总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求zhongshengbeikong
总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：本产品与ABBOTT ARCHITECT c4000/c8000/c16000全自动生化分析仪配套使用，用于体外定量测定人血清中总蛋白的浓度。
1.1包装规格液体单剂型（液体Ⅰ型）试剂（R）：60mL×4；试剂（R）：80mL×4。
1.2主要组成成分试剂（R）（液体）氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mmol/L碘化钾20mmol/L硫酸铜12mmol/L2.1 外观试剂（R）应为蓝色溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在波长546nm（540nm～560nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤0.200。
2.4准确度测定尿素、尿酸和总蛋白复合冰冻人血清国家标准品（编号：360012），相对偏差应不超过±5%。
2.5分析灵敏度对应于浓度为60g/L的TP所引起的吸光度差值（△A）的绝对值应在0.100～0.500的范围内。
2.6重复性重复测试高、中、低浓度样本，变异系数（CV）应≤5%。
2.7批间差测定同一样本，批间差（R）应≤6%。
2.8线性范围在[2，100]g/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在(30，100]g/L范围内，线性相对偏差应不超过±10%；在[2，30]g/L范围内，线性绝对偏差应不超过±3g/L。
2.9试剂稳定性2.9.1试剂效期稳定性：原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为36个月。
试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
2.9.2开盖稳定性：开盖后，在2℃～8℃避光保存，稳定期为30天；稳定期满后1天内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求shouyi
总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）
适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。
1.1产品规格
4×100mL；6×60mL；8×50mL；2×100mL
1.2产品组成成分
NaOH 600mol/L，硫酸铜12 mmol/L，酒石酸钾钠32 mmol/L。
2.1 外观
试剂为淡蓝色透明溶液。
2.2 装量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度
A≤0.15（光径1.0cm，波长540nm）。
2.4分析灵敏度
测定57.2g/L被测物时，吸光度变化在0.1631～0.2075范围内。
2.5 准确度
相对偏差应不超过±5%。
2.6 精密度
2.6.1 重复性
变异系数CV＜3%。
2.6.2 批间差
批间相对极差＜3%。
2.7 线性区间
a）（0，100]g/L。
在规定的线性区间内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）应不低于0.990。
b）（0，30]g/L区间内，线性绝对偏差应不超过±3g/L；（30，100]g/L 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性
原装试剂2～8℃避光保存，有效期18个月，有效期满后两个月内测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
SH0001总蛋白测定SOP
总蛋白液体测定(双缩脲法)Total Protein (TP)1检验目的本试剂盒用于体外定量测定人血清或血浆总蛋白。
2方法双缩脲比色终点法。
3原理在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。
显色强度和蛋白浓度成正比。
4 标本血清或血浆。
稳定性：20～25℃保存可稳定6天，4～8℃保存可稳定4周，-20℃保存至少可稳定1年。
不可使用已被污染的标本。
5 试剂5.1在测定时的各组分和浓度试剂1（R1）：氢氧化钠80 mmol/L酒石酸钾钠12.8 mmol/L试剂2(R2)：氢氧化钠100 mmol/L酒石酸钾钠16 mmol/L碘化钾15 mmol/L硫酸铜 6 mmol/L5.2试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻！标准品避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
6 仪器OLYMPUS AU400全自动生化分析仪7测定程序见参数表8 校准品和质控品8.1使用Roche公司提供的Roche多项目定标液对自动分析仪进行校准。
每批样品检测时，使用Roche 公司提供的Roche定标液和控制品进行内部质量控制。
8.2质控物的保存和稳定性：质控物存放于4-8℃可保存一个月，分装存放于-20℃至有效期。
8.3室内质控规则：X±2S为警告线, X±3S为失控线。
8.4 不准确度允许范围：X±10%8.5不精密度：RCV：4.0%9 性能特性9.1病人结果可报告范围本法对总蛋白的检测范围为0.5～150 g/L。
当样品测定值超过上限时，应将样品用9 g/L氯化钠溶液作1+ 1稀释，重新测定，结果乘以2。
9.2特异性/干扰当样品中抗坏血酸浓度≤ 1704 μmol/L，胆红素浓度≤ 684 μmol/L，血红蛋白浓度≤ 5.00 g/L，甘油三酯浓度≤ 11.3 mmol/L时没有观察到干扰。
9.3灵敏度/检测限本试剂的检测限为0.5 g/L。
总蛋白测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求ruizhengshanda
总蛋白测定试剂盒（双缩脲法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中总蛋白的含量。
1.1产品型号/规格及其划分说明1.2主要组成成分2.1外观2.1.1 外观（液体单试剂）.R应为蓝色透明溶液，无混浊，无未溶解物；.校准液应为浅黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物；.试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.1.2 外观（液体双试剂）a）R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物；b）R2应为蓝色溶液，无混浊，无未溶解物；c）校准液应为浅黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物；d）试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量R和校准液的净含量不少于标示值。
R1、R2和校准液的净含量不少于标示值。
2.3 试剂空白吸光度在主波长540nm, 副波长700nm处（光径1cm），试剂空白吸光度A≤0.20。
2.4分析灵敏度测量1g/L的被测物时，吸光度变化△A≥0.0010。
2.5 线性区间在[10，110]g/L线性范围内，线性相关系数r≥0.990。
在[10,20]g/L范围内，绝对偏差不超过±2g/L；在(20,110]g/L范围内，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1 重复性重复测定(45±5)g/L、(70±10)g/L和 (100±10)g/L的样品，变异系数CV%≤5%。
2.6.2 批间差相对极差≤5%。
2.7 准确度测定标准物质BW3627-2，测定值与靶值的相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性原包装的试剂盒在（2～8）℃避光保存，有效期为18个月。
试剂盒在规定的储存条件下保存至有效期满后，检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
总蛋白测定(双缩脲法)SOP
q 总蛋白测定（双缩脲法）SOP1.原理：所有蛋白质分子都含有肽键。
在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成蓝紫色的化合物。
蓝紫色化合物在546nm(540nm-560nm)处的吸光度与肽键的数量成正比关系，依次可以计算蛋白质的含量。
2.方法：双缩脲法3.试剂：总蛋白试剂其含量为氢氧化钠0.6mol/L酒石酸钾钠32mol/L碘化钾20mol/L硫酸铜12mol/L4.储存条件及有效期：（1）原包装试剂在2℃-8℃避光贮存，有效期36个月。
（2）试剂开盖后在2℃-8℃避光保存，稳定期30天。
5. 样本要求：（1）样本种类：新鲜无溶血血清。
（2）样本采集：取空腹静脉血 3.0ml，置于带分离胶试管中，标本采集后，3000r/min离心5min，分离血清，立即密封送检。
（3）样本干扰：对反应吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果，遇上述情况建议重新采集。
（4）样本保存：密封无蒸发条件下样本2℃-8℃可稳定3天。
6. 检验步骤：（1）开生化仪见生化仪的SOP。
（2）操作步骤：参数设置；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；结果审查；报告。
a.参数设置b.试剂装载每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，不同批号的不能混用。
c.校准换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。
d.质控在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，做质控。
e.样本装载样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。
f.测定g.结果审查h.报告7. 参考值55-85g/L8 .临床意义：+(1) 血清总蛋白浓度增高a.血清中水分减少，而使总蛋白浓度相对增高。
凡体内水分的排出大于水分的摄入时，均可引起血浆浓缩，尤其是急性失水时（如呕吐，腹泻，高热等）变化更为显著，血清总蛋白浓度有时可达100-150 g/L。
双缩脲法测定血清总蛋白实验报告
双缩脲法测定血清总蛋白实验报告一、实验目的1、掌握双缩脲法测定血清总蛋白的基本原理和操作方法。
2、熟悉分光光度计的使用。
3、了解血清总蛋白测定的临床意义。
二、实验原理双缩脲试剂是由硫酸铜的碱性溶液与酒石酸钾钠的碱溶液混合而成。
当含有两个或两个以上肽键的化合物与双缩脲试剂反应时，会形成紫红色的络合物。
由于蛋白质分子中含有多个肽键，其在碱性溶液中能与双缩脲试剂产生紫红色的反应，颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。
通过比色法测定反应后溶液的吸光度，与标准曲线对照，即可计算出血清中总蛋白的含量。
三、实验器材与试剂1、器材分光光度计恒温水浴箱移液器试管刻度吸管2、试剂双缩脲试剂：称取硫酸铜（CuSO4·5H2O）15g 和酒石酸钾钠60g，分别用蒸馏水溶解后，混合并定容至 1000ml，在室温下放置可长期稳定。
蛋白标准液（60g/L）：准确称取干燥的牛血清白蛋白 60g，用生理盐水溶解并定容至 100ml。
待测血清样本四、实验步骤1、标准曲线的绘制取 6 支干净的试管，编号 1-6，按下表加入试剂：｜试管编号｜ 1 ｜ 2 ｜ 3 ｜ 4 ｜ 5 ｜ 6 ｜｜：：｜：：｜：：｜：：｜：：｜：：｜：：｜｜蛋白标准液（ml）｜ 0 ｜ 02 ｜ 04 ｜ 06 ｜ 08 ｜ 10 ｜｜生理盐水（ml）｜ 10 ｜ 08 ｜ 06 ｜ 04 ｜ 02 ｜ 0 ｜｜双缩脲试剂（ml）｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜摇匀后，置于 37℃水浴中保温 30 分钟。
以 1 号管为空白对照，在 540nm 波长处，用分光光度计测定各管的吸光度值（A）。
以蛋白质含量（g/L）为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、测定血清总蛋白取 3 支干净的试管，编号 7、8、9，按下表加入试剂：｜试管编号｜ 7（空白管）｜ 8（标准管）｜ 9（测定管）｜｜：：｜：：｜：：｜：：｜｜生理盐水（ml）｜ 10 ｜ 0 ｜ 0 ｜｜蛋白标准液（ml）｜ 0 ｜ 10 ｜ 0 ｜｜待测血清（ml）｜ 0 ｜ 0 ｜ 10 ｜｜双缩脲试剂（ml）｜ 40 ｜ 40 ｜ 40 ｜摇匀后，置于 37℃水浴中保温 30 分钟。
总蛋白(TP)测定试剂盒(双缩脲法)产品技术要求mairui
2性能指标
2.1外观
试剂1（R1）应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；
试剂2（R2）应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物；
试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；包装标签文字符号应完整、清晰。
2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃ 1 ℃，546 nm 波长条件下，吸光度应小于0.200。
2.4分析灵敏度
当样本浓度为70 g/L 时，吸光度变化应不小于0.150。
2.5线性范围
试剂盒在（2～120）g/L 范围内：
a)线性相关系数r 应不小于0.995；
b)当样本浓度不小于30 g/L 时，线性相对偏差应不超过±6.0%；当样本浓度小于30 g/L 时，线性绝对偏差应不超过±3.6g/L。
2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数：CV 应不大于 2.0％。
2.6.2批间差
相对极差：R 应不大于 4.5％。
2.7准确度
2.7.1国家标准品测试
测定国家标准品，测定结果与靶值的相对偏差应不超过±5.0% 。
2.7.2质控品测试
测定质控品，测定结果应在靶值范围内。
2.8分析特异性
血红蛋白浓度在250 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在1200 mg/dL 内、结合胆红素在21 mg/dL 内、非结合胆红素浓度均在21 mg/dL 内、葡聚糖（分子量：7w 或4w）浓度在3000 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10 .0%以内。
血清总蛋白液体双缩脲法测定
血清总蛋白液体(TP)双缩脲法测定1.实验原理双缩脲比色终点法。
在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。
显色强度和蛋白浓度成正比。
OH—蛋白质+ Cu2+ -------------﹥紫红色复合物2. 标本采集2.1 病人准备：无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型：血清或血浆。
3. 标本存放20～25℃保存可稳定6天；4～8℃保存可稳定4周；-20℃保存至少可稳定1年。
4. 标本运输室温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
6. 实验材料:6.1 上海申能总蛋白测定试剂盒货号：14223171701 试剂1＋试剂26.1.1 试剂组成试剂1（R1）：6×64ml氢氧化钠80 mmol/L酒石酸钾钠12.8 mmol/L试剂2（R2）：6×16ml氢氧化钠100 mmol/L酒石酸钾钠16 mmol/L碘化钾15 mmol/L硫酸铜 6 mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
试剂不可冰冻。
开盖后应避免污染。
6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。
使用试剂时应采取必要的防护。
6.2 校准品：使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器：贝克曼AU680生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验贝克曼AU680生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
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总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)
简介：
总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成。
对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。
目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。
Leagene 总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。
双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色，所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。
可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长。
双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很好，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 离心管或小试管
2、 水浴锅或恒温箱
3、 比色杯
4、 分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、 取蛋白标准配制液或稀释液加入到蛋白标准中，充分溶解后配制成的蛋白标准溶液，配
制后可立即使用，溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。
亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。
特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。
例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白标准溶解于蔗糖中。
一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解总蛋白标准品的稀释液。
编号 名称
TC0547 120T Storage
试剂(A): 双缩脲试剂 250ml 4℃ 试剂(B): 蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 蛋白标准配制液 5ml RT 试剂(D): 双缩脲空白试剂(备选) 100ml
4℃ 使用说明书
1份
2、样本处理：血清、血浆样本直接取检测。
对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比
例，加入生理盐水或PBS，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。
3、TP加样操作，按下表依次加入试剂：
加入物(ml) 空白管标准管待测管
ddH2O 0.04
蛋白标准溶液(如1mg/ml) 0.04
待检样品(血清、血浆、组织匀浆液) 0.04
双缩脲试剂 2.0 2.0 2.0
4、混匀,孵育。
5、比色杯光径，分光光度计测定波长处的吸光度，如无，之间的波长也可。
以空白管调零，
读取标准管和各待测管的吸光度。
6、当遇到浑浊或溶血样本等，应设”样本空白管”：取待测样品加入双缩脲空白试剂，以
双缩脲空白试剂调零，读取样本空白管吸光度。
用待测管吸光度减去样本空白管吸光度后的净吸光度，计算总蛋白浓度。
计算：
总蛋白(g/L)=(待测管吸光度/标准管吸光度)×蛋白标准液浓度(g/L)
注意事项：
1、蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后，即获得蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，
不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2、待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后，如果发现检测效果不佳，可以室温放置1h或
60℃放置15min，颜色会随着时间的延长不断加深。
3、测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化，可能的原因
是样品中含有铜离子螯合剂。
4、如果没分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
使用酶标仪测定蛋白浓度时，每个试剂
盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
5、检测中发现所有孔都呈暗紫色，可能原因是样品含有还原剂，应适当透析或稀释样品。
有效期：12个月有效。
蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。