从妊娠识别角度谈牛的胚胎移植
牛借腹怀胎的技术
牛借腹怀胎的技术将经超数排卵处理并发情的良种肉牛的优秀母牛输精后，采集早期胚胎移植到生理状态相同的母牛(本地母牛、杂交母牛)子宫内，就是“借腹怀胎”，是繁育良种肉牛品种胎儿的一项新技术。
提供早期胚胎的母牛叫供体母牛，接受胚胎的母牛叫受体母牛。
一、胚胎移植的技术环节1、牛的选择。
选择的供体牛应具有产生更多的后代的能力，而且生殖机能应处于较高的水平。
牛产后2个月以上才宜作供体。
受体牛应选择体型较大、性情温顺的个体。
在实际生产中以本地牛、改良牛较适宜。
受体牛要加强饲养管理，移植前45天开始补饲，并单独组群饲养。
2、胚胎移植。
放牧型牛移植季节应选在8-11月份，舍饲牛应避开最冷最热的季节。
受体牛的发情鉴定要及时准确。
将冷冻胚胎细管解冻并装枪。
首先清除受体牛粪便，擦拭外阴部；操作者一手将移植枪插入阴门，至子宫颈外口；另一手插入直肠，把握子宫颈；缓慢地将移植枪送至子宫角前1/3至1/2处，慢慢推入钢芯。
3、妊娠诊断。
直肠检查法通常在移植后3个月开始。
对妊娠25天以上的受体牛可用超声波诊断法(B超)检查。
对已妊娠的受体牛要加强饲养管理，避免应激反应。
做好受体牛分娩前、分娩时及分娩后犊牛维护是保证前期工作成果的关键。
二、胚胎移植技术的用途1、快速扩繁优秀个体数量。
应用超数排卵技术1次平均可得5-6枚可用胚胎，移植后可生出2-3头后代。
1头奶牛，1年可超排4次，即可得到8-12头后代。
同时，应用胚胎冷冻技术，可以建立基因库，保存具有优良遗传特征的良种牛品种资源。
2、代替优良种畜的引进。
用胚胎代替活畜引种，运输极为方便，不仅可节约数额巨大的进口种畜的费用，还可避免疯牛病对国内畜牧业的危害。
3、快繁奶牛。
利用黄牛、杂种牛作受体，移植奶牛胚胎可快速扩繁纯种奶牛。
采用级进杂交改良的周期通常需15-20年，而利用胚胎移植则缩短为1年，效益巨大。
4、利用难孕或不孕的母牛繁育后代。
奶牛胚胎移植技术
奶牛胚胎移植技术上海交通大学农业与生物学院朱淑文一、概述牛胚胎移植的商业化应用开始于七十年代初期。
当时，必须通过手术方法才能采集胚胎，由于奶牛的乳房影响手术的顺利进行，手术后往往还会影响奶牛以后的繁殖性能，因此，胚胎移植主要在肉牛中应用。
1976年，一些研究小组报道了应用导管高效采集胚胎的非手术方法。
随后，胚胎移植在奶牛中的应用得到了飞速发展。
1974年，第一头胚胎移植登记荷斯坦奶牛在美国出生。
七十年代后期，胚胎移植（ET）登记荷斯坦奶牛的数量每年以100%以上的速度增长，1980年达到8298头年。
进入80年代后，随着非手术采胚法和移植技术的改进以及胚胎冷冻保存技术的发展，每年（ET）登记奶牛的数量在稳步增长，至1990年达到18727头年。
截止1991年，美国登记的胚胎移植荷斯坦奶牛总数量已达到142598头。
目前，44%的荷斯坦优秀种公牛是由胚胎移植培育的。
九十年代以来，胚胎移植在发达国家中的增长速度有所减缓，但是技术含量越来越高，例如体外受精胚胎生产技术、转基因技术以及克隆技术的应用和研究得到加强。
近几年来，胚胎移植在亚洲和南美一些国家中增长速度很快。
从整个世界范围来看，牛胚胎移植的增长速度仍然很快。
二、胚胎移植技术（一）体内受精胚的移植1 超数排卵在常规胚胎移植技术中，获得大量可用胚胎的主要途径是超数排卵（简称超排），因此，高效率的超排技术是胚胎移植技术能否在生产中推广应用的关键。
应用于奶牛的超排激素主要有PMSG（孕马血清促性腺激素）和FSH（促卵胞素）。
PMSG尽管只需一次性注射，省时省力，但是半衰期过长，可以导致卵巢的过度刺激以及对排卵、受精和随后的胚胎发育产生不利的影响，因此现在一般已不采用PMSG对奶牛进行超排处理。
目前广泛应用于母牛的超排激素是FSH。
用于奶牛超排的商品FSH均是从屠宰家畜的脑垂体中提取的，脑垂体不但能够分泌FSH，而且还能分泌LH，因此商品FSH制剂中都含较高水平的LH，不同厂家或同一厂家不同批次FSH制剂中的LH含量差异很大，所以商品FSH制剂的超排效果很不稳定。
牛胚胎移植技术在我国养牛业中的应用及前景
牛胚胎移植技术在我国养牛业中的应用及前景16HeilongjiangJoumalofAnimalReproductionV o1.10No.42002牛胚胎移植技术在我国养牛业中的应用及前景陈静波,窦忠英(西北农林科技大学畜牧兽医学院动物生殖内分泌与胚胎工程重点实验室,陕西杨凌712100)中图分类号:$823.36文献标识码:B文章编号:1005—2739(2002)04—0016—03动物胚胎移植(embryotransfer,El")是将一头优秀母畜配种后的早期胚胎用手术或非手术的方法取出,移植到另一头同种并且生理状态相同的母畜体内,使之继续妊娠发育为新个体的技术,所以也称为借腹怀胎或人工授卵.为了使供体母畜多排卵,通常要用促性腺激素处理,促使几个,十几个甚至更多的卵泡发育并排卵,因此国外将常规的胚胎移植常称为MOET(眦dDleonandEmbryoT_Fa/~e,r),即超数排卵胚胎移植或称为多排卵胚胎移植.目前科学技术的发展,用体外生产胚胎(ⅣP,invitroproduction)技术或克隆(cloning)技术等方法也可生产胚胎.由于牛经济价值高,属单胎动物,产仔数量少,繁殖周期长,用胚胎移植技术进行纯种扩群繁殖速度快;用于黄牛改良,一代即可换种;同时牛繁殖无季节性,又可全过程进行非手术操作,供受体牛可反复使用,因此牛的胚胎移植技术应用价值高.这项技术可以极大地增加优秀母牛的后代数,在目前我国养牛业处在高产奶牛,纯种肉牛数量较为紧缺的形势下,具有重要的推广应用价值.本文将简要介绍这项技术在我国养牛生产中的发展应用概况, 并简述这项技术的用途,推广中需考虑的因素和应用前景.l我国牛胚胎移植的发展情况从20世纪70年代后期牛胚胎移植研究开始到9o年代中期前的推广应用,我国牛胚胎移植工作主要是用高产荷斯坦奶牛作为供体牛,低产牛,本地牛或杂交牛作为受体,用黄牛产奶牛,低产牛生高收稿日期:2O02—09—30作者简介:陈静波(1956一),男,研究员.现工作单位新疆畜牧科学院新疆天康畜牧生物技术股份公司胚胎生物工程事业部Ermil:j@产牛后代."九五"期间我国肉牛业的兴起,肉用种牛及胚胎的引进,使肉牛胚胎移植数量逐渐增加并超过了奶牛数量.近两年全国乳品加工能力的快速增长和消费市场的扩大,对奶牛的需求急剧增加,奶源短缺,牛价飞涨,奶牛胚胎移植掀起了前所未有的热潮,为牛胚胎移植提供了良好的市场环境.牛胚胎移植技术成为增加奶牛数量,发展优质高产奶牛群的有效和重要途径.我国前几年每年实际移植牛的数量在5000头次以上,今年有希望突破万头次.全国牛胚胎移植在肉牛稳步发展的同时,各地又纷纷将牛胚胎移植的重点转向奶牛,牛胚胎移植在养牛业中的应用空前高涨,正在向产业化迈进.表1我国牛胚胎移植发展情况年度处理供体牛数移植受体牛数犊牛数(每头次'一(头.次/年)(头.次/年)供体牛处理)*本表所列数据是根据有关资料报道和信息的统计与估计. 2在养牛生产中的用途牛胚胎移植技术在牛繁殖和育种生产中用途广泛,主要可用于如下几个方面:2.1用于生产种畜和纯种牛扩群繁殖,增加进口纯种牛或国产优秀个体的后代数.用低产牛产高产牛后代,提高群体的遗传品质和生产性能.2.2用于育种改良计划,加速遗传进展.如在奶牛育种中采用NOEl?技术方案,可缩短世代间隔,加速品种改良.2.3黄牛产奶牛,一代换种.纯种牛的胚胎移植给黄牛受体,可将15～20年的改良周期变为1年,大黑龙江动物繁殖第l0卷第4期2(102年l7幅度地提高了牛改良的效率,增加了纯种牛的群体数量.我国有繁殖母牛数千万头,大多数都需要改良,用当地的土杂种牛资源直接繁殖市场紧缺的奶牛和肉牛品种,在生产上效益显着.2.4移植产双胎,提高生产效率.在肉牛生产中,给受体母牛直接移植两枚全胚或半胚,或者配种后移植l枚全胚或半胚,可生产双胎;在种牛和奶牛生产中,对受体牛同时移植两枚经过性别鉴定的胚胎或分割后的两枚半胚,可获得30%以上的双犊率,还避免了异性孪生不育.2.5用胚胎进出口取代活畜的引进和出口,经济,方便,安全.近些年我国应用较多,但是由于国际上疫情严重,要满足国家检疫条例的规定,在实施中有一定的难度.2.6用于难孕畜的诊断和治疗或用优质难孕母畜生产胚胎移植后代.2.7其它胚胎工程技术应用的必须手段.可用于牛胚胎分割和体外生产胚胎的移植和乳腺生物反应器的研究.经过性别鉴定的胚胎可以生产理想性别的犊牛,增加母犊率.这项技术虽然用途广泛,优点很多,但与人工授精技术相比,有操作环节多,成本高,前期投资多的缺点.3推广应用中需考虑的问题3.1工作条件和组织工作从技术实施的角度来说,开展胚胎移植工作只要有供体母牛或已制作好的胚胎,一定数量的受体母畜,技术人员和设备即可操作.胚胎可以购买国产或进口的优秀牛胚胎,也可以用自己牛群最优秀的5%～10%的个体生产胚胎.各品种优秀种公牛的冷冻精液在国内市场供应充足.受体牛在我国十分丰富,是一笔待开发和利用的宝贵资源.我国已培养了一批技术熟练地骨干. 一位熟练的技术人员和助手在牛群较集中的情况下, 每天可移植30～50头,一年即可移植数干头次.但是,目前多数地方的组织工作并不理想,工作点分散,可用牛只少,工作效率低,1人1年仅可移植数百头,致使技术人员短缺,技术力量不足.牛胚胎移植的专用设备不复杂,容易购置,尤其是鲜胚移植,专用仪器和器械还可流动使用.综上所述,开展这项工作的技术条件比较容易满足.但是要把它应用到生产实践中去,却是个非常复杂的问题.工作的时间性强,对组织工作要求相当高.从某种意义上说,组织工作比技术工作的难度更大.在我国牛胚胎移植市场潜力很大,但现实的市场还需要开拓.3.2牛胚胎的选择目前市场上的牛胚胎来源广泛,有国外生产的进口胚胎,但更多的是国产胚胎.从生产胚胎采用的技术上分有体内胚胎和体外胚胎; 从胚胎的保存形式上分有新鲜胚胎和冷冻胚胎.目前牛体外法生产的胚胎已可达到40%以上的受胎率,这项技术是扩大胚胎来源和降低成本的有效途径,尤其是结合活体采卵技术,可以极大地提高供体母牛的胚胎生产效率.采用鲜胚移植与冻胚移植各有利弊(见表2),为了保证移植的受胎效果,在有条件的地方最好采用鲜胚移植方法.表2鲜胚移植与冻胚移植的比较牛胚胎的品种选择也很多,由于各级政府加大了家畜种子工程的投入,一些企业也投资发展纯种奶牛和肉牛,现在国内的优良供体牛品种应有尽有, 有美国,加拿大,澳大利亚及中国的荷斯坦奶牛,有乳肉兼用的西门塔尔牛和新疆褐牛,有小型肉用母本品种牛安格斯牛(黑色或红色),海福特牛,还有大型或杂交父本品种夏洛来牛,利木赞牛,德国黄牛,皮尔蒙特,比利时蓝白花等品种,各地可根据发展养牛的目的和需要选择,发展专用的纯种牛种群.如果仅为了提高后代牛的生产性能,降低胚胎移植成本,可以选择分布较广的荷斯坦母牛作母本,选用理想公牛品种的冷冻精液生产两个优秀品种牛的杂交后代.3.3受体母牛选择的策略受体牛与供体牛在遗传和生产性能上相差越大,在牛改良上意义越大;两者市场价格相差越大,牛胚胎移植技术的经济回报越好.在选择受体母牛时,我们还需要考虑总体效益.利用当地土杂种母牛作受体,一代换种,改良效果显着,在农牧区农户饲养时,成本低,投入少;但是如果是舍饲集中饲养,则成本较高.在市场价格正常的情况下,如果选择高代杂交荷斯坦等乳用l8Heilong/iangJournalofAnimalReproductionV o1.10No.42002 品种母牛做受体,虽然投入高,但是产出多,产奶增收或生长增值,饲养成本被抵消.母牛的产奶量足以养活自己,并可有盈余.3.4技术推广难点牛胚胎移植推广中超数排卵,采卵,受体牛选择,受体牛同期发情和发情鉴定及非手术移植技术需要经验,培养一个熟练的技术人员需要2～3年的时间.本项技术的操作对卫生和无菌要求也较高.由于技术环节多,环环相连,一个环节的失误将导致整个操作过程的效率下降和失败.3.5技术水平在正常的条件下,一般新鲜胚胎的妊娠率为55%～70%,与母牛第一情期人工授精的受胎率相同;冻胚妊娠率45%～6o%,冻胚比鲜胚低约10%.在生产中推广牛胚胎移植技术时,影响成功率的因素除了操作技术人员的技能和经验外,受体牛的选择和管理也十分关键.这在我国农牧区移植时尤其如此,受体牛必须健康,有正常的繁殖力和发情周期,并且发情天数与供体牛或胚龄相同.在我国农牧区的条件下,由于营养状况和饲养管理条件的影响,利用当地黄牛做受体,受胎率通常低约5%～10%.4胚胎移植技术的市场及前景虽然牛的胚胎移植技术应用的效率还有待提高,但常规胚胎移植技术已经成熟.我国养牛业的发展和牛胚胎工程技术研究的深入为胚胎移植技术提供了广阔的市场和美好的前景.牛胚胎移植技术在我国近年的推广应用经过几次反复后,目前发展较快. 牛胚胎已作为商品进入市场经济之中,在生产中显示出越来越大的作用.我国养牛业处在蓬勃发展阶段,有适龄繁殖母牛5000余万头,绝大多数是遗传品质较差的土种和低代杂种黄牛,高产优质牛数量有限,品种改良,迫在眉睫.对牛胚胎移植技术的需求急剧增加,在全国多个省区掀起了推广应用的热潮,今年有望突破万头次移植,并在近年发展到30000～50(130头/年的规模,将来有可能作为一项常规繁殖技术,在条件较好的地区,象家畜人工授精那样被逐渐推广.此外,与牛胚胎移植技术有关的胚胎分割技术,牛活体采卵技术,包括有卵母细胞体外成熟,体外受精和体外培养的体外生产胚胎技术,胚胎性别鉴定技术的方法也已建立并逐渐成熟.用这种配套技术体外生产的优质胚胎不久将供应市场,缓解优质高产牛胚胎紧缺的情况.牛胚胎工程配套技术的建立将解决我国缺少专门的肉用品种的问题,减少价格昂贵种牛的进口,大大降低成本,提高胚胎移植效率,市场前景广阔.牛胚胎移植及有关技术将在我国畜牧业的发展中,尤其在养牛业中发挥重要作用.来稿摘登?母猪子宫内膜炎的防治母猪子宫内膜炎是由于配种,人工授精及阴道检查消毒不严,难产,胎衣不下,子宫脱出及产道损伤后,由细菌(双球菌,葡萄球菌,链球菌,大肠杆菌等)侵入引起的一种母猪生殖器官疾病.临床表现为阴户流脓,体温升高,不发情或发情不正常,屡配不孕等,最终因丧失生产能力而被淘汰.该病是种猪场比较常见的一种产科病,务必进行有效防治.1在母猪分娩前用1%高锰酸钾清洗阴户,在母猪分娩结束时注射3mL催产素或1mL律胎素,以保证子宫内残余物排尽.2分娩后注意观察,一旦发现有阴户流脓现象,应及时选择l%盐水,0.02%新洁尔灭或0.1%高锰酸钾溶液用子宫洗涤器冲洗子宫,每天1次,每次每头母猪200mL,等阴户排出的液体透明无脓时,再向子宫内一次性注入240万IU青霉素和100万IU 链霉素.3对慢性子宫内膜炎或病情较重者,单独或同时进行全身疗法.可选用青霉素每次160万IU,配合链霉素每次100万IU进行注射,每天2次;亦可用磺胺类药物如磺胺嘧啶钠,按0.05～0.1g/'妇体重肌注或静脉注射,每天2次;或金霉素,土霉素按40n妇体重肌注,每天2次.4人工助产前,应将手及用具逐一用0.05%消毒威或0.1%新洁尔灭浸泡.分娩结束后再向子宫内注入青霉素160万IU和链霉素100万IU,防止在助产时产道受损感染.5对子宫内膜炎发病较轻的猪,在所有母猪分娩结束后注射160万IU青霉素进行预防处理.薛志成(辽宁省辽中县南门街6号,110200)。
牛胚胎移植
牛胚胎移植技术操作规程评论本文章来源：青海畜牧兽医杂志更新时间：2003-1-9 11:58:00点击数： 2278文王统华，张宝文，张国仓，王文奎（青海省大通县草原站，桥头镇，810100）摘要：牛胚胎移植技术，已开始应用于牛的改良和品种引进中，是养牛业今后必须采用的一项新技术之一。
关键词：牛；胚胎移植；规程中国分类号：S814．6 文献标识码：C 文章编号：1003－7950（2002）06－0044－02 牛的胚胎移植，在操作过程中技术要求高，通过我县牛胚胎移植技术的推广，现将牛胚胎移植技术操作规程介绍如下，供参考。
1 主题内容与适用范围1．1 本规程规定了牛胚胎移植技术操作的基本原则、要求和方法。
1．2 本规程适用于牛胚胎移植技术推广应用的规范化操作。
1．3 本规程应用冻胚进行牛胚胎移植。
2 受体牛的选择标准2．1 年龄在3～8岁，健康，无疾病，体格较大，膘度好。
2．2 繁殖性能正常，产后60d以上，并有两次以上的正常自然发情记录。
2．3 泌乳性能好，无难产史，不使用两次人工受精未孕的牛。
3 受体牛的饲养管理3．1 做到精心管理，合理饲养，环境清洁，饲草、饲料、饮水要新鲜，补充食盐和必要的添加剂。
3．2 组成一定数量的牛群。
圈舍内防止过挤，以便于发情观察。
3．3 农户长期舍饲的母牛要注意加强运动。
3．4 防止在移植前后因饲料及环境改善造成的应激反应。
4 受体牛的同期发情4．1 使用前列腺素（PGF2α）一次肌注，诱导发情。
给处于情期8～15d且直肠检查黄体的受体牛一次注射PGF2α。
4．2 两次PGF2α处理。
在不考虑发情周期的情况下，可间隔11d,前后两次肌注PGF2α。
5 发情观察原则上根据母牛接受爬跨确认为发情、早、晚各观察30min发清情况。
对发情牛需做直肠检查，以确认卵泡，次日上午或晚上做直肠检查确定是否排政若在发情后36h以后排卵的牛不能用作受体牛。
6 冷冻胚胎的解冻6．1 三步平衡法冻胚的解冻6．1 解冻液的配备：将10％、6％和3％甘油的PBS（培养液）保存液，用0．22／m滤器灭菌，分装在小培养皿内，第1杯为含10％甘油的PBS保存液，第2杯为含6％甘油的PBS保存液，第3杯为含3％甘油的PBS保存液，第4杯为不含甘油的PBS保存液。
良种奶牛胚胎引进分析报告.doc
良种奶牛胚胎接种分析报告牛胚胎接种概念牛胚胎移植是指将已经培育好的牛胚胎用液态氮冷冻罐贮藏起来，在试验室里解冻后在显微镜下进行分离，然后再移植到受体母牛的体内。
这种方法的优点在于，它能够使外国优质奶牛品种的特性在本地得以完全保留，优化奶牛品系，提高出奶率。
中国传统的育种方法是进口少量的种公奶牛，经杂交数代将黄牛或肉牛转变成奶牛。
这也就是常说的"黄牛杂交改良"。
这样的方法有几个不可克服的缺点：进口成体种奶牛的价格很高，运输不方便，同时受到一些法规政策的限制，如隔离检疫等；数代杂交周期约需10年或更长时间；与黄牛或肉牛的杂交后代相对的产奶量要低得多，不如纯种的高，也不适合作进一步的配种繁殖；所引入的奶公牛一般只是国外的一般性公奶牛，在此基础上得到的后代最好也只能达到国外的一般水平，实际上往往达不到原始公奶牛的水平。
这些原因也就是为什么这么多年来中国一直在进行黄牛杂交改良的工作，奶牛产量却总是赶不上世界水平的根本所在。
要彻底解决这个问题，就需要借助现代繁育技术的帮助。
胚胎接种技术就是解决这个问题的良药。
胚胎技术简介1.体外胚胎生产这就是人们常常提到的试管婴儿。
对奶牛而言，经过约290天的怀孕期，小牛就会诞生了。
应用这项技术，可以大规模的生产优质奶牛胚胎，以提高广大农户的奶牛品质。
2.超排卵及胚胎移植技术该技术首先使用促性腺激素对高品质奶牛进行超排处理，然后使用顶尖公牛的精液对这些已超排的奶牛进行人工受精。
受精后7天，通过非手术办法将体内发育的胚胎冲出。
这些胚胎进而被分散移植到一些产奶量一般的母牛体内，或者迅速冷冻以备后用。
目前，每年全世界进行约50万例胚胎移植，其中40％在美国进行。
尽管超排卵和胚胎移植技术可以用于改进奶牛品质，但由于其仍然使用体内受精的方式，费用和人工都相当大，不可能成为快速提高奶牛数目的有效方法。
3.克隆核移植该技术证明了任何细胞类型，包括过去认为绝不可能的已分化了的细胞都可以通过克隆技术恢复其全能性，发育成为健康的个体，而该个体和供体细胞拥有完全相同的遗传物质（DNA），也就是说，使用一个成年动物的细胞可以复制这个动物。
牛品种改良胚胎移植技术
畜禽养殖科学 | livestock science392020.20·0 引言牛胚胎移植手术能充分挖掘优良母畜的繁殖潜能，同时还能缩短育种周期，加快遗传进展，克服母处不孕不育症，降低引种费用，增加养殖效益，减少传染性疾病发生。
我国关于牛胚胎移植技术的研究起步相对较晚，各项技术环节还处于探索阶段，技术体系还不是很成熟。
因此有必要加强先进胚胎移植技术的推广应用，转变传统育种模式，以此提升育种效果，缩短育种周期，提高养殖效益。
1 供体受体选择和同期发情处理1.1 供体牛选择和同期发情处理供体牛应具备该牛品种典型的外貌体型特征，生产性能优良，具有稳定的遗传特性，并且系谱清晰，身体健康，不存在传染性疾病和生殖系统疾病。
供体牛身体健康，繁殖机能正常，有2次以上的正常交配纪录。
供体牛应饲喂优质的饲草饲料，胚胎采集前后应保证良好的饲养条件，不能任意变换饲喂程序和饲料配方，保持牛中等以上膘情。
供体牛超排卵在自然发情的第9～13天进行。
发情当天为第0天，在发情后的第9～13天肌肉注射FSH ，每间隔12 h 注射1次，采用4 d 减量注射。
随后对供体牛进行人工受精，精液质量符合GB4143，人工受精操作技术规程，参照NY-T1335执行。
1.2 受体选择和同期发情处理受体牛年龄在3～6岁，体重控制在550 kg ，身体高大，性情温顺，生长发育正常，膘情中等，以上身体健康，不存在传染性疾病，没有流产史。
母牛繁殖机能正常，前一胎不存在难产和人工助产情况，为1～3胎的经产母牛，具有良好的泌乳性能。
根据供体牛的数量确定受体牛的数量，情况下供体牛和受体牛按照1∶5或1∶6的比例搭配。
胚胎移植前2个月补充精饲料，移植前1个月注射维生素A 、维生素D 、维生素E ，补充微量元素。
受体牛选择使用前列腺素法或阴道栓法进行同期发情处理[1]。
选择第1种方法时，可以直接给黄体发育良好，且处于发情周期黄体期的受体牛肌肉注射前列腺素（PGF2）每头牛臀部深部肌肉注射2.4 mg ，受体牛注射激素比供体牛提前0.5～1 d 。
牛胚胎移植简介
2．超排处理方法 在母畜发情周期的适当时 期，利用外源性促性腺激素处理，增进卵 巢的生理活性，诱发许多卵泡同时发育成 熟并排卵。
（1）母牛 在发情周期的第16或17天肌肉或皮下注
射PMSG1500－2000IU。该方法是按照发情周期的规 律，在黄体期即将结束，卵泡期即将来临前，顺势 促进较多的卵泡生长和成熟。这种超排方法必须和 发情周期的进程配合好，所以在时间安排上受到限 制，应用很不方便。另一种方法是在发情周期的中 期，在注射促性腺激素的同时，注射或子宫灌注 PGF2a 或其类似物以溶解黄体。一般是在发情周期 第10～13天内进行。具体做法是在注射PMSG后，隔 日肌肉注射PGF2a或5～10mg，或子宫灌注 PGF2a2～3mg。如用FSH，则连续注射4～5天，每 天两次，总剂量为30～40mg（国产品400～500大鼠 单位），在第5次注射FSH的同时注射PGF2a。
收集胚胎的冲洗液可不含牛血清白蛋白， 培养和保存时则需加入，或以胎犊血清代 替。血清白蛋白的含量一般为0.3～1％，犊 牛血清需在56℃时持续灭活30分钟，冲卵 液、培养液中血清的含量一半分别为5％、 10～20％。
（五）胚胎的检查
胚胎的检查包括两个过程，一是检胚，二 是胚胎鉴定。检胚时须将收集到的冲卵液 静置10分钟，等胚胎下沉后移去上层液， 直接活吸取底部液体，然后置于实体显微 镜下检胚。检到的胚胎应及时移入含有20 ％犊牛血清的PBS培养液中进行鉴定。胚胎 鉴定的方法有以下几种。
(二)超数排卵处理
在母畜发情周期中的适当时间，注射促性 腺技术，是卵巢上有比自然生理状态下更 多的卵泡发育并排卵，这种方法称超数排 卵（Superovulation），简称超排。
奶牛胚胎移植技术要点及应用前景
Cow Reproduction and Management奶牛胚胎移植技术要点及应用前景操礼军1，汪 晖2，杜婷婷1，刘 莉1*，胡永青1*1 新疆畜牧科学院畜牧业质量标准研究所，新疆乌鲁木齐 8300002 新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，新疆乌鲁木齐 830000摘 要：胚胎移植方案增加了遗传改良并缩短了世代间隔。
因此，胚胎移植作为一种有利的技术，有助于在短时间内实现遗传进步和增加有价值的育种者数量。
牛胚胎移植技术涉及供体和受体动物的选择和管理，以及胚胎的收集和移植。
在牛中使用胚胎移植的主要目标是提高有价值的雌性的繁殖率。
因此，有价值的雌性的后代数量增加到至少比正常情况下高出5 倍的水平。
体内胚胎生产的阶段包括供体动物和受体动物的选择，所选供体和受体的发情周期的同步，诱导超排卵和随后的供体授精，收集（通过子宫冲洗），胚胎的评估和移植。
牛胚胎移植计划的成功和经济取决于多种因素：在任何胚胎移植计划中，使用高质量的精液和高比例的正常运动细胞是非常关键的一步；转移的对象必须是与供体处于同一周期的受者；受赠者必须具有经证实的生殖能力，无先天性或传染性疾病，以获得高受孕率，并具有健壮的体型，以避免难产问题。
目前胚胎移植已广泛应用在遗传改良、种畜繁育和保种、疾病控制、基因工程研究等方面。
随着技术的发展，胚胎移植必将在实际生产中发挥更多的应用价值。
关键词：奶牛；胚胎移植；应用；前景文章编号：1671-4393（2023）09-0074-06 DOI:10.12377/1671-4393.23.09.120 引言在畜牧业中，胚胎移植技术已成为动物学家和育种学家改善畜群遗传，并迅速增加优良畜种的有力工具，目前已广泛应用在遗传改良、种畜繁育和保种、疾病控制、基因工程研究等方面。
具体到牛上，胚胎移植技术是指将一头良种母牛配种后的早期胚胎取出，移植到另外一头或数头同种的、生理状况相同或相似的母牛生殖道的适当基金项目：自治区重大科技专项-新疆奶业创新项目（2020A01001-4-3-1）作者简介：操礼军（1973-），男，安徽桐城人，本科，高级畜牧师，研究方向为遗传育种；汪 晖（1986-），女，新疆乌鲁木齐人，本科，实验师，研究方向为农产品品质检测与评价；杜婷婷（1997-），女，新疆奎屯人，硕士，研究方向为食品营养与安全。
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从妊娠识别角度谈奶牛的胚胎移植
胚胎移植是利用外源激素使生产性能优良、具有优秀的遗传基因的个体短时间内大量生产胚胎，并移植到同种的生理状态相同的母畜体内使其建立妊娠并产子的技术。
我国优秀高产母牛的缺乏制约着我国奶业的发展，所以以优秀高产奶牛为供体，利用胚胎移植来扩大优良生产群体，从而加快我国奶牛的育种速度，对我国奶牛业的快速发展具有重要意义。
在奶牛的胚胎移植的生产实践中，移植后的胚胎受胎率不够理想，导致成本较高使其的推广应用有较大的难度。
影响胚胎移植成功率的因素是多方面的，由胚胎自身的状态（胚胎的质量、来源、胚龄、发育潜力）、受体牛的状况（同期发情程度、黄体发育状况、子宫卵巢生理状况、营养健康状况）及人为因素（操作人员的操作技术、移植季节）等因素构成。
其中，体内或体外生产的胚胎在移植到受体体内时，妊娠的识别和建立对胚胎移植成功率有决定性的影响。
妊娠的维持是需要高水平的血液孕酮浓度来保证的，从而使子宫内膜保持有利于胚胎存活的状态，这就需要发情母牛体内周期性黄体向妊娠黄体的转换，使黄体不会退化萎缩的过程便是妊娠识别的过程。
妊娠的识别的开启是移植胚胎进行再发育生长的重大转折点，是由多种细胞生长因子协同作用完成的。
1 囊胚发育对妊娠识别的影响
奶牛的胚盘会在受精后的8~10天从透明带中脱离形成囊胚，其由形成个体的内细胞团和包被细胞团的滋养层构成，其中滋养层会形成管状结构，抵御子宫内环境的侵害，随着胚胎的生长，滋养层沿着子宫内膜上的子宫阜逐渐形成绒毛，在子宫与胚胎的识别过程中，子宫会识别胎盘细胞并在特定的部位形成绒毛最后形成子叶，从而达到妊娠的建立。
在胚胎着床的初期，滋养层对子宫上皮的入侵是胚胎附着的重要环节，并且金属蛋白酶（MMP）和金属蛋白组织抑制因子（TIMP）是被认为有抑制和调节囊胚滋养层向子宫浸润的两种调控因子。
因此，在胚胎移植中所要移植的胚胎要求囊胚发育形态要好，其滋养层细胞发育充分，对移植后的妊娠的识别和建立具有重要作用。
2 调控妊娠识别和着床的各种细胞生长因子
胚胎在体内与母体的信息交流是通过各种细胞生长因子并构造信息通路进行的，它们通过直接参与识别着床过程或诱导其他细胞生长因子的分泌间接参与识别着床过程，并且它们相互配合，共同调控妊娠的建立。
2.1 干扰素-t
干扰素-t（INF-t）是奶牛母体妊娠识别中起核心作用的细胞生长因子之一。
INF-t由生长期的胚胎滋养层所分泌，可以引起子宫内膜上皮前列腺素F2α（PGF2α）分泌模式的改变，从而间接抑制黄体的退化，开启妊娠识别。
而且其在着床开始分泌量达到高峰再下降，在妊娠的建立过程中起重要作用。
2.2 转化生长因子-β
转化生长因子-β（TGF-β）在细胞增殖、转移、分化和对细胞外基质的调控方面起重要作用。
TGF-β具有抑制MMP,诱导TIMP的作用，对人的胚胎具有抑制滋养层增殖、诱导分化的作用，在奶牛体内也发现了TGF-β的存在，可以认为其参与妊娠的识别和建立过程。
2.3 其他因子
在妊娠母畜体内发现的白血病抑制因子（LIF）、巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素（IL）、肿瘤坏死因子（TNF）等都有相关报道阐述对胚胎早期妊娠识别和着床的影响。
在奶牛妊娠识别和以后的妊娠建立时，需要有发育完善的囊胚和各种细胞分裂因子、激素、附植因子等共同参与、配合，才能产生以后的着床、胎盘形成等生理现象。
在妊娠识别的过程中，要求胚胎与母体子宫的发育是同步的，并且移植入相应的位置才能确保胚胎与母体妊娠信号通路的建立和开启。
在对奶牛胚胎移植的操作技术和移植所需的生理生化条件了解之后，再进行胚胎进入子宫后妊娠信号的发出以及受体母畜妊娠信号的接收的相关机制的研究是十分必要的，可以根据已知的妊娠信号的生物因子追根溯源将其的基因调控片段在基因组中进行定位，并进行相应基因的克隆并测序，以至于可以从分子层次（相关基因的启动）方面进行胚胎发育机理的探讨，从而逐渐掌握妊娠识别机制，通过人工控制体内和体内胚胎发育环境使胚胎移植的受胎率得到提高，同时，这也将有利于早期胚胎发育机理的理论的阐明，对胚胎工程技术的发展起着巨大的推动作用。