畜禽血液样品的采集、制备与保存方法
动物血液样品采集制备与保存的方法
动物血液样品采集制备与保存的方法采集动物血液样品是许多生物学领域研究的一个必要步骤，可在研究动物体内代谢产物、蛋白质和其他生物化学成分等方面提供重要数据。
正确采集、制备和保存动物血液样品对保证实验可重复性和数据可靠性至关重要。
在此，我们将详细介绍动物血液采集、制备和保存的一般步骤和技巧。
一、动物血液采集步骤1.选择采集方法动物血液样品可以通过多种方法采集，例如尾静脉、脚趾或心室，选择采集方法需要考虑动物品种、体重、年龄、健康状态和需要采集的样品量等因素。
尾静脉是大多数小鼠、大鼠和兔子采集血液的首选方法，他们的尾部通常被轻轻加热以促进血流量。
草食性动物的脚趾可以作为血液采集的理想位置，例如绵羊和牛。
对于较大的动物，例如猪和狗，则通常会选择从心室采集血液，这通常是有经验的实验室技术员或兽医完成的。
2.准备采集器具为了在采集血液样本之前确保动物的安全和正确采集血液，需要准备一些必要的器具，例如消毒的手套、注射器、切口刀、愈合事物、血液管、离心螺旋管等。
3.准备动物在采集血液样品之前需要让动物充分的适应工作环境和操作过程。
对于大型动物，需要麻醉或镇定，以确保安全。
对于小型动物，例如小鼠和大鼠，在采集血液之前需要使用一个温和的方法略微加热尾巴以刺激血流。
4.采集血液在采集血液之前，需要消毒所使用的器具并穿戴手套以减少感染风险。
在采集血液时，需要将血液针或血转移管插入血管并抽取所需的血液量。
在采集血液之前，需要确保血液管正确插入血管，这通常会导致血液快速流出采集器。
5.处理采集的血液在采集血液后，需要立即将其转移到适当的容器中，例如离心螺旋管等，并按照相应的实验流程进行处理。
二、动物血液制备和保存的步骤1.离心制备在采集和转移到离心管的过程中，需要立即离心制备样品。
离心的目的是将血细胞和血浆分离，这样可以分离出血浆，以便分离蛋白质和其他分子。
通常离心螺旋管需置于离心机中，并按照相关的实验流程进行离心。
2. 血清制备在离心制备之后，可以将红细胞从上清液中分离出来，以制备血清。
畜禽采血技术基本操作
兽医实用技术 畜禽采血基本操作
兽医实用技术 ——畜禽采血基本操作
• 一、血样采集的意义 • 二、畜禽采样基本操作 • 三、采样信息记录、保存及 运输
一、血样采集的意义
• • • • • 疫病监测 健康证明 监测样品反应用以治疗 疫病诊断 学术/研究
二、畜禽采样基本操作
• • • • • 2.1 采样部位 猪 – 耳静脉、颈静脉、前腔静脉 牛 - 颈静脉、尾静脉 绵羊/山羊 – 颈静脉 鸡 – 翼根静脉
二、畜禽采样基本操作
• 2.2 畜禽采样基本操作
仰卧保定前腔静脉采血
前腔静脉 采血部位
生猪站立保定颈静脉采血
颈静脉采 血部位
站 立 保 定
按压 止血
生猪耳静脉采血
家禽翼根静脉采血
二、畜禽采样基本操作
• 2.3 畜禽采样（观看视频） • 2.4 免疫主的姓名、住址，地理位置，电话号 码。 2、送检人员的姓名，地址，电子邮件，电 话和传真号码。 3、取样动物，品种，性别，年龄和免疫信 息。 4、采样和送样的时间必须完整填写。
三、采样信息记录、保存及运输
• 样品保存及运输：
尽快送抵 – 良好状态 – 冷藏 – 如有 干冰则需增加包装 必须附上采样信息表！
畜禽血液采集、血清分离及保存技术
畜禽血液采集、血清分离及保存技术陈正林【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】2页(P37-37,38)【作者】陈正林【作者单位】安龙县动物疫病预防控制中心，贵州安龙 550024【正文语种】中文随着畜禽养殖业的迅速发展，交通运输便利，畜禽交易半径扩大，畜禽疾病流行机会增加，提高了动物疫病防控难度。
在疫病防控工作中，仅靠流行病学、临床症状、病理剖检等手段已经不能对疫病做出准确的诊断，兽医实验室诊断技术已成为判定动物疫病的重要依据。
各级加强了兽医实验室能力建设，对动物血液样品的采集、制备与保存有较高的要求，所以，畜禽血液的采集、血清的规范分离、保存是获得准确的实验室诊断、监测结果、疾病确诊的基础，对及时做出诊断结论，迅速采取相应防控措施，扑灭疫情和控制疫情至关重要，同时，进行免疫效果监测，评估畜禽群体免疫抗体水平，及时为养殖户提供免疫技术指导，加强畜禽疫病免疫工作，保护养殖安全具有重要意义。
止血钳2把（消毒）、毛剪2把（消毒）、酒精、碘酒、棉球、一次性采血器（10 ml）或真空采血管（含有抗凝剂，使用量根据采血数量准备）、1.5～2 ml弹头离心管、胶布、记号笔1支、口罩、白大褂、瓷盘（消毒）、消毒药等。
采血过程中应严格保持无菌操作。
2.1 牛、羊血液的采集方法2.1.1 牛、羊颈静脉采血将被采血动物保定，稍抬头颈，于经脉沟上1/3与中1/3交界部剪毛消毒，一手拇指按压采血部位下方颈静脉沟血管，使静脉怒张，另一手持针头，与皮肤呈45°，由下向上斜刺入，插入真空采血管，待血量达到要求后，拔下针头，用消毒棉球按压针眼，轻按止血，立即将采血管轻轻倒置使血液与抗凝剂混合，静置15 min，待血液凝固后分离血清。
2.1.2 牛尾静脉采血固定牛，使牛尾往上翘，在尾部约30 cm处用手握住，离尾根10 cm左右中点凹陷处，先用酒精棉球消毒，然后将采血针垂直刺入（约1 cm深），针头触及尾骨后再退出1 mm进行抽血，采血结束，消毒并按压止血。
畜禽血液样品的采集制备及保存方法
畜禽血液样品的采集制备及保存方法随着畜禽养殖业的不断发展，畜禽血液样品的采集制备及保存方法也成为了养殖业者们必须掌握的一项技能。
详细了解畜禽血液样品的采集制备及保存方法，有助于提高样品质量，并为科学研究和诊断提供可靠的样品来源，同时也能够保护养殖动物的健康与安全。
本文将介绍畜禽血液样品的采集、制备和保存方法，以供畜禽养殖业者参考使用。
采集畜禽血液样品一般采用静脉采血法或心前穿刺法。
静脉采血法: 静脉采血法通常使用的是畜禽肘窝静脉，其采血位置比较固定，采血方法也较为简便。
具体操作步骤如下：1.畜禽肘窝部位消毒。
将畜禽肘窝处的毛发剪短，用消毒液对采血部位进行消毒。
2.固定畜禽。
将畜禽固定在操作台上，需保持畜禽的舒适度和安静，以免造成不必要的压力，影响采血结果。
3.采血。
对于鸡类，需要插入采血针到肘窝静脉处，将血样采集到血常规管中；对于猪、牛、羊等家畜，需要将静脉环扣住，采血针从环的上方插入到静脉内，当动脉血液随针头进入时，需放开环的上口，等到血液快流时，将容器连续地放入血流中收集血样。
心前穿刺法: 心前穿刺法是体内采血法的一种，常用于人工饲养的野生动物、家禽等比较特殊的畜禽样品的采集。
操作方法如下：1.消毒。
消毒的效果要严格掌握，可用二色油酸乙酯及碘酒。
2.盘腿或麻醉。
畜禽采集时，可将其置于实验操作盘中并盘腿或使其睡眠状态下进行操作，以降低手术风险。
3.确定穿刺位置。
在胸部左右位置寻找心跳位置，并确定穿刺位置。
4.穿刺采血。
在穿刺位置穿刺采用20ml注射器和针头采血，并将血液转入专用试管中。
制备畜禽血液样品的制备分为离心血和诱导血凝固两种方式。
离心血: 离心血是将采集到的畜禽血液试样离心，分离血浆和红细胞。
一般用于生物学、免疫学等科研工作。
操作步骤如下：1.离心。
接收新鲜采集的血样，放入10ml离心管中，管盖拧紧放入离心机中离心，将血浆分离出来并转入新离心管中。
2.保存。
将离心好的血浆避光下保存，用于后续实验工作。
动物血液样品采集制备与保存的方法
动物血液样品采集制备与保存的方法陈静陈德明徐玉玲/ 四川省兴文县动物疫病预防控制中心随着国际国内动物疫病形式复杂多变，我国养殖业集约化程度不断提升，广大基层畜牧兽医工作者做好辖区内动物疫病监测对保障畜牧业健康发展具有十分重要的意义。
其中最关键的环节是样品采集，样品质量的好坏直接决定监测结果的准确与否，而在基层采集数量最多的则是各种家畜家禽的血液样品。
本文对几种常见畜禽血液样品的采集、制备及保存的方法作了阐述, 供同仁参考。
一、常见畜禽血液样品的采集（一）家禽的采血方法1. 心脏采血。
对于雏鸡，采血者可独立完成，仰卧保定，左手抓鸡，右手持采血针，平行颈椎从胸腔前口插入，回抽见有回血时，即把针芯向外拉使血液流入采血针。
成年禽的心脏采血可采用侧卧法和仰卧法。
侧卧法：助手抓住禽两翅及两腿，右侧卧保定，采血者在触及心搏动明显处，或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1/2 处消毒，垂直进针2 ～ 3 cm，回抽见有回血时，针芯外拉收集血液。
仰卧法：助手仰卧保定禽，采血者用手指压离嗉囊，露出胸前口，用装有长针头的注射器，将针头沿其锁骨俯角（既胸骨前端与两侧锁骨融合形成“V”字的地方）刺入，顺着体中线方向水平穿行，刺入心脏抽取血液。
如刺入心脏，采血者可感到心脏跳动，稍回抽针芯可见回血，否则，应将针头稍拔出调整角度再刺入直至抽出血液。
生产实践中，由于家禽品种和个体大小不同进针位置和深度也会有细微的不同，操作时需作适当调整。
心脏采血可大量采血，但容易造成死亡，不宜连续使用。
特别是对雏禽，常因针头刺破心脏或伤及肺脏导致出血过多而死亡，而且心脏的修复能力特别差，对畜禽后期生长发育影响较大。
为此，采血时，我们要找准采样部位，跟着心脏的跳动频率缓慢抽取血液，切忌抽血过快。
2. 禽翅静脉采血。
翅静脉采血法是家禽采血方法中最常用的一种。
助手侧卧保定禽只，使翅膀展开，露出腋窝部。
拔掉该处羽毛，可见由翼根进入腋窝的翼根静脉，其远心端则是较细的翼下静脉。
畜禽血液样品的采集、保存与运送方法
后再 全群 接 种 。猪 患 体 内外 寄 生 虫 病 时 ， 长 缓 慢 、 生 消瘦 ， 饲
料报 酬 低 ， 据 笔 者 多 年 实 践 ， 用伊 维 菌 素 驱 虫 效 果 较 好 ， 根 应 可同时驱除体 内线虫 及体表疥 螨、 虱等 ， 有高效 、 济 、 猪 具 经 简便 的优 点 。
及采 血 操 作 实 践 ， 合 理 论 知 识 ， 要 介 绍 在 临 床 实 践 中 学 结 简 到 的省 时省 力 的 采 血技 术 。
３ ４０ １ １０）
液 ， 以 小 猪 的采 血 部 位 应 稍 靠 后 。 中大 猪 和 公 母 猪 血 管 比 所 较 大 ， 后 太 深 ， 头 够 不 到 血 管 ， 以应 略 靠 前 。根 据 经 往 针 所 验 ，０ 以 下 的 小 猪 应 采 两 前 肢 与 气 管 交 汇 处 ， 母 猪 和 ３ 公 ３ 以上 中 大 猪 可 选 颈 部 最 低 凹 处采 血 。 ０
头 的 注射 器 ， 由翼 根 向翅 方 向 平 行 刺 人 静 脉 ， 松 近 心 端 的 放 按 压 ， 慢 抽 取 血液 ， 血 完 毕后 及 时 压 迫 采 血 处 止 血 。 缓 采
当 针 刺 人 不 见 血 液 时 ， 以将 针 头 左 右或 来 回 动 一 下 针 可 头， 当看 到 针 管 内 有 血 液 时 ， 明 已刺 入 血 管 ， 即 采 血 ， 说 立 采
完 善 ， 入 旺 盛 的生 长 期 ， 由 于 断 奶 应 激影 响 ， 育 工 作 不 进 但 保
可大意。
持 空 气 清 新 ， 猪 休 息 的 温 度 不 得 低 于 ２ ℃ ， 条 件 的 猪 场 仔 ０ 有 此 阶段 仔 猪 应 实 行 网 床 培 育 ， 育 栏 可 设 自动 投 料 机 ， 仔 保 让 猪 自由 采 食 ， 提 高 饲 料 利 用 率 ， 既 日增 重 加 快 ， 时 仔 猪 与 粪 同 便接触少了 ， 病发生率便降低 了。 疾
简述畜禽常规采集血样及其注意事项
简述畜禽常规采集血样及其注意事项刘建华辽宁省本溪满族自治县农业综合发展服务中心，辽宁本溪 117000在畜禽疫病防控中，疫病的监测、检测是不可缺少的，采集血样质量对监测、检测的结果产生直接的影响。
笔者通过多年来的工作实践，结合实际工作情况，在这里简述畜禽常规采集血样及其注意事项如下。
1 畜禽采集血样前准备1.1 常规采集血样地点的确定：养殖数量多的地区、养殖场户密集的地区、老旧疫情的地区、与外市县相邻的地区等可优先考虑确定。
发生疫情时，如布病疫病，根据实际地理位置情况采集一个村小组或全村羊进行普检。
高致病性禽流感、非洲猪瘟等重大动物疫病按上级规定进行采集血样。
1.2 采集血样所需的器械、用品：合理的实用的采样单、中性记录笔、油性记号笔、耳标笔、一次性连体防护服、一次性塑料鞋套、一次性N95口罩、一次性医用乳胶手套、保定器械（猪的猪嘴套、牛的牛鼻钳、马属动物的耳夹子）、采集禽类血、猪耳静脉血、牛羊颈静脉血、马属动物颈静脉血用：一次性使用静脉采血针（蝶翼型、规格最好是黑色0.7(22G)）、一次性使用人体静脉血样采集容器（也称真空管）（5 mL普通针管或全血2 mL EDTA 抗凝血管）、牛尾根静脉血用5 mL/10 mL/20 mL无菌注射器换配9mm×15mm的针头采血、禽类全血用5 mL/10 mL 0.5 mm×20 mm针头的无菌注射器、成猪前腔静脉用10 mL粉色1.2 mm×37 mm针头的无菌注射器，采样箱、医疗废物包装袋、带消毒药液的喷壶。
1.3 采集血样人员：最少2名以上有一定兽医专业技术人员。
2 畜禽采集血样时的注意事项2.1 做好采集血样前的调查：如采前察看个体状况是否正常，出现不明死亡怀疑炭疽疫病的不得采集样品；详细了解免疫情况；刚配种或将要产仔的种畜不要采样。
2.2 做好个人防护：到达采集样品场户后在现场穿戴个人防护用品，采样结束后，将个人防护用品统一装入医疗废物包装袋内带回无害化处理。
畜禽血样采集与血清分离保存
２１ ． 耳 静脉 采 血 ．． １ ２
猪 保 定好 后 ，将 猪 耳 根 捏 紧 ．
举 ，采 血者 用 针 头在 第 ２ ３尾椎 间垂 直 刺 入 后 抽 取 、
血样。 ２３ 家禽血 样 采 集 助 手 将 家 禽 的胸 腹 部 面 向采 血 －
显 露 静 脉 。局部 常 规 消毒 采 血 部位 后 ． 较 细 的 针 头 用
应 防止 静脉 塌 陷和 出现气 泡 。 家 禽 或小 动 物 需要 采 集 多量 血液 时 ， 可行 心 脏 穿
２１ ． 前 腔 静脉 采血 ．． ２ ２
定 ，将 两前 肢 向后 拉 直 或使 两前 肢 与体 中线 垂 直 ， 将 猪 头 部拉直 ， 前腔 静脉 紧张 ． 前窝 充分 露 。肥 猪 使 胸 站立保定， 在左 侧 （ 右侧 ） 或 胸前 窝 （ 由胸 骨 柄 、 头 即 胸 肌 和胸骨 骨肌 的起 始部 构成 的 陷窝 ）用套针 管 的注射
形 管 架 、 次性 注 射 器 （ 血 针 ） 记号 笔 、 精 棉 球 、 一 采 、 酒
干棉 球 、 相关 表格 等 。
２ 血 样 采 集
部 保 定 ； 可 抓 住 羊 角 ， 在 羊 背 ， 行 注 射 、 血 等 也 骑 进 采
操 作 ； 可 面 向尾 侧 ， 在羊 身 上 ， 紧两 侧后 肢 将 羊 还 骑 抓 倒 提后 ， 移至 跗前 部保 定 。 手 体 格较 大 的 羊 ， 手 提 起 羊 的右 后 肢 ． 手 抓 在 右 左 羊 的右 侧 膝皱 襞处 ， 定 者 用 膝 抵 在 羊 的 臀 部 ， 手 保 左 用 力提 拉 羊 的膝 褶 ．在 右 手 的配 合 下将 羊放 倒 后 ， 捆
也 可将 血 液立 即 注入 Ｖ形 管 中 ． 常温 下 １ ２ ． 样 即 ～ ｄ血
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畜禽血液样品的采集、制备与保存方法血液不断地在全身流动，参与机体的各种功能活动，对动物的新陈代谢以及维持内环境和保持与外界环境间的平衡起着重要的作用。
当血液发生病理变化时，常常会影响全身的组织和器官，而组织和器官的病变又可以引起血液成分的变化，因此，血液的检验在疾病的诊断中起到十分重要的作用；临床检验采用的血液样品分为全血、血清和血浆。
全血主要用于血细胞成分的检验，血清和血浆主要用于大部分临床化学检查和免疫学检验。
血液样品的采集、制备与保存是重要的前期工作，是保证正确诊断的基本条件。
1.采集部位与方法畜禽血液样品的采集部位和方法，与种类、检测项目、试验方法及用血量有关，视实际情况而定。
1.1 鸡的采血技术
1.1.1翅静脉采血：是常用的采血部位，翅静脉在肘关节腹侧的表面，清晰地暴露于皮肤之下，肉眼可见。
采血时先拔去该部位的羽毛，抽血时，动作轻柔缓慢，防止血管塌陷不回流，采血后略移动皮肤轻压即可止血；由于鸡的皮肤游离性大，采血后容易形成血肿。
1.1.2心脏采血：此方法多用于进行尸体剖检前的血液采集检验。
将鸡仰卧保定，针头从V 型锁骨前端刺入，或者在靠近心脏的胸侧壁刺入；心脏采血过程中，如果操作不慎，易损伤肺脏，更有慎者，引起大出血死亡。
1.1.3颈静脉采血：鸡的左侧颈静脉很细，通常右侧颈静脉采血。
在皮肤上的一个无毛的沟正好是右侧颈静脉所处的位置。
颈静脉游离性大，皮肤松弛，采血后易于形成血肿。
1.2 猪采血技术
1.2.1前腔静脉采血：猪前腔静脉是由左右两侧的颈静脉与腋静脉至第一对肋骨间的胸骨柄汇合形成。
采血时，针头刺入部位在与耳根和对侧肩胛骨上缘连线垂直线的胸骨端处，大猪采用站立保定，小猪可以采用仰卧保定法。
左侧靠近膈神经，故以右侧采血为宜。
1.2.2耳静脉采血：一般用于体格较大的猪。
保定后，耳部消毒灭菌，以手指压迫近心端耳部静脉，使血管努张，针头刺入血管后，动作要轻柔，采血要缓慢，否则血液不回流使静脉瘪陷。
1.3 牛的采血技术
1.3.1 颈静脉采血：将头向一侧保定，用手指压迫颈静脉沟处，待血管怒张后，于采血部位消毒进针采血。
1.3.2尾静脉采血：采血人员站立牛正后方，将牛尾向上抬起180 度，在第一尾锥与第二尾锥之间的尾中线上进针采血。
此方法需要人员少，采血速度快，可以
**** 操作。
1.4 马、羊的采血技术马、羊均采用颈静脉采血。
方法同牛的颈静脉采血。
1.5 犬、猫的采血技术一般在后肢外侧小隐静脉或前肢内侧皮下静脉采血，采血前由助手保定，在采血部位的近心端扎止血带，待血管怒张后，迅速刺入采血器，松开止血带左手固定针头，采血力度要适当。
2.血液样品的处理
2.1 血浆的制备：在采血器内加入适量的抗凝剂，采血后，反复颠倒采血器，使
抗凝剂与血液充分混匀，静置或经过离心使血细胞下沉后，上清液即为血浆。
2.2血清的制备：首先将采集的血液样品置室温半小时，待血液凝固后2000-3000 转/分离心5-10分钟，上清夜即为血清；如离心后有轻微的溶血，用牙签将血凝块挑出，将混有红细胞碎片的血清再次离心，用干净吸管收集血清于干燥的指型管中，贴上标签备用。
如血清溶血严重，应剔出样品。
2.3全血的制备：全血制备与血浆制备基本相同。
供全血分析时，抗凝剂选用会直接影响化验结果，选用抗凝剂的原则：主要用于血液PH值和血液电解质测定
的应选用肝素；柠主要用于血液促凝时间的测定应选用柠檬酸钠；主要用于血液
有形成分检查的全血应选用EDT A草酸盐不能用作血小板计数和尿素、血氨、非蛋白氮等含氮物质的检测；
3.血液样品的保存与运送
采集的血液样品如不能及时进行检验，必须做适当的处理，防止其成分发生大的变化。
通常分离到的血清与血浆样品保存于密闭试管中，存放于4 °C冰箱内或冷冻。
全血样品应保存于4C冰箱内，检验时，样品必须达到室温，达到室温之后颠倒数次，使血液充分混匀后，方可检验。
如果样品能在24小时内送往实验室，可保存于4 C环境的保温箱内，如果24小时内不能抵达或有些样品送往外地实验室时，样品必须冷冻处理后，并在低温下运送。
运送途中防止样品泄漏，密闭封装并加冰袋运送。
同时要填写详细的样品记录。
4.分析：血液样品变异因素的控制
严格控制血液样品的变异因素，是使检测结果尽可能符合客观情况的重要环节。
因此，在采血过程中应注意下列问题：
4.1.规定动物的采血时间：有些血液化学成分有明显的昼夜波动，对采血动物，应在禁食12小时后采血，这样可以将食物对血液各种成分的浓度的影响减少到最低程度。
在刚进完食动物身上采取的血液样品，往往出现血糖、甘油三酯增高，无机磷降低，麝香草酚浊度增加。
进食富含脂肪的饲料，常导致血清混浊而干扰很多项目的生化检测。
4.2.血液样品来源一致：动脉血和经脉学的化学成分略有差异，整个试验期间，采取的血液样品必须一致。
4.3.防止分解：血液内某些化学成分，离体后由于氧化酶或细菌的作用，容易分解，致其含量有所改变。
所以，为了防止血液内某些化学成分的分解，血液样品被采集后应立即按规定处理，及时检测或加入适当的保存剂按规定保存。
4.4.防止气体逸散：血液暴露于空气中后，二氧化碳迅速逸出，并吸收氧气提高血氧饱和度，进而引起血浆成分的改变，因此，在采血过程中要根据检测项目的需要来采取适当的采血方式。
4.5.防止污染：采血器及样品容器都必须用化学处理并用重蒸馏水冲洗，防止铜、
铁等金属离子和污染物对影响检测结果。
并且在做作蛋白结合碘测定时，禁用碘酊消毒采血部。
4.6.防止溶血：溶血可以影响许多生化检测项目的结果。
红细胞破裂后释放出的物质与血浆中许多成分的浓度不一样，如钠、氯化物、钙等在血浆中的浓度要高于红细胞内的浓度，应予以防止。
4.7引起溶血原因是强力震荡、离心速度过快、温度过低或者过高、加入与血液
环境不等渗液体、放置时间过长等等引起红细胞破裂的因素。
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