中国南海红树林内生真菌ZZF42次级代谢产物的研究

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三种南海海洋红树林内生真菌次级代谢产物的研究的开题报告

三种南海海洋红树林内生真菌次级代谢产物的研究的开题报告

三种南海海洋红树林内生真菌次级代谢产物的研究的开题
报告
题目:三种南海海洋红树林内生真菌次级代谢产物的研究
摘要:南海是我国具有重要意义的海洋资源之一,其中海洋红树林内生真菌是其中一种十分重要的生物资源。

本研究将选取三种南海海洋红树林内生真菌进行研究,分析其次级代谢产物及其生物活性,为南海海洋红树林内生真菌资源的开发和利用提供理论依据和实验依据。

研究思路:首先,将从南海海洋红树林内采集到的内生真菌进行筛选和鉴定,选取三种具有代表性的真菌进行研究。

其次,采用化学分离和纯化技术,分离并获得该三种真菌次级代谢产物。

然后,对所得次级代谢产物进行结构鉴定、生物活性测试与分析,寻找具有活性、生物功能组合的代谢物。

最后,深入研究代谢物的应用前景和开发利用方法。

研究意义:本研究将可深入了解南海海洋红树林内生真菌的代谢途径及产物与其生物活性之间的关系,为南海南海海洋红树林内生真菌资源的可持续利用、开发提供理论和实践支持。

关键词:南海海洋红树林;内生真菌;次级代谢产物;鉴定;生物活性。

固体发酵培养南海红树林内生真菌1403次级代谢产物研究

固体发酵培养南海红树林内生真菌1403次级代谢产物研究

固体发酵培养南海红树林内生真菌1403#次级代谢产物研究蔡奕彪蔡小玲(中山大学化学与化学工程学院海洋天然产物有机研究所;广东省生物功能分子重点实验室,广东广州510275)摘要:海洋红树林内生真菌次级代谢产物化学结构新颖、种类繁多,是天然药物先导化合物的重要来源。

本文对南海红树林内生真菌1403#进行了固体发酵培养,得到醌类等类型的化合物。

关键词:红树林内生真菌;次级代谢产物;固体培养海洋多变复杂的环境导致了海洋微生物的多样性。

海洋微生物因其特殊的生存环境而具有产生新型生物活性物质的巨大潜力。

近年来,从海洋真菌中分离鉴定了许多结构新颖的次级代谢产物,这些化合物显示了良好的抗肿瘤、抗细菌或抗真菌等生物活性,为新药的开发和各种疑难疾病的治愈提供了新的希望[1]。

红树林是一种热带盐滩上特有的植物群落,因此组成这个群落的几种主要种类在形态、生理、生态的各个方面都有它的特殊性:主要表现在胎萌现象以及根系的多样性中,以及红树林区经常受到海水的浸淹,土壤中的含盐量很高(一般在4.6~27.8‰之间),因而红树植物绝大部分属于盐生植物,具有排除或分泌盐分的结构,能将吸入体内的盐分分别经过茎、叶表面分布的盐腺排出,排在茎、叶表面的盐分晶体被雨水等淋洗掉。

如桐花树、海榄雌等植物,就有泌盐的机能,能排除过量的盐分,以适应高盐度的基质[2-3]。

在固体发酵中,菌体可以更高效地利用培养基中的营养物质,促进次级代谢产物的产生,同时,可能是因为固体发酵更好的模拟了其生活环境,且当菌株附着与固体基质上生长时,供氧丰富,生长密度大,生存竞争更为激烈,因此产生的次级代谢产物的量也会提高。

固体发酵还有含水量少,废水、废渣少,环境污染少等优点[4]。

醌类化合物(quinonoids) 指分子中具有不饱和环二酮结构(醌式结构)或容易转变为这种醌式结构的天然有机化合物。

主要包括:苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌四类。

它是一种色素,在植物中主要存在于蓼科大黄、何首乌、虎杖;茜草科茜草、豆科决明子、番泻叶、百合科芦荟、唇形科丹参、紫草科的紫草等。

南海红树林内源真菌#2240的四个格链孢酚类衍生物次级代谢产物研究

南海红树林内源真菌#2240的四个格链孢酚类衍生物次级代谢产物研究

TAN , U i S E Ni LI Le , H Zhig n , N n c n . a g LI Yo g. he g
( . c ol f h m s ya dC e cl n ier g U i r t o o t C ia 1 Sh o o e i r n h mi gnei , nv sy f uh hn , C t aE n e i S
值均 超过 5 gmL 并 且从 生 源途 径 角度 也初 步探 索 了上 述 四个化合 物之 间的相 互 0 / .
关 系.
关 键词 : 红树 林 内源真 菌 ; 格链 孢 酚类衍 生物 ; 次级 代谢 产物 ; 制 活性 ; 源途 径 抑 生
中图分 类号 : 6 6 2 0 5 . 文献标 识码 : A
收 稿 t :0 8 4 — 2 3期 2 0 —0 0 基 金项 目: 围家“ 6 ” 83 课题 资助项 目( 0 6 A 9A 2 ; 20 A 0 7- ) 国家 自然科学基 金 资助项 目(0 70 8 ; 华大学博 士启 2 20 2 5 ) 南
动 金 .
作者简 介 : 倪 ( 90一) , 谭 17 , 湖南衡 [人 , ; 南华 大学化学 化1学 院副教授 , 士. f j 二 博 主要研究方 向: 主客俸化学 、 天 然 药 物 化学 .

3 、 ,0一二 甲氧 基 格链 孢 酚 ( )4 1 化合 物 4 . 结 构通 过谱 图分 析 ( )其 包括 ” M H、 C N R, D F , Q H C, E M , V及 I ) E Y HM C, MB HR I S u R等 和相 关文 献 得 以确 定. 步 药理 实验 表 初
Re e r h o u t r a i lDe i a i e o u e y t a g o e s a c n Fo r Ale n r o r v tv s Pr d c d b he M n r v

两株南海红树林内生真菌(SK7、SK11)次级代谢产物的研究的开题报告

两株南海红树林内生真菌(SK7、SK11)次级代谢产物的研究的开题报告

两株南海红树林内生真菌(SK7、SK11)次级代谢产物的研
究的开题报告
一、研究背景
红树林是近海地区重要的生态系统,具有天然的防风固沙、保护海岸线、保护生物多样性等功能。

同时,红树林内生微生物是具有巨大研究价值的资源之一。

其中,
红树林内生真菌能够合成大量次级代谢产物,具有广泛的生物活性和药理作用。

因此,深入研究红树林内生真菌的次级代谢产物具有重要的理论和应用意义。

二、研究目的
本研究旨在从南海红树林内生真菌中筛选出具有生物活性和药理作用的次级代谢产物,并对其进行结构鉴定和生物活性测试,为寻找新型天然产物提供科学依据和理
论指导。

三、研究内容和方法
1、采集南海红树林样品,进行微生物分离和鉴定。

2、利用高效液相色谱、气相色谱及质谱等技术对红树林内生真菌的次级代谢产
物进行分离纯化和结构鉴定。

3、通过生物活性测试,对筛选出的次级代谢产物进行药理学评价。

四、预期成果
1、从南海红树林内生真菌中筛选出具有生物活性和药理作用的次级代谢产物。

2、对筛选出的次级代谢产物进行结构鉴定和生物活性测试,探讨其可能的药理
作用和应用前景。

3、为后续糖尿病、心血管等疾病药物开发提供基础数据和理论依据。

南海红树林内生真菌Cephalosporium sp.(2090#)次级代谢产物研究

南海红树林内生真菌Cephalosporium sp.(2090#)次级代谢产物研究

角瓶 , 内装培养液 30 L 经 11 0 1 P 高温 0 m , 2 ℃( .M a) 灭菌 2 rn 5 i 后在超净工作台上接种。共接种 7 L a 0, 2 ℃静置培养四周后 , 5 分别收集发酵液和菌体。
1 4 提 取分 离 .
7 L发酵 物过 滤得 菌体 和发酵 液 , 0 发酵 液浓 缩
(. 1 广东医学院药学院 , 广东 东莞 5 30 ;.胶南市第一中学 , 288 2 山东 3 .中国海洋 大学 医药 学院 , 山东 青 岛 2 60 ; 60 3
4 .中山大学化 学 与化学 工程 学 院 , 广东
关键词 : 红树林 内生真菌 ; 次级代谢 产物 ; 环二肽 ; 甾醇
青岛 260 ; 640
发酵 培 养 基 为 葡 萄 糖 1 0 , 白 胨 0 2 , .% 蛋 .%
授采 自南 海 红 树 的 内 生 真 菌 , 菌 的 种 属 尚 未 鉴 该
酵母 膏 0 1 , 海 盐 02 % ,H . 。50 L三 .% 粗 .5 p 70 0 m
定, 本文首次研究了该菌的次级代谢产物。从该菌 的菌体浸提液中分离得到七个已知化合物, 通过波 谱解析 以及文献 对 照 , 分别 鉴定 为 : ( 一 ) 肽 环 亮 亮 二 ( )环 ( 亮 ) 1 , 丙一 二肽 ( )环 ( 一 亮 ) 肽 ( )环 2, 亮 异 二 3, ( 一 ) 肽( ) 脯 异亮 二 4 和环 ( 苯丙一 ) 肽 ( )麦 角 甾 甘 二 5, 醇() 6 和过氧化麦角 甾醇 ( ) 7。
1 实 验 部分
1 1 仪器 与试 剂 .
仪器 : 国 Bue 公 司 V C O 2型 富 立叶 德 rkr E T R2
变换红外光谱仪 ( T R s c o e r ; 国 V r n F — etm t )美 I p r e a a i 公 司 IO A 50 B超 导 核 磁 共 振 谱仪 ; 国 V N V 0 N 英 G 公 司 Z BH A —S双聚 焦 磁 质 谱 仪 ; 国 Ee et 公 德 lm na r 司 Vr LC SO元素 分 析仪 。 ai E HN — o 试 剂 : 萄 糖 C 蛋 白胨 B 酵 母 膏 B 粗 葡 R, R, R,

中国南海海洋真菌1893#代谢产物研究

中国南海海洋真菌1893#代谢产物研究
中国南海海洋真菌1893#代谢产物研究
高剑 陈光英 林永成*
中山大学化学与化学工程学院天然产物研究室,广州,510275
摘要 海洋真菌是潜在的具有多种生物活性代谢产物的来源,代表了寻找新的海洋药物的方向。国内外在这方面的研究已经取得了丰硕的成果,随着研究方法和手段的不断发展,海洋真菌的活性代谢产物研究将迎来新的前景。

饱和四羟基神经鞘胺醇(39) 甘露醇(40)
2.5 结果分析
由于菌体在不同的培养条件下,其代谢产物也会有所不同,以及完成毕业论文实验的时间有限,我所分到的这几个化合物都是得到证明具有一定药理活性的已知化合物。其药理活性如下:
参 考 文 献:
1 江苏新医学院,中药大辞典,上海科学技术出版社,2712
2 彭司勋等编,药物化学,化学工业出版社,346
3 吴雄宇、林永成等,鞘氨醇的合成研究进展,有机化学,2002,22(11),
817~826
4 吴毓林、黎运龙等,鞘氨醇的化学,有机化学,1997,17(5),411~427
5 孙文基等编,天然活性成分简明手册,中国医药科技出版社,368
Abstract Marine fungi are potentially prolific sources of highly bioactive secondary metabolites that might represent useful leads in the development of new pharmaceutical agents. A lot of shining works have been carried out in this area by the experts from China and abroad. As along with the development of research methodologies and means , the research of marine fungi will have bright future.

五种南海红树林真菌次级代谢产物的研究的开题报告

五种南海红树林真菌次级代谢产物的研究的开题报告

五种南海红树林真菌次级代谢产物的研究的开题报告标题:南海红树林真菌次级代谢产物研究摘要:南海红树林是地球上独特的珍贵生态系统,其中各种微生物生物量大且物种丰富。

真菌是其中重要的组成部分,具有丰富多样的次级代谢产物。

本文采用分离纯化、质谱分析等方法,分别研究了南海红树林中5种常见真菌的次级代谢产物,并从中筛选出具有生物活性的化合物,对其进行初步的活性评价,为今后的深入研究提供参考。

内容:1. 研究背景和意义2. 研究对象与方法3. 研究进展与成果4. 展望与期望正文:一、研究背景和意义南海红树林是我国特有的生态系统,包括了红树林、海草床和珊瑚礁等生态群落,具有丰富的生物资源和生态学价值。

其中,各种微生物丰富多样,真菌作为其中的一个重要组成部分,具有很高的生物多样性和生物活性,被广泛应用于医药、农业、环境等领域。

红树林真菌的次级代谢产物具有很大的潜在应用价值,加之南海红树林真菌物种繁多、资源丰富,因此研究红树林真菌的次级代谢产物具有实际的应用价值和科学研究的意义。

二、研究对象与方法2.1 研究对象本研究选取了南海岛屿附近红树林中5种常见真菌进行研究,包括:Penicillium glabrum、Aspergillus flavus、Fusarium equiseti、Phoma sp. 和Trichoderma sp.。

2.2 研究方法采用分离纯化、质谱分析等方法,分别研究各菌株次级代谢产物,并从中筛选出具有生物活性的化合物。

实验流程如下:1. 真菌分离将采集的南海红树林样品进行分离纯化,得到单菌株。

2. 发酵条件的优化选用培养基、发酵条件进行优化,以提高次级代谢产物的产量。

3. 提取和分离次级代谢产物进行次级代谢产物的提取和分离,得到纯化的化合物。

4. 质谱分析采用质谱分析技术,结合NMR等分析方法对各纯化物进行鉴定。

5. 活性评价对筛选出的具有生物活性的化合物进行初步的活性评价,分析其对植物、微生物等的生物活性。

南海红树林内生真菌Sk-2代谢产物研究

南海红树林内生真菌Sk-2代谢产物研究

南海红树林 内生真菌 S k 一 2 代谢产物研究
杨 建香
f 桂林 师范高等专科学校 学报编辑部 , 广西 桂林 5 4 1 0 0 1 )
[ 摘 要】 目的:研究南海红树林 内生真菌 s k 一 2的代谢产物。方法 :采用反复硅胶柱色谱法、 S e p h a d e x
L H 一 2 O凝 胶色 谱法 等进行 分 离纯化 , 并通过 理化 常数 测定和 核磁 数据分 析鉴 定其 化学结 构。结 果 : 从南海 红树 林 内 生 真菌 S k - 2的培 养 液 中分 离得 到 4个 代 谢 产 物 。经 波 谱 解 析 ,分 别 为 :大 黄 素 甲醚 ( 1 ) , 3 , 6 一 d i s e c b u t y l 一 1 , 4 一 d 1 h y d r o x y p 1 D e r a z { n e 一 2 , 5 一 d i o n e ( 2 ) . 7 , 8 一 二 甲基 苯 并 [ g ] 蝶啶 一 2 , 4( 1 H , 3 H ) 一二酮( 3 ) 过氧 化麦角 甾醇( 4 ) 。结论 : 四个化 合物 均首次 从南 海红树 林 内生真菌 S k 一 2中分 离得到 。
研究表明, 海 洋 微 生物 将 成 为 下 个 世 纪 开 发 新 型 药 物 的重 要 资 源[ 3 1, 海 洋 微 生 物 是 产 生新 的 生 物 活 性 物 质 的极 好 来 源之 一 , l 4 1 而 海 洋 微 生 物 中 的红 树 林 内生 真菌 , 已成 为海 洋微 生 物 资 源开 发 利用 , 寻 找 天然 药物 先导 化合 物 的重要 途径 。 本 文对 南 海 红 树 林 内生 真 菌 S K一 2的次 级 代 谢 产 物 进 行 系 统研 究 , 从 培 养 液 中分 离 得 到 4个 化 合 物: ( 1 )大 黄 素 甲醚 ; ( 2 ) 3 , 6 一 d i s e c b u t y l 一 1 , 4 一 d i h y d r o x —
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甲醇提取物
展开剂:20%EA-PE
甲醇相
正己烷相
脂肪酸甘油酯 脂肪酸
硫酸-甲醇甲酯化
菌体:用甲醇浸泡
GC-MS
可编辑ppt
16
RT: 5.47 - 39.55 100
24.76
90
80
Relative Abundance
70 29.92
60
50
29.64 40
30
20
24.06
30.58
10
21.27
APCI:大气压状态下进行的化学电离 MS2:母离子和子离子的关系
可编辑ppt
APCI-MS2 分离、鉴定
12
APCI-MS2
样品的(+)APCI全扫描质谱图
母离子m/z 311.1的二级全扫描质谱图
母离子m/z 295.1的二级全扫描质谱图
母离子m/z 205.1的二级全扫描质谱图
可编辑ppt
13
242
C15H30O2
256
C16H32O2
268
C17H32O2
270
C17H34O2
294
C19H34O2
296
C19H36O2
298
C19H38O2
可编辑ppt
相似度
858 871 848 829 833 831
825 847
相对含量 (%) 0.85
0.54 1.00 3.86
39.78 22.75
中国南海红树林内生真菌ZZF42 次级代谢产物的研究
报告人:吴春燕 学号:04328040 专业:应用化学(化学生物学) 导师:刘岚 副教授
可编辑ppt
1
报告提纲
选题意义
国内外研究现状
研究思路
实验及讨论
结论
可编辑ppt
2
选题意义
海洋真菌是海洋微生物的一个重要 分支。从海洋真菌分离出的次级代谢 物中约70%-80%具有生物活性。
可编辑ppt
19
致谢
❖ 本论文是在导师刘岚副教授的悉心指导下完成的。刘老师对实验进 展十分关注,从理论上和实践上给予了我非常深入细致的教导。是 刘老师的信任和支持使我有了许多锻炼的机会,从学习灭菌接菌、 过柱分离到核磁培训、测试、解谱,是刘老师的精心栽培使我的实 验技术和科学素养都上升到一个新的高度。刘老师拥有渊博的专业 知识,严谨的治学态度和勤奋踏实的科研作风,是我将来学习工作 中的楷模。在此,衷心感谢刘老师对我的谆谆教诲和深切关怀!
(08.03——08.05)
可编辑ppt
6
关于培养液中代谢产物的讨论
PE:EA=1∶2
(体积比)
洗脱得到的组
碘 缸
分经反复柱

层析、薄层
Hale Waihona Puke 色制备色谱纯 化,得到:
浅黄色粉末
Rf ≈ 0.25
Rf ≈ 0.70
展开剂:EA 展开剂:10%MO-
可编辑ppt
EA
7
EI-MS: RT=1.65s及RT=2.38s处各存在一个峰
7.837 7.869 7.909 8.131
9.196
200 600
ppm (t1)
7.50
500
100
2000
400 0
300
1500
7.00
200
6.50
δH 6.81~6.83(d, J=8.1)
100
6.64~6.67(d, J=8.1)
1000
0
9.50
9.00
8.50
8.00
ppm (t1)
27.45 4.26
18
结论
红树林内生真菌ZZF42菌体的低极性代谢产物甲 酯化后含有八种成分,分别为:α-柏木烯、十四酸 甲酯、十五酸甲酯、(9Z)-十六碳烯酸甲酯、十六 酸甲酯、(9E,12E)-十八二烯酸甲酯、(9Z)-十 八烯酸甲酯、十八酸甲酯。
一般认为,低极性部分 = 脂肪酸/脂肪酸酯
可能还有其它物质,如萜类等。
红树林内生真菌代谢产物
包括生物碱类 (杂环生物碱、
大环生物碱等),大环内酯,
环肽类,醌类,萜类,聚
醚类,甾醇类,多糖类,
不饱和脂肪酸等。 可编辑ppt
3
从红树林内生真菌ZZF42已发现的代谢产物:
1-甲基-β-咔啉
N-甲基-1-甲基-β-咔啉
4-羟基-α-苯乙酸
吲哚-3-乙酸
4-甲氧基-8-羟基-喹啉 环-(苯丙-酪)二肽
可编辑ppt
8
EI-MS
环(甘-苯丙)二肽
环(苯丙-苯丙)二肽
可编辑ppt
9
500
6.639 6.665
6.802 6.828
7.003 7.026
7.160 7.185 7.208 7.241 7.261
400
H NMR分析(溶于氘代DMSO) 1
300
Your comment here
700
据此可看出,红树林内生真菌F42能产生结构独特、骨架
新颖并具有生物活性的代谢产物,而产物中被分离鉴定
出的化合物还比较少,故该菌具有进一步研究的潜力。
可编辑ppt
4
研究思路
微生物大量培养
培养物收获

代谢产物分离


时间长,损耗大


纯组分
混合组分


结构鉴定
是否新化合物
MS
GC-MS

组分信息获知
药理活性测试
-100
500
δH 9.19(brs)
0
ppm (t1)
10.0
可编辑ppt5.0
0.0
10
可编辑ppt
11
如果真的存在环(苯丙-酪)二肽, 它为什么不能被EI检测出来?
EI源要求固、液态样品汽化后再进入离子源, 因此不适合难挥发和热不稳定的样品。
环(苯丙-酪)二肽:mp 291~293℃ 难挥发化合物
选择好的分离条件纯化
可编辑ppt
5
实验与讨论
前期准备工作 —— 重蒸溶剂、查阅文献等
(07.11——07.12)
菌株培养发酵
(08.01——08.03)
培养菌种
配制 培养液200L
接菌
发酵 40天
收菌
培养液:60℃下 200L 5L
EA 萃取5次
EA 提取物
菌体 晒干
MO浸泡 一个月
MO 提取物
分离、鉴定代谢产物
序 保留时间 号 t/min
化合物
1 13.08
α-柏木烯
2 19.96
十四酸甲酯
3 21.27
十五酸甲酯
4
24.06 (9Z)-十六碳烯酸甲酯
5 24.76
十六酸甲酯
6 29.64
(9E,12E)十八二烯酸甲酯
7 29.92 (9Z)-十八烯酸甲酯
8 30.58
十八酸甲酯
分子量
分子式
204
C15H24
13.08
19.96
0
10
15
20
25
30
35
Time (min)
红树林内生真菌ZZF42菌体代谢产物低极性部分
硫酸-甲醇酯化后的可G编C辑/ppMt S总离子流色谱图
NL: 1.92 m/z= 33.0 507. MS 0805 liula
17
红树林内生真菌ZZF42菌体代谢产物低极性部分 硫酸-甲醇酯化后的化学成分及其相对含量

环 ( 苯 丙 酪 ) 二 肽 的 裂 解 途 径
可编辑ppt
14
结论

环(苯丙-酪)二肽
环(苯丙-苯丙)二肽 环(甘-苯丙)二肽
混合组分先送质谱分析,可基本确定其成分,
再根据个人经验或查阅文献,能找出有效的 分离条件(展开体系),如此,既提高效率, 又能防止微量成分的损失。
可编辑ppt
15
关于菌体代谢产物中低极性部分的讨论
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