小肠结肠炎耶尔森氏菌显色培养基使用说明书

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小肠结肠炎耶尔森氏菌显色培养基使用说明书

用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离和检测

组分

科玛嘉小肠结肠炎耶尔森氏菌基础培养基和增补剂各一瓶。

基础培养基:琼脂15.0 g/L 蛋白胨20.0 g/L 盐类 5.0 g/L 色素1.3 g/L 增补剂:0.1 g/L

pH值7.0±0.2

操作

1、基础培养基:取瓶内干粉41.3 g溶于1000 mL去离子水的洁净三角瓶

中,充分搅拌混匀。也可根据需要按照41.3 g/L的比例扩大或缩小制备

培养基的量。

2、加热至100℃,不停搅拌,使其完全溶解。切勿加热超过100℃,切勿

121℃高压灭菌。若使用微波炉加热,应将培养基加热沸腾,立即移出,

轻轻摇匀,再放入微波炉加热,观察小气泡变为大气泡,直至完全溶解

即可。切勿使培养基溢出。

3、增补剂:取增补剂0.1g溶于1mL去离子水中,(也可按照0.1g/L的比

例扩大或缩小制备增补剂的量),搅拌均匀,使其完全溶解,将增补剂溶

液过0.45um滤膜备用。注:增补剂应现配现用,制备好的增补剂溶液在

-20℃可保存15天。

4、把混匀后的增补剂加入到冷却至47℃±2℃的基础培养基中,轻轻摇动

使其充分混匀,倾注平皿,使其凝固,晾干备用。

保存该成品平板在室温可保存一天或在冰箱内贮存1个月(2℃~8℃,避光)。

接种

划线或涂布接种(冰箱内保存的平板使用前应恢复至室温),在30±1℃恒温条件下需氧培养24h~36h 。

结果

性能及局限

一些小肠结肠炎耶尔森氏菌在该培养基可能生长较弱。一些较为罕见的非致病性耶尔森氏菌也可能会淡紫色菌落(伯氏耶尔森菌、莫氏耶尔森氏菌、克氏耶尔森氏菌、罗氏耶尔森氏菌等)。最终鉴定为致病性小肠结肠炎耶尔森氏菌需做附加试验。

贮存条件

基础干粉贮存于15℃~30℃干燥环境中,增补剂贮存于2℃~8℃环境中,在有效期前使用。

污染处理

使用过的培养基需要在121℃灭菌至少20分钟才可以按照有关规定丢弃。附:供体外诊断使用,产品须专业人员操作。

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