实验八、蛋黄卵磷脂的制备
蛋黄中卵磷脂的提取项目报告
序言卵磷脂是过去五十年间既蛋白质、维生素被发现的最重要的营养素。
它没有副作用，却在抗击疾病和促进健康方面有着稳定、长远、整体的效果。
越来越多的营养学家、药物学家和医学家投身到对卵磷脂的研究中去。
越来越多的国际权威研究组织为卵磷脂对人类健康的神奇作用都给予高度的评价！1996年9月在布鲁塞尔召开的卵磷脂国际会议上，赢得了世界营养专家、药物学家和医学家的普遍认同；1997年第七届卵磷脂国际会议曾作出结论：“总结这些研究成果，建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于幼儿的智力发育是很重要的。
”1998被联合国粮农组织(FAO)列为世界五大营养食品之一的高度认可1999在美国食品与药物管理委员会（FDA）的批准下，所有的婴儿食谱中都要适量补充卵磷脂。
2001年被美国时代杂志上评选为“二十一世纪最伟大的健康食品”卵磷脂集中存在于脑及神经系统，血液循环系统、免疫系统及心、肝、肺、肾等重要器官。
是构成神经组织的重要成分，属于高级神经营养素。
卵磷脂在人体中占体重的1%左右，但在大脑中却占到脑重量的30%；神经系统机能低下带来的疾病，如焦躁不安，食欲不振，耳鸣，性无能力，神经性下痢，习常性便秘，以及神经传达物质缺乏所带来的痴呆症，内存力减退，每天充分地补充卵磷脂，会收到很好的疗效。
——麻省综合医院的J. H.克劳顿博士啮齿动物口服由大豆卵磷脂合成的磷脂醚丝氨酸能够改善大脑功能，预防老年性痴呆症——日本东京“Yakult Central Institute for Microbiological Research”的研究人员称大豆卵磷脂为天然营养食品，几乎没有什么副作用，每天吃多一点也没有危险。
——世界卫生组织（WHO）用卵磷脂饲育怀孕的大鼠，其后代在智力测验（迷宫测试）中，记忆力显著优于未饲育卵磷脂的大鼠的后代。
——美国北卡罗来纳州DUKE大学心理学教授药学博士沃伦来克“总结有关卵磷脂的所有研究成果，我们应当特别建议怀孕妇女服用适量的卵磷脂，这对于她们的婴儿的智力发育是很重要的。
蛋黄卵磷脂的提取
蛋黄卵磷脂的提取[实验目的]1.了解从动物中提取有效物质的一般原理和方法。
2.更好的理解和利用相似相容原理。
3.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。
4.掌握薄层液相色谱的原理及操作方法。
[仪器与试剂]烧杯、量筒、三口瓶（100mL）、圆底烧瓶（100mL）、烧杯、分液漏斗、旋转蒸发仪、水浴锅、分液漏斗。
氯仿、无水乙醇、乙醚、三乙胺、氯化钠溶液（10%）、无水MgSO4、丙酮、GF254硅胶板。
[实验原理]实验采用混合溶液萃取法。
薄层色谱法又称薄板色谱法。
薄板色谱法按其固定相性质和分离机理可分为：吸附薄层法，分配薄层法，离子交换薄层法及尺寸排阻薄层法等。
薄层色谱法基本原理实质是吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程。
[实验步骤]1.蛋黄卵磷脂的提取取新鲜的熟鸡蛋一个，完整的取出蛋黄，置于装有搅拌器、回流冷凝管和温度计的100mL三口瓶中，加入20mL混合溶剂（氯仿：乙醇=1：3），控制反应温度为35—40℃，搅拌30min。
抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。
滤液转入分液漏斗中，以5mL氯仿清洗抽滤瓶后一并加入分液漏斗中，加入40mL 10%氯化钠溶液。
分出氯仿层，用无水MgSO4干燥。
干燥后的氯仿层减压蒸馏近干，加入10mL丙酮，搅拌，冰水冷却后分离沉淀物。
用可能少的乙醚溶解沉淀物，转入烧杯，用1mL乙醚清洗烧瓶后也转入烧杯。
在搅拌下缓慢加入10mL丙酮，冰水冷却后除去溶剂，将产品置于真空干燥箱中干燥，得到白色或浅黄色蜡状卵磷脂产品，计算产率。
2.薄层色谱法（TLC）定性检测点样：取管口平整的毛细管吸取配置好的2%的卵磷脂氯仿溶液，点在薄层板上，点的直径一般为2-3cm，样品点在离薄层一端为1cm左右的起始线上，离板边约有1cm的距离。
展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿、乙醇、三乙胺与水（体积比=1:1:1:0.3）的混合溶剂中进行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板与展开剂液面成15°左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0.5cm左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1cm左右时，即可去除薄层板，标出溶剂前沿位置。
卵磷脂的制备及鉴定
卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。
2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。
二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。
三、实验原理将卵黄中加乙醇，卵磷脂溶于乙醇溶液中，分离提取，蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。
但由于乙醇抽提时，其他脂质也一起被抽提，如甘油三酯、甾醇等。
利用卵磷脂不溶于丙酮的性质，用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂，能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。
无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀，因此，可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来，由此除去蛋白质、脂肪等杂质，再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。
四、实验仪器、试剂与材料1、仪器：离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。
溶液：取氯化锌10g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，2、试液：l0%的ZnCl2即得。
3、试剂与材料：氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。
五、操作步骤1、粗提：取鸡蛋卵黄适量，用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取，离心分离（300Or/min，5min），将沉淀物重复提取3次，回收上清液。
然后减压蒸馏（45℃）至近干，用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。
加入丙酮溶解，抽滤，分离出沉淀，真空干燥（40℃，3Omin），得到淡黄色的粗卵磷脂，称重。
2、精制：取一定量的卵磷脂粗品，加无水乙醇溶解，得到约10%的乙醇粗提溶液，室温搅拌0.5h。
分离沉淀物，液。
加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl2加适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌lh，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色蜡状的精制卵磷脂；干燥；称重。
3、鉴定：（1）薄层色谱分析：取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液，用GF254硅胶板以氯仿：甲醇：水（65：25：4）为展开剂，展开，取出，干燥，碘蒸气显色。
（2）紫外吸收光谱测定：将一定量卵磷脂制成0.l%无水乙醇溶液，照紫外分光光法在190～40Onm处测定，卵磷脂的紫外最大吸波长在215nm。
蛋黄卵磷脂提取方案设计
1.设计背景1.1蛋黄卵磷脂的设计背景介绍蛋黄卵磷脂作为一种天然磷脂，具有重要的生理功能和广泛的应用价值。
在我国，随着食品、医药、化妆品等行业的快速发展，对蛋黄卵磷脂的需求日益增加。
目前国内蛋黄卵磷脂的提取技术相对落后[1]，提取效率低、成本高，且产品质量不稳定，严重制约了相关产业的发展。
因此，针对蛋黄卵磷脂提取方案的设计具有重要的现实意义。
蛋黄卵磷脂主要存在于蛋黄中，其含量约为8%-10%。
蛋黄卵磷脂具有独特的分子结构，使其在乳化、分散、稳定等方面具有优异的性能，因此在食品、医药、化妆品等领域具有广泛的应用[2]。
在食品工业中，蛋黄卵磷脂可作为乳化剂、稳定剂、润滑剂等，提高产品的质量和口感；在医药领域，蛋黄卵磷脂具有抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等生理活性，可用于制备药物载体和保健品；在化妆品行业，蛋黄卵磷脂具有良好的保湿、修复和保护作用，可用于护肤品的研发。
近年来，尽管我国在蛋黄卵磷脂提取技术方面取得了一定的进展，但与发达国家相比，仍存在较大差距。
传统提取方法如有机溶剂提取、超声波辅助提取等存在提取效率低、成本高、环境污染等问题[3]。
研究一种高效、环保、低成本的蛋黄卵磷脂提取方案，对于提高我国蛋黄卵磷脂产品的市场竞争力、促进相关产业可持续发展具有重要意义。
1.2卵磷脂主要化学成分和药理作用1.2.1主要化学成分磷脂酰胆碱（Phosphatidylcholine, PC）：这是卵磷脂中最主要的成分，占卵磷脂总量的40%-50%。
磷脂酰胆碱由甘油、两个脂肪酸链、磷酸和一个胆碱分子组成，其分子结构决定了其在细胞膜中的重要作用。
磷脂酰乙醇胺（Phosphatidylethanolamine, PE）：这是卵磷脂中的另一主要成分，含量通常在20%-30%之间。
磷脂酰乙醇胺的结构与磷脂酰胆碱类似，但其所连接的亲水性头部基团是乙醇胺。
磷脂酰肌醇（Phosphatidylinositol, PI）：磷脂酰肌醇在卵磷脂中的含量相对较少，大约占5%-10%。
蛋黄卵磷脂的制备
盐和碳酸氢钠存量不足引起。胞囊纤维变性严重影响脂肪的吸收，摄入脂肪有
30%-60%吸收不良，因而会造成脂肪痢。溶血磷脂酰胆碱能使摄入脂肪移位，将 甘油一酯及脂肪酸在低共熔基质中相结合。在有碳酸氢钠离子及胆汁盐情况下， 变得容易吸收。 （4）健康心脏 证实卵磷脂对心脏健康有积极作用，因为它能调节胆固醇在人体内的含量、有效 降低胆固醇、高血脂及冠心病的发病率。
4、操作步骤 （1）取新鲜鸡蛋一只，除去蛋清取其蛋黄，加入 20ml95%乙醇混合搅拌，4000rpm,离心10min,回收上清液， 将沉淀物反复提取三次，抽滤回收上清液，合并二次滤 液 （2）滤液进行减压蒸馏至近干，得到黄色油状物，用石 油醚洗下油状物，加丙酮分离沉淀物，及粗卵磷脂 （3）按20g卵磷脂：250ml无水乙醇，溶解粗卵磷脂，滴 加60%ZnCl2沉淀卵磷脂，直至不产生沉淀，抽滤 （4）加10ml左右冰丙酮洗涤搅拌，至丙酮溶液为近无色， 抽滤得到白色蜡状精制卵磷脂
二、蛋黄卵磷脂的制备
制取蛋黄卵磷脂的方法有很多，有有机溶剂法，无机盐复合沉淀法，乙酸乙酯 纯化法，超临界CO2萃取法等，这里着重介绍有机溶剂法 1、实验原理
有机溶剂法是根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的。
室 温 下 , 取 10mL 新 鲜 蛋 黄 用 两 倍 体 积 的 乙 醇 进 行 提 取 , 混 合 搅 拌 , 离 心 (3000r/min)5min,将沉淀物重复抽提几次后,取上清液,60℃蒸馏至近干,加入丙酮,分
项目三：蛋黄卵磷脂的制 备
姓名：朱 鹏 飞 学号：2012040941 组别： 7 组 班级：生物技术1211
目录：
一、蛋黄卵磷脂的相关知识 二、蛋黄卵磷脂的制备
三、蛋黄卵磷脂的检测 四、卵磷脂在生活中的价值与应用
蛋黄卵磷脂的制备研究
比较了水提方法与醇提法，醇提法效果较好。
为全面考查醇提法影响因素，设计了溶媒量、溶媒浓度和提取次数的３因素３水平正交试验，结果见表４。
试验结果及方差分析表明：乙醇回流法从多穗柯中提取总黄酮类化合物的最佳条件Ａ２Ｂ３Ｃ２即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，影响因素的大小依次为：乙醇浓度、提取时间、溶媒量；此法提取的多穗柯中总黄酮类物质含量为１２．５９％。
３结 论对多穗柯中黄酮类物质的提取，水提法以８０℃的恒温水浴，ｐＨ值为１０的氢氧化钠液提取效果最好。
醇提法的正交试验的结果表明：多穗柯中黄酮类物质的最佳提取条件是Ａ２Ｂ３Ｃ２，即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，醇提法提取总黄酮类物质的含量是１２．５９％。
而碱提法色素成分浸出太多。
所以，多穗柯中黄酮类物质的最佳提取方法是醇提法。
此法的提取工艺简单，条件容易控制，提取率高，提取剂乙醇易除净，所以可将此工艺应用于工业化生产，所生产的提取液可浓缩成膏状物，也可直接将其添加到保健饮料、糖果、绿豆羹、饼干或口服液中，作为保健食品、营养食品和功能食品的原料，应用前景良好。
参考文献：［１］中科院植物研究所．中国高等植物图鉴（第一册）［Ｍ］．科学出版社，１９７２．［２］廖代富，等．多穗柯叶的综合利用［Ｊ］．中国野生植物，１９９２（３）：１０．［３］江苏新医学院．中药大辞典［Ｍ］．上海：上海科技出版社，１９９７．２４３３．［４］郭建平，等．葛根药理作用研究进展［Ｊ］．中草药，１９９５，（３）：１６３．［５］马慧萍，贾正平，谢景文，等．淫羊藿总黄酮的提取分离工艺研究［Ｊ］．华西药学杂志，２００２，１７（１）：１．［６］覃洁萍，许学键，董明姣，等．广西藤茶中黄酮类成分的提取工艺研究［Ｊ］．中国现代应用药学杂志，２０００，１７（３）：１９６，［７］丁利君，吴振辉，蔡创海，等．金银花中黄酮类物质最佳提取工艺的研究［Ｊ］．食品科学，２００２，２３（２）：６２．蛋黄卵磷脂的制备研究吴晓英，林 影，叶倩君，李晶晶（华南理工大学生物工程系，广东 广州 ５１０６４０）摘 要：研究了鸡蛋卵黄卵磷脂的制备工艺和产品质量分析。
卵磷脂的提取实验报告
卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言：卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物，存在于生物体细胞膜中，具有重要的生理功能。
本实验旨在通过提取卵磷脂，了解其提取方法和应用。
实验材料与方法：材料：鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器：搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤：1. 取适量鸡蛋，将蛋黄与蛋清分离。
2. 将蛋黄放入搅拌器中，加入适量乙醇，搅拌均匀。
3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心，离心后分为两层，上层为乙醇层，下层为沉淀层。
4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
5. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。
6. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。
7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
8. 加入适量水，摇匀后放置静置。
9. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。
10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
11. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。
12. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。
13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。
14. 加入适量水，摇匀后放置静置。
15. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。
结果与讨论：经过多次提取，我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。
实验过程中，通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用，能够有效地分离出卵磷脂。
乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂，而氯化钠则用于调节溶液的渗透压，帮助分离。
氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂，能够与卵磷脂形成复合物，从而实现分离。
卵磷脂作为一种重要的生物大分子，具有多种生理功能。
首先，卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一，能够维持细胞膜的完整性和稳定性。
其次，卵磷脂还参与细胞信号传导，调节细胞功能。
此外，卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能，常被用作食品添加剂和药物载体。
在实际应用中，卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。
例如，可以根据不同来源的卵磷脂进行提取，以获得特定的卵磷脂种类。
蛋黄卵磷脂的提取
六、注意事项
提高提取温度有利于提高产率，但是也 不宜过高。 使用丙酮、乙醚，室内应严格避免明火 且有良好的通风条件。
蛋黄卵磷脂的提取
一、实验目的
学习蛋黄卵磷脂的提取方法 学习搅拌器的使用
二、实验原理
卵磷脂是自然界中广泛分布的和所有细胞中存 在的甘油磷脂和神经鞘脂类的统称。 蛋黄的组成是51%水分，14.8%蛋白质； 34.6%的卵磷脂 使用溶剂提取卵磷脂时要注意，蛋黄是一种相 当稳定的乳状液，其中乳化剂是磷脂与蛋白质 结合的脂蛋白复合物。要充分把磷脂提取出 来，所用溶剂必须能破坏这种复合。
三、实验装置
四、试剂与仪器
试剂：氯仿，乙醇，乙醚，氯化钠溶液 （10％），无水硫酸钠，丙酮，鸡蛋 仪器：三口烧瓶，烧杯，分液漏斗，机 械搅拌器，水减压蒸馏装置。
五、实验操作
新鲜鸡蛋一个，煮熟完整取出蛋黄，置于装 有搅拌器、回流冷凝管、温度计的100ml三口 烧瓶中。加入20ml混合溶剂（氯仿：乙醇 =1:3),控制温度为35～40℃，搅拌30min。 抽滤，滤饼在同样条件下再提取一次。滤液 转入分液漏斗，以5ml氯仿淌洗抽滤瓶后一并 倒入分液漏斗，加入40ml10％氯化钠溶液洗 涤，分出氯仿层，用无水硫酸钠干燥。
干燥后氯仿层用水减压蒸馏近干（水浴加热， 温度小于40℃）。加入10ml丙酮，搅拌，冰水 冷却后分离沉淀物。倾去上层丙酮层（尽量倒 净）。用尽可能少的乙醚溶解沉淀，转入烧 杯，另用1ml乙醚淌洗圆底烧瓶后也转入烧 杯。 搅拌下缓缓加入10ml丙酮，冰水冷却后倾去丙 酮层，在真空干燥箱中使固体产物挥发掉残留 溶剂后称量，得到白色或蛋黄色蜡状卵磷脂产 品。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
《专业综合实验2》
三、实验实验方法与步骤
1、蛋黄的收集 采用放置于冰箱保存的新鲜鸡蛋。打蛋是要注意保 证蛋黄的完整性，分离蛋黄，备用。 2、卵磷脂的提取 取100g鸡蛋卵黄于烧杯中，加入200ml95%乙醇， 置磁力搅拌器室温下搅拌1h，3000r/min离心分离 10min，将沉淀物再加入95%乙醇，重复以上步骤3 次。收集上清液，45℃下减压蒸馏至近干，用少量石 油醚溶解，得石油醚溶液，于石油醚溶液中加入适量 丙酮，分离出沉淀物，置搪瓷盘中摊平，厚度不易超 过1.5cm，40℃左右减压真空干燥2～4h，得淡黄色 的卵磷脂粗品，准确称量，记录。 3、卵磷脂的纯化
《专业综合实验2》
孟江平
一、实验目的
《专业综合实验2》
1、了解并掌握鸡蛋黄卵磷脂的制备工艺原理 和方法。
教学重点：
1、鸡蛋黄卵磷脂的制备工艺原理和方法。
《专业综合实验2》
教学方法：讲授、实际指导。 教学时数：8学时。 教学过程:
三、实验原理
卵磷脂最早发早发现于1844年，由法国学者葛布利（Gobley） 从蛋黄中分离出来，故而得名。卵磷脂是构成生物体细胞膜的重 要成分之一，广泛存在于动植物体内。虽然许多食物中都含有一 定的卵磷脂，其中大豆、卵黄和动物肝脏中的卵磷脂含量较高。 卵磷脂既是一种重要且安全的食品乳化剂，有事一种保健食品。 此外还广泛应用于临床上心脑血管及肝、肿瘤等疾病的治疗，及 作为药物载体。
本实验使用有机溶剂从鸡蛋卵黄中提取卵磷脂、利用金属 盐沉淀纯化卵磷脂，并对卵磷脂的质量进行分析。
《专业综合实验2》
二、实验材料、试剂与仪器
1、材料： 新鲜鸡蛋、卵磷脂对照品。 2、试剂： 乙醇（95%）、无水乙醇、丙酮、石油醚、氯化锌、氯仿、 甲醇、碘，均为分析纯。 3、仪器： 紫外可见分光光度计、旋转蒸发仪、真空干燥箱、恒温磁 力搅拌器、离心机、GF250硅胶板（10cm×20cm）、薄层 色谱展开缸、玻璃毛细管（内径0.9～1.1mm，壁厚0.10～ 0.15mm，管长100mm）等。
《专业综合实验2》
卵磷脂为两性分子，既具有脂溶性，又具有亲水性。其等 电点约为ph6.7。卵磷脂外观为浅黄色至浅棕色粉末或半透 明黏稠状液态物质，有清淡柔和的风味和香味。卵磷脂可 溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中，也能溶于水成为胶 体状态，但不溶于丙酮，且不同的磷脂在有机溶剂中溶解 度不同，故可用有机溶剂来提取分离卵磷脂。但单纯用溶 剂萃取制备卵磷脂是所得产品纯度不高，如果在萃取过程 中加入酸、碱或盐类物质，利用金属离子或酸、碱对卵磷 脂分子的选择性，可以获得较高纯度的卵磷脂。
4、卵磷脂的检测 （1）薄层层析分析 将卵磷脂样品与对照品分别配成2%的氯仿溶液， 用GF250硅胶板进行层析，展开剂为氯仿：甲醇： 水（65：25：4），层析完毕后，取出薄板，干燥， 用碘蒸汽显色，观察并拍照。
《专业综合实验2》
（2）紫外分光光度法测定
将自制的卵磷脂样品溶于无水乙醇中，浓度 为0.1%，用紫外分光光度计扫描其在190～ 400nm的吸收光谱，卵磷脂的紫外最大吸收峰 应在215nm左右的波长处。
《专业综合实验2》
将2.5g粗卵磷脂溶于25ml无水乙醇中，加入相当 于卵磷脂质量10%的Zncl2的水溶液3ml，室温下搅 拌0.5h，得金属盐卵磷脂络合物沉淀，过滤，收集 沉淀物。加入冰冷丙酮50ml洗涤沉淀物，搅拌1h， 过滤，收集沉淀物，置搪瓷盘中摊平，厚度不易超 过1.5cm，40℃左右减压真空干燥2～4h，可得淡黄 色蜡状的精制卵磷脂，准确称量，记录。