多糖结构分析
多糖的结构分析方法包括
多糖的结构分析方法包括多糖的结构分析方法是确定多糖化合物的组成和连接方式的关键工具。
一般而言，多糖的结构分析可分为化学方法和生物方法两大类。
下面将对这些方法进行详细阐述。
一、化学方法：1. 水解分析法：多糖可通过水解反应将其分解为单糖组成部分。
常用的水解剂有酸、碱及酶等。
水解之后，通过测定生成的单糖或小分子产物的性质，如比旋光度、红外光谱等，可以了解多糖的结构。
2. 艳蓝法：多糖与一些特定的染料反应，形成稳定的染色复合物，从而测定多糖的含量。
例如，通过酚-硫酸法，可以用磺酸依托品氧化苄功酸钠抗络常数来定量多糖。
3. 光谱法：红外光谱、紫外光谱、核磁共振等技术可用于多糖的结构分析。
红外光谱可用来分析反映多糖内部结构的原理基团，紫外光谱用于分析多糖的存在和测定多糖的含量，核磁共振用于确定多糖的空间结构。
4. 色谱法：气相色谱、液相色谱和凝胶渗透色谱等方法可用于多糖的分离和定性。
例如，利用薄层色谱法，可分离多糖混合物，并通过染色剂的显色来判断多糖的组成。
二、生物方法：1. 酶降解法：通过加入特定酶，如淀粉酶、纤维素酶、葡萄糖酸酶等，可对多糖进行降解。
通过观察降解过程中生成的产物，可以了解多糖的结构。
此外，酶处理还可用于多糖的修饰。
2. 糖基转移酶法：多糖通过与糖基转移酶反应，可实现特定糖基的转移。
通过测定生成的产物，可以推测多糖的结构。
3. 色谱法：包括气相色谱、高效液相色谱等。
例如，通过细胞外多糖水解产生的单糖组成通过气相色谱或液相色谱分析，可以了解多糖的结构。
4. 核磁共振波谱法：包括质子核磁共振、碳13核磁共振等。
通过测量样品在强磁场下的核磁共振信号，可以获得丰富的结构信息。
此外，还有一些其他方法如质谱分析、电泳分析等都可用于多糖的结构分析。
总之，多糖的结构分析需要利用多种方法互相印证，综合分析，才能获得准确的结构信息。
以上介绍的方法只是常用的几种，请根据研究的具体需要选择合适的方法进行分析。
多糖高级结构研究方法
1. 红外光谱法（IR）红外光谱在多糖的结构分析上的应用主要是确定糖苷键的构型以及常规官能团。
如：多糖化合物在890cm- 1处吸收是β-吡喃糖苷键特征峰，而820 cm- 1和850cm- 1则是α-吡喃糖苷键特征峰。
2.核磁共振法( NMR)主要用于确定多糖结构中糖苷键的构型以及重复结构中单糖的数目。
3. 原子力显微镜（AFM）该技术是在扫描隧道显微镜( STM )基础上发展起来的一种新颖的物质结构分析方法。
其用很尖的探针扫描待测样品表面, 探针附在一根可活动的微悬臂的底端上, 当探针与样品接触时, 产生的微小作用力引起微悬臂的偏转, 通过光电检测系统对微悬臂的偏转进行检测和放大, 信号经过转换可得到样品的三维立体图像。
如：该技术研究了香菇多糖在不同浓度NaOH 溶液下构型和构象的转变。
4. X- 射线衍射法(XRD)X - 射线衍射法可得到晶体的晶胞参数和晶格常数, 再加上立体化学方面的信息，包括键角、键长、构型角和计算机模拟, 就可以准确的确定多糖的构型。
5. 圆二色谱( CD)从CD 可以知道绝对构型、构象等信息, 是研究多糖的三维结构的有效办法。
中性多糖因缺少一般紫外区可提供信息的结构, 难以直接得到由CD 谱提供的结构信息，通常可进行衍生化或者将多糖与刚果红络合后测定。
6. 快原子轰击质谱( FAB - M S)FAB- MS适合于分析极性大、难挥发、热不稳定的样品。
在快原子轰击过程中, 样品通过正离子方式增加一个质子或阳离子, 或通过负离子方式失去一个质子产生准分子离子作为谱图的主要信号, 并给出反映连接顺序等信息的碎片。
因此FAB- MS可用来测定寡糖链的分子量。
通过FAB- MS形成[M - H ] - 离子是确定寡糖中单糖组成的一种方便的方法。
7. 气质联用(GC - M S)气相色谱与质谱联用可以得到有关单糖残基类型、链的连接方式、糖的序列和糖环形式、聚合度等多种结构信息。
《多糖结构解析》课件
质谱技术
通过电离多糖分子并测量其质量 ，可以获得多糖的分子量和组成 信息。
核磁共振技术
通过测量多糖分子中氢原子或其 他原子周围的磁场，可以解析多 糖的精细结构。
生物技术分析法
凝集素结合法
利用凝集素与多糖的特异 性结合，分离纯化多糖， 并进行结构分析。
抗体技术
利用抗体与多糖的特异性 结合，进行多糖的定性和 定量分析。
THANKS
感谢观看
亲和色谱法
利用多糖分子与配体之间的特 异性亲和力，将多糖分离纯化
出来。
分离纯化过程中的注意事项
注意温度和pH值
在提取和分离纯化过程中，要控制好温度和pH值 ，以保证多糖的稳定性和活性。
避免长时间高温
长时间高温会导致多糖的结构发生变化，影响其 生物活性和稳定性。
注意防止污染
在分离纯化过程中，要避免污染，如微生物、杂 质等，以保证多糖的纯度和质量。
03
多糖的结构解析方法
化学分析法
01
02
03
酸水解
在酸的作用下，将多糖水 解成单糖，然后进行衍生 化反应，通过气相色谱或 液相色谱进行分析。
碱水解
在碱的作用下，使多糖水 解成寡糖和单糖，同样需 要进行衍生化反应，再进 行色谱分析。
酶解
利用特异性酶将多糖水解 成特定结构的片段，再进 行分析。
物理分析法
食品工业
食品添加剂
01
多糖可作为增稠剂、稳定剂、口感改善剂等用于食品加工中，
提高食品品质和稳定性。
功能性食品
02
利用多糖的生理活性，开发具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖等功
能的食品。
食品包装材料
03
多糖可制成可食用的食品包装材料，具有良好的阻隔性能和环
多糖结构解析的方法
多糖结构解析的方法多糖化合物的结构解析是糖化学和生物化学领域的中心问题之一、因为多糖的结构决定着它们的功能和生物活性。
多糖结构解析的方法可以分为物理方法和化学方法。
一、物理方法：1.光谱学方法：光谱学方法是多糖结构解析中常用的一种方法。
包括紫外光谱、红外光谱、荧光光谱和核磁共振等方法。
（1）紫外光谱：多糖在紫外光谱上表现出特有的吸收峰，可以确定它们的环状结构。
（2）红外光谱：红外光谱是解析多糖结构的重要手段，通过测定多糖分子中的官能团振动频率和强度，可以得到多糖分子的化学结构和键合特性。
（3）荧光光谱：荧光光谱可用于表征多糖的发光行为和其与其他生物分子的结合情况，从而推测其结构和功能。
（4）核磁共振：核磁共振是解析多糖结构的重要手段之一，通过测定多糖中氢、碳、氮等元素的核磁共振信号，可以确定多糖的类型和键合方式。
2.比色法：比色法是通过观察多糖与一些特殊试剂产生的颜色变化来判断多糖的结构。
比如，酚硫酸法可以用于检测多糖的含量和环状结构。
3.色谱法：色谱法是多糖结构解析的重要方法之一、包括薄层色谱、柱层析、气相色谱和高效液相色谱等方法。
通过对多糖的分离和分析，可以得到多糖的组成和分子量信息。
二、化学方法：1.普通化学方法：多糖的碳水化合物性质决定了其一些基本反应，比如酸水解、酶降解、氧化还原等反应。
利用这些反应可以推测多糖的结构。
2.酶法：酶法是多糖结构解析的重要方法之一、不同酶对多糖的酶解反应具有特异性，通过观察酶解产物，可以推测多糖链的连接方式和单糖的种类。
3.质谱法：质谱法是近年来发展起来的一种多糖结构解析方法，主要有质谱分析和质谱成像两种方法。
通过质谱技术可以得到多糖的精确分子量和分子结构，尤其适用于大分子多糖的分析。
综上所述，多糖结构解析的方法多种多样，可以从不同的角度揭示多糖的化学成分和结构特征。
尽管目前多糖结构解析仍然是一个具有挑战性的问题，但随着新技术的发展，相信将能更加准确和全面地揭示多糖的结构和功能。
多糖的结构分析课件
第6章 多糖的结构分析
多糖结构测定的意义 从天然物质中分离得到的单体多
糖化合物即使具有很强的活性与具有较 大的安全性, 但如果结构不清楚, 则无法 进一步开展其药理学与毒理学研究, 也 就不可能进行人工合成或结构修饰改造 工作, 更谈不上进行高质量的新药开发 研究, 其学术及应用价值将会大大降低。
OH 2 OC2 H OHC2 H OH
以1→2位键合(1→2,6类似)
O H H
HO
0
H O H
C2 H OH
CH2O H
IO -4
O N aB H 4
O H+
CH 2OH
CH OO HCOOC H 2O HH O H 2C
OH 2O2CHOH
O
CH 2OH
以1→4位键合(1→4,6类似)
.
第6章 多糖的结构分析
3.甲基化（单糖残基的连接方式） 是用甲基化试剂将糖分子中的游离羟基
甲基化成甲醚，然后水解，检识这些甲基糖 产物，就可能推测组成多糖分子中单糖间连 接的位置（羟基所在的位置，即为原来单糖 残基的连接点）。 （氢化钠、碘甲烷） （1）制备负碳离子：无水二甲亚砜30ml于 100ml试剂瓶中，通入氮气几分钟后，加入 1.5gNaH，渐渐加温，然后恒温在65-70℃46小时。最终颜色为墨绿色。整个过程通氮， 并搅拌。
多糖的非还原末端或非末端的（1→6）键与邻三元醇相似, 其与过碘酸盐作用则糖环开裂得到一分子比例的甲酸而消耗二 分子比例之过碘酸盐。非末端的（1→2）或（1→4）键与邻二 元醇相似, 其开裂后产生二分子醛而消耗一分子比例之过碘酸盐。 对于非末端的（1→3）键或C-2和C-4有分枝的则不受过碘酸盐 影响。因此多糖氧化后定量测定过碘酸盐的消耗、甲酸的生成 和剩余糖的比例, 就可确定多糖中各种单糖的键型及其比例。
多糖结构分析范文
多糖结构分析范文多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物，广泛存在于生物体内，具有重要的生理功能和科学研究价值。
多糖的结构分析是研究其化学组成、分子结构和空间构型的过程，对于了解多糖的生物学功能和性质具有重要意义。
多糖的结构分析方法主要包括物理化学方法、光谱分析方法和酶解分析方法等。
下面将对这些方法进行详细说明。
1.物理化学方法：物理化学方法是利用多糖的物理性质进行结构分析的方法。
其中包括粘度测定、分子量测定、光旋光度测定和电泳分析等。
（1）粘度测定：多糖的粘度与其分子大小和结构有关，通过测定多糖溶液的粘度可以推测其分子量和构型。
粘度测定通常利用Ubbelohde粘度计或Ostwald粘度计进行。
（2）分子量测定：多糖的分子量是其结构的关键参数，可通过凝胶过滤、凝胶电泳或质谱等方法测定。
其中，凝胶过滤是常用的方法，通过选择合适的孔径大小的凝胶阻隔多糖的滤过，然后根据滤过时间计算出多糖的分子量。
（3）光旋光度测定：多糖的结构中含有手性中心，具有旋光性，通过测定多糖溶液的旋光度可以推测其分子结构。
通常使用旋光光谱仪进行测定。
（4）电泳分析：多糖的电泳分析常用聚丙烯酰胺凝胶电泳或琼脂糖电泳。
通过电泳分析可以确定多糖的电荷性质、分子大小和分子结构。
2.光谱分析方法：光谱分析方法包括红外光谱、核磁共振（NMR）光谱和质谱等。
（1）红外光谱：红外光谱可以提供多糖分子中官能团的信息，如羟基、氨基、羧基等。
通过对比标准谱图或理论谱图，可以确定多糖的官能团组成。
（2）核磁共振光谱：核磁共振光谱可以提供多糖分子的分子结构和空间构型信息。
其中，13CNMR可确定多糖的碳原子排布，1H-NMR可确定多糖的氢原子排布。
（3）质谱：质谱是一种通过测量多糖分子或其片段的离子质量比来确定分子结构的方法。
通过质谱可以推断多糖的元素组成、分子量和结构。
3.酶解分析方法：酶解分析方法是利用特定的酶可以选择性地降解多糖，从而确定其分支链和连接方式。
多糖组成多样性：圆二色谱测定方法分析
多糖组成多样性：圆二色谱测定方法分析多糖是一类重要的生物大分子，广泛存在于生物体内，如细胞壁、细胞膜、软骨、骨骼、肌肉、皮肤、血管、眼球等组织中。
多糖的结构和组成对其生物学功能具有重要影响。
因此，多糖的分析和表征对于深入了解其生物学功能具有重要意义。
圆二色谱是一种常用的多糖分析方法，可以用于分析多糖的结构和组成。
1.多糖的结构和组成多糖是由单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
多糖的结构和组成对其生物学功能具有重要影响。
多糖结构包括链式结构和支链结构，链式结构包括直链和分支链。
多糖的组成包括单糖种类、单糖的连接方式和单糖的相对比例等因素。
2.圆二色谱测定方法圆二色谱是一种常用的多糖分析方法，可以用于分析多糖的结构和组成。
圆二色谱是利用多糖分子的手性结构对圆偏振光的旋转方向产生影响，从而分析多糖的结构和组成。
圆二色谱可以分析多糖的二级结构，如α-螺旋、β-折叠和无规卷曲等结构。
圆二色谱还可以分析多糖的单糖组成和连接方式等信息。
3.圆二色谱的应用圆二色谱广泛应用于多糖的分析和表征。
圆二色谱可以用于分析多糖的结构和组成，如多糖的二级结构、单糖组成和连接式等信息。
圆二色谱还可以用于分析多糖的空间结构和分子间相互作用等信息。
圆二色谱在生物医学领域中也有广泛应用，如用于分析多糖药物的结构和组成，以及多糖药物与受体的相互作用等信息。
4.圆二色谱的优势和局限性圆二色谱具有高灵敏度、高分辨率和非破坏性等优点，可以分析多糖的结构和组成等信息。
但是，圆二色谱也存在一些局限性，如需要高纯度的样品、需要专业的仪器和操作技能等。
此外，圆二色谱也不能直接分析多糖的三维结构和分子间相互作用等信息。
图1。
5.结论多糖是一类重要的生物大分子，其结构和组成对其生物学功能具有重要影响。
圆二色谱是一种常用的多糖分析方法，可以用于分析多糖的结构和组成。
圆二色谱具有高灵敏度高分辨率和非破坏性等优点，但也存在一些局限性。
圆二色谱在多糖的分析和表征中具有重要应用价值，可以为深入了解多糖的生物学功能提供重要信息。
多糖结构分析
一：多糖中的单糖组分分析一般对多糖进行完全水解，水解条件：封管0.5~3M硫酸或1~6M盐酸，80℃~100℃水解2.5~8h 即可。
或控制水解条件，进行逐步水解，如封管0.025M硫酸，100℃水解15min，30min，45min 等，水解液用碳酸钡或氢氧化钡中和，滤液浓缩后可用纸层析、薄层层析、气相层析或高压液相层析等鉴定。
二：相邻单糖基连接方式分析将甲基化多糖水解得到甲基化的单糖，而此单糖上甲基化之羟基所在的碳原子就是连接键所在。
高碘酸氧化是定量反应，Smith降解是将高碘酸氧化产物进行还原，酸水解或部分水解，从高碘酸的消耗量和不同产物的生成，便可进行糖苷键位置的判断-产物中若有一分子比例的甲酸生成而消耗两分子比例的高碘酸根时，表明多糖的非还原末端或非末端部分有1-6苷键相连的单糖基存在；产物中若有赤藓醇生成，则提示有1-4结合苷键；若有甘油生成，有1-6、1-2结合的苷键或有还原性末端葡萄糖基等；若产物中能检出单糖，如葡萄糖、半乳糖、甘露糖等，则有1-3苷键存在。
结合¹³C-NMR确定连接位置。
三：端基碳苷键构型分析1：酶解实验：不被淀粉酶水解的多糖，无α-苷键，与纤维素酶有作用者，存在β-苷键。
2；IR：α-型差向异构体的C-H键在844±8cm‾¹处有一个吸收峰；β-型的C-H键在891±7cm‾处有一个吸收峰。
但是，海藻糖、阿洛糖和异阿洛糖的α-型和β-型同时存在的情况下，就不能以次来判断。
3：¹H-NMR：端基碳的δ值大于5.00ppm者，糖苷键为α-型，小于5.00ppm者，则为β-型。
4；¹³C-NMR：α-型连接的C₁化学位移在97-101ppm，β-型的在103~105ppm。
对甘露聚糖不能用化学位移判断α-型或β-型。
可用裂分常数决定，一般¹Jｃ-ｈ=170HZ，为α-型，160HZ 者为β-型。
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多糖结构研究方法多糖及其复合物是来自于高等动、植物细胞膜和微生物细胞壁中的天然大分子物质之一，自然界含量丰富，与人类生活紧密相关，对维持生命活动起至关重要的作用。
多糖和核酸、蛋白质、脂类构成了最基本的4类生命物质。
由于多糖的生物活性与多糖的结构关系密切，因此清楚认识多糖的结构是进行多糖研究和利用的基础。
多糖结构比蛋白质和核酸的结构更加复杂，可以说是自然界中最复杂的生物大分子。
从化学观点来看，多糖结构解析最大的难点就在于其结构的复杂性。
糖的结构分类可沿用蛋白质和核酸的分类方法，即多糖的结构也可分为一级、二级、三级和四级结构。
与蛋白质或核酸大分子相比，糖链的一级结构“含义”要十分丰富。
测定糖链的一级结构，要解决以下几个问题：(1)相对分子质量；(2)糖链的糖基组成，各种单糖组成的摩尔比；(3)有无糖醛酸及具体的糖醛酸类型和比例；(4)各单糖残基的D-或L．构型，毗喃环或呋喃环形式；(5)各个单糖残基之间的连接顺序；(6)每个糖苷键所取的a-或B．异头异构形式；(7)每个糖残基上羟基被取代情况：(8)糖链和非糖部分连接情况；(9)主链和支链连接位点：（10)糖残基可能连接硫酸酯基、乙酰基、磷酸基、甲基的类型等。
多糖的二级结构是指多糖主链间以氢键为主要次级键而形成的有规则的构象，与分子主链的构象有关，不涉及侧链的空间排布；多糖的三级结构和四级结构是指以二级结构为基础，由于糖单位之间的非共价相互作用，导致二级结构在有序的空间里产生的有规则的构象四。
多糖结构的分析手段很多。
不仅有仪器分析法，如红外、核磁共振、质谱等，还有化学方法，如完全酸水解、部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反应等，以及生物学方法，如特异性糖苷酶酶切、免疫学方法等。
1质谱(MS)由于MS法在糖链结构分析中具有快速灵敏，样品用量少、结构信息直观的特点而得到越来越广泛的应用。
近年来各种软电离技术的诞生，如快原子轰击质谱(FAB—MS)，电喷雾质谱(ESI—MS)，基质辅助激光解析离子化质谱(MALDI-MS)等，使得糖结构分析的研究取得了日新月异的发展。
(1)快原子轰击质谱(FAB—MS)FAB-MS是上世纪80年代初发展起来的一种新的软电离质谱技术。
其显著区别于传统质谱之处在于样品受加速原子或离子的轰击，可直接在基质溶液中电离。
FAB-MS的引入使传统质谱技术难以分析的极性强，难挥发以及热不稳定的化合物不经衍生化就可以直接进行质谱分析，而且对生物大分子的研究取得了重大突破。
FAB-MS已被证明是分析糖结构最为有力的方法之一，它不仅可以测定寡糖及其衍生物的分子量，而且可以测定聚合度高于30的糖的分子量。
同时，FAB-MS还可以确定糖链中糖残基的连接位点和序列，已广泛用于糖类的分析。
(2)电喷雾质谱(ESI-MS)ESI-MS是将溶液中分子转变成气相离子非常有效的手段，是目前最软的一种电离方式。
这种电离方式所产生的分子离子往往带有多电荷。
因此ESI-MS可以测定的分子量范围大大扩展。
对多糖而言，ESI-MS可以分析nh25个甚至更多单糖残基组成的含有羧基或硫酸根等官能团的多糖。
近年来，ESI-MS已在多糖的结构分析中显示了强大的生命力。
它能用于衍生化和非衍生化多糖的测定。
ESI-MS易与HPLC，CE等技术联用，大大提高了工作效率以及灵敏度和精确度，如ESI-MS与I-IPLC联用分析寡糖及其衍生物。
(3)基质辅助激光解析离子化质谱(MALDI-MS)MALDI-MS于上世纪80年代末问世。
由于技术的特点，这种离子化方式电离出的离子常用飞行时间(TOF)检测器检测，因此MALDI-MS常与TOF一起称为基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)。
它也是一种软电离方式，产生的分子离子十分稳定，不易裂解，所以适用于检测大分子质量的生物样品。
2红外光谱(IR)红外光谱(infrared spectroscopy，IR)是一种吸收光谱。
因为红外光只能激发分子内原子核之间的振动和转动能级的跃迁，所以红外吸收光谱是通过测定振动和转动能级跃迁的信息来研究分子结构的。
在红外光谱图中，纵坐标一般用线性透光率作标度，称为透射光谱图；也有采用非线性吸光度为标度的，称为吸收光谱图。
谱图中的横坐标是以红外辐射光的波数(锄d)为标度。
较少采用波长(pm)为标度。
波长和波数的关系依照式为：v(cml)×u岬)=104。
红外辐射光的波数可分为近红外区(10000-4000cm-1)、中红外区(4000-400cm-1)和远红外区(400-10 cnl-1)。
其中最常用的是中红外区，大多数化合物的化学键振动能级的跃迁发生在这一区域，因此主要研究中红外区域的吸收光谱即分子的振动光谱，可以对各种高分子材料进行分析、测定。
则对应这些基团的一些谱带在这个化合物的取光谱中往往是最强的，明显地显示这个基团的结构特征。
因此，对应这些基团的谱带在其聚合物的谱图中，常常是处于最显著的地位，能够很特征地反映该类聚合物的结构和预示其存在。
对于各种聚合物分子来说，含有的主要极性基团是酸、酯、酰胺、酰亚胺、苯醚、脂肪醚和醇等。
除此之外，含有硅、硫、磷、氯和氟等杂原子的化合物也常具有较强的极性。
红外光谱作为“分子的指纹”广泛用于分子结构和物质化学组成的研究。
根据分子对红外光吸收后得到谱带频率的位置、强度、形状以及吸收谱带和温度、聚集状态等的关系便可确定分子的空间构型，求出化学键的力常数、键长和键角。
从光谱分析的角度看主要是利用特征吸收谱带的频率推断分子中存在某一基团或键，由特征吸收谱带频率的变化推测临近的基团或键，进而确定分子的化学结构，当然也可由特征吸收谱带强度的改变对混合物及化合物进行定量分析。
3拉曼光谱拉曼散射又称拉曼效应，是由印度物理学家拉曼于1928年首先发现并因此获得1930年诺贝尔物-理奖。
拉曼效应是能量为hvo的光子同分子碰撞所产生的光散射效应，也就是说，拉曼光谱是一种散射光谱。
单色光束的入射光光子与分子相互作用时可发生弹性碰撞和非弹性碰撞，在非弹性碰撞过程中，光子与分子之间发生能量交换，光子不仅仅改变运动方向，同时光子的一部分能量传递给分子，或者分子的振动和转动能量传递给光子，从而改变了光子的频率。
简单来说，散射分子的转动能级和振动能级发生了变化是产生拉曼散射的原因，此时散射光子频率不同于入射光子。
因此，每种物质的拉曼光谱也就是拉曼散射光谱都只与其自身的分子结构有关，而与入射光的频率无关。
拉曼效应普遍存在于一切分子中，无论是气态，液态和固态。
拉曼散射光谱对于样品制备没有特殊要求；对于样品数量要求比较少。
拉曼散射最突出的优点是采用光子探针，对于样品无损伤探测，尤其适合对稀有或珍贵的样品进行分析，甚至可以用拉曼光谱检测活体中的生物物质。
拉曼光谱与红外光谱是相互补充的。
在各种分子振动方式中，强力吸收红外光的振动能产生高强度的红外吸收峰，但只能产生强度较弱的拉曼谱峰；反之，能产生强的拉曼谱峰的分子振动却产生较弱的红外吸收峰。
将两者结合起来才能得到分子振动光谱的完整数据，更好地解决分子结构的分析问题。
常用的拉曼光谱技术主要有：显微共焦拉曼光谱技术、傅里叶变换拉曼光谱技术、共振增强拉曼光谱技术和表面增强拉曼光谱技术。
(1)显微共焦拉曼光谱技术显微共焦拉曼光谱技术是将拉曼光谱分析技术与显微分析技术结合起来的一种应用技术。
通过两根光导纤维将显微镜与拉曼光谱仪组合起来，实验时通过显微镜观察，选择有关分析所感兴趣的待测样品的部位，一根光导纤维将被激发的激光光束从光谱仪传递到显微镜待测样品部位，入射激光通过显微镜聚焦后，照射到被测样品上，另一根光导纤维将拉曼散射光辐射传递回光谱仪的有关部位，传递回来的拉曼散射光信号被相干仪所调整，形成光谱信号。
显微共焦拉曼光谱技术可在不受周围成分干扰的情况下，精确获取微区内的化学信息，如化学成分、晶体结构、分子取向及分子间相互作用等。
(2)傅里叶变换拉曼光谱技术傅里叶变换拉曼光谱一般采用波长1064nm的近红外激光作为激发光源，分子的荧光不被激发，避免了许多样品拉曼光谱中的荧光干扰，近90％的化合物可获得拉曼光谱。
(3)共振增强拉曼光谱技术当激发光的频率接近或等于被测分子的电子吸收频率(紫外．可见光)时，某一条或几条特定的拉曼线强度会急剧增加，甚至可以出现正常拉曼效应中观察不到的泛频及组合振动频率的谱峰。
共振拉曼光谱灵敏度高，可检测低浓度和微量样品，可研究大分子聚集体的局部结构，已成为研究有机分子、离子、生物大分子甚至活体组织的有利工具。
(4)表面增强拉曼光谱技术表面增强拉曼光谱技术是一种新的表面测试技术，它可以在分子水平上研究材料分子的结构信息，具有极高的灵敏度和选择性等独特的优点。
4 X射线衍射(XRD)1912年德国物理学家劳厄(Laue)等人根据理论预见，并用实验证实了X射线具有波动性，它与晶体相遇时能产生衍射现象，并证明了X射线的波动性和晶体内部结构的周期性，开创了x射线晶体学这一新领域。
当一束单色x射线入射到晶体时，由于这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有相同数量级，故能相互干涉，在某些特殊方向上产生X射线衍射，衍射线在空间分布的方位和强度，与晶体结构相关。
衍射线空问方位与晶体结构的关系可用布拉格(Bragg)方程表示：2dsinθ=nλ，式中d为晶面间距，θ为掠射角，n为反射级数，λ为x 射线波长。
5核磁共振(NMR)核磁基振(缩写为NMR)，是指核磁矩不为零的核，在外磁场的作用振能提供有关化学结构及分子动力学的信息，成为分子结构解析的一个有力工具。
核磁共振技术于1946年美国哈佛大学的波赛尔和斯坦福大学的布洛赫发现的，经过60多年的理论和技术上的发展，取得了非常惊人的成就，该领域已先后有6位科学家获得4次诺贝尔奖。
现在核磁共振技术己经广泛应用于物理，化学，医学，生物等多个领域。
尤其是现在用多核，多维核磁共振方法进行的生物大分子(蛋白质、核酸等)的三维空间构象和动力学研究更加引人注目。
近些年来，人们通过核磁共振或X射线晶体衍射技术解析了越来越多的蛋白质及其复合物的结构。
通过对这些结构的分析，人们对生物大分子架构，酶作用的活性位点，蛋白质与蛋白质相互作用的界面等有了更深入的了解。
但是，随着了解的加深，人们同时认识到仅仅对静态结构的了解并不足以解释蛋白质在生理过程中的作用机理。
因为三维空间的结构仅仅是基态的结构，而在生理过程中蛋白质分子更多的处于激发态，并同蛋白质分子的运动特性密切相关。
我们必须了解蛋白质分子结构随时间的变化，从而在分子的静态结构和动态结构间架起一座桥梁，这样才能最终揭示蛋白质分子结构与功能的关系。
6扫描电子显微镜扫描电子显微镜简称为扫描电镜，英文缩写为SEM(ScanningElectron Microscope)。