DNA亲子鉴定测试的常见问题
DNA测序技术的使用中常见问题
DNA测序技术的使用中常见问题DNA测序技术是一项重要的科学工具，被广泛应用于生物医学研究、进化学、司法科学等领域。
然而，在使用DNA测序技术的过程中，常常会遇到一些问题。
本文将介绍DNA测序技术使用中常见的问题，并提供相应的解决方案。
1. 样品质量问题在DNA测序之前，样品质量是至关重要的。
低质量的样品会导致测序结果的偏差和错误。
常见的样品质量问题包括样品的纯度不高、浓度不足或者样品受到了污染。
解决方案：- 提高样品纯化方法：使用恰当的纯化试剂和技术来提高样品的纯度，例如使用芳香族化合物或异维酮类物质。
- 检测样品浓度：使用光谱法或者比色法来测量样品中DNA的浓度，确保其符合测序要求。
- 避免样品污染：在样品处理过程中，严格遵守无菌操作规程，使用经过无菌过滤器过滤的试剂和器具。
2. 序列读取长度问题DNA测序技术可以产生从数十个碱基对到上百万个碱基对的序列。
然而，部分DNA测序技术的读取长度有限，这可能影响到某些研究或应用的结果。
解决方案：- 选择合适的测序方法：不同的测序方法具有不同的读取长度，选择适合自己研究目的的测序方法，以满足相关的研究需求。
- 使用测序技术的新发展：不断发展的测序技术，如第三代测序技术，具有较长的读取长度和更高的准确性，可以解决传统测序方法的限制。
3. 突变检测问题DNA测序技术不仅可以用于确定特定序列的顺序，还可以用于检测和鉴定突变。
然而，突变的检测可能受到多种因素的影响，如检测方法的灵敏度和特异性、突变类型的多样性等。
解决方案：- 选择合适的突变检测方法：不同的突变具有不同的检测方法，如SNP分析、插入和缺失突变的分析等。
选择合适的方法来检测特定类型的突变。
- 结合多种检测方法：结合使用不同的突变检测方法可以提高突变检测的准确性和可靠性。
- 验证突变结果：通过使用其他独立的测序技术或方法来验证突变结果，以确保结果的可靠性。
4. 数据分析问题DNA测序技术生成的数据量巨大，数据分析是一个复杂而耗时的过程。
DNA测序结果中常见的几个问题
1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱，几乎难以辨别?这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致，该干扰峰和正常序列峰重叠在一起；另外，测序电泳开始阶段电压有一个稳定期，所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚，有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生N 值，峰图较杂?由于测序反应的信号是逐渐减弱的，所以序列末端的信号会很弱，峰图自然就会杂乱，加上测序胶的分辨率问题，如果碱基分不开，就会产生N 值，正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列?如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的，因为引物本身是不被标记的，所以在测序报告中是找不到的；如果找不到克隆片段中的扩增引物，可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到扩增引物；另外插入片段的插入方向如果是反的，此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点?可能的原因同上，您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物，当然，若是样品出现意外原因，如空载、载体自连等，克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致，给我的结果与我需要的序列有差距，这是怎么回事? 首先，我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号，如果对应的是您的样品，由于不知您的实验背景，测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断，我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)?是否会影响测序结果?序列图的背景杂带是由荧光染料引起，如果太强会影响测序结果，要看信噪比，我们给的结果信噪比大都在98%以上。
7 、测序结果为什么与标准序列有差别？原因可能有：样品个体之间的差别、测序准确率的问题，自动测序仪分析序列的准确并非100%，建议至少测一次双向，通过双向测序可以最大限度减少测序的错误。
DNA测序常见问题分析及解决办法总结
请提供详细资料我们会根据结果具体分析。
常见问题
具体情况
可能的原因
处理办法
备注
样品准备问题
菌培养不好或失败
抗性不对或菌已死
核对抗性，尽可能提供载体信息。
或菌培养条件特殊
重新提供菌液，或提供2ug纯化质粒。
质粒提不出
质粒拷贝数极低或
客户自己采取大量提取的方法提供2ug纯化质粒。
培养方式不当
质粒产量很低
低拷贝数质粒或
客户自己采取大量提取的方法提供2ug纯化质粒。
培养方式不当
自带质粒或已纯化PCR产物量极低
是否为电泳法定量，
质粒：电泳检测浓度大于100ng/ul，体积大于20ul。
测OD值法不可靠,电泳检测
总量是否足够
已纯化PCR产物：根据片段长度提供足够量的模板，一般要求是100ng/反应/Kb，进行多个反应的应相应增加量。
测序出现双峰或信号中断
双峰
重复序列，如polyT、polyA或几个碱基重复
质粒产量极低
客户自己提供2ug纯化好的质粒
PCR产物定量极低
重新电泳检测已纯化的PCR产物，确认有足够的量，或提供PCR原液由公司进行纯化
测序结果正常，与预期不符
找不到引物
质粒模板
检测是否为空载体，从其互补链上寻找，克隆位点离测序引物太近，长插入片段未测通。
PCR模板
不可能找到所用的测序引物，短片段可以从互补链上找到另一段的引物，长片段由于测不通，无法找到相应序列想得到全序列，短片段可以从两端进行测序，长片段需要经克隆后进行测序。
用反向引物中出现套峰
可能是样品非单克隆，挑其他克隆测序。
PCR产物测序中，某一点后序列变乱
做亲子鉴定注意事项
做亲子鉴定注意事项亲子鉴定是一项非常重要且敏感的工作，主要用于确定父母和子女之间的亲属关系。
随着社会的进步和科技的发展，亲子鉴定的方法也日益成熟和准确。
然而，由于其涉及到家庭关系和个人隐私，需要注意一些事项，以确保鉴定结果的准确性和客观性。
首先，选择正规机构进行亲子鉴定是非常重要的。
正规机构通常具有专业的实验室和专业的技术人员，他们能够提供准确和高质量的鉴定结果。
在选择机构时，可以参考一些公认的权威机构或是咨询专业人员的意见，确保选择到的机构是具有良好声誉和信誉的。
其次，需要确保鉴定样本的准确性和完整性。
亲子鉴定的样本主要是父母和孩子的DNA样本，因此，采集样本时需要注意一些细节。
首先，应确保样本的来源清晰明确，避免混淆和交叉感染。
其次，应采用专业的采样工具和方法，确保样本的纯净和完整。
对于孩子的样本采集，需要在监护人的陪同下进行，以确保过程的合法性和透明性。
第三，亲子鉴定过程中需要尊重个人隐私和家庭关系。
亲子鉴定涉及到家庭的私密问题，因此，在进行鉴定前，需要征得相关当事人的同意，并对个人信息和鉴定结果进行保密。
鉴定机构需要严格遵守相关的法律法规，保护被鉴定人的合法权益，不得将相关信息泄露给外部。
第四，监督和信任也是亲子鉴定中需要注意的事项。
亲子鉴定是一项严肃而庄重的工作，需要有专业的利益监督机构进行监督和审查。
此外，在鉴定过程中，相关当事人也需要保持对鉴定结果的信任和尊重，不得对结果进行任意质疑或者扭曲解释。
只有通过维护鉴定的专业性和客观性，才能达到亲子鉴定的真实和公正。
最后，亲子鉴定的结果需要正确使用和解读。
亲子鉴定的结果是科学和实验的产物，对于家庭和个人的重大影响，因此，在使用和解读结果时需要谨慎而专业。
首先，需要对鉴定结果进行全面的了解和解读，避免片面和错误的理解。
其次，要正确使用鉴定结果，不能将其作为个人攻击或者其他不当用途。
亲子鉴定的结果应该用于解决鉴定问题，维护家庭和个人的合法权益。
DNA亲子鉴定常见问题
DNA亲子鉴定常见问题DNA亲子鉴定是一种可以通过比对个体间的DNA序列来确定亲子关系的科学技术。
近年来，随着亲子鉴定的广泛应用，人们对于这个领域的了解也越来越多。
然而，仍然存在一些常见问题困扰着公众。
在本文中，我们将回答一些关于DNA亲子鉴定的常见问题，帮助读者更好地了解这一科学技术。
问题一：什么是DNA亲子鉴定？DNA亲子鉴定是一种利用DNA序列来确定亲子关系的方法。
DNA 是人体细胞内的遗传物质，它由碱基对组成，其中包括腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）。
每个人的DNA序列都是独一无二的，在親子鉴定中，相互比对被鉴定者和被比对者的DNA 序列，通过分析DNA序列的相似性，来确定两者之间是否存在亲子关系。
DNA亲子鉴定的原理是通过比较被鉴定者与被比对者之间的DNA 序列，寻找两者之间的相似性。
在进行DNA亲子鉴定时，常用的方法是提取被鉴定者和被比对者的DNA样本，然后通过PCR扩增特定的DNA片段，接着使用电泳技术将扩增的DNA片段进行分离。
最后，通过比对两者的DNA分离片段，来确定是否存在亲子关系。
问题三：DNA亲子鉴定的可靠性有多高？DNA亲子鉴定的可靠性非常高。
由于每个人的DNA序列都是独一无二的，所以DNA亲子鉴定可以比对个体间的DNA序列，只要比对结果达到一定的相似性阈值，就可以确定是否存在亲子关系。
根据国际标准，DNA亲子鉴定的可靠性可以达到99.9%以上。
进行DNA亲子鉴定需要提供被鉴定者和被比对者的DNA样本。
常见的DNA样本来源有口腔黏膜刷取、血液、毛发根部、指甲、尿液等。
一般来说，提供足够的DNA样本可以提高亲子鉴定的可靠性。
问题五：DNA亲子鉴定会对个体造成伤害吗？DNA亲子鉴定不会对个体造成伤害。
提取DNA样本时，常使用非侵入性的采样方法，例如口腔黏膜刷取或者取指甲、毛发等样本。
这些采样过程对个体没有任何危害。
此外，亲子鉴定的分析过程也是非侵入性的，不会对个体造成伤害。
胎儿亲子鉴定常见问题
更多详情咨询DNA亲子鉴定中 心。
（1）绒毛亲子鉴定一般在孕八周 至16周进行采样，我们目前不提 供采样服务，如果您能在医院采 样我们可提供鉴定服务。
（2） 羊水亲子鉴定在孕16-24周 采集羊水。羊水量这时候是最充 足的，这时候进行抽取羊水最为 安全期，抽取少量（3-5毫升）的 羊水对胎儿的健康成长是不会造 成不良影响的。
2.胎儿亲子鉴定如何收费。
胎儿羊水鉴定价格为3800元检测 费（不包含羊穿费），目前只提 供广州亲子鉴定预约。其他地区 可在医院抽取寄送样本至我中心 （建议选择三甲医院）
胎儿绒毛亲子鉴定为绒毛的是 4100元，父母提供常规标本。若 父或母提供特殊样本，则每个样 本加500元检测费
so6d6qw 广州亲子鉴定
胎儿亲子鉴定常见问题
近日，DNA亲子鉴定中心工作人员 接到不少客户咨询胎儿DNA鉴定的 问题，在此，我中心就相关胎儿 DNA亲子鉴定的问题跟大家一一解 答。
1. 胎儿亲子鉴定什么时间做？
胎儿亲子鉴定可以选择二个时间 段做，根据这二个间段可将胎 儿亲子鉴定分为绒毛亲子鉴定和 胎儿羊水亲子鉴定。
拓展分析《DNA的粗提与鉴定》十大疑难
拓展分析《DNA的粗提与鉴定》十大疑难曾小军（江西省泰和县第二中学343700）1、实验中成功的关键是什么？应特别注意哪些过程？本实验成功的关键，是保证提取到足量且较纯净的DNA。
因为DNA在细胞中含量少，所以在下列步骤中应特别注意：在步骤1中使用的鸡血的量要在180mL左右，提取细胞核物质时要充分搅拌。
在步骤2中要充分晃动烧杯，在步骤3中加蒸馏水要控制好量，在步骤4中要使用多层纱布过滤，在步骤5中要充分搅拌，步骤7中使用冷酒精等。
因为DNA易吸附在玻璃容器上，所以实验中要使用塑料烧杯和试管，以减少DNA的丢失。
270．在DNA粗提取实验中，鉴定DNA为什么不用2M/L的NaCl溶液而用0.015M/L 的NaCl溶液？答：①教材中所选用“0.015M/L的NaCl溶液”，起溶解DNA的溶剂作用，成功率低，用时较长。
②若改为“2M/L的NaCl溶液”，起溶解DNA的溶剂作用，则实验成功率高，所用时间较短（有实验证明）。
③通过实践证明：用2M/L的NaCl溶液比用0.015M/L的NaCl 溶液效果更好2、本实验用鸡血细胞液而不用鸡全血，原因如何？能否用哺乳动作的肝脏作为实验材料？鸡全血包括血浆和血细胞，血浆中无DNA。
全血除去血浆后即是浓缩的血细胞，DNA的含量相对提高了，便于DNA的提取。
将哺乳动物肝脏组织剪碎、研磨，并让其吸水胀破后可释放较多的DNA，因而可以用哺乳动物的肝脏作实验材料。
3、生活在牧区的学生，采集牛、马和羊血比较方便，他们按照教材的实验要求，能否观察到实验现象？不能。
哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核，无染色体和DNA，提取不到DNA，当然观察不到实验现象。
4、实验最好用塑料容器（如塑料烧杯、试管等），不宜用玻璃容器？鸡血细胞破碎后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。
因此，实验过程最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。
DNA测序结果中常见的几个问题
D N A测序结果中常见的几个问题公司内部档案编码：[OPPTR-OPPT28-OPPTL98-OPPNN08]1 、为什么开始一段序列的信号很杂乱，几乎难以辨别这主要是因为残存的染料单体造成的干扰峰所致，该干扰峰和正常序列峰重叠在一起；另外，测序电泳开始阶段电压有一个稳定期，所以经常有20-50 bp 的紧接着引物的片段读不清楚，有时甚至更长。
2 、为什么在序列的末端容易产生 N 值，峰图较杂由于测序反应的信号是逐渐减弱的，所以序列末端的信号会很弱，峰图自然就会杂乱，加上测序胶的分辨率问题，如果碱基分不开，就会产生N 值，正常情况下ABI377测序仪能正确读出500个碱基的有效序列。
3 、测序结果怎么找不到我的引物序列如果找不到测序所用的引物序列。
这是正常的，因为引物本身是不被标记的，所以在测序报告中是找不到的；如果找不到克隆片段中的扩增引物，可能是您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到扩增引物；另外插入片段的插入方向如果是反的，此时需找引物的互补序列。
4 、测序结果怎么看不到我克隆的酶切位点可能的原因同上，您克隆的酶切位点距离您的测序引物太近，开始一段序列很杂，几乎难以辨别，有可能看不清或看不到酶切位点。
通常我们会尽量选择距离酶切位点远点的引物，当然，若是样品出现意外原因，如空载、载体自连等，克隆的酶切位点也是看不到的。
5 、你测出的结果与我预想的不一致，给我的结果与我需要的序列有差距，这是怎么回事首先，我们会核实给您的测序结果是否对应您的样品编号，如果对应的是您的样品，由于不知您的实验背景，测得的序列是否与您预想的结果一致我们无法判断，我们能做到的是检查发送给您的测序结果和您提供来的样品是否一致。
6 、序列图为什么会有背景噪音(杂带)是否会影响测序结果序列图的背景杂带是由荧光染料引起，如果太强会影响测序结果，要看信噪比，我们给的结果信噪比大都在98%以上。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
DNA亲子鉴定测试的常见问题
1. 什么是DNA亲子鉴定测试?
DNA(脱氧核糖核酸)是人身体内细胞的原子物质. 每个原子有46个染色体,另外,男性的精子细胞和妇人的卵子, 各有23个染色体,当精子和卵子结合的时候.这46个原子染色体就制造一个生命, 因此,每人从生父处继承一半的分子物质, 而另一半则从生母处获得。
DNA亲子鉴定测试与传统的血液测试有很大的不同. 它可以在不同的样本上进行测试, 包括血液,腮腔细胞, 组织细胞样本和精液样本. 由于血液型号, 例如A型, B型, O型或RH 型, 在人口中比较普遍, 用于分辨每一个人, 便不如DNA亲子鉴定测试有效. 除了真正双胞胎外, 每人的DNA是独一无二的. 由于它是这样独特, 就好像指纹一样, 用于亲子鉴定, DNA是最为有效的方法.
2. DNA亲子鉴定有多准确?
DNA亲子鉴定是目前亲子测试中最准确的一种. 如果小孩和测试男子的DNA模式在一个或多个的DNA探针上不吻合, 那么被测试男子便被100%排除, 即他是0%可能是亲生父亲. 他不可能是孩子的生父.
如果是母亲, 孩子和被测试父亲的DNA模式完全吻合, 那么可以计算出99.9%或更大的或然率.，这个结果证明他是实则完全证实小孩的亲生父亲.大部分的美国法庭接受90%或然率作为生父证明的证据.
3. 孩子要到某一年龄才可接受DNA亲子鉴定测试吗?
DNA亲子鉴定测试是无年龄限制. 传统的血型测试要小孩至少6个月. 还有,要大量的血液样本, 通常是要两大茶匙以上. 这种方法应用于小孩身上较困难。
相反, DNA亲子鉴定只是要很少几滴的血液(约1/4 或1/2 茶匙), 或是口腔抹擦所得的腮细胞, 这种用少量的血液或口腔测试,使DNA测试甚至可以在新生婴或小孩身上进行。
由于DNA是形成于结合期, 测试甚至可以在小孩末出世之前, 使用(Chorionic villi Sampling/CVS) 胎盘素或抽羊水(amniocentesis) 方法来进行.
亲子鉴定可以在已逝世的人的由殡仪馆工人收集的样本上进行. 当一个人已辞世或失踪,还可以在其有血缘关系的亲属上重新编排他或她的DNA组织。
4. 亲子鉴定可以在没有母亲参与情况下进行吗?
可以. DNA亲子鉴定是非常有效, 即使在母亲不在的情形下依然有效. 在母亲参与或不参与的情况下, 而孩子和被测试男子的DNA组织排列不吻合, 那么被测试者便100%排除为亲生父亲. 如果组织排列吻合, 那么我们可计算出99%或更大的生父或然率. 个人如带未成年小孩测试,携带身份文件并签署一份有关他/她在法律上有权带小孩来测试的表格。
5. 口腔(腮)抹试准确吗?
测试血液的另一变通办法是一种叫腮抹试(buccal swab)的样本收集方法, 由于DNA存在于身体内每个细胞之中, 使用抹试方法收集的样本而得出的试验结果的准确性和血液样本一样。
收集样本时用棉签在小孩口内轻轻抹试, DNA便可以从此抽取, 这种程序是不强制和无
痛, 最适宜于小孩, 由于用这种方法提取DNA,更多的步骤，可以在大人身上取血而用口腔擦试在小孩上取得样本,，大人也可选择使用口腔抹擦测试.
6. 被测试的人分布在不同的城市可以吗?
完全无问题。
7.要医院证明或律师信才可以做DNA亲子鉴定吗?
不一定。
.
8. 亲子鉴定可以在小孩出世前做吗?
可以，用DNA鉴定, 亲子测试可以在小孩未出世前进行, DNA测试可通过CVB胎盘素, 常在怀胎10到13个星期, 或用抽羊水方法在怀孕14到24星期内进行. 任何一种手术要由一位OB/GYN医生实施。
9. DNA亲子鉴定的原理和程序
DNA是从几滴血, 腮细胞或培养的组织纤内提取而来. 用畴素将DNA样本切成小段, 放进喱胶内, 用电泳槽推动DNA小块使之分离--最细的在最远, 最大的最近. 之后, 分离开的基因放在尼龙薄膜上, 使用特别的DNA探针去寻找基因, 相同的基因会凝聚于一, 然后, 利用特别的染料,在X光的环境下, 便显示由DNA探针凝聚于一的黑色条码. 小孩这种肉眼可见的条码很特别---- 一半与母亲的吻合,一半与父亲的吻合. 这过程重覆几次, 每一种探针用于寻找DNA的不同部位并影成独特的条码, 用几组不同的探针, 可得到超过99,9%的父系或然率或分辨率.
10. 可否请解释亲子鉴定测试的结果?
孩子会有一条纹与亲生母亲相同而另一条码与待证实父亲1号(AF1)相同,此人是生父; 被排除的男子(AF2),则与小孩并无相同的条码.
肯定父系关系= 99.99%或更大的生父或然率(法律上证明是生父)
否定父系关系= 0% 生父或然率(100%排除为生父)
由于国内人口基数较大，一般建议采用20个以上STR位点比对方可得出正确结论。