黑果枸杞化学成分研究进展_夏园园

1.1 黑果枸杞多糖的生物活性 1.1.1 抗疲劳作用 负重游泳试验是评价抗运动性疲劳 的重要指标。汪建红等 [8] 和 Ni 等 [9] 采用小鼠负重游泳 试验研究均发现，黑果枸杞多糖具有明显的抗疲劳生 物活性。 1.1.2 降血糖作用 汪建红等 [10] 采用预防性灌胃黑果枸 杞多糖溶液后再造模与先造模再治疗性灌胃黑果枸杞 多糖溶液两种方法，研究黑果枸杞多糖对糖尿病的预 防和治疗作用，结果显示，黑果枸杞多糖能显著降低 糖尿病小鼠的血糖含量。 1.1.3 消炎作用 对黑果枸杞分离、纯化后，Peng 等 [11] 对其纯化多糖的生物活性进行了研究，发现黑果枸杞 复合多糖 LRGP3 通过阻断 TLR4/NF-κB 信号通路来缓 解或消除脂多糖 (LPS) 诱导的炎症。 1.1.4 抗氧化活性 Liu 等 [4] 通过测定对二苯代苦味酰基 (DPPH)、过氧化氢、超氧负离子自由基的清除率来研 究 LRGP 的抗氧活性，结果表明，LRGP 可作为功能食 品和药物的新型天然抗氧剂。
1.4 黑果枸杞多糖的含量测定 测定黑果枸杞多糖含量多采用经典的苯酚 - 硫酸
法 [21]，但该法只能测定总糖的含量，且易受其他还原 性物质的干扰。超高效液相 - 蒸发光散射 (UPLC-ELSD) 法可进行梯度洗脱，适用于黒果枸杞多糖的分析 ， [22] 但灵敏度不高。
2 黑果枸杞色素
2.1 黑果枸杞色素的生物活性 黑果枸杞色素（L. ruthenicum pigment）具有延缓衰
2.2 黑果枸杞色素的提取与纯化 2.2.1 黑果枸杞色素的提取工艺 通过比较常规水浴法、 超声波提取、微波提取和超声 - 微波协同萃取这 4 种 方法对黑果枸杞色素提取率的影响发现，超声 - 微波 协同萃取法的提取效果最好，常规水浴法次之，微波法 最差 [26]。柳福智等 [27] 通过单因素和多因素正交试验对 影响提取物中黑果枸杞色素含量的各因素进行了研究， 获得其最佳提取工艺条件为 5% 盐酸和 85% 乙醇混合 溶剂作浸提剂、溶剂比 1∶1、提取温度 70 ℃、提取时 间 4 h、固液比 1∶20。酶解法 [28] 也是黑果枸杞花色苷 的有效提取方法之一。 2.2.2 黑果枸杞色素的纯化工艺 为获得黑果枸杞色素的 精制品，还需优化精制工艺对其粗提物进一步纯化， 以除去多糖等杂质。王丽玲等 [29] 利用均匀实验设计法， 考察了 pH 值、料液浓度和树脂径高比对大孔树脂吸附 色素的影响，以及 pH 值、乙醇浓度和洗脱剂速度对大 孔树脂解析色素的影响，优化出 AB-8 大孔树脂对黑果 枸杞色素动态吸附和动态解析的最佳纯化条件。
鲁小静等 [13] 采用单因素试验，考察热水浸提法中 提取温度、料液比和提取时间对多糖提取率的影响； 再 结 合 响 应 面 分 析 法（response surface methodology， RSM）优化黑果枸杞多糖的提取工艺；确定了多最佳提 取条件为热水温度 90 ℃、料液比 1︰25（g︰mL）、时 间 66 min，黑果枸杞多糖得率为 29.36 %。陈亮等 [14] 则 在单因素试验的基础上，利用 Box-Behnken 设计和响 应面分析法，对超声浸提法提取黑果枸杞多糖的工艺进 行了合理优化。RSM 的优点为可对连续的而非一个个 独立的试验点进行分析，以确立最佳试验条件，且所得 数据准确、可靠，具有实用价值；缺点为需确保最佳的 试验条件包含在设计的试验点中，若试验点选取不当， 则得到的优化结果不理想，此外还需选择合适的评价 指标，如某类成分的含量或损失量等。故 RSM 适用于 黒果枸杞单类成分的提取优化，对于黒果枸杞水提、 醇提等粗提液总体成分的提取优化，很难选择合适的 评价指标，RSM 不太适用。
花色苷类色素是黒果枸杞色素的主要组成部分，花 青素是花色苷的苷元，自然条件下游离状态的花青素极 少见，主要以糖苷形式存在，原花青素在植物体内可 转化成花青素，二者均为多酚类的类黄酮化合物。花 色苷类色素耐热、耐光、耐酸，稳定性较好，不受蔗 糖和防腐剂苯甲酸钠的影响，且有较强的浸染能力 ， [25] 可应用于医药、食品、化妆品等。类胡萝卜素也是黑 果枸杞浆果中含有的一类重要天然色素，其不溶于水， 是一种脂溶性色素，在保护组织抗光氧化方面起重要 作用。
Research Progress in Chemical Constituents of Lycium Ruthenicum Murr. XIA Yuanyuan1, MO Rennan1, QU Wei2, LIU Wenyuan1
(1. Department of Pharmaceutical Analysis, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China; 2.Department of Natural Medicinal Chemistry, China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China) [Abstract] Lycium ruthenicum Murr. is a medicinal and edible plant with various pharmacological activities including anti-oxidation, antiatherosclerosis, immunity enhancement, anti-aging and hypolipidemic activity. This review summarized progress in the researches on chemical constituents, biological activities, extraction methods and quality analysis of Lycium ruthenicum Murr. so as to provide reference for further exploitation and utilization of active ingredients in Lycium ruthenicum Murr. [Key words] Lycium ruthenicum Murr.; chemical constituents; biological activities; determination methods
1.2.2 黑果枸杞多糖的纯化工艺 马玉婷等 [15] 采用基于 单因素试验的响应面法，对黑果枸杞酒渣多糖的大孔树 脂精制工艺进行了优化，获得其最佳吸附条件和解吸附 条件。彭强等 [16] 研究黑果枸杞水溶性多糖的纯化工艺， 结果显示，其最佳脱蛋白方法为三氯乙酸法，最佳脱 色方法为过氧化氢法。
1.3 黑果枸杞多糖的结构表征 目 前 从 黑 果 枸 杞 中 分 离、 纯 化 了 水 溶 性 多
糖 LRGP1[17]、 阿 拉 伯 半 乳 聚 糖 蛋 白 (LRGP3)[18]、 LRGP4-A[19] 和免疫活性果胶 (LRGP5)[20]，并对其进行结 构表征（基本实验流程见表 1），其中 LRGP1-4 为中 性多糖，LRGP 5ble 1 Experimental procedures for structural characterization of LRGP from Lycium ruthenicum Murr.
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Prog Pharm Sci
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1.2 黑果枸杞多糖的提取与纯化 1.2.1 黑果枸杞多糖的提取工艺 白红进等 [12] 采用不同 方法（包括常规水浴法、微波法、超声法和超声 - 微 波协同萃取法等）提取黑果枸杞多糖，再用蒽酮 - 硫 酸比色法测定其含量，其中只有超声法未加热，其他三 种方法均在加热条件下提取多糖。结果显示，4 种方法 的提取效果依次为超声 - 微波协同萃取法 > 常规水浴 法 > 微波法 > 超声法。提示，黑果枸杞多糖的提取可 能受温度的影响，提取时宜采用加热方法。但温度过高， 又会使多糖降解、生物活性降低，故为提高黑果枸杞 多糖的提取率，需对提取条件进一步优化。
究 表 明， 多 糖 是 中 草 药 发 挥 独 特 疗 效 的 重 要 物 质 基 础。 黑 果 枸 杞 多 糖（Lycium ruthenicum glycoconjugate polysaccharide，LRGP）不仅可作为能源物质，其在生物 体内也具有多种生物活性，是黑果枸杞的主要功能组分。
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老、抗氧化、调节血脂、预防动脉粥样硬化等多种生 物活性 ， [5，7，23] 且安全、无毒 ， [24] 可作为药食两用的 天然色素使用。
Liu 等 [4] 采 用 动 态 微 波 辅 助 萃 取 (dynamic microwave-assisted extraction，DMAE) 技 术 提 取 黑 果 枸 杞多糖；用 Box-Behnken 设计和基于单因素试验的响 应面法优化提取条件；优化后的提取条件为料液比 31.5 mL·g-1、提取时间 25.8 min、微波功率 544.0 W。动态 微波辅助萃取法的提取量大、选择性好、速度快，是 一种能量和溶剂低消耗的环境友好型提取法；与热水 浸提法相比，其多糖得率相近或更高。但热水浸提法 操作简单、安全，虽提取时间较长、效率较低，因其 提取成本低和干扰物质少或易除去的优点，目前仍是 植物多糖提取的常用法。
目的
方法
粗多糖提取
纯化
相对分子质 量测定
单糖组成、 结构表征
热水浸提、醇沉、去蛋白、脱色 阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱
高效凝胶渗透色谱 (HPGPC)
甲基化法、部分酸水解、IR、NMR、ESI-MS
黒果枸杞多糖相对分子质量大、结构复杂、多含支 链，故对其分析较困难。结构表征时，需先运用部分 酸水解法等将多糖分解成相对分子质量较小的多糖或 寡糖，才可进行色谱光谱联用分析以确定其单糖组成、 糖苷键的类型和位置。纯度测定也是多糖分析的基本 项目之一，经纯度确定的黒果枸杞纯化多糖，可进行 药理或体内实验，进一步研究其构效关系。