激素溶解方法
植物组织培养常用激素溶解方法
常用激素溶解方法
1、吲哚乙酸（IAA)：溶于乙醇、热水、碱性溶液，碱性溶液中稳定；一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解；
2、吲哚丁酸(IBA)：溶于乙醇、热水、碱性溶液，碱性溶液中稳定；一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解；
3、萘乙酸（NAA）：溶于乙醇、碱性溶液；一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解；
4、玉米素（ZT)：溶于乙醇或碱性溶液；一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解
5、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）：溶于碱性溶液或酸性溶液；一般使用0.1molHCl或NaOH溶液溶解；
6、赤霉素（GA3）：溶于乙醇，使用95%酒精溶解
备注：生长素一般使用95%乙醇或NaOH 溶解；
分裂素一般使用NaOH溶液、95%乙醇或稀HCl溶解；。
植物激素的配制方法灭菌方法
母液浓度
生长素
IBA（3-吲哚丁酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
IAA（3-吲哚乙酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
α-NAA（a-萘乙酸）可用1M NaOH彻底溶解后，再加水定溶到一定浓度。
0.2g/L
ZT（反式玉米素）先溶于适量1M NaOH中，再加水至一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。（反式用少量1M NaOH溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
赤霉素
GA3先溶于适量无水乙醇中，再加水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
2，4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）用无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
细胞分裂素
KT（激动素6-糖氨基嘌呤）和6-BA（6-苄氨基嘌呤）先溶于少量1M NaOH中，再加水定容。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
配制生长素类，例如IAA、NAA、2.4-D、IBA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。
细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。
配制生物素，用稀氨水溶解，然后定容。
配制方法
植物激素配制方法总结
原则
植物激素：每种激素必须单独配制成母液，浓度为0.1mg/ml，0.5mg/ml，1.0mg/ml，激素浓度的表示方法多种，ppm（mg/L）、mol/L、mg/ml，用时根据需要取用。
激素的配制方法
1）0.1 %升汞的配制方法:
称取0.5 g升汞粉末，加入少量浓HCL（1 M）溶解，然后定容至500 ml容量瓶中
2）0.5 mg/ml 6-BA：
用少量1 mol/L的NaOH溶解，然后定容至容量瓶中
3）0.5 mg/ml NAA:
用少量1 mol/L NaOH溶解，然后定容至容量瓶中
4）0.5 mg/ml 2，4-D:
用少量1 mol/L 少量95 %乙醇溶解，然后定容至容量瓶中
5）1 mg/mlTDZ
用少量1 mol/L NaOH溶解，然后定容至容量瓶中
6）Picloram
以无菌水溶解后过滤灭菌
7）IBA 配制0.2 mg/ml
用95 %酒精溶解，再用蒸溜水稀释后分别配制成0.2 mg/ml的母液。
要注意，配制时，要把溶解有IBA的酒精倒入水中，不要把水倒入溶解有IBA的酒精中，否则会引起沉淀。
发生沉淀后不可使用。
8）1 mg/ml 6-KT的溶解方法
用少量1 mol/LNaOH溶解，然后用蒸馏水稀释。
激素测定方法
激素的测定方法参考王学奎（2015）《植物生理生化实验原理与技术》一书中的高效液相色谱法，以2016年采自尚志市水稻田的野慈姑球茎为材料，6-12月每个月测定一次野慈姑球茎内CA3和ABA的含量。
试验材料的处理称取1-2g样品，在冰浴下研磨匀浆，加入80%的预冷甲醇20ml，保鲜膜密封，在4℃冰箱里冷浸过夜。
浸提液抽滤，10ml甲醇润洗研钵2次，过滤后与浸提液合并，40℃下减压蒸发至没有甲醇残余。
剩余水相完全转移到三角瓶中，用30ml石油醚萃取脱色2次，弃去醚相。
加0.01gPVPP（交联聚乙烯吡咯烷酮，crosslinked polyvinylpyrrolidone），超声30mim，抽滤用30ml，乙酸乙酯萃取3次，合并酯相，40℃下减压蒸干。
用甲醇（色谱纯）溶解残留物并定容至2ml，经0.45μm微孔滤膜过滤得待测液，保存于4℃冰箱中。
测定（1）标准曲线的绘制取一定量GA3和ABA标准品，用甲醇（色谱纯）溶解，配制成不同浓度的溶液，点击“运行控制”菜单，再选择“运行方法”，手动或自动进样器进样10-30μL，进行液相检测分析。
在一定浓度范围内，4种激素峰面积与浓度呈良好线性关系时，即可绘制标准曲线。
（2）取同样体积的待测样品，进样。
待样品峰全部出完，冲洗30min待基线平直后，即可分析下一个样品。
（3）定性根据标准品的保留时间判断样品中的对应激素峰。
选择与已知标样具有相同保留时间的样品的峰面积，并根据对应的标准曲线查出对应激素的浓度ρ（μg/mL），然后根据下式计算鲜样（FW）中各激素的含量：样品中激素含量（μg/kg FW）=ρ·V Tm·V S式中：ρ为根据样品峰面积从标准曲线查得的对应激素浓度（μg/mL）；V T为待测样总体积（mL）；V S为进样量（μL）；m为样品鲜质量（g）。
培养基母液配制
培养基母液的配制（一）激素母液由于多数生长调节物质难溶于水，因此配法各不相同，激素母液可以在2~4℃冰箱中保存。
在配制药品前，应准备好一定容积的小烧杯、玻璃棒，用纯净水冲洗干净方可使用：1、IAA、IBA、GA3、ZT可先用少量95%酒精溶解，再加水定容，摇匀后贮于试剂瓶中，贴上标签。
2、2,4-D、KT、可用少量10%的Noah溶解，再加水定容。
3、6-BA可用少量1mol/LHCl溶解后，再加水定容。
4、NAA可溶于热水或少量95%酒精中，再加水定容至一定体积。
5、1mg/ml的2.4-D的配制：称取0.1g2,4-D，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
6、1mg/ml的6BA的配制：称取0.1g6-BA，用少量1mol/LNaOH 溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
7、1mg/ml的NAA的配制：称取0.1gNAA，用少量95%酒精助溶，然后定容到100ml容量瓶中。
8、1mol/L的HCl的配制：量取83.3ml盐酸加水稀释定容至1L。
（一般、组培室用量少，配制500ml即可，即：称取盐酸41.65ml 稀释定容至500ml。
配制盐酸时。
需要带口罩、戴手套。
）9、10%的NaOH的配制：称取10gNaOH，加少量纯净水溶解，然后定容到100ml容量瓶中。
10、HgCl2 的配制：称量1g的HgCl2，加热水后进行溶解定容至1L。
二、培养基配制配错培养基造成的危害比组培技术中其他任何失误都大。
因此，配制培养基和称取其他成分必须绝对小心。
为了降低配错培养基的风险，最好准备一张纸，详细地写出配制培养基过程中所需的成分和配置步骤。
每配完一种成分或配完一种母液，划掉相应的记录。
1、一般而言，分化配方的配制：除萱草琼脂为5.5g/L外，其它植物为琼脂5g/L。
白糖为30g/L。
母液粉为4.74g/L。
用自己配制的母液配培养基时，大量母液（1号）50ml/L，微量（2~5号为5 ml/L）。
03植物激素的配制方法灭菌方法
细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。
配制生物素，用稀氨水溶解，然后定容。
配制方法
脱落酸
ABA（脱落酸）可用少量1M NaOH溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
植物组培中，有些植物激素不能加入培养基中随之高压蒸汽灭菌，那么这些激素该如何加入培养皿中？
过滤灭菌后，在无菌条件下将其加入到高压灭菌后的温度下降到约50至60度的未凝固的培养基中，或者适当加热（如50~70°C水浴加热）使之溶解后的培养基中，摇匀，待培养基冷却凝固再接种培养物。
0.2g/L
ZT（反式玉米素）先溶于适量1M NaOH中，再加水至一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。（反式玉米素是天然酶）
0.1g/L
2-ip可用少量1M NaOH溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
赤霉素
GA3先溶于适量无水乙醇中，再加水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
除菌方式
母液浓度
生长素
IBA（3-吲哚丁酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
IAA（3-吲哚乙酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
α-NAA（a-萘乙酸）可用1M NaOH彻底溶解后，再加水定溶到一定浓度。
植物激素的配制方法灭菌方法
α-NAA（a-萘乙酸）可用1M NaOH彻底溶解后，再加水定溶到一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
2，4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）用无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
细胞分裂素
KT（激动素6-糖氨基嘌呤）和6-BA（6-苄氨基嘌呤）先溶于少量1M NaOH中，再加水定容。
配制生物素，用稀氨水溶解，然后定容。
配制方法
除菌方式
母液浓度ห้องสมุดไป่ตู้
生长素
IBA（3-吲哚丁酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
IAA（3-吲哚乙酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
可高压灭菌: IBA，NAA，6-BA，2,4-D;、KT
不可高压灭菌:ZT、2-IP、IAA，GA3
配制生长素类，例如IAA、NAA、2.4-D、IBA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。
细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
脱落酸
ABA（脱落酸）可用少量1M NaOH溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
植物组培中，有些植物激素不能加入培养基中随之高压蒸汽灭菌，那么这些激素该如何加入培养皿中？
过滤灭菌后，在无菌条件下将其加入到高压灭菌后的温度下降到约50至60度的未凝固的培养基中，或者适当加热（如50~70°C水浴加热）使之溶解后的培养基中，摇匀，待培养基冷却凝固再接种培养物。【下载本文档，可以自由复制内容或自由编辑修改内容，更多精彩文章，期待你的好评和关注，我将一如既往为您服务】
中国药典收载的甾体激素类药物的含量测定方法
中国药典收载的甾体激素类药物的含量测定方法中国药典收载的甾体激素类药物的含量测定方法有以下几种:
1. 容量法：适用于甾体激素类药物的水或乙醇溶解度的测定。
具体测定方法包括蒸馏法和溶剂提取法等。
2. 光谱分析法：适用于甾体激素类药物的光谱分析法，如紫外 - 可见分光光度法、红外光谱法和核磁共振法等。
3. 色谱分析法：适用于甾体激素类药物的色谱分析法，如高效液相色谱法、气相色谱法和凝胶色谱法等。
4. 化学分析法：适用于甾体激素类药物的化学分析法，如酸碱中和法、氧化还原法、盐析法等。
以上方法均可用于甾体激素类药物的含量测定，但具体使用方法应根据药物的性质和测定要求进行选择。
同时，中国药典还收录了一些甾体激素类药物的质量标准和规范，以确保药品的质量和安全性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
常用激素溶解方法
1、吲哚乙酸（IAA)：溶于乙醇、热水、碱性溶液，碱性溶液中稳定；一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解；
2、吲哚丁酸(IBA)：溶于乙醇、热水、碱性溶液，碱性溶液中稳定；一般使用95%酒精、NaOH溶液溶解；
3、萘乙酸（NAA）：溶于乙醇、碱性溶液；一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解；
4、玉米素（ZT)：溶于乙醇或碱性溶液；一般使用95%酒精或NaOH溶液溶解
5、6-苄基氨基嘌呤（6-BA）：溶于碱性溶液或酸性溶液；一般使用0.1molHCl或NaOH溶液溶解；
6、赤霉素（GA3）：溶于乙醇，使用95%酒精溶解
备注：生长素一般使用95%乙醇或NaOH 溶解；
分裂素一般使用NaOH溶液、95%乙醇或稀HCl溶解；。