临检基础知识讲解：尿蛋白定性试验的一般方法
尿蛋白定量测定方法
尿蛋白定量测定方法
尿蛋白定量的测定方法主要是测24小时尿蛋白定量，首先病人需留24小时的尿液，留取方法是早上第一次的尿不要，然后从第二次尿开始收集起来，收集在一个较大的容器里，一直收集到第二天早上的第一次尿，就称之为24小时尿。
24小时尿还要称一下重量，本应用量筒来明确具体尿量，但是大多数病人家里面没有这么大的量筒或量杯，而水的比重和尿的比重差不多，所以称完重量后，可参考水的比重，来计算具体尿量。
将尿液混匀后取一管送医院检查，剩下的尿倒掉即可，测定送检的那一管尿的尿蛋白浓度是多少，然后再乘以尿量，就可测得24小时尿蛋白的定量，这种方法能够避免病人饮食和运动对于尿蛋白的影响。
尿蛋白定性检查
尿蛋白定性检查一、磺基水杨酸法【目的】掌握尿蛋白（PRO）定性磺基水杨酸法（SSA）。
【原理】生物碱试剂磺基水杨酸，在酸性的条件下，其磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性蛋白盐沉淀。
【器材】1. 小试管、试管架。
2.滴管、胶洗头。
3. 2ml刻度吸管、吸耳球。
4. pH广泛试纸。
5. 黑色衬纸。
【试剂】 200g/L磺基水杨酸溶液：20g磺基水杨酸溶于100ml蒸馏水中。
【标本】新鲜尿液或模拟蛋白尿标本。
【操作】1、调pH 用pH广泛试纸测试尿液酸碱度，如pH不在5—6范围，可加酸或碱予以调节。
2、加尿液取小试管2支，分别加入清晰尿液1ml。
3、加试剂于第1支试管内滴加磺基水杨酸溶液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加试剂作为空白对照。
4、判断结果 1min内观察结果，按照书中表格判断阳性程度及大致蛋白质含量。
【参考区间】阴性【注意事项】1、标本①如果尿液呈现明显的浑浊，应先离心或过滤。
②当知患者应用大剂量青霉素、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时，应告知结果可能产生假阳性。
③指导患者正确采集中段尿，避免混有生殖系统分泌物。
2、调pH 本法在尿液偏碱或偏酸时（pH＞9或pH＜3)可呈假阴性，因此检测前可先测试尿pH，必要时用稀NaOH或5%醋酸进行调节。
3、结果判断（1）掌握好结果判断时间。
操作时严格按照操作方法进行，判断时间严格掌握在1min，极轻度的混浊并无明显临床意义。
当尿液中含高浓度尿酸或尿酸盐时，在加入试剂1—2min后可能出现白色点状物，逐渐呈蛛丝状浑浊，缓慢扩散，覆盖于尿液表面，遇此干扰可离心后的尿液上清进行检测。
（2）如果通过镜检发现大量细胞，分析其阳性可能是由于混有生殖系统分泌物造成的假阳性，则可用离心后的上清液重新测定，进行验证。
（3）对于微弱阳性的判断，可选用黑色衬纸作背景，以提高分辨力。
4、灵敏度本法灵敏度高，为0.05—0.10g/L。
尿葡萄糖班氏法定性试验【目的】掌握葡萄糖（Glu）班氏定性的方法【原理】葡萄糖含有醛基，在高热、碱性溶液中，能将试剂中的蓝色硫酸铜还原为黄色氢氧化亚铜，出现红色氧化亚铜沉淀。
尿蛋白定量测定方法
尿蛋白定量测定方法
尿蛋白定量测定方法是检测尿液中蛋白质浓度的方法。
常用的尿蛋白定量测定方法有：
1.尿蛋白试纸条法：该方法是将一张试纸条蘸取少量尿液，然后放置在特定条件下观察颜色变化，通过颜色的深浅程度来判断尿液中蛋白质的含量。
2.磷酸铁铵法：该方法是将尿液加入磷酸铁铵溶液，在加入硫酸后观察褐色沉淀的产生，根据沉淀的量来估计尿液中蛋白质的含量。
3.比重法：该方法是通过测量尿液的比重，并根据比重的值来推算尿液中蛋白质的含量。
4.免疫测定法：该方法包括酶联免疫吸附法、放射免疫测定法、荧光免疫测定法等多种技术，通过特定的抗体来测定尿液中特定蛋白质的含量。
这些方法根据不同的原理和实验技术，可以选择合适的方法来测定尿液中蛋白质的含量。
尿蛋白的检测方法
尿蛋白的检测方法
1、尿蛋白定性试验：通常指普通尿常规检查，一般留取一试管的晨尿，晨尿要保证空腹6-8个小时，晨起第一次排尿时取中段尿。
然后用加热醋酸法、磺柳酸法或试纸法检查，如果有尿蛋白即报告阳性，但不能测出尿蛋白的量；
2、尿蛋白定量测定：需要将24小时的尿液完全留下后混合，记录尿量，选取部分标本通过化验检查尿蛋白的浓度，再计算出24小时尿蛋白的总量。
可以帮助诊断肾脏疾病的严重程度，如果尿蛋白量过大，可能需要做肾穿刺活检；
3、尿蛋白电泳分析：也需要取晨尿，取样本尿液，使尿液中的蛋白做电泳，确定是大分子蛋白、中分子蛋白，还是小分子蛋白。
根据蛋白成分的不同，确定肾脏受累部位；
4、尿微量白蛋白检测：比较建议在空腹6-8个小时以后，留取晨起第二次或第三次的尿液，可以早期发现是否存在尿蛋白的情况。
尿液蛋白质测定(手工法)操作规程sop
尿液蛋白质测定（手工法）操作规程sop
一、项目名称：尿液蛋白质定性检查
二、方法：磺基水杨酸法
三、原理：磺基水杨酸为生物碱试剂，在酸性环境下，其阴离子可
与带正电荷的蛋白质结合成不溶性蛋白盐而沉淀。
四、试剂：10%磺基水杨酸乙醇溶液。
五、仪器：手工法
六、操作步骤：
1、取试管加尿液3ml。
2、滴加10%磺基水杨酸溶液3－4滴，形成界面。
3、如尿呈浑浊，表示有蛋白质存在，混浊深浅表示含量的多
少。
七、结果判断：
●阴性：尿液外观仍清晰透明，不呈浑浊。
●微量（+/-）：轻微浑浊，隐约可见。
●阳性（+）：明显的白色混浊，但无颗粒出现。
（++）：稀薄乳样浑浊，出现颗粒。
（+++）：混浊，有絮片状沉淀。
（++++）：絮状混浊，有大凝块下沉。
八、参考范围：正常人为阴性。
九、标本要求：
1、标本应新鲜，并及时送检。
2、尿液标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。
3、容器应清洁、干燥。
十、临床意义：分为功能性、体位性、病理性蛋白尿，后者见于肾
炎、肾病综合症等。
十一、注意事项：
1、此法比较敏感。
2、如尿液浑浊，应先离心或过滤。
3、强碱性尿可出现假阴性，应加5%醋酸溶液数滴酸化后再做试
验。
4、有机碘造影剂、超大剂量使用青霉素等均可致假阳性。
5、尿中含高浓度尿酸或尿酸盐时，可呈假阳性。
十二、参考文献：
全国临床检验操作规程（第3版）
十三、
编写者：
制定日期：
修改日期：
科主任对规程认可：。
尿蛋白的定量检测原理
尿蛋白的定量检测原理
尿蛋白的定量检测原理一般采用免疫测定法，主要包括免疫沉淀定量法和免疫酶联免疫吸附法（ELISA）。
免疫沉淀定量法：
该方法基于免疫反应原理进行定量。
首先，将待检尿液样品加入经过预处理的抗体反应剂中，形成抗原-抗体复合物。
然后，通过沉淀技术将复合物从尿液中分离出来，并定量测定所沉淀的尿蛋白。
最常用的免疫沉淀定量法是尿液常规检查中的硝酸盐法。
免疫酶联免疫吸附法（ELISA）：
该方法利用酶标法原理，将特异性抗体或抗原固定在试验板上，然后将标记有酶的抗体或抗原与待检尿液样品中的尿蛋白结合，形成抗原-抗体复合物。
经过洗涤去除未结合的物质后，加入酶底物，使酶催化底物反应生成可测定的产物，通过测量产物的颜色强度来确定尿蛋白的浓度。
以上两种方法均依赖于抗原和抗体的高度特异性结合，通过测量特定反应产物的含量来定量测定尿蛋白浓度。
这些方法准确度高、敏感性强，广泛应用于尿液检测和临床诊断。
磺基水杨酸法尿蛋白定性检查
磺基水杨酸法尿蛋白定性检查
原理：磺基水杨酸是一种生物碱，在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不溶性的蛋白盐沉淀，沉淀生成的程度可反映蛋白质含量。
器材：小试管、滴管、吸管、黑色衬纸及PH广泛试纸。
试剂：200g/L磺基水杨酸溶液：20g磺基水杨酸溶于100ml蒸馏水中。
操作：1、取小试管2支，各加清晰尿液1ml
2、于第1支试管内加磺基水杨酸溶液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加
试剂作空白对照，1min内观察结果。
3、结果判断
注意事项：1、该法灵敏，极轻微反应无意义。
判断结果应及时，否则会使阳性增高。
2、尿内含尿酸或尿酸盐过多，可出现假阳性，但反应较为缓慢，15s
后出现浑浊，由弱渐强；或于加试剂1min后渐呈蛛丝状浑浊，
缓慢扩散，覆盖于尿液的表面，加热或加碱可消失。
3、含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假阳性，但其反应与
蛋白尿不同，应仔细观察并结合用药情况综合分析。
4、要求在1min内观察并判断结果。
尿蛋白测定方法
尿蛋白测定方法
尿蛋白测定方法
尿蛋白是指在正常情况下应该不应存在于尿液中的蛋白质。
通过尿蛋白的检测，在一定程度上可以确定身体是否存在肾脏疾病或其他慢性病变。
目前，常用的尿蛋白检测方法主要有三种：尿液常规检查、尿蛋白蓝染色法和定量检测法。
第一种方法是指通过常规尿液检查，来初步发现蛋白质是否异常。
此方法简单易行，成本低廉，但是在发现异常蛋白质时，无法确定具体的蛋白类型或浓度。
第二种方法是指采用尿蛋白蓝染色法。
此方法适用于初筛法，能在相对较短的时间内检测出异常蛋白质的类型和数量，并可定性分析蛋白质的来源。
但是，该方法的缺点在于操作难度较大，需要使用特殊的设备，而且结果容易受操作人员水平的影响。
第三种方法是目前最常用的定量检测法。
此方法通过测量尿液中蛋白质的浓度来确定是否存在异常蛋白质。
常用的尿蛋白测定方法包括比
浊法、免疫测定法、电泳法等。
其中，比浊法操作简单，成本低廉，
但灵敏度不高；免疫测定法在灵敏度和特异性方面较好，但成本较高；电泳法可以分离出不同种类的蛋白质，但需要更加专业的设备和操作
技术。
总体上，目前的尿蛋白测定方法已经具有较高的准确性和可靠性，但
需要根据具体情况选择相应的方法来测定尿蛋白，以更好地发现和治
疗慢性病变。
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为蛋白尿的过筛试验。
1.试带法
利用pH指示剂的蛋白误差原理。
本法对清蛋白较敏感，对球蛋白不敏感，仅为清蛋白的1/100～1/50，且可漏检本周蛋白。
尿液pH增高可产生假阳性。
本法快速、简便、易于标准化，适于健康普查或临床筛检。
2.加热乙酸法
为传统的经典方法，特异性强、干扰因素少。
能同时检出清蛋白及球蛋白尿，但敏感度较低，一般在0.15g/L左右。
本法能使含造影剂尿液变清，可用于鉴别试验。
3.磺基水杨酸法
又称磺柳酸法。
操作简便、反应灵敏、结果显示快，与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应；敏感度高达0.05～0.1g/L，因而有一定的假阳性。
被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。