微生物群落基因指纹分析
RAPD/DAF 不需设计特殊引物
Bb-PEG
简单；不需要昂的设 备
低分辨率；Bb-PEG 染料比较难获 得 很多条带与群落成员无关
RFLP/ARD 直接；不需要昂的设 RA 备 TRFLP 高分辨率;泳道内标 记;直接定量分析片 段
无法获得种系发生信息，设备昂贵
讨论
基因指纹技术用于研究不同微生物群体的遗传
RFLP 和 ARDRA
限制性片段长度多态性和扩增rRNA片段限制
性分析都能用于微生物群落的特征分析。将 16S rDNA 片短用通用引物进行PCR扩增，再 用限制性酶消化，然后通过琼脂糖或聚丙烯酰 胺胶电泳，最后进行显色，即可进行分析。
Martinez-Murcia 等用RFLP分析16S rDNA 片
分离基于单链DNA的不同的折叠构象，因此
影响电泳迁移率。
Lee 和 coworkers用此技术来研究天然细菌群
落的结构和多样性。 Schwieger 和 Tebbe 用 PCR-SSCP来分析不同植物根际的微生物群落。
RAPD和DAF
随机扩增多态性DNA（RAPD）被用于跟踪不同土壤
微生物群落对2，4—D的反应。Breen et等用一个相似 的方法，名字叫做DNA扩增指纹法（DAF） ，来比 较不同生物反应器中的微生物群落，以及一个生物反 应器中的群落变化。这两种方法都用来5-10碱基的随 机引物，这些随机引物在基因组DNA的不同部位复性， 使PCR产物分生出不同的长度。产物在琼脂糖胶或聚 丙烯酰胺凝胶中进行分离，然后用EB染色或银染显示 出条带。
Bb-PEG 电泳
双苯酰亚胺--聚乙烯二醇电泳是一种简单和 快速的电泳方法，用以检测不同的细胞培养和 不同环境中样品基因的PCR产物的序列变化。 电泳在含有双苯酰亚胺配基的琼脂糖凝胶中进 行，长链和PEG交联。双苯酰亚胺约束AT富集 的序列。高A+T含量的DNA分子比低A+T含量 的DNA分子在胶中所受阻力更大，因此能够分 离各种片段。
DGGE 和 TGGE
变性（温度）梯度凝胶电泳法，将收集
到的混合微生物基因组DNA和通过特异 引物获得PCR产物的混合物，在含有线 性梯度的DNA变性剂（或梯度温度条件 下）的聚丙烯酰胺凝胶中电泳.不同DNA 分子中不同的序列排列影响双链的熔解， 因此不同序列的分子分离。
该技术常被用于构建混合群落的基因图谱，研
究细胞群落的群体动态和不同基因在混合群落 的表达，所以可以以此来监视增殖培养，比较 DNA分离方法，屏蔽克隆库的重复，测定 rRNA 操纵子的微观不均一性。该技术最重要 的一点是条带可以保存在胶中，随后的排序可 以显示群落成员种系发生的信息.
SSCP
单链构象多态性技术通过特异引物扩增DNA
片段，将PCR产物变性后直接在非变性胶中电 泳。
技术
优点Leabharlann 缺点LMW RNA
直接，不需要体外扩 增
RNA降解迅速;LMW RNA 长度变化大， 种系发生信息有限
只能分析短片段（550 bp) ;有时 会形成双链或异源分子，影响结果
DGGE/TGG 能够鉴定群落成员 E
SSCP
能够鉴定群落成员
只能分析短片段(150-400 nt);重 复性差
无法获得种系发生信息; 重复性差
低分子量RNA指纹技术
该基因指纹技术的用于描绘低分子量RNA(5S
核糖体RNA；转运RNA)已有10年多了，这项 技术通过直接从环境样品中提取总RNA，通 过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离。显影后可将 图谱扫描然后储存在数据库中方便比对。
到目前为止，克隆16S rDNA的PCR扩增产物
是检测微生物多样性和鉴定混合的微生物群落 种类构成最成功的方法。
The end
2、DNA指纹鉴定技术的应用：
返回
谢谢
差异、环境变化之后对细菌群落的变化的监视 既简便又快速。这些技术都能用于描述性技术 分析，而且只有几种方法，如LMW RNA指纹、 DGGE、SSCP，能通过杂交分析或分离条带的 序列分析对群落成员进行进一步的鉴定。基因 指纹技术的发展将使的越来越多多工作在微生 物生态方面的科学家产生浓厚的兴趣。
1、你还能说出DNA指纹鉴定技术在其他方面的应 用吗？ 答案
段的PCR扩增产物来评估多盐池塘的原核生物 的多态性。
T-RFLP
这种技术跟RFLP很相似，利用荧光标记PCR
产物。这种产物在进行PCR扩增的时候用一种 带荧光的引物使尾端带有标记。在接下来的测 定中，扩增的基因将被限制性酶消化，让后在 DNA自动测序仪中进行检测。只有带有荧光 标记的限制性片段即末端限制性片段才能被检 测出来。Avaniss-Aghajani 和 co-workers最先 运用这种方法来鉴定复杂混合物中的不用细菌。
基因指纹分析技术的意义
微生物通常很小，外部特征也不显著，无法通过形态学去
分类。 自然界中99%的微生物是无法被分离 。 为了对微生物多样性执行生态系统机能所发挥的作用更好 地理解 ，一种能弥补传统微生物测定法的不足的技术是很 必须的。 基因指纹分析技术基于各种独特的核苷酸物理分离片段， 能描绘出微生物群落的结构轮廓。 最重要的是，这种方法能够同时分析多个样品，因此能够 比较不同环境中微生物群落的遗传多态性，还能随时间变 化研究单个群落的习性。
Methods of Microbial Community Analysis
微生物群落基因指纹分析—研究现状与 未来展望
林仲旸
10808045
摘要
微生物生态学常利用核糖体RNA作为一种分子技术来
鉴定微生物种群，其中一种策略就是克隆从周围环境 获得的PCR产物来检查微生物群落的多样性，而不需 进行培养。虽然这种方法很成功，但却不适合用来研 究微生物群落复杂的动力学，例如微生物群落对电解 质的耐受，季节波动的影响，环境变化的影响。因此， 基因指纹分析技术是一种更好的方法，在此我将展示 当前基因指纹技术在微生物生态学的应用并展望未来 的前景。
实验ERIC-PCR指纹图谱技术
生态学中的应用
实验目的
• 明确ERIC-PCR技术用于分析微生物群 落结构的原理.
• 掌握ERIC-PCR的操作方法.
ERIC Enterobacterial Repetitive Intergenic Consensus-PCR
Hulton,1991
0.5μl
20.5 μl
2. 加入模板DNA40ng 4.0μl
NC 样品 PC
24.5 μl
3. 放入PCR扩增仪,95℃变性7min 4. 取出PCR小管,迅速加入0.5μl Taq DNA聚合酶,混匀,简短
离心.后加酶可保证模板变性完全且不损坏Taq DNA聚合酶 的活性
5. 放入PCR扩增仪 ,按以下程序进行扩增： 94℃ 1 min,52℃ 1 min, 65℃ 8 min,共30个循环； 65℃延伸16min,1个循环.
• dNTPDNA合成的原料
PCR原理
ERIC-PCR程序
• 95℃, 7min • 94℃, 1min 变性
52℃, 1min 退火 68℃, 8min 延伸 • 65℃, 16min
30 cycles
1. 试剂
实验材料
无菌水 25 mmol/L MgCl2溶液 10×扩增缓冲液:
含500 mM KCl, 100 mM Tris-HCl PH9.0, 1% TritionX-100 2.5 mmol/L dNTP混合液 20pmol/μl 引物E1 20pmol/μl 引物E2 5 U/μl Taq DNA聚合酶 DNA模板40-80ng环境样品总DNA
6. 程序结束约6.5h,取出PCR小管 7. 吸取2μl扩增产物用浓度仪测定浓度
环境微生物群落多样性分析
环境微生物群落多样性分析微生物群落多样性的基本概念环境中微生物的群落结构及多样性和微生物的功能及代谢机理是微生物生态学的研究热点。
长期以来，由于受到技术限制，对微生物群落结构和多样性的认识还不全面，对微生物功能及代谢机理方面了解的也很少。
但随着高通量测序、基因芯片等新技术的不断更新，微生物分子生态学的研究方法和研究途径也在不断变化。
第二代高通量测序技术（尤其是Roche 454高通量测序技术）的成熟和普及，使我们能够对环境微生物进行深度测序，灵敏地探测出环境微生物群落结构随外界环境的改变而发生的极其微弱的变化，对于我们研究微生物与环境的关系、环境治理和微生物资源的利用以及人类医疗健康有着重要的理论和现实意义。
在国内，微生物多样性的研究涉及农业、土壤、林业、海洋、矿井、人体医学等诸多领域。
以在医疗领域的应用为例，通过比较正常和疾病状态下或疾病不同进程中人体微生物群落的结构和功能变化，可以对正常人群与某些疾病患者体内的微生物群体多样性进行比较分析，研究获得人体微生物群落变化同疾病之间的关系；通过深度测序还可以快速地发现和检测常见病原及新发传染病病原微生物。
研究方法进展环境微生物多样性的研究方法很多，从国内外目前采用的方法来看大致上包括以下四类：传统的微生物平板纯培养方法、微平板分析方法、磷脂脂肪酸法以及分子生物学方法等等。
近几年，随着分子生物学的发展，尤其是高通量测序技术的研发及应用，为微生物分子生态学的研究策略注入了新的力量。
目前用于研究微生物多样性的分子生物学技术主要包括:DGGE/TGGE/TTGE、T-RFLP、SSCP、FISH、印记杂交、定量PCR、基因芯片等。
DGGE等分子指纹图谱技术，在其实验结果中往往只含有数十条条带，只能反映出样品中少数优势菌的信息；另一方面，由于分辨率的误差，部分电泳条带中可能包含不只一种16S rDNA序列，因此要获悉电泳图谱中具体的菌种信息，还需对每一条带构建克隆文库，并筛选克隆进行测序，此实验操作相对繁琐；此外，采用这种方法无法对样品中的微生物做到绝对定量。
微生物群落功能定量检测方法介绍
微生物群落功能定量检测方法介绍微生物是地球上最为广泛存在的生命形式之一，它们存在于各种自然环境中，从陆地到水体，从深海到高山，从北极到沙漠，几乎无处不在。
微生物群落是指一个特定环境中的所有微生物的总体群集，包括细菌、真菌、病毒等。
微生物群落的功能对于维持生态平衡、环境保护和人类健康具有重要意义。
因此，准确地定量检测和描述微生物群落功能是微生物生态学和环境科学领域的重要研究课题之一。
为了实现微生物群落功能的定量检测，研究人员开发了许多先进的技术和方法。
目前，常用的微生物群落功能定量检测方法主要包括基于高通量测序的方法和基于功能基因芯片的方法。
高通量测序方法是一种基于DNA测序技术的方法，可以快速、准确地检测和描述微生物群落的功能。
它利用先进的测序仪器和生物信息学分析工具，对微生物群落中的DNA进行扩增、测序和分析，从而了解其中微生物的种类和数量。
通过对特定功能基因的测序数据进行定量分析，可以有效评估微生物群落的功能水平。
功能基因芯片是另一种常用的微生物群落功能定量检测方法。
它是基于生物芯片技术的一种高通量平行分析技术，可以同时检测数千个功能基因。
功能基因芯片具有高灵敏度、高通量和高特异性的特点，可以准确测定微生物群落的功能丰度和多样性。
除了上述的主要方法外，还有一些其他的微生物群落功能定量检测方法，如荧光原位杂交技术（FISH）、荧光定量PCR（qPCR）等。
这些方法通过针对特定的微生物种群或功能基因的探针或引物进行定量检测，可以快速、高效地获得微生物群落的功能信息。
总结起来，微生物群落功能定量检测是研究微生物生态学和环境科学的关键议题。
目前，基于高通量测序、功能基因芯片和其他分子生物学技术的方法已经成为主流。
这些方法具有快速、准确、高通量和高特异性的特点，能够为我们深入了解微生物群落的功能及其对生态环境的影响提供有力的支持。
微生物群落功能定量检测的研究和应用在环境科学、生态学、医学和农业等领域都具有重要的意义。
实验十六数量性状的遗传学分析：人类指纹分析
稳定性
指纹在个体发育过程中相 对稳定，不会因外部环境 或生长发育而发生显著变 化。
指纹类型的遗传学解释
皮纹分类
根据指纹的形态特征，可以将人 类指纹分为斗形纹、箕形纹和弓 形纹三大类，每类又可细分为不 同的亚型。
遗传学分析
通过遗传学分析，可以确定不同 指纹类型之间的遗传关系，以及 不同特征之间的连锁关系。
准备显微镜、放大镜、记录本、相机等观察和记录工具，确保实验过程的顺利进 行。
指纹观察与记录
观察指纹特征
使用显微镜或放大镜仔细观察每个指 纹的特征，包括纹路走向、纹路密度、 纹路类型等。
记录数据
详细记录每个指纹的特征，并拍照或 扫描进行存档，确保数据的准确性和 可追溯性。
数据处理与分析
数据整理
将观察和记录的数据进行整理，建立数据库或数据表格， 便于后续的数据处理和分析。
作用。
数量性状在群体中呈连续变异， 受多个基因和环境因子影响，遗
传力较高。
数量性状遗传学在农业、医学和 生物多样性保护等领域具有广泛
应用。
人类指纹分析的意义
个体识别
指纹具有高度的个体特异性， 可用于身份识别和犯罪侦查。
遗传疾病研究
指纹与遗传疾病之间可能存在 关联，通过指纹分析有助于研 究遗传疾病的发病机制。
遗传学研究
指纹的遗传规律有助于理解人 类遗传学的基本原理，为多基 因遗传病的研究提供线索。
生物多样性保护
指纹分析在生物多样性保护领 域可用于物种鉴定和种群遗传
结构研究。
02 人类指纹的遗传基础
指纹的遗传特性
01
02
03
遗传性
指纹的形态和结构特征是 由基因决定的，具有明显 的遗传性。
代谢指纹分析及其在微生物研究中的应用
代谢指纹分析及其在微生物研究中的应用摘要：代谢指纹分析是新兴的代谢组学的主要研究方法之一，本文综述了代谢指纹分析的研究方法及其在微生物领域的研究应用进展。
关键词：代谢组学；代谢指纹分析；微生物代谢组学是20世纪90年代中期发展起来的一门对生物体或细胞等所有小相对分子质量代谢产物进行定量和定性分析的新技术。
这门新兴的学科凭借其整体论优势在最近几年得到了迅速的发展，广泛地应用到了功能基因组学、生物医学、微生物学等领域。
1.代谢组学简介代谢组学（Metabonomics或Mmetabolomics）是通过考察生物体系受刺激或扰动后(某个特定的基因变异或环境变化)其代谢产物的变化或随时间的变化，是研究生物体系代谢途径的新技术[1]。
Nicholson最初给出的定义是：定量测量生物体因病理生理刺激或基因改变引起的代谢应答变化[2]，系统性的代谢组学概念应将机体的代谢过程与微生物代谢以及外源环境因子的相互作用因素综合起来[3]。
研究过程中，逐步提出了一些相关概念，如代谢物靶目标分析(Metabolite target analysis)、代谢轮廓(谱)分析(Metabolic profiling analysis)和代谢指纹分析(Metabolic fingerprinting analysis)等。
2.代谢指纹分析的产生及原理20世纪80年代初，美国BIOLOG公司开发了一种新的微生物鉴定方法-代谢指纹法，并将其应用于微生物的自动化检测。
其原理是根据细菌对碳源（或氮源）利用的差异来区别和鉴定细菌，不同的细菌会利用不同碳源（或氮源）进入新陈代谢过程（称为呼吸），而对其他一些碳源（或氮源）则无法利用，将每种细菌能利用和不能利用的一系列碳源（或氮源）进行排列组合，就构成了该种细菌特定的代谢指纹，由于细菌在利用碳源进行呼吸时，会发生一系列的氧化-还原反应，产生电子，TTC（四唑紫，2,3,5-TriphenylTetrazoliumChloride）在呼收电子后，会由无色的氧化型转变为紫色的还原型，通过肉眼观察或计算机控制的读数仪，将反应结果同数据库中的指纹进行比对，从而得到细菌的鉴定结果。
微生物群落结构与环境因素相关性分析
微生物群落结构与环境因素相关性分析随着生物技术的快速发展，微生物群落结构与环境因素相关性分析成为了研究的热点之一。
微生物群落是指在特定环境中共存的微生物的总体，它对环境的变化非常敏感，能够反映环境的健康状况和改变。
因此，了解微生物群落结构与环境因素之间的关系对于环境保护和生物多样性的监测具有重要意义。
一、微生物群落结构的分析方法为了研究微生物群落结构与环境因素之间的关系，首先需要对微生物群落进行分析。
常用的微生物群落分析方法包括：1. 16S rRNA基因分析：通过对微生物群落中16S rRNA基因的测序和分析，可以获得微生物群落的丰富度、多样性和组成。
2. 基于功能基因的分析：通过测定微生物群落中特定功能基因的存在情况，可以了解微生物群落的功能潜力和代谢能力。
3. 元基因组学分析：通过测序微生物群落中的全基因组DNA，可以研究微生物群落的功能特征和代谢通路。
二、环境因素对微生物群落结构的影响环境因素是影响微生物群落结构的重要因素之一。
多种环境因素，如温度、pH 值、适宜的营养条件、氧气含量、盐度等，都能够显著影响微生物群落的结构和组成。
下面以土壤微生物群落为例，具体分析环境因素对微生物群落结构的影响。
1. pH值：土壤的酸碱度通过影响微生物的生理特征和代谢途径，进而影响微生物群落结构。
不同pH值环境下，微生物群落的物种组成和丰度差异明显。
2. 湿度：湿度对土壤微生物的生存和代谢有着重要的影响。
适宜的水分含量可以促进微生物的生长、繁殖和代谢，从而影响微生物群落的结构。
3. 温度：不同温度条件下，微生物的生理特征会发生显著变化，从而导致微生物群落结构的差异。
4. 营养物质：营养物质是微生物生长和代谢的重要来源。
土壤中不同种类和含量的有机和无机物质会影响微生物群落结构的组成和多样性。
三、微生物群落结构与环境因素的相关性分析方法微生物群落结构与环境因素之间的相关性分析是揭示微生物群落对环境变化的响应机制的重要方法之一。
基于高通量测序技术的微生物群落多样性和组成分析
基于高通量测序技术的微生物群落多样性和组成分析高通量测序技术，也被称为Next-generation Sequencing，简称NGS，是一种基于多重并行测序的技术。
当今，NGS技术已经成为微生物群落多样性和组成分析的核心方法。
为了更好地理解NGS技术在微生物群落中的应用，本文将从微生物群落的定义入手，逐步介绍NGS技术并探讨其在微生物群落中的应用。
一、微生物群落的定义微生物群落是指生态系统中的一组微生物集合，包括细菌、真菌、病毒、古菌等，并与环境中其他生物和非生物因素相互作用。
微生物群落丰富多样，与宿主生物的代谢和生理过程直接相关。
微生物群落可被分为多个层级（如种、属、科等），每个层级包括多种微生物的成员，同时也存在竞争、合作和利用等多种关系。
二、NGS技术的介绍NGS技术是第三代测序技术的代表。
相对于第二代测序技术（Sanger测序技术）的单基因测序，NGS技术是一种基于并行测序的高通量测序技术，因其测序速度快、效率高，迅速被广泛应用于生命科学、医学、农业和环境等领域。
NGS技术的工作原理是：将DNA或RNA片段打断，加上指定引物扩增，并在大规模并行的反应中进行测序。
目前，NGS技术主要可以分为Illumina测序和Ion Torrent测序两种。
三、NGS技术在微生物群落中的应用NGS技术在生态学中的应用越来越广泛，其中在微生物群落多样性和组成分析方面得到了广泛的应用。
NGS技术在微生物群落分析中的优缺点如下：（1）优点高通量测序技术可以快速而准确地获取微生物群落的基因信息和代表性序列，尤其是对于那些难以被检测或难以被培养的微生物。
同时，NGS技术的高度并行性和灵活性可以在一个样本中同时检测多个微生物群落，有效提高了宏观微生物遗传学研究的效率和范围。
此外，NGS技术还可以识别微生物群落中的代谢和功能，这为微生物的分离和纯化提供了良好的材料基础。
（2）缺点与其他技术相比，NGS技术的成本更高，这也是目前阻碍其广泛应用的一个瓶颈。
微生物全基因组分析及其在微生物资源开发中的应用
微生物全基因组分析及其在微生物资源开发中的应用近年来，随着生物技术的逐渐发展，微生物全基因组分析逐渐成为了研究微生物的重要手段之一。
通过全基因组分析，可以深入理解和研究微生物的基本特性，包括形态、生理、代谢等方面的情况。
同时，微生物全基因组分析在微生物资源开发中也有着广泛的应用，为微生物资源产业的发展提供了强大的支持。
一、微生物全基因组分析的基本概念微生物全基因组分析是指对微生物的基因组进行全面的测序和分析，包括DNA序列的读取、比对、组装和注释等步骤。
全基因组测序技术的出现，使得微生物全基因组分析成为了可能。
通过全基因组分析，可以掌握微生物完整的遗传信息，找出其中重要的基因功能，例如致病、代谢、生长等，对微生物的分类和进化关系进行深入探究。
二、微生物资源开发中的应用基于微生物全基因组分析的研究结果，可以在微生物资源开发中得到广泛的应用。
以下将从微生物药物、生物酶、环境修复以及工业应用四个方面进行阐述。
1. 微生物药物微生物全基因组分析技术可以为微生物药物的研发提供有力的支持。
通常情况下，微生物药物的研发过程需要分离、筛选和鉴定具有生物活性的微生物分离物，耗时耗力。
而通过全基因组分析，可以快速地发现微生物中的潜在代谢途径和重要基因功能，对于开发新型微生物药物来说具有重要意义。
同时，对于已经开发的微生物药物，也可以通过微生物全基因组分析技术进行修饰和改良，使得其药效更加明显，达到最佳的治疗效果。
2. 生物酶微生物全基因组分析技术在生物酶开发中的应用十分广泛。
酶是微生物产生的一种重要催化剂，可以应用在生产、工业、农业等领域。
通过全基因组分析，可以发掘微生物中新的生物酶资源，较为全面地了解微生物的生物酶代谢功能，探究生物酶的合成、降解、转移途径等。
此外，微生物全基因组分析还可以帮助合成新型生物酶，增强酶的特异性和催化效率，提高其在产业领域的应用前景。
3. 环境修复微生物全基因组分析技术在环境修复中的应用十分重要。
基于PCR-DGGE的重金属污染土壤微生物种群指纹分析
Ｐ ＲＤ Ｇ Ｃ ． Ｇ Ｅ指纹图谱分析 ， 来全面综合地反映重金 属 污染对 土壤微 生物结 构多样 性所 产生 的影 响 ，以 明确 受 重金 属 污 染 土 壤 中微 生 物 结 构 的变 化规 律 及 相关性 分析 ，为深 入研究 重金 属对 土壤微 生物毒 害作 用 ，重金属 污染 土壤 的微生 物修 复机理 提供理 论依 据 。 １ 材料 与 方 法
中图 分 类 号 ：Ｘ１２ ７ 文献 标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ： １７ ．９ ６（ ０ ０ ９２ ０ —５ ６４５０ ２ １ ）０ —２ ４０
土壤微 生物 群落结 构是 土壤生 态功能 的基础 ， 传统 方法 只能揭 示部分 土壤微 生物 的特征 ，自然界 中很 多微 生 物 不 能 用 现 有 的培 养 方 法 进 行 分离 和 鉴 定或是 不能 培养 【，且 这种分 离 培养方 法不 能很 ｌ 】
将 细河 流域 自上 而下 ，分 别在 其上 、中 、下游 河段
的富 官（ ，彰 驿（） Ｉ ） Ｉ ，土 台（Ｉ Ｉ Ｉ） Ｉ布设 ３ 横切 细河 的 条 断面上 取样 ，取农 田表层 土壤 （～ ０ｃ ，根据 每个 ０ ２ ｍ） 样 点 的地块 形状 ，采 取 多点取样 ，每 ５个点合 为一 个 土壤 样 品。土样带 回实 验室 ，一部分 土样立 刻放 人 ．０ ℃冰冻箱 中保 存备用 。另 一部 分经 风干 、混 ２ 匀 后 ，用 四分 法 留取 １ｋ ，再 取少 量过 ０１ ９ ｒｍ ｇ ． ｎ ４ 筛 ，供 重金 属分析测 试用 。
基于 Ｐ Ｒ Ｄ Ｃ — ＧＧＥ的重 金 属 污染 土壤 微 生 物种 群 指 纹 分 析
李 晔 ，孙 丽娜 ，杨 继 松 ，杨 晓 波 ２ 曲亚 军 ，
利用DGGE指纹图谱技术考察不同营养条件下土壤微生物群落结构的变化
Ｘ
ｎ ｎ
Ｄｉｃ ｓ ｉ ｎ ｏ ｓ ｕ ｓ ｏ ｎ Ｃｈａ ｇ ｓ ｏ ｏ ｌＭ ｉ ｒ ｂ ａ ｍ ｍ ｕ ｔ ｎ ｅ ｆＳ ｉ ｃ ｏ ｉ ｌＣｏ ｎ ｎｉｙ ｇ
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ｎ
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Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｖ ａ ｉｔｏ ｉ ｅ ｓｔ ｉｒ ｉ ｌｇ ｎ ｓ ｕｎ ｒ ｄ ｆｅ ｅ ｔ ｓ ｉ ａ ｄｉｉ ｅｙｔ ｅ ｔ ｅ ｔ ｅ ｅ ｓ ｕ ｅ ｓｒ ｃ ： ｒａ ｉ ｎｓｏｆｄ ｖ ｒ ｉｙ ｏｆｍ ｃ ｏｂ ａ ｅ ｅ ｄｅ ｉｆ ｒ ｎ ｏ ｌ ｄ ｔｖ ｒ ａ ｍ ｎ ｓ ｗ ｒ ｔ ｄｉｄ
ｂ ｉ ｙ Ｕｓｎｇ ＤＧＧＥ ｎ ｅ ｆ ｅ ｅ ｔ ｉｉ ｎ ｌＣｏ ｄ ｔｏ ｕ ｄ ｒ Ｄｉｆ ｒ ｎｔＮｕ ｒ ｔｏ ａ ｇ ｎ ｉｉ ｎ
Ｕ
Ａ
ＸＩ ＡＮＧ ａ ｇ ｍｉｇ，Ｗ ＡＮＧ ｈ ｎ ｌ Ｉ Ｈｏ ｇ ｔｏ，Ｊ ＡＮＧ ｎ — ｎ Ｇｕ ｎ — ｎ Ｃ ｕ —ｉ Ａ ｎ —ａ ，Ｊ Ｉ Ｕ Ｐｉｇ ａ
ｎ
ｏ
物 群落 的基 因多 样 性 。经 过 直 接从 土壤 中抽 提 总 ＤＮ 并 对 总 ＤＮ 中 １ Ｓｒ Ａ 及 其 中 ｍ ～ Ｖｓ 变 区 序 列 作 Ａ， Ａ ６ ＤＮ Ｖｅ 可
Ｐ Ｒ扩 增 、 性 梯 度 凝 胶 电 泳 （ ＧＧ ） 析 等 ， 现 不 同处 理条 件 下 的 土 壤 微 生 物 的 基 因 多 样 性 变 化 与 土 壤 微 生 Ｃ 变 Ｄ Ｅ分 发 物 量 的波 动 并 不 一 致 ， 明微 生物 群 落 多 样 性 与 微 生 物 量 的关 系并 非 线 形 。 同时 发 现 秸 秆Ｓ 添 加 更 有 利 于 土 壤 微 说 的