乳腺癌基因治疗的研究进展
乳腺癌的诊治新进展
乳腺癌的诊治新进展乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年上升，但随着医学技术的不断进步，乳腺癌的诊断和治疗也取得了许多新的进展。
一、诊断技术的进步1、影像学检查：随着乳腺成像技术的不断发展，如乳腺X线摄影、超声、MRI等，乳腺癌的检出率得到了显著提高。
其中，MRI能够提供乳腺组织的冠状面和矢状面图像，有助于发现多灶性乳腺癌，对于常规影像学检查难以发现的乳腺癌具有很好的补充作用。
2、病理学检查：免疫组织化学方法、原位杂交技术、基因测序等新技术的应用，使得病理诊断更加准确和精细。
例如，通过检测ER、PR、HER2等基因的表达水平，可以指导医生选择更为有效的治疗药物。
3、液体活检：这是一种新型的检测方法，通过检测血液中的肿瘤标志物或循环肿瘤细胞等，可以实现对乳腺癌的早期诊断和病情监测。
二、治疗方法的进步1、个体化治疗：随着基因测序技术的不断发展，针对不同患者的基因突变，制定个体化的治疗方案已成为可能。
例如，针对HER2阳性患者，可以选择针对HER2的靶向药物；针对BRCA1/2基因突变的患者，可以选择PARP抑制剂等。
2、免疫治疗：免疫治疗是近年来肿瘤治疗的重要进展之一。
在乳腺癌治疗中，免疫治疗药物如PD-1/PD-L1抑制剂等的应用，能够激活患者自身的免疫系统来攻击肿瘤，提高治疗效果并改善患者的生活质量。
3、精准手术：随着手术技术的不断进步，如乳房保留手术（保乳手术）和乳房重建手术等的应用，使得乳腺癌手术更加精准和微创。
同时，通过术前新辅助化疗等方法，可以缩小肿瘤体积，提高手术切除的成功率和患者的生存率。
4、综合治疗：乳腺癌的治疗已经从单一的手术切除发展到了综合治疗。
在综合治疗中，医生会根据患者的病情、身体状况、分子分型等因素，制定包括手术、放疗、化疗、内分泌治疗和靶向治疗在内的综合治疗方案。
这种综合治疗方案的应用，使得乳腺癌的治疗效果得到了显著提高。
三、预防和筛查1、健康生活方式：保持健康的生活方式，如均衡饮食、适量运动、避免肥胖等，可以降低乳腺癌的发病率。
乳腺癌的基因治疗新进展
乳腺癌的基因治疗新进展乳腺癌作为女性中常见的一种恶性肿瘤，一直是全球关注的焦点。
虽然传统的治疗方法，如手术、放疗和化疗等在一定程度上提高了乳腺癌患者的生存率，但仍然存在一些患者会出现复发或转移的情况。
因此，人们开始探索基因治疗作为一种新的乳腺癌治疗选择。
本文将介绍乳腺癌的基因治疗新进展。
一、乳腺癌的基因治疗原理基因治疗是利用基因工程技术将修复、替换或调控异常基因的治疗策略。
而乳腺癌的基因治疗主要是通过诱导体内或体外的基因表达，以抑制癌细胞的增殖和促进肿瘤的凋亡。
1. 基于肿瘤抑制基因的治疗肿瘤抑制基因（TSGs）的异常表达在乳腺癌中相当常见。
通过导入正常的肿瘤抑制基因，可以恢复其正常功能，从而抑制癌细胞的生长和扩散。
例如，基因治疗可以通过转导p53基因来恢复患者体内缺失或突变的p53基因，从而使乳腺癌细胞受到更多的自身调控。
2. 基于免疫疗法的治疗免疫疗法是一种通过增强机体免疫系统来对抗癌细胞的治疗方法。
近年来，免疫疗法在乳腺癌治疗中取得了显著的成果。
基因治疗可以通过改造免疫细胞，使其具备更好的抗肿瘤能力。
例如，利用基因编辑技术CRISPR-Cas9，可以修饰免疫细胞表面的抗原识别受体（CAR），从而提高免疫细胞对乳腺癌细胞的识别和攻击能力。
二、乳腺癌的基因治疗应用案例基因治疗作为一种新颖的乳腺癌治疗方法，已经在实际临床中得到一定的应用。
下面将介绍几个乳腺癌基因治疗的成功案例。
1. 细胞因子基因治疗细胞因子基因治疗是通过引入编码特定细胞因子的基因来促进机体免疫功能的恢复。
例如，在乳腺癌患者中，IL-2（白细胞介素-2）的基因治疗可以激活T细胞和NK细胞，增强机体对肿瘤的免疫杀伤作用。
2. 基于RNA干扰技术的治疗RNA干扰技术是通过介导小干扰RNA（siRNA）或shRNA干扰靶基因的转录和翻译过程，从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖。
在乳腺癌治疗中，RNA干扰技术可以针对乳腺癌相关基因，如HER2和BRCA1等，从而抑制肿瘤生长和转移。
乳腺癌的基因治疗前景
乳腺癌的基因治疗前景乳腺癌，作为女性最常见的恶性肿瘤之一，已成为全球范围内严重威胁女性健康的疾病。
尽管已有多种传统治疗方法，如手术、化疗和放疗，取得了不俗的效果，但由于乳腺癌的异质性和遗传多样性，传统治疗仍存在一定的局限性。
然而，随着基因治疗技术的不断发展，乳腺癌的基因治疗前景正变得越来越可观。
基因治疗是一种利用基因工程技术向患者体内导入载有特定基因的载体，从而实现对癌症相关基因的调控和修复的方法。
对于乳腺癌患者而言，基因治疗具有巨大的潜力，不仅可以有效抑制肿瘤的生长和扩散，还可以增加化疗和放疗的敏感性，提高疗效和生存率。
乳腺癌的基因治疗主要包括三个方面：基因靶点的发现、基因载体的选择和基因递送系统的建立。
首先，通过对乳腺癌基因组学的研究，科学家们已经发现了大量的与乳腺癌发生发展密切相关的基因靶点。
这些基因靶点包括激素受体、HER2和细胞凋亡相关基因等。
其次，针对这些基因靶点，科研人员选择了不同的基因载体来进行治疗。
常见的基因载体包括质粒、病毒和纳米颗粒等。
最后，为了保证基因的有效递送到肿瘤细胞内，在基因治疗过程中建立了多种基因递送系统，如基因转染和基因克隆等。
基因治疗的一个突破性进展是针对乳腺癌的基因编辑技术。
基因编辑技术，如CRISPR-Cas9系统，可以精确地选择和编辑患者体内的基因序列，从而改变细胞的功能和行为。
这为乳腺癌的个体化治疗提供了新的可能性。
患者的个体化基因编辑可以根据乳腺癌的突变特点进行精确靶向，进而提高治疗效果和降低副作用。
然而，乳腺癌的基因治疗仍然面临一些挑战和问题。
首先，基因治疗的安全性和有效性仍需进一步验证。
尽管基因治疗已在临床试验中取得了一些成功，但仍有一些患者对基因治疗不敏感或存在严重的副作用。
另外，基因治疗的高昂费用也限制了其广泛应用。
目前，科学家们正在努力寻找更安全、有效且经济的基因治疗方法，以提高乳腺癌患者的生存率和生活质量。
综上所述，乳腺癌的基因治疗前景广阔且充满希望。
乳腺癌的基因治疗研究
Ｋｅ ｙ ｗｏｒ ｄｓ： ｅ ｓ ａ ｃ ｒ； ｎ ｈ ｒ ｐ Ｂｒ ａ ｔｃ ｎ ｅ Ｇｅ ｅ ｔ ｅ ａ ｙ
摘要： 乳腺癌 的发生 、 发展是一个复杂 的过程 ， 涉及多种基 因的改 变。随着越来 越多的乳腺癌相关基 因被确 认 ， 因治疗 基 成为乳腺癌治疗 的一个新途径 和研究 热点。乳腺癌基因治疗 的方 法主要有 癌基 因治疗 、 抑癌基 因治疗 、 免疫 基因治疗 、
乳腺癌的研究历史和进展
乳腺癌的研究历史和进展乳腺癌是一种对女性健康产生严重影响的疾病，在过去的几十年里，对乳腺癌的研究历史和进展取得了重要的突破。
本文将从乳腺癌的起源、诊断和治疗方法等方面，介绍乳腺癌研究的历史以及近年来的进展。
乳腺癌的研究可以追溯到几个世纪以前。
在古代，乳腺癌并没有得到足够的重视，很多人认为它只是一种血液淤积造成的肿块，因此对乳腺癌的认识相当有限。
直到19世纪末，人们才开始对乳腺癌进行了深入研究。
在乳腺癌的早期研究中，对于肿瘤的良恶性判断成为了关键。
在这个时期，医生们主要通过手工检查来判断肿瘤的性质，并通过剖检来进一步确认。
然而，这种方法在早期诊断中存在一定的局限性。
直到20世纪初，随着医学技术的发展和影像学的应用，研究者们开始使用X射线来进行乳腺癌的诊断。
这项技术为乳腺癌的早期发现提供了极大的便利。
随着时间推移，乳腺癌的研究逐渐深入，人们对乳腺癌的发病机制有了更清晰的认识。
研究发现，乳腺癌的发生与女性体内的激素水平密切相关。
雌激素是一种能够促进乳腺组织生长的激素，过多的雌激素会导致乳腺细胞的异常增生，最终可能发展成乳腺癌。
这一发现为乳腺癌的预防和治疗提供了新的思路。
在乳腺癌的治疗方法方面，近年来取得了令人瞩目的进展。
传统的治疗方法主要包括手术切除、放疗和化疗等。
然而，这些方法对于一些晚期患者来说效果往往有限。
因此，研究者们开始探索新的治疗方法。
基因治疗是其中的一种新兴治疗方法。
基因治疗通过改变个体的基因表达，以达到治疗的目的。
研究发现，乳腺癌是一种基因性疾病，个体的基因变异会导致肿瘤的形成和发展。
因此，通过干预个体的基因表达，可以阻断乳腺癌的发展。
近年来，基因治疗在乳腺癌的治疗中取得了初步的成功，给患者带来了新的希望。
此外，免疫治疗也是乳腺癌研究的热门领域之一。
免疫治疗通过增强机体的免疫反应，使机体自身攻击癌细胞。
近年来，免疫检查点抑制剂的研究成果令人鼓舞。
这类药物能够阻断肿瘤对免疫系统的“伪装”，激活机体的免疫系统，使其能够自行攻击癌细胞。
乳腺癌基因治疗的研究进展
乳腺癌基因治疗的研究进展杜力成;王栋【摘要】我国乳腺癌发病率呈逐年上升趋势,已居女性恶性肿瘤的首位.尽管以手术治疗为主,多种治疗为辅的临床综合治疗模式明显提高了乳腺癌患者的生存率,但晚期和复发性乳腺癌的治疗仍是困扰临床医师的难题.随着乳腺癌相关基因研究的进展及靶向药物的临床应用,乳腺癌的基因治疗显示出了良好的应用前景,基因靶向治疗有望成为治疗晚期及复发性乳腺癌的有效手段.%Breast cancer incidence is increasing year by year in China, which has become the leading cause of death among female malignant tumors. The survival rate has improved with the progress of comprehensive clinical treatments of operation therapy supplemented by a variety of other treatments. However, the advanced-stage and recurrence are still hard problems for clinicians. With the rapid progress of research in cancer related genes and the application of targeted medicine, gene therapy shows promise, especially in advanced and recurrent cases.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2012(018)020【总页数】4页(P3400-3403)【关键词】乳腺癌;基因治疗;进展【作者】杜力成;王栋【作者单位】山东大学附属省立医院乳腺甲状腺外科,济南,250021;山东大学附属省立医院胸外科,济南,250021【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。
三阴型乳腺癌的治疗进展
三阴型乳腺癌的治疗进展三阴型乳腺癌是一种特殊类型的乳腺癌，其雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体-2（HER-2）均表达阴性，具有较高的侵袭性和恶性程度。
过去的治疗方法主要以手术和化疗为主，但随着科学技术的不断进步，针对三阴型乳腺癌的治疗方法也得到了不断的探索和改进。
手术治疗：传统上，三阴型乳腺癌的手术治疗以根治性手术为主。
然而，随着医学技术的进步，手术方式也在不断改进。
例如，保乳手术和乳房重建手术的应用，可以在保证治疗效果的同时，提高患者的生活质量。
化疗：化疗是三阴型乳腺癌的主要治疗方式之一。
近年来，新药研发和化疗方案的优化使得化疗效果得到了显著提升。
例如，添加新型靶向药物和免疫药物，以及根据个体差异制定个性化化疗方案等。
靶向治疗：针对三阴型乳腺癌的特定基因突变和分子靶点，开发出了一系列靶向药物，如抗HER-2药物、EGFR抑制剂、BRCA1/2抑制剂等。
这些药物可以通过抑制肿瘤细胞的增殖和转移，提高患者的生存率。
免疫治疗：免疫治疗是近年来肿瘤治疗的重要突破之一。
通过激活患者自身的免疫系统来攻击肿瘤细胞，可以达到长期控制肿瘤的目的。
在三阴型乳腺癌中，免疫治疗也取得了一定的进展，如免疫检查点抑制剂、CAR-T细胞疗法等。
联合治疗：随着多种治疗方法的不断发展，联合治疗成为了三阴型乳腺癌治疗的新趋势。
例如，手术联合化疗、放疗联合靶向治疗、免疫治疗联合靶向治疗等，可以综合发挥各种治疗手段的优势，提高治疗效果。
由于三阴型乳腺癌具有较高的异质性和个体差异，因此制定个体化的治疗策略至关重要。
通过基因检测、分子分型等手段，可以更准确地了解患者的病情和预测治疗效果，从而制定出最合适的治疗方案。
针对患者的具体情况，还可以开展临床试验和其他研究项目，探索新的治疗方法。
三阴型乳腺癌的治疗方法在不断发展和改进中。
传统治疗方法的改进和新治疗方法的探索为患者提供了更多的选择和希望。
通过个体化治疗策略的制定和综合运用各种治疗手段，可以进一步提高患者的生存率和改善生活质量。
乳腺癌治疗研究进展教学课件ppt
采取相应的处理方法进行缓解。
免疫疗法与靶向治疗
免疫疗法
01
通过激活患者自身的免疫系统来攻击肿瘤细胞，提高患者的免
疫能力，从而达到治疗肿瘤的目的。
靶向治疗
02
通过针对特定的肿瘤细胞分子靶点，使用药物进行精准治疗，
提高治疗效果和减少副作用。
免疫疗法与靶向治疗的最新研究进展
03
包括新型药物研发、联合治疗方案等，为乳腺癌治疗提供了新
乳腺癌的病因包括遗传、内分泌、环境等多种因素，但仍有 许多未知因素需要进一步研究。
乳腺癌的危害
1 2
影响患者身体健康
乳腺癌患者可能会出现乳房疼痛、溢液、皮肤 改变等症状，严重时可能导致病理性骨折、肺 栓塞等，影响患者的身体健康。
对心理健康的影响
乳腺癌可能导致患者情绪低落、焦虑、抑郁等 心理问题，对患者的心理健康造成负面影响。
包括微创手术、机器人辅助手术等，提高了手术 精度和效率。
放疗与化疗
01
放疗
放疗是利用放射线杀死癌细胞的一种方法，通常用于辅助手术治疗，
降低复发率。
02
化疗
化疗是使用化学药物杀死癌细胞，通常用于治疗转移性乳腺癌，延长
生存期。
03
放疗与化疗的副作用及处理方法
放疗和化疗都会引起一些副作用，如恶心、呕吐、骨髓抑制等，需要
个性化治疗
随着精准医学的发展，个性化治疗逐渐成为乳腺癌治疗的重要方向，但仍需要进一步的研 究和探索。
02
乳腺癌治疗研究进展
手术治疗
手术类型
包括肿块切除术、乳腺切除术、腋窝淋巴结清扫 术等，根据病情选择合适的手术方式。
手术效果
手术治疗的目的是尽可能地切除肿瘤，降低复发 率，提高生存率。
RNAi技术在乳腺癌基因治疗中的研究进展
的 研 究 提供 了强 大 的 武 器 ，也 为 乳 腺 癌 基 因 治 疗 增 添 了 新 的 活 力 。 现对 Ｒ ｉ 乳 腺 癌 基 因治 疗 中 的 研 究 现 状 与 进 展 方 ＮＡ 在
面 作一 综述 。
１ ＲＮＡｊ 述 概
１１ ａ ｉ 机 制 ． ＮＡ 的 ｌ 目前 对 于 Ｒ ｑ ｉ 生 的 可 能 机 制 初步 达 成 共识 ，认 为病 ＺＡ 发 毒 基 因 、 工转 入 基 因 、 座子 等 外 源 性 基 因随 机 整 合 到 宿主 人 转
细胞 基 因 组 内 并 利 用 宿 主 细 胞进 行 转 录 时 ， 产 生 双 链 ＲＮＡ 常 （ｓ ＮＡ） ｄＲ 。宿 主 细 胞 对 这 些 ｄＲＮＡ会 产生 反 应 ，即 ｄＲ ｓ ｓ ＮＡ
乳 腺 癌 是 当前 发 病 率 较 高 的女 性 恶性 肿瘤 ，严 重 威 胁女 性 的身 体 健 康 。 传统 治 疗 以手 术 治 疗为 主 ， 以化 疗 、 疗 。 辅 放 而 化 疗 和 放 疗 对 肿 瘤 非特 异 性 、 感性 差 ， 作 用 大 。 因 此乳 腺 敏 副
癌 的 基 因 治 疗 受 到 充分 重 视 。 １９ ９ ８年 ＫＮＡ 干 扰 （ ＲＮＡｎｅ— ｉｔｒ ｆ ｅｃ ， ｅ ｎｅＲＮＡ ） 发 现 Ｉ， 别 是 在 哺 乳 动 物 细 胞 应 用 小 干 扰 ｒ ｉ的 ”特
２１ ． ＲＮＡ 在 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 端 粒 酶 活 性 研 究 中 的 应用 ｉ
端 粒酶 的活 化 使 细 胞 具 有 无 限 增 生 的能 力 是 恶 性 肿 瘤 的 普 遍 现 象 。端 粒 酶 的 异 常 表达 与 恶性 肿瘤 的 发 生 、 展 、 后 发 预 密 切相 关 ，其催 化亚 基 ｈ Ｅ Ｔ ＲＴ 基 因是 合成 端 粒 酶 全 酶 的 限 速 因素 。Ｈｏｉ ｗ 等 建 了端 粒酶 逆转 录酶 （Ｔ ＲＴ） 端 ｒａ ａ ｋ 构 ｈＥ 和
抗肿瘤基因治疗药物的研发现状与未来趋势分析
抗肿瘤基因治疗药物的研发现状与未来趋势分析一、引言癌症，作为全球范围内严重威胁人类健康和生命的疾病，一直是医学研究的重点。
随着科技的进步，基因治疗作为一种新兴的治疗手段，为癌症治疗带来了新的希望。
本文将从理论研究的角度，对抗肿瘤基因治疗药物的研发现状与未来趋势进行深入分析。
一、抗肿瘤基因治疗药物的研发现状1.1 基因治疗的基本原理基因治疗是通过将外源基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷或异常导致的疾病的治疗方法。
在抗肿瘤基因治疗中，主要通过以下几种机制发挥作用：一是直接杀伤肿瘤细胞；二是增强机体对肿瘤的免疫应答；三是逆转肿瘤细胞的耐药性。
1.2 现有抗肿瘤基因治疗药物的分类及作用机制目前，抗肿瘤基因治疗药物主要分为以下几类：1. 自杀基因疗法：通过向肿瘤细胞内导入特定的酶基因，使原本对细胞无毒或低毒的药物前体在肿瘤细胞内转化为具有细胞毒性的药物，从而杀死肿瘤细胞。
例如，单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSVtk）基因联合更昔洛韦（GCV）的疗法。
2. 免疫基因疗法：通过增强机体对肿瘤的免疫应答来抑制或消灭肿瘤。
这包括引入细胞因子基因（如IL2、IFN等）以增强免疫细胞活性，或引入肿瘤抗原基因以激活特异性免疫反应。
3. 抗血管生成基因疗法：针对肿瘤血管生成的关键因子或受体进行基因干预，抑制肿瘤血管生成，从而“饿死”肿瘤细胞。
例如，针对VEGF或其受体的基因沉默技术。
4. 多药耐药基因逆转疗法：针对肿瘤细胞的多药耐药性，通过导入耐药逆转基因来恢复肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
5. 抑癌基因疗法：通过替换或修复突变的抑癌基因，恢复其正常功能，从而抑制肿瘤的生长和转移。
例如，p53基因的替换疗法。
1.3 研发现状分析近年来，抗肿瘤基因治疗领域取得了显著进展。
一方面，多种基因治疗药物已进入临床试验阶段，部分药物甚至获得了批准上市。
另一方面，随着基因编辑技术（如CRISPR/Cas9）的发展，基因治疗的精准性和效率得到了大幅提升。
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抗血管生成基因治疗
抗血管生成基因的因子包括内皮抑素、血管抑素 和干扰素-α。基于肿瘤和正常内皮细胞之间基因 表达的差异，选择性抑制肿瘤内皮细胞中异常基 因的表达，抑制肿瘤血管生成，从而达到治疗肿 瘤的目的。 最强的血管生成细胞因子是VEGF。反义核酸， 可溶性VEGFR、核糖酶、抗VECF单克隆抗体和 受体酪氨酸激酶（RTK）抑制剂已被用于抗肿瘤 血管生成的基因治疗。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
19
存在的问题 ？
目的基因的表达不受控制，存在过度 表达或不适当表达，特别是当插入基 因是一些毒性的基因或对机体有影响 时，不仅对疾病的治疗不利，甚至会 导致致命的副作用。
20
第三节 乳腺癌自杀基因调控治疗
特异性的转录调控元件使治疗基因准 确、有效地表达于肿瘤细胞，使治疗 基因的表达受体外因素的调控，提高 基因治疗的有效性和可控性，是基因 治疗领域的一个重要问题。
MCF/TRE/tk/Tet-On
27
Tet-On 基因调控系统中，其发挥作用所需 的两个组成元件：TRE 元件和rtTA 元件， 分别克隆于两个载体系统中。使用时先将 含有TRE元件和目的基因转染入宿主细胞， 然后再以含有 rtTA 的质粒转染该细胞， 经过两次转染而构建出细胞株。
28
MCF/TRE/tk/Tet-On 细胞 HSVtk 基因的表达
重组逆转录病毒载体 pRevTRE/tk的鉴定
M 1 2
图 1 重组质粒 pRevTRE/tk的 酶切鉴定结果
M: λDNA/ Hind Ⅲ DNA Marker lane 1: pRevTRE/HSVtk / Bam HI + Hind Ⅲ; lane 2: pRevTRE/HSVtk plasmid DNA
乳腺癌基因治疗研究进展
The research progress of human breast cancer gene therapy
曾
赵
军
中南大学生物科学与技术学院 分子生物学系
第一节 乳腺癌基因治疗研究背景
乳腺癌是严重危害妇女健康的恶性 肿瘤。据国际抗癌协会（ IARC ） 公布的统计资料表明，乳腺癌在全
图 2 重组质粒pRevTRE/tk 的PCR鉴定结果
M: 100bp DNA ladder Marker; lane 1: PCR product with primer TK1 and TK2; lane 2: PCR product with primer TK3 and TK4
26
MCF-7细胞转染实验
30
Dox 浓度对 MCF/TRE/tk/Tet-On 细胞生长的影响
9
Cell number (1x10 4 cells/ml)
8 7 6 5 4 3 2 1 0
0 200 400 600 800 1000 1200 1500
Doxcycline concentration (ng/ml)
图 5 GCV 浓度为 1 μg/ml 时，不同浓度 Dox 对 MCF/TRE/tk/Tet-On 细胞存活数的影响
目前用于乳腺癌免疫治疗的特异抗原包括HER-2、CEA、 MAGE-1、MUC-1等。 • 采用基因工程将编码这些抗原的基因修饰后，克隆到逆 病毒载体，转入体内；或在体外采用基因工程，将这些抗 原的不同抗原簇克隆，产生不同抗体，筛选出能抑制肿瘤 细胞生长的抗体。 • 赫赛汀（Herceptin）就是针对c-er-2细胞外区域不同抗 原簇的人单克隆抗体。它可有效抑制c-er-2的下游信号传 导，从而抑制乳腺癌细胞的生长。
7
乳腺癌抗体治疗
单克隆抗体 Herceptin(贺赛汀) 针对HER-2/neu原癌 基因的人/鼠嵌合单 抗，与细胞表面的 erb-B2受体结合,抑 制乳腺癌细胞的生长, 产生抗体依赖细胞介 导的细胞毒作用。
8
免疫基因治疗
•指在基因水平，通过诱发或加强机体内针对肿
瘤细胞表面的肿瘤相关抗原（TAAs）的特异性 免疫反应，调动宿主的免疫系统来识别并破坏 癌细胞。 •乳腺癌组织表达多种TAAs，包括HER-2/neu（ c-er -2）、MACG-1和MUC-1等，机体针对这些 TAAs产生一定的特异性体液和细胞免疫反应。
21
乳腺癌基因治疗的调控元件
1)乳腺癌相关基因：erbB-2、Muc-1、 p53、BRCA1、BRCA2、nm23、p16等；
2)组织特异性基因:雌激素反应元件 (ERE)、人α乳白蛋白基因(hALA)、羊乳 球蛋白基因(oBLG)等；
3)缺氧反应元件(HRE)等。
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Tet 基因表达调控系统
将编码促进免疫反应的细胞因子的基因直 接在体内转染到肿瘤细胞内，或在体外 将这些基因转染到肿瘤细胞内，在肿瘤 细胞经放射线照射灭活后，自身移植于 体内，以增强免疫反应。包括IL-2、IL-
12、干扰素、粒细胞-巨噬细胞集落刺激
因子（GM-CSF）等。
10
特异性靶抗原的免疫治疗
• 采用特异的靶抗原作为疫苗对肿瘤的免疫反应更有效。
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旁观者效应
表 1 MCF/TRE/tk/Tet-On 细胞旁观者效应的克隆记数
1组 (n=4) 2组 (n=4) 3组 (n=4) 4组 (n=4) 5组 (n=4) 6组 (n=4)
MCF-7
100%
95% 5%
90% 10%
75% 25%
50% 50%
0% 100%
MCF/TRE/tk/Tet- 0% On
肿瘤抑癌基因治疗
•野生型p53基因具有通过调控视网膜母细胞瘤基因控
制细胞凋亡、抑制细胞增殖的作用。但是，由于乳腺 癌细胞中p53易突变而失活，影响了p53基因治疗乳腺 癌应用。在乳腺癌家族中发现抑癌基因BRCA1常存在 突变而表达过低。 •在乳腺癌动物模型中采用装有BRCA1的逆病毒载体， 直接注射入瘤内，可抑制晚期乳腺癌胸壁转移瘤的生 长。
•药物前体激活基因治疗（GPAT）可以利用正常和肿瘤
细胞之间的某一基因转录差异，选择性驱动表达导入肿 瘤细胞内的无活性化疗药物前体转化为有活性的代谢产 物，特异性杀伤肿瘤细胞。 •氟脲类药物对乳腺癌有杀伤作用，但5-氟胞嘧啶核苷酸 （5-FC）作为药物前体，对细胞无杀伤作用，而它在嘧 啶脱氨酶的转化下，可代谢为有活性的5-FU（5-氟尿嘧 啶）而具有杀伤肿瘤细胞的能力。
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RT-PCR 检测 SCID小鼠肿瘤组织 HSVtk的表达
自杀基因治疗乳腺癌的作用机理
乳腺癌细胞 直接杀伤癌细胞
病毒蛋白 病毒载体 通过旁观者效 应杀伤癌细胞 药物前体
自杀基因
毒性代谢物
18
自杀基因 HSVtk 编码胸腺嘧啶激酶，在 细胞内，自杀基因HSVtk 能将核苷类似 物 GCV 磷酸化，使其进一步代谢为三磷 酸 GCV，抑制细胞 DNA 聚合酶，影响 DNA合成，导致细胞死亡，达到清除肿 瘤的目的。
33
SCID小鼠体内成瘤及治疗前后肿瘤大小的变化
图 6 乳腺癌细胞 MCF/TRE/tk/Tet-On 接种 SCID小鼠后， NS组、GCV组、GCV+Dox组 SCID小鼠肿瘤体积的变化
34
SCID小鼠肿瘤组织病理学观察
图 7 三组 （NS组、GCV组、GCV+Dox组）SCID 乳腺癌小鼠 经治疗15天后肿瘤组织病理学观察 H-E染色（×250） A. NS 对照组; B. GCV 治疗组; C. Dox+GCV 治疗组
The ability to induce growth arrest and apoptosis
Downstream targets of p53 and Rb is necessary Clinical trials of second-generation oncolytic viruses
Combinations of tumour suppressor genes
24
重组逆转录病毒载体 pRevTRE/tk的构建
PCR 扩增获得 HSVtk 基因 DNA 片段，设 计引物时，在 引物 TK1 的 5’ 加上BamHⅠ酶 切位点，引物 TK2 的 5 ’加上 Hind Ⅲ 酶切 位点，定向克 隆到pRevTRE 质粒上, 得到 pRevTRE/tk质 粒。
25
Tet 系统利用大肠杆菌抗 四环素操纵子 的阻遏与去 阻遏作用来调控基因表达， 使基因表达受四环素的精 确调控。Tet 激活系统 （Tet-On）是突变的 tet 阻遏蛋白与 VP16 的激活 域融合表达 rtTA , 强力霉 素存在时，rtTA 与 tetOp 结合，激活靶向转 录。
23
Tet-On 调节乳腺癌细胞株 HSVtk 表达及 体外调控性治疗作用的实验研究
Clinical trials of p53 gene replacement have had limited success ;
PTEN expression alters metastatic potential
and reduces neovascularization
6
Prospects
克隆计数(均值 ±SE)
36.0±0. 81
34.0±0. 4.5±0.6 81 5
5.0±0. 71
5.0±0.58 3.5±0.5 0
32
可调控性自杀基因乳腺癌动物模型的建立
以表达 HSVtk基因及调控系统 Tet-On 的 乳腺癌细胞 MCF/TRE/tk/Tet-On 直接接种 SCID 小鼠成功建立了可调控性自杀基因乳 腺癌动物模型，为探讨自杀基因体外调控 机制的研究奠定了基础。
化学基因治疗
• 将耐药基因，如多药耐药基因（MDR）转入造血干细胞
，然后自体回输以增加化疗药物剂量，增强疗效，也不影 响机体的造血系统。 • Cowan等将4例乳腺癌病人的造血细胞提取后，体外转 染MDR基因，并且在体外应用大剂量化学药物杀死可能污 染的肿瘤细胞后，将转染了MDR的造血细胞自身移植。给 予大剂量的化学药物治疗后，3例病人移植细胞中仍可检 测到MDR的表达，转染MDR的细胞存活率与骨髓抑制成反 比，无严重毒副作用发生。