ELISA法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究
ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证
ELISA法检测疫苗中残余牛血清蛋白含量的方法学验证董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋【期刊名称】《现代仪器与医疗》【年(卷),期】2006(012)006【摘要】为验证ELISA法检测病毒性疫苗中残余牛血清蛋白方法的可靠性,由2个部门对12个样品进行4人连续3天的验证.结果表明:4人连续3天的12次检测结果均满足牛血清白蛋白ELISA法(BSP-ELISA法)标准曲线成立的条件,建立合格标准曲线的成功率为100%;对5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL浓度的牛血清白蛋白(BSP)标准品,不同实验人员间测定结果的变异系数在2.87%～6.33%之间,精密度较好;回收率在92.9%～103.1%之间,说明不同人的测定结果准确度高.分别采用该方法与已上市的牛血清白蛋白试剂盒对7种疫苗中100个样品的残余BSP含量进行检测,二者的检测结果合格符合率为100%,用该方法对已上市的检测BSA试剂盒中的4个标准品进行检测,回收率在90.0%～117.1%,检测灵敏度为2.5ng/mL,表明BSP-ELISA法可以敏感、准确地定量检测BSA,可用于目前我公司疫苗制品中残余牛血清白蛋白的质量控制.【总页数】5页(P21-25)【作者】董小曼;田博;杨冰;潘殊男;栗妍;沈淑琴;王晋【作者单位】北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024;北京天坛生物制品股份公司,北京,100024【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.ELISA法检测干细胞溶液中残留牛血清白蛋白含量 [J], 宛莹;聂德志;贲亮;黄若洋2.ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量 [J], 方玉;冯晓明;奚廷斐;杜晓丹;陈震3.三种检测猪瘟疫苗中牛血清蛋白含量的ELISA试剂盒的性能对比 [J], 曹玉美;方茜;陆江;孙如水;孙龙4.应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白 [J], 李长贵;周铁群;王剑锋;邱平5.检测疫苗残余牛血清ELISA试剂的质量控制 [J], 潘殊男;刘保奎因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
ELISA定量检测新生牛血清中乙脑抗体方法的初步验证19
ELISA定量检测新生牛血清中乙脑抗体方法的初步验证摘要】目的：对定量检测新生牛血清中乙脑抗体的ELISA方法进行初步验证。
方法：对ELISA方法的灵敏度、精密性、特异性、线性和在新生牛血清中的适用性进行验证。
结果：该法的灵敏度为1:4096；板内和板间CV平均值分别为1.2%和2.0%；抑制率均>79%；线性较好，相关系数r均>0.993;在新生牛血清中的检测回收率均>90%。
结论：该法具有较高的灵敏度、精密性、特异性和线性，适用于检测新生牛血清中的乙脑抗体。
【关键词】乙脑抗体；ELISA；新生牛血清【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）10-0152-02Primary validation of quantitative ELISA for Japanese encephalitis antibody in new born bovine serum Yao Liang Qian Haozhou Zhang Jinghai .Shenyang Pharmaceutical University 10163,China【Abstract】Objective To Validate the quantitative ELISA for antibody against Japanese Encephalitis Virus (JEV) in newborn bovine serum. Methods The method was verified for sensitivity, precision, specificity, linearity and determined for Antibody against JEV in new born bovine serum. Results The sensitivity of the method was1:4096;The mean CVs of determination results of test samples in various wells and on various plates were 1.2% and 2.0% respectively; All inhibitions ratio were >79%;The linearity was good,all correlation coefficientsr were >0.993;Every recovery was>90% in new born bovine serum. Conclusion The method for detection of antibody against Japanese Encephalitis Virus (JEV) in newborn bovine serum was applicative, which showed high sensitivity, precision, specificity and linear.【Key words】Japanese encephalitis antibody; ELISA ; New born bovine serum新生牛血清是乙脑疫苗生产中重要的原辅料，新生牛血清中如含有乙脑抗体将影响乙脑疫苗的正常生产。
品检中的兽药残留检验方法
品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。
合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病，提高畜禽养殖效益。
然而，如果兽药残留超过安全标准，可能对消费者健康造成潜在风险。
因此，兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。
兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。
本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法，并讨论其原理和应用。
高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。
该方法基于高效液相色谱（HPLC）和质谱联用仪（MS），通过对样品进行分离和定性分析，可以快速、准确地检测多种兽药残留物。
HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点，适用于不同类型的兽药残留物检测。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。
该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合，形成特异性抗原-抗体复合物，并通过酶作用产生颜色反应，从而定量检测兽药残留物的含量。
ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点，适用于大规模的兽药残留检测。
气相色谱-质谱联用法（GC-MS）也是常用的兽药残留检验方法之一。
该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析，可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。
GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多种兽药残留物的分析。
快速液相色谱法（UPLC）也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。
与传统的液相色谱相比，UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。
因此，UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。
综上所述，兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。
通过合理选择和应用适当的检验方法，可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。
这有助于确保畜产品的质量安全，保护消费者的健康。
未来，随着科技的进步，兽药残留检验方法还会不断发展和完善，以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。
ELISA法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究
收稿日期:2006-01-23;修回日期:2006-04-06作者简介:潘殊男(1974-),男,硕士,助理研究员,主要从事检测方法研究。
E L I S A 法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究潘殊男,杨冰,刘保奎,董小曼(北京天坛生物制品股份有限公司,北京100024)摘 要:为了验证E L I S A 法对病毒性疫苗中残余牛血清蛋白检测的适用性,用牛血清蛋白E L I S A 测定法与牛血清白蛋白E L I S A 测定法、牛血清I g G -E L I S A 测定法对麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液以及多种成品疫苗中的残余牛血清蛋白含量进行了测定。
结果显示,麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液中牛血清白蛋白含量依次为I g G 含量的70.5倍、65倍、84.3倍,洗涤后病毒收获液中两者比值分别为4.2、1.8和8.1;牛血清白蛋白E L I S A 法和牛血清蛋白E L I S A 法均能检测出疫苗中牛血清白蛋白,但前者测不出牛血清I g G ,而后者可准确检测牛血清I g G 。
牛血清蛋白E L I S A 测定法可同时检测牛血清白蛋白和牛血清I g G ,更适用于疫苗残余牛血清蛋白含量的测定。
关键词:牛血清;E L I S A ;适用性中图分类号:R 446.61文献标识码:A文章编号:1005-5673(2006)03-0023-04I n v e s t i g a t i o no na p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o no f r e s i d u a l b o v i n e s e r u m c o n t e n t s i nv i r a l v a c c i n e s P A NS h u -n a n ,Y A N GB i n g ,L I UB a o -k u i ,e t a l .(B e i j i n gT i a n T a nB i o l o g i c a l P r o d u c t s C o .,L T D ,100024,C h i n a )A b s t r a c t :T o v a l i d a t e t h e a p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o n o f r e s i d u a l b o v i n e s e r u mc o n t e n t s i n s o m e v i r u s v a c c i n e s ,b y w h i c hi n c l u d e d m e a s u r e m e n t o f r e s i d u a l p r o t e i n s f r o m b o v i n e s e r u m i nc u l t u r e s b e f o r e w a s h i n g a n dh a r v e s t e d c u l t u r e s a f t e r w a s h i n g i n p r e p a r a t i o no f v a c c i n e s f o r m e a s l e s ,m u m p s a n d r u b e l l a .T h r e e k i n d s o f E L I S Am e t h o d s c o u l d b e u s e d i nd e t e c -t i o no f b o v i n e s e r u mp r o t e i n s ,b o v i n e s e r u ma l b u m i n a n d b o v i n e I g Gr e s p e c t i v e l y .T h e r e s i d u a l c o n t e n t s o f b o v i n e s e r u ma l -b u m i n a r e 70.5、65a n d 84.3f o l d s a s t h o s eo f b o v i n e I g Gi n v i r u s c u l t u r e s b e f o r ew a s h i n gi nm e a s l e s ,m u m p s a n dr u b e l l a v a c c i n e s ,w h e r e a s a f t e r w a s h i n g i nh a r v e s t e d c u l t u r e s t h e r a t i o s o f b o t ho f t h e ma r e r e d u c e d t o 4.2,1.8a n d 8.1f o l d s r e -s p e c t i v e l y .B o v i n e s e r u mp r o t e i n s -E L I S Ac a nb e u s e di nd e t e c t i o no f B S Aa n db o v i n eI g G i nah i g h l y s e n s i t i v ew a y ,b u t B S A -E L I S A i s o n l y c o n d u c t e d o n d e t e r m i n a t i o n o f B S A .T h e f o r m e r i s m o s t a p p l i c a b l e t h a n t h e o t h e r t w o o n d e t e c t i n g r e s i d -u a l b o v i n e s e r u m a l l e r g e n si nv i r u s v a c c i n e s ,b e c a u s eB S A a n db o v i n eI g G a r eb o t hp r i m a r yr e s i d u a l a l l e r g e n si nt h e s e p r e p a r a t i o n s .K e yw o r d s :B o v i n e s e r u m ;E L I S A ;A p p l i c a b i l i t y 《中国生物制品规程》2000年版规定,疫苗中残余的牛血清蛋白残留量不得超过50n g /m l 〔1〕。
ELISA法检测组织工程产品中残留牛血清蛋白含量
论著 ・
Ｅ ＩＡ ＬＳ 法检测 组织工程产 品 中 残 留牛 血 清 蛋 白含 量
方玉 冯晓 明 奚廷 斐 陈震 杜 晓丹
【 要 】 目的 摘
探 讨 定 量 检 测 牛 血清 白蛋 白 （ ｕ ｅｕ ｌｕ ｎ Ｂ Ａ） Ｂ ｌｓｒｍ ａ ｍｉ，Ｓ 酶联 免 疫 试 剂 盒 用 于 组 织 工 程 医疗 产 品 （ ｄｃｌ ｌ ｂ Ｍｅｉ ａ
明 显减 少 。 论 （ ） 试 剂 盒 适 用 于 组织 工程 医疗 产 品 中 Ｂ Ａ残 留量 的 检测 。 ２ 对 于 组织 工 程 医疗 产 品 而 言 ， 同的 结 １该 Ｓ （） 不 清洗 程 序 对 Ｂ Ａ 的残 留量 有 非 常 明 显 的影 响 。生 产 商 应 根 据其 预期 用 途 制 定 有 效 的 清 洗 程序 ， 在 说 明 书 中给 予 足 够 Ｓ 并
酶联免疫吸附测定法ELISA在抗生素残留检测中的应用
加强国际合作与交流
加强与其他国家和地区的合作与交流，共同推进ELISA技术在抗生素 残留检测领域的发展和应用。
07 参考文献
参考文献
1 2
参考文献1
介绍了ELISA的基本原理和在抗生素残留检测中 的应用，强调了其高灵敏度和特异性。
抗生素残留的来源
畜牧业和农业中广泛使用抗生素，导致动物产品如肉类、蛋类和奶制品中存在 抗生素残留。
ELISA技术简介
01
酶联免疫吸附测定法（ELISA）
是一种基于抗原-抗体反应的检测方法，通过酶标记技术将免疫反应与
化学信号放大相结合，实现对目标物质的灵敏检测。
02
ELISA技术的优点
高灵敏度、特异性、操作简便、适合批量检测等。
03 ELISA在抗生素残留检测 中的应用
抗生素残留检测的重要性
保障食品安全
抗生素残留超标可能对人体健康造成危害， 如产生过敏反应、耐药性等，因此对抗生素 残留进行检测是保障食品安全的重要环节。
国际贸易标准
随着国际贸易的发展，各国对抗生素残留 的检测标准日益严格，符合国际标准的检 测方法对于出口农产品的企业至关重要。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）在 抗生素残留检测中的应用
目录
• 引言 • ELISA技术原理 • ELISA在抗生素残留检测中的应用 • ELISA技术的实验流程 • 实验结果和数据分析 • 结论 • 参考文献
01 引言
抗生素残留问题
抗生素残留对人类健康的潜在威胁
长期摄入含有抗生素残留的食物可能增加人体内耐药菌株的形成，降低抗生素 在治疗疾病时的有效性。
03
ELISA技术的基本原理
牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析(ELISA)
牛的牛血清白蛋白残留检测酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中类牛血清白蛋白残留检测的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛的牛血清白蛋白残留检测水平。
用纯化的牛的牛血清白蛋白残留检测抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入类牛血清白蛋白残留检测，再与HRP标记的类牛血清白蛋白残留检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的类牛血清白蛋白残留检测呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛的牛血清白蛋白残留检测浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
ELISA方法检测牛组织中的阿维菌素类药物残留
ELISA方法检测牛组织中的阿维菌素类药物残留杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2014(050)009【摘要】建立一种间接竞争ELISA方法,检测牛组织中的阿维菌素类药物(Avermectins,AVMs)残留.该方法可同时检测牛肝脏和肌肉中的阿维菌素、伊维菌素和埃普里诺菌素残留.标准曲线:y=-45.613x+ 81.191,R2=0.9951,IC50=4.8 ng/mL,线性范围为1.1 ng/mL～21.9 ng/mL.空白牛肝脏组织中以20、50ng/mL和100 ng/g浓度添加时,AVMs回收率为53.8％～80.4％,变异系数为3.4％～17.9％;空白牛肌肉组织中以5、10 ng/mL和20 ng/g浓度添加时,AVMs 回收率为70.9％～108.6％,变异系数为3.7％～17.1％.【总页数】3页(P70-72)【作者】杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫【作者单位】中国牧工商(集团)总公司,北京丰台100070;中国牧工商(集团)总公司,北京丰台100070;中牧实业股份有限公司,北京丰台100070;北京农学院,北京昌平102206;中国牧工商(集团)总公司,北京丰台100070;中牧实业股份有限公司,北京丰台100070【正文语种】中文【中图分类】S851.34+7【相关文献】1.ELISA方法检测含油食品中氟喹诺酮类药物残留 [J], 于金玲;宫小明;董静;丁葵英;王洪涛2.动物组织中苯并咪唑类药物多残留ELISA方法的建立 [J], 陈飞;万宇平;冯静;刘春雪3.猪肉组织中阿维菌素类药物残留的高效液相色谱-串联质谱法测定 [J], 赵东豪;贺利民;聂建荣;洪振涛;连槿;刘雅红;彭聪4.牛肌肉中阿维菌素类药物残留的免疫亲和色谱——高效液相色谱荧光检测方法的研究 [J], 杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫5.液相色谱法测定猪组织中阿维菌素类药物残留量 [J], 王海;刘素英;单吉浩;吴银良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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收稿日期:2006-01-23;修回日期:2006-04-06作者简介:潘殊男(1974-),男,硕士,助理研究员,主要从事检测方法研究。
E L I S A 法检测疫苗中牛血清残留量的适用性研究潘殊男,杨冰,刘保奎,董小曼(北京天坛生物制品股份有限公司,北京100024)摘 要:为了验证E L I S A 法对病毒性疫苗中残余牛血清蛋白检测的适用性,用牛血清蛋白E L I S A 测定法与牛血清白蛋白E L I S A 测定法、牛血清I g G -E L I S A 测定法对麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液以及多种成品疫苗中的残余牛血清蛋白含量进行了测定。
结果显示,麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液中牛血清白蛋白含量依次为I g G 含量的70.5倍、65倍、84.3倍,洗涤后病毒收获液中两者比值分别为4.2、1.8和8.1;牛血清白蛋白E L I S A 法和牛血清蛋白E L I S A 法均能检测出疫苗中牛血清白蛋白,但前者测不出牛血清I g G ,而后者可准确检测牛血清I g G 。
牛血清蛋白E L I S A 测定法可同时检测牛血清白蛋白和牛血清I g G ,更适用于疫苗残余牛血清蛋白含量的测定。
关键词:牛血清;E L I S A ;适用性中图分类号:R 446.61文献标识码:A文章编号:1005-5673(2006)03-0023-04I n v e s t i g a t i o no na p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o no f r e s i d u a l b o v i n e s e r u m c o n t e n t s i nv i r a l v a c c i n e s P A NS h u -n a n ,Y A N GB i n g ,L I UB a o -k u i ,e t a l .(B e i j i n gT i a n T a nB i o l o g i c a l P r o d u c t s C o .,L T D ,100024,C h i n a )A b s t r a c t :T o v a l i d a t e t h e a p p l i c a b i l i t y o f E L I S Ai nd e t e c t i o n o f r e s i d u a l b o v i n e s e r u mc o n t e n t s i n s o m e v i r u s v a c c i n e s ,b y w h i c hi n c l u d e d m e a s u r e m e n t o f r e s i d u a l p r o t e i n s f r o m b o v i n e s e r u m i nc u l t u r e s b e f o r e w a s h i n g a n dh a r v e s t e d c u l t u r e s a f t e r w a s h i n g i n p r e p a r a t i o no f v a c c i n e s f o r m e a s l e s ,m u m p s a n d r u b e l l a .T h r e e k i n d s o f E L I S Am e t h o d s c o u l d b e u s e d i nd e t e c -t i o no f b o v i n e s e r u mp r o t e i n s ,b o v i n e s e r u ma l b u m i n a n d b o v i n e I g Gr e s p e c t i v e l y .T h e r e s i d u a l c o n t e n t s o f b o v i n e s e r u ma l -b u m i n a r e 70.5、65a n d 84.3f o l d s a s t h o s eo f b o v i n e I g Gi n v i r u s c u l t u r e s b e f o r ew a s h i n gi nm e a s l e s ,m u m p s a n dr u b e l l a v a c c i n e s ,w h e r e a s a f t e r w a s h i n g i nh a r v e s t e d c u l t u r e s t h e r a t i o s o f b o t ho f t h e ma r e r e d u c e d t o 4.2,1.8a n d 8.1f o l d s r e -s p e c t i v e l y .B o v i n e s e r u mp r o t e i n s -E L I S Ac a nb e u s e di nd e t e c t i o no f B S Aa n db o v i n eI g G i nah i g h l y s e n s i t i v ew a y ,b u t B S A -E L I S A i s o n l y c o n d u c t e d o n d e t e r m i n a t i o n o f B S A .T h e f o r m e r i s m o s t a p p l i c a b l e t h a n t h e o t h e r t w o o n d e t e c t i n g r e s i d -u a l b o v i n e s e r u m a l l e r g e n si nv i r u s v a c c i n e s ,b e c a u s eB S A a n db o v i n eI g G a r eb o t hp r i m a r yr e s i d u a l a l l e r g e n si nt h e s e p r e p a r a t i o n s .K e yw o r d s :B o v i n e s e r u m ;E L I S A ;A p p l i c a b i l i t y 《中国生物制品规程》2000年版规定,疫苗中残余的牛血清蛋白残留量不得超过50n g /m l 〔1〕。
为此建立了检测残余牛血清蛋白的E L I S A 双抗体夹心法,并对方法的特异性、敏感度、精密性进行了初步验证〔2〕,2005年药典要求用E L I S A 法对疫苗中残余牛血清白蛋白进行检测〔3〕,考虑到疫苗中牛血清I g G 也是重要的过敏原,试验中将已建立的牛血清蛋白E L I S A 法(B S P -E L I S A )与无锡博生公司生产的牛血清白蛋白E L I S A 试剂盒(W X -B S A -E L I S A )、美国C y g n u s 公司生产的牛血清白蛋白试剂盒(C Y -B S A -E L I S A )、牛血清I g GE L I S A 检测试剂盒(C Y -B -I g G -E L I S A )对疫苗成品、半成品中残余牛血清蛋白成分进行测定,以初步探讨牛血清I g G 蛋白在疫苗中的残留量,并对B S P -E L I S A 法用于疫苗残余牛血清蛋白含量测定的适用性进行评价。
材料与方法1 材料和仪器96孔聚苯乙烯反应板购自C O A S T A R 公司;底物液A 液为含过氧化脲的柠檬酸-醋酸盐缓冲液,底物液B 液为四甲基联苯胺(T M B ),均由北京天坛生物制品股份有限公司诊断用品室提供;酶标仪为英国D r a g o n 公司产品,型号为W e l l S c a n M K 3。
国家牛血清标准品(批号200205)购自中国药品生物制品检定所;抗牛血清蛋白抗体、辣根过氧化物酶标记的抗牛血清蛋白抗体为天坛生物制品股份有限公司质监部制备;反向间接血凝法(R P H A )残余牛血清蛋白检测试剂(批号200401)购自中国药品生物制品检定所;牛血清白蛋白E L I S A检测试剂盒(批号20050301)购自无锡博生生物技术开发公司;牛血清白蛋白E L I S A检测试剂盒(批号17124)、牛血清I g GE L I S A检测试剂盒(批号16124)购自美国C y g-n u s公司。
麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液由天坛生物制品股份有限公司疫苗三室提供;麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗、麻疹-风疹联合疫苗、麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗、试验性水痘疫苗、V e r o细胞乙型脑炎灭活疫苗、试验性脊髓灰质炎疫苗均为北京天坛生物制品股份有限公司产品。
2 以R P H A法为参考方法,验证B S P-E L I S A测定法〔2〕检测疫苗中残余牛血清蛋白的适用性分别用B S P-E L I S A和R P H A法检测不同病毒性疫苗中残余牛血清蛋白的含量,检测样品包括麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗、麻疹-风疹联合疫苗、麻疹-腮腺炎-风疹联合疫苗、试验性水痘疫苗、V e r o细胞乙型脑炎灭活疫苗、试验性脊髓灰质炎疫苗均为北京天坛生物制品股份有限公司产品。
以供试品中牛血清蛋白含量>50n g/m l为不合格,≤50n g/m l为合格判定标准。
3 B S P-E L I S A法检测牛血清白蛋白、牛血清I g G 含量的适用性分别用B S P-E L I S A法和W X-B S A-E L I S A试剂盒检测C Y-B S A-E L I S A试剂盒中的B S A标准品、C Y-B-I g G-E L I S A试剂盒中的B-I g G标准品,计算回收率。
4 测定疫苗生产过程中,洗涤前后B S A和B-I g G 的含量分别用B S P-E L S I A法和W X-B S A-E L I S A试剂盒、C Y-B S A-E L I S A试剂盒、C Y-B-I g G-E L I S A试剂盒检测麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液和洗涤后病毒收获液中的残余B S、B S A、B-I g G 含量,计算B S A、B-I g G之间的比值以及二者在B S 中所占比例。