5、若所有稀释度的平均菌落数均小于30, 则应按稀释度(倍数)最低的平均菌落数乘以 稀释倍数(见下表,例5)。
6、若所有稀释度的平均菌落数均不在 30~300之间,则以最近300或30的平均菌落 数乘以稀释倍数(见下表,例6)。
计算公式说明:
①如样品来源为液体其表示为CFU/ml;
②所加样品量为每个平板所加入的相应稀释液的体积(ml)。

微生物限度-直接接种方法以及菌落计数

微生物限度-直接接种方法以及菌落计数

菌落总数百科名片菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等)每克(每毫升)检样所生长出来的细菌菌落总数。

按国家标准方法规定,即在需氧情况下,37℃培养48h,能在普通营养琼脂平板上生长的细菌菌落总数,所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌,由于现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。

因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数,菌落总数并不能区分其中细菌的种类,所以有时被称为杂菌数,需氧菌数等。

目录菌落总数介绍检验方法说明(一)样品的处理和稀释:(二)倾注培养(三)计数和报告菌落总数介绍菌落是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物,它是由数以万计相同的细菌集合而成。

当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。

菌落总数测定是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量,它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当的卫生学评价。

菌落总数的多少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣。

检验方法菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。

基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。

国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。

检验方法参见:GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验菌落总数测定》SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品菌落计数》说明(一)样品的处理和稀释:1.操作方法:以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振要或研磨制成1:10的均匀稀释液。

菌落总数、霉菌和酵母菌总数等微生物检验方法

菌落总数、霉菌和酵母菌总数等微生物检验方法

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统计菌落数目的方法

统计菌落数目的方法

统计菌落数目的方法一、引言菌落是微生物繁殖形成的可见现象,可以用来估计菌落的数量。

统计菌落数目是微生物学中的重要研究方法之一。

本文将介绍统计菌落数目的方法及其应用场景。

二、直接计数法直接计数法是最简单、直接的方法之一,适用于较少数量的微生物菌落计数。

该方法通常使用显微镜和计数盘来进行菌落计数。

具体步骤如下:1.准备好培养基,并将待测样品在培养基上均匀涂布。

2.将培养基放置在适宜的环境中,培养一段时间,使菌落生长。

3.使用显微镜观察培养基,使用计数盘对菌落进行计数。

4.根据计数盘上的单位格数和菌落的平均大小计算总菌落数量。

三、稀释平板法稀释平板法适用于菌落数量较多的情况。

该方法通过连续稀释样品,将其均匀涂布在培养基上,然后计算每个稀释液中的菌落数量。

具体步骤如下:1.准备一系列含有不同菌落数量的稀释液。

2.取一定体积的稀释液,将其均匀涂布在培养基上。

3.培养一段时间后,使用计数盘对菌落进行计数。

4.根据每个稀释液中的菌落数量,绘制菌落数量与稀释倍数的曲线图。

5.根据曲线图中最合适的稀释倍数,计算原始样品中的菌落数量。

四、膜过滤法膜过滤法适用于水样和空气样品等液态或气态样品。

该方法通过将样品过滤,将菌落过滤在膜上,再将膜转移到培养基上进行培养和计数。

具体步骤如下:1.准备适用的膜过滤器,并将其放置在过滤装置中。

2.将待测样品通过过滤装置过滤,将菌落过滤在膜上。

3.将膜转移到培养基上,进行培养。

4.培养一段时间后,使用计数盘对菌落进行计数。

5.根据计数盘上的单位格数和菌落的平均大小计算总菌落数量。

五、应用场景统计菌落数目的方法在许多领域都有广泛应用,包括:1.食品卫生检验:通过统计菌落数量可以评估食品的卫生状况,判断是否符合相关标准。

2.环境监测:统计空气、水和土壤中的菌落数量,可以评估环境的卫生状况,指导环境治理工作。

3.医疗卫生:统计医院空气、器械和手术室中的菌落数量,可以评估感染风险,采取相应的防控措施。

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技术参数
• • • • • • 成像 检源自分析功能 测量功能 数据库功能 报表打印 仪器规格与选配
HiCC- 型自动菌落计数、抑菌圈测定、 HiCC-V型自动菌落计数、抑菌圈测定、显微计数分 析系统成像原理 析系统成像原理
• 图像分辨率: 图像分辨率:采用光学分辨率 4800×9600上下双光源可选的高 × 上下双光源可选的高 清晰扫描仪, 清晰扫描仪,物理分辨率最小达 25.4mm/4800像素 像素=0.0053mm/像 像素 像 可分辨大于0.1mm的菌落。 的菌落。 素,可分辨大于 可分辨大于 的菌落 图像调节:放大缩小、视野导航, 图像调节:放大缩小、视野导航, 图象增强、色度调节、 图象增强、色度调节、灰度负相变 换。 高均匀性的正面光源成像和背光光 源成像,扫描成像的亮度、 源成像,扫描成像的亮度、色度可 调。
仪器性能优点
I. 自动识别统计: 自动识别统计:SmartdownTM 菌落智能识别技术, 菌落智能识别技术,可自动识别 大规模团状、 大规模团状、链状粘连的球菌菌 以及显微镜下大规模团状、 落,以及显微镜下大规模团状、 链状粘连的长形杆菌( 链状粘连的长形杆菌(包括显微 形态相互粘连的大肠杆菌、 形态相互粘连的大肠杆菌、病菌 孢子)。自动计数精度≥96.5%, )。自动计数精度 孢子)。自动计数精度 , 最多监视修正3.5%,即达 最多监视修正 ,即达100% 正确。 150~600个菌落 的计数速度, 个菌落/s的计数速度 ~ 个菌落 的计数速度, 每小时最快计数120个平板。 个平板。 每小时最快计数 个平板 颜色识别和专有的背景校正, 颜色识别和专有的背景校正,精 细分割光照不匀的菌落, 细分割光照不匀的菌落,最多同 时计数出15类菌落 类菌落。 时计数出 类菌落。可快速测 定大肠菌群,并可一机多用。 定大肠菌群,并可一机多用。 IV. 可裁剪掉污染目标区, 可裁剪掉污染目标区,能根据菌 落形态、大小差别, 落形态、大小差别,自动剔除杂 有效支持复杂微生物统计。 质,有效支持复杂微生物统计。 可自动形成批操作向导, 可自动形成批操作向导,一键完 成自动计数。清晰、 成自动计数。清晰、可直观验证 的计数自动标记, 的计数自动标记,可自由选择标 记数字/符号 及标记的颜色、 符号, 记数字 符号,及标记的颜色、 大小。 大小。 菌落图像、 菌落图像、检验结果可保存到数 据库,并导出形成PDF、 据库,并导出形成 、 WORD报告,或EXCEL表,满 报告, 报告 表 管理和搜索的需要; 足GLP管理和搜索的需要;可存 管理和搜索的需要 储菌落图像及全部统计结果, 储菌落图像及全部统计结果,免 除了繁琐的记录工作,避免错误。 除了繁琐的记录工作,避免错误。
• 报表打印
• • 在线编辑:提供报告编写模板、 在线编辑:提供报告编写模板、修 改输入、打印预览。 改输入、打印预览。 报表打印:图片、 报表打印:图片、统计数据自动打 印。

仪器规格与选配
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仪器的检测分析功能 仪器的检测分析功能
• • 菌落统计速度: 个菌落/s。 菌落统计速度:150~600个菌落 。 ~ 个菌落 全皿菌落统计: 全皿菌落统计:SmartdownTM菌 菌 落智能识别技术统计菌落总数, 落智能识别技术统计菌落总数,可 自动识别大规模团状、 自动识别大规模团状、链状粘连的 球菌菌落, 球菌菌落,以及显微镜下大规模团 链状粘连的长形杆菌, 状、链状粘连的长形杆菌,并按任 意直径范围分类统计显示特定大小 的菌落。 的菌落。 区域选择统计:可选择圆、半圆、 区域选择统计:可选择圆、半圆、 扇形、矩形、 扇形、矩形、多边形区域的目标进 行统计。 行统计。 鼠标增减统计:快捷、 鼠标增减统计:快捷、方便的修正 手段, 手段,尤其适合修正培养皿边缘菌 落。 颜色识别统计:根据颜色特性筛选, 颜色识别统计:根据颜色特性筛选, 分别计数分析特定颜色的菌落数量。 分别计数分析特定颜色的菌落数量。 • 按菌落形状统计: 按菌落形状统计:自动统计出球菌 数量和其它类菌落的数量。 数量和其它类菌落的数量。 统计效果监视: 统计效果监视:多种标识方式的菌 落分析精度监视,迅速达到100% 落分析精度监视,迅速达到 正确。 正确。 菌落形态分析: 菌落形态分析:自动分析每个菌落 的面积、等效直径、长轴、短轴、 的面积、等效直径、长轴、短轴、 长宽比、圆度、周长。 长宽比、圆度、周长。 大肠菌群测定:依国家标准,快速 大肠菌群测定:依国家标准, 算出大肠菌群值。 算出大肠菌群值。 菌落粘连分割: 菌落粘连分割:自动分割相互粘连 的菌落, 的菌落,可由用户选择分割或不分 割,还能自动分割成片粘连的长形 目标。 目标。 自动换算参数:输入培养皿直径、 自动换算参数:输入培养皿直径、 样本稀释度后,自动换算出结果。 样本稀释度后,自动换算出结果。 全新的菌落平皿自动定位功能, 全新的菌落平皿自动定位功能,快 速地自动取得菌落目标分析区
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微生物菌落计数、抑菌圈测量、显 微技术分析系统
产品介绍 性能优点 技术参数
HiCC- 型自动菌落计数、抑菌圈测定、 HiCC-V型自动菌落计数、抑菌圈测定、显微计数分析系统
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• 仪器标定:仪器自带标定功能,实现半自动的尺寸标定。 仪器标定:仪器自带标定功能,实现半自动的尺寸标定。 • 长度测量:具有跟随放大镜功能,通过鼠标拖动精确测量。 长度测量:具有跟随放大镜功能,通过鼠标拖动精确测量。 • 抑菌圈测量:内置美国 抗微生物药物敏感性试验执行标准” 抑菌圈测量:内置美国CLSI“抗微生物药物敏感性试验执行标准”最 抗微生物药物敏感性试验执行标准 新版全部数据,提供了数据输入和修改平台,方便更新, 新版全部数据,提供了数据输入和修改平台,方便更新,为纸片法药 敏分析提供了快捷工具。可按最新的国家药典分析药敏、效价指标。 敏分析提供了快捷工具。可按最新的国家药典分析药敏、效价指标。 点选[抑菌圈测量 图标按钮,自动获得抑菌圈面积/直径 菌落面积/ 抑菌圈测量]图标按钮 直径、 点选 抑菌圈测量 图标按钮,自动获得抑菌圈面积 直径、菌落面积 直径、抑菌圈直径/菌落直径的比值 抑菌圈面积/菌落面积的比值 菌落直径的比值、 直径、抑菌圈直径 菌落直径的比值、抑菌圈面积 菌落面积的比值 等 结果。可在有局部文字干扰的情况下,自动获得抑菌圈面积/直径 直径、 结果。可在有局部文字干扰的情况下,自动获得抑菌圈面积 直径、 菌落面积/直径 抑菌圈直径/菌落直径的比值 抑菌圈面积/菌落面积 直径、 菌落直径的比值、 菌落面积 直径、抑菌圈直径 菌落直径的比值、抑菌圈面积 菌落面积 等结果。测量单个抑菌圈的直径,仪器的重现性≤0.02mm; 的比值 等结果。测量单个抑菌圈的直径,仪器的重现性 ; 效价测量精度≤0.5%;效价重复测量精度 效价测量精度 ;效价重复测量精度≤0.5%;台间测量差异 ; ≤0.5%。 。
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