酶活性酶活力的含义
酶
酶活力，规定为：在最适反应条件（25℃）下，每
分钟内催化1微摩尔底物转化为产物所需的酶量定为 一个酶活力单位，即1U=1μmol/min。
酶的催化作用受测定环境的影响，因此测定
酶活力要在最适条件下进行，即最适温度、最适 pH、最适底物浓度和最适缓冲液离子强度等，只
性失活；（3）酶是两性电解质，在不同pH下呈现不
同的离子状态（4）和蛋白质一样具有胶体性质；（5） 具有蛋白质所具有的化学呈色反应。
2. 酶的组成分类
酶作为一种具有催化功能的蛋白质，与其它蛋白质 一样，相对分子质量很大，一般从一万到几十万以至大
到百万以上。
从化学组成来看酶可分为单纯蛋白质和结合（缀合） 蛋白质两类。属于单纯蛋白质的酶类，除了蛋白质外， 不含其它物质，如脲酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和核 糖核酸酶等。属于结合蛋白质的酶类，除了蛋白质外， 还要结合一些对热稳定的非蛋白质（辅助因子）小分子 物质或金属离子，其酶蛋白（脱辅酶）与辅助因子结合
酶反应的速度曲线
反应时间的延长，酶反应速度逐渐下降。因此，研
究酶反应速度应以酶促反应的初速度为准。
2. 酶的活力单位（U, activity unit）
酶活力的大小即酶含量的多少，用酶活力单位 表示，即酶单位（U）。 酶单位的定义是：在一定条件下，一定时间内 将一定量的底物转化为产物所需的酶量。
1961年国际生物化学协会酶学委员会及国际纯
一、习惯命名法
1961年以前使用的酶的名称都是习惯沿用的，称为 习惯名。
1. 根据酶作用的底物命名，如淀粉酶、蛋白酶。 2. 根据酶催化反应的性质及类型命名，如水解酶、氧 化酶等。 3. 结合上述两个原则命名，如琥珀酸脱氢酶。 4. 在这些命名的基础上，加上酶的来源或其它特点， 如胃蛋白酶、胰蛋白酶。
酶的分离纯化
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五、抗体酶
五、抗体酶 （abzyme） ） 抗体酶本质上是免疫球蛋白， 抗体酶本质上是免疫球蛋白，但在易变区被赋予了 免疫球蛋白 酶的属性，所以又称“催化性抗体” 酶的属性，所以又称“催化性抗体”（catalytic antibody）。 ）。 抗原： 抗原：
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二、调节酶
• 调节酶是对代谢调节起特殊作用的酶类。 调节酶是对代谢调节起特殊作用的酶类。 • 调节酶分子中有活性区和调节区，其催化活力 调节酶分子中有活性区 调节区， 活性区和
可因与调节剂的结合而改变， 可因与调节剂的结合而改变，有调节代谢反应 的功能。 的功能。
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三、酶的纯度鉴定
酶产品质量评价中常使用比活力， 酶产品质量评价中常使用比活力， 比活力越高，纯度越高。 比活力越高，纯度越高。
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第七节 一些酶的名称及概念介绍
寡聚酶( ) 一 寡聚酶(oligoenzyme)
酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地 酶分子的非催化部位与某些化合物可逆地 非催化部位 非共价键结合后引起酶分子构象的改变， 非共价键结合后引起酶分子构象的改变， 进而改变酶的活性状态， 进而改变酶的活性状态，这种现象称为别 构调节作用。 构调节作用。
别构激活作用 别构抑制作用
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三、同工酶
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中国科学院0107年生物化学与分子生物学真题
中国科学院0107年生物化学与分子生物学真题中国科学院0107年生物化学与分子生物学真题一.是非题(1X10)1. 所有a氨基酸中的a碳原子差不多上一个不对称的碳原子( )2. 蛋白质的四级结构能够定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( )3. 依照凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,因此最先被洗脱出来( )4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有专门的几何排列的局部空间结构,如此的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( )5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则可不能表现为竞争性抑制( )6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情形,同时也取决于底物分子的解离情形( )7. 寡聚酶一样是指由多个相同亚基组成的酶分子( )8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( )9. 线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( )10. 脂质体的直径能够小到150 ?( )11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( )12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( )13. CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( )14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也能够是次黄嘌呤( )15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( )16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( )17. 真核生物m RNA两端都含有3'-OH.( )18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调剂系统( )19. 所有氨酰-t RNA合成酶的作用差不多上把氨基酸连接在Trna 末端核糖的3'-羟基上( )20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都可不能被化学修饰( )二.选择题(1x25)1. 绒毛膜促性激素是一种_____________A. 甾醇类激素B. 脂肪酸衍生物激素C. 含氮激素2,溴化氰(CNBr)作用于____________A. 甲硫氨酰-XB. 精氨酰-XC. X-色氨酸D. X-组氨酸3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力____________A. ATP酶B. 蛋白质激酶C. 蛋白水解酶4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成________A. ααB. ββC. α2βγ25.胰岛素原是由一条"连接肽"通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条"连接肽"称为_________A. A链B. B链C. C肽6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为___________A. KmB. VmaxC. Km/VmaxD. Vmax/Km7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶__________________A. 由低活性形式变为高活性形式B. 由高活性形式变为低活性形式C. 活性不受阻碍8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,现在酶催化反应速度增大,是由于______A. 结合能增大B. 增加的结合能被用来降低反应活化能C. 增加的结合能被用来降低KmD. 增加的结合能被用来增大Km9.TGFβ受体具有下列哪一种酶的活性___________A. 酪氨酸激酶B. 酪氨酸磷酸酯酶C. 丝氨酸/苏氨酸激酶D. 腺苷酸环化酶10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大奉献有关:_______________A. 结构生理学B. 发育生理学C. 神经生物学D. 免疫学11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在_______________A. 钠钾ATP酶B. 线粒体ADP-ATP载体C. 蛋白激酶CD. 线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用要紧通过__________A. 离子键B. 疏水键C. 氢键D. Van der Waal氏力13.生物膜的差不多结构是___________A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中14.辅酶Q是____________A. NADH脱氢酶的辅基B. 电子传递链的载体C. 琥珀酸脱氢酶的辅基D. 脱羧酶的辅酶15.完整线粒体在状态4下的跨膜电位可达_____________A. 1mvB. 10mvC. 100mvD. 200mv16.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做___________A. 有义链B. 反义链C. 重链D. cDNA链17.一段寡聚合糖核苷酸TψCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基(非修饰核苷):A. 3个B. 4C. 5D. 618.已知有的真核内含子能编码RNA,这类RNA是___________A. 核小分子RNA(sn RNA)B. 核仁小分子RNA(sno RNA)C. 核不均一RNA(hnRNA)19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是____________A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成C. 尿酸氧化酶的激活剂,加速尿酸的降解20.α-鹅膏覃碱能强烈抑制___________A. 细菌RNA聚合酶B. 真核RNA聚合酶C. 细菌DNA聚合酶D. 真核DNA聚合酶21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关?A. ATP的水解B. GTP的水解C. Camp的水解D. 烟酰胺核苷酸参与22. 基因重组确实是DNA分子之间的:A. 共价连接B. 氢键连接C. 离子键连接23. DNA复制过程中双链的解开,要紧靠什么作用__________A. 引物合成酶B. Dnase IC. 限制性内切酶D. 拓扑异构酶24. 包括中国在内,有专门多国家科学家参与的人类基因组打算,到目前为止的进展情形如何?A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱B. 仅测定了7,10合22号染色体的核苷酸序列C. 测定了人基因组3X10^9碱基的全序列,但只是一部"天书",无法明白它的全部意义D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息,差不多了解大部分基因的功能25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是:________A. 磷酸吡哆醛B. 泛酸C. 烟酰胺D. 硫氨素三填空题(每空一分)1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为__________________然后是胰岛素的前体,称为_________2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种___________结构,其中每一股又是一种专门的_____________结构.3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_________型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_____________4. "蛋白质组"是指____________________5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp,蛋白激酶C的专一活化因子是__________,此外还有某类型的蛋白激酶能够由_______作为专一激活因子6. 已阐明原子辨论率三维结构的膜固有蛋白有______________,__________________等(仅写两个)7. 霍乱毒素的受体是一种____________化合物8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成ATP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是__________9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,阻碍膜脂流淌性的要紧因素是_____________--10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离_________于后者;前者的直径__________于后者11. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP)差不多上通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有___________和____________活性12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸PRPP)除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与___________和_____________氨基酸代谢有关.13. 大肠杆菌的启动子序列包含有___________-,_______________及____________等信息.14. 逆转录病毒含有单链RNA,感染细胞后转变成双链DNA,这种DNA必须__________,才能发生病毒的复制.15. 真核RNA聚合酶I要紧位于细胞__________中,合成大分子核糖体RNA前体四.问答题(5X6)1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个时期?(仅需写出时期名称)2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的缺失,因此操作过程通常要求在低温下进行.假如醇化一个热稳固(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作?请简述你的见解.3. 由一个抑制剂抑制完整线粒体β-羟基丁酸或琥珀酸的氧化,但不抑制(维生素C+四甲基对苯二胺)的氧化,那个抑制剂的抑制部位应该在电子传递链的什么部位?什么缘故?4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接5. 酵母细胞利用半乳糖的几种酶基因GAL7-GAL10-GAL1,它们的转录是如何受调控因子GAL4和GAL80调剂的?中国科学院2002年研究生入学试题《生物化学与分子生物学》一、是非题：15题，每题1分，共15分。
4 酶 (Enzyme)
5）酶的转换数：
酶的转化数(turnover number，即kcat)是 它的最大催化活性的一种量度。 kcat定义为： 当酶被底物饱和时,每分子的酶在单位时间内 催化底物分子转变成产物的数量。转换数也称 为酶的分子活性(molecular activity)。
对于在简单的米-曼氏方程情形下(只有 一种ES复合物),假定反应混合物中的酶浓度 ([ET]或[E0])是已知道, 在饱和的[S]下,
一. 命名原则 1、习惯命名 例如：乙醇脱氢酶 2.、系统命名的原则 ●应标明酶的所有底物及催化的性质，并用︰ 符号把底物分开。例如：乙醇︰NAD+脱氢酶. ●不管催化正反应还是逆反应，一般都用同一 名称。 ●如果所催化的反应包含二种变化，则尽可能 用同一种变化来表示，另一个功能附后。例如： L-谷氨脱氢酶催化的反应是：该酶的系统命名 是 谷氨酸︰NAD+脱氢酶（脱氨）。
该酶的系统命名是 谷氨 酸︰NAD+脱氢酶（脱氨）
二、酶的分类
1、氧化还原酶类: 催化氧化还原反应 A· + B → A + B· 2H 2H
这类酶包括需氧 脱氢酶、氧化酶 和不需氧脱氢酶
2、转移酶类：催化功能基团的转移反应（插 入4-2b）： AB + C ←→A + BC
3、水解酶类:催化水解反应： AB + HOH →AOH + BH （可视为一类特殊的转移酶）
③对于讨论酶的催化效率来说，最有用的参
数应该包含kcat和Km两者。 根据米氏方程的推导
2、pH对酶促反应的影响 酶作用环境的pH可以影响酶蛋白的结构﹑ 酶活性部位的解离状态﹑辅酶的解离以及底物 分子的解离，从而影响酶与底物的结合以及对 底物的催化效力。 一般来说，酶只在一个有限的pH范围内是 活泼的。大多数酶只有在某一特定的pH条件下， 它 的 催 化 活 性 是 最 大 的 。 这 一 pH 称 为 最 适 pH （pH optimum）。
生化名词解释
一、名词解释1.等电点: 对于某种氨基酸而言，当溶液在某一特定pH时，氨基酸以两性离子的形式存在，正电荷与负电荷数相等，净电荷，在直流电=电场中，既不向正极移动，也不向负极移动。
这时溶液的pH就是该氨基酸的等电点。
2.肽单位：蛋白质中肽键的C、N及其相连的4个原子共同组成肽单位。
3.结构域：球蛋白分子的一条多肽链中常常存在一些紧密的、相对独立的区域，称为结构域，它是在超二级结构的基础上形成的具有一定功能的结构单位。
4.酶活力：又称酶活性，是指酶催化化学反应的能力。
（用某一化学反应的速度表示）5.比活力：也称比活性，是指每毫克酶蛋白做具有的活力单位数。
比活力越高，纯度越高。
6.酶的活性中心：是酶分子上由催化基团和结合基团构成的一个微区。
7.酶原：酶的无活性前体。
8.同工酶：是指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质和免疫性质不同的一组酶。
9.核酶：又称核酸类酶,是具有催化功能的RNA分子，是生物催化剂，可降解特异的mRNA序列。
10.核酸的变性：指碱基对之间的氢键断裂，双螺旋结构松开，称为两股单链的DNA分子。
11.核酸的复性：在适当的条件下，变性的DNA分开的两股单链又重新恢复成双螺旋结构，这个过程称为复性。
12.Tm：将50%的DNA分子发生变性时的温度称为中点解链温度或熔点温度（Tm）。
13.生物氧化：糖、脂肪和蛋白质等营养物质在细胞内氧化分解生成二氧化碳和水并释放能量的过程。
14.呼吸链：是氧化呼吸链的简称，又称电子传递链或电子传递系统，是指排列在线粒体内膜上的由多种脱氢酶以及氢和电子传递体组成的氧化还原体系。
15.底物水平磷酸化：营养物质在代谢过程中经过脱氢、脱氧、分子重排和烯醇化等反应，分子内的能力重新排布，形成了高能磷酸基团或高能键随后直接将高能磷酰基转移给ADP生成ATP；或将水解高能磷酸键释放的自由能用于ADP与无机磷酸反应（ATP+Pi）生成ATP，以这样的方式生成ATP的过程称为底物水平磷酸化。
全国统一高考生物试卷(新课标ⅰ)(含解析版)
全国统一高考生物试卷（新课标Ⅰ）一、选择题（共6小题，每小题6分，满分36分）1．（6分）下列与细胞相关的叙述，正确的是（）A．核糖体、溶酶体都是具有膜结构的细胞器B．酵母菌的细胞核内含有DNA和RNA两类核酸C．蓝藻细胞的能量来源于其线粒体有氧呼吸过程D．在叶绿体中可进行CO2的固定但不能合成ATP2．（6分）离子泵是一种具有ATP水解酶活性的载体蛋白，能利用水解ATP释放的能量跨膜运输离子．下列叙述正确的是（）A．离子通过离子泵的跨膜运输属于协助扩散B．离子通过离子泵的跨膜运输是顺着浓度阶梯进行的C．动物一氧化碳中毒会降低离子泵跨膜运输离子的速率D．加入蛋白质变性剂会提高离子泵跨膜运输离子的速率3．（6分）若除酶外所有试剂均已预保温，则在测定酶活力的试验中，下列操作顺序合理的是（）A．加入酶→加入底物→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量B．加入底物→加入酶→计时→加入缓冲液→保温→一段时间后检测产物的量C．加入缓冲液→加入底物→加入酶→保温并计时→一段时间后检测产物的量D．加入底物→计时→加入酶→加入缓冲液→保温并计时→一段时间后检测产物的量4．（6分）下列与神经细胞有关的叙述，错误的是（）A．ATP能在神经元线粒体的内膜上产生B．神经递质在突触间隙中的移动消耗ATPC．突触后膜上受体蛋白体的合成需要消耗ATPD．神经细胞兴奋后恢复为静息状态消耗ATP5．（6分）在漫长的历史时期内，我们的祖先通过自身的生产和生活实践，积累了对生态方面的感性认识和经验，并形成了一些生态学思想，如：自然与人和谐统一的思想．根据这一思想和生态学知识，下列说法错误的是（）A．生态系统的物质循环和能量流动有其自身的运行规律B．若人与自然和谐统一，生产者固定的能量便可反复利用C．“退耕还林、还草”是体现自然与人和谐统一思想的实例D．人类应以保持生态系统相对稳定为原则，确定自己的消耗标准6．（6分）理论上，下列关于人类单基因遗传病的叙述，正确的是（）A．常染色体隐性遗传病在男性中的发病率等于该病致病基因的基因频率B．常染色体显性遗传病在女性中的发病率等于该病致病基因的基因频率C．X染色体显性遗传病在女性中的发病率等于该病致病基因的基因频率D．X染色体隐性遗传病在男性中的发病率等于该病致病基因的基因频率二、解答题（共4小题，满分39分）7．（10分）有关DNA分子的研究中，常用32P来标记DNA分子．用α、β和γ表示ATP或dATP （d表示脱氧）上三个磷酸基团所处的位置（A﹣Pα～Pβ～Pγ或dA﹣Pα～Pβ～Pγ）．回答下列问题；（1）某种酶可以催化ATP的一个磷酸基团转移到DNA末端上，同时产生ADP．若要用该酶把32P标记到DNA末端上，那么带有32P的磷酸基团应在ATP的（填“α”“β”或γ”）位上．（2）若用带有32P标记的dATP作为DNA生物合成的原料，将32P标记到新合成的DNA分子上，则带有32P的磷酸基团应在dATP的（填“α”“β”或γ”）位上．（3）将一个带有某种噬菌体DNA分子的两条链用32P进行标记，并使其感染大肠杆菌，在不含有32P的培养基中培养一段时间．若得到的所有噬菌体双链DNA分子都装配成噬菌体（n 个）并释放，则其中含有32P的噬菌体所占比例为，原因是．8．（8分）为了探究生长条件对植物光合作用的影响，某研究小组将某品种植物的盆栽苗分成甲、乙两组，置于人工气候室中，甲组模拟自然光照，乙组提供低光照，其他培养条件相同。
酶 答案
第四章 酶一、名词解释1．酶：是生物体内一类具有催化活性和特定空间构象的生物大分子，包括蛋白质和核酸。
2．酶的专一性：一种酶只作用于一类化合物或一定的化学键，以促进一定的化学变化，生成一定的产物。
这种现象称为酶的专一性或称酶的特异性。
3．酶的活性中心：或称活性部位。
指酶分子中直接和底物结合，并和酶催化作用直接有关的部位。
4．2.抗体酶（abzyme ）：是一种具有催化能力的蛋白质，其本质上是免疫球蛋白，但是在易变区被赋予了酶的属性，所以又称为“催化型抗体”。
5．米氏方程：6．激活剂：使酶活性增加的物质称为激活剂。
7．酶活力：也称为酶活性，是指酶催化一定化学反应的能力。
8．米氏常数Km ：酶的特征常数，其含义是酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。
9．可逆抑制作用：抑制剂常以非共价键与酶可逆结合，使酶活性降低或丧失。
可以用透析或超滤等物理方法去除，这种抑制作用称可逆抑制作用。
10．不可逆抑制作用：抑制剂常以共价键与酶活性中心上的必需基团相结合，抑制剂与酶的结合牢固不能用透析或超滤等物理方法去除，这种抑制作用称不可逆抑制作用。
11．变构酶：除具有酶的活性中心外，还具有与调节物结合的调节中心的寡聚酶称为变构酶。
12．同工酶：指催化相同化学反应，而酶蛋白的分子结构、理化性质不同的一组酶。
13．单体酶：只有一条多肽链的酶。
14．寡聚酶：由几条或几十条相同或不同的多肽链亚基以非共价键结合的酶。
15．多酶复合体：由几种功能相关的酶彼此嵌合形成复合体。
16．核酶：化学本质为RNA 的酶。
17．酶的活力单位：单位时间内转化单位物质的量的底物所需要的酶量。
18．比活力：指每单位质量样品中的酶活力。
19. 诱导酶（inducenzyme ）是细胞内在正常状态下一类很少存在或没有的酶，当细胞中因加入了诱导物后而被诱导产生的酶，它的含量在诱导物存在下显著增高，这种诱导物往往是该酶底物的类似物或底物本身。
20. 全酶；即蛋白质部分和非蛋白质部分（辅助因子）。
酶活性酶活力的含义
优点及不足
实例
可反复利用，但 一种 固定化葡萄糖 只催化②_____ 一类 化学 异构酶 或③_____ 反应 成本低、操作容 固定化酵母细 易，但反应效果 胞 ⑤_____ 下降
高考真题体验 核心整合归纳 限时规范训练
一系列
——心堂亮
1．酶活性(酶活力)测定的一般原理和方法 (1)酶活性(酶活力)的含义：酶的活性(酶活力)是指酶催化一定化学反应的能 力。 (2)酶活性(酶活力)测定的一般原理和方法：酶的活性(酶活力)通常以单位时 间内底物的消耗量或者在单位时间内产物的生成量来表示。 2．影响酶活性的因素、酶的用量及应用实验探究时注意的问题 (1)实验设计时要遵循单一变量原则和对照原则，严格控制无关变量。 (2)探究不同温度(或pH)对酶活性的影响时，温度(或pH)作为自变量，通常通 过设置合理的梯度来确定最适值。最适值是通过比较相同时间内获得的产量 或效果来确定的。
这一种碳源而生存。因此，A培养基可以作为分离联苯降解菌的选择培 养基。
高考真题体验 核心整合归纳 限时规范训练
(2)根据表格数据，当培养基中添加Mn2＋时，能使联苯水解酶的活性升高。金属离 子是通过与酶结合后，改变酶的空间结构来影响酶活性的。 (3)酶具有专一性、高效性，酶催化后，酶分子结构不改变，如果能利用酶工程将 酶固定下来，便可以重复利用，使酶的催化反应连续进行。酶工程的操作包括酶的 生产、酶的分离纯化、酶的固定化和酶的应用等几个方面。 (4)影响酶促反应速度的因素有酶浓度、底物浓度和温度、pH等反应条件。在反应 条件适宜，酶量不足的情况下，增加底物量，酶促反应速度不增加，此时酶促反应 速度的限制因子是酶浓度。随着酶浓度的增加，当酶浓度不是酶促反应速度的限制 因子时，底物量增加，酶促反应速度增加。 (5)红球菌和假单孢菌降解多聚联苯的能力不同的原因可能是两种菌内酶量不同， 或者是两种菌内酶结构的不同致使酶活性不同。 答案 A 该培养基中多聚联苯为唯一碳源 (1)Mn2＋ 金属离子与酶结合可以改 便于重复利用，能连
酶活力名词解释生物化学
酶活力名词解释生物化学
酶活力，也称酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。
酶活力的大小可以用在一定条件下，酶催化某一反应的反应速度来表示。
反应速率越大，活力就越高，反应速率越小，酶活力就越低。
因此，酶活力测定实际上就是酶的定量测定。
在生物化学中，酶活力的单位定义是在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所用的酶量，通常用酶促反应速度来表示，即单位时间内、单位体积中底物的减少量或产物的增加量，单位是浓度/单位时间。
此外，比活力是一个表示酶浓度或者说酶纯度的参数，是指每毫克蛋白质所含的酶活力单位数。
酶活力的测定
4. 抑制剂和激活剂
抑制剂和激活剂是影 响酶活力的其他因素 。抑制剂会抑制酶的 活性，而激活剂则会 增强酶的活性。在测 定酶活力时，需要排 除抑制剂和激活剂的 影响，并进行适当的 样品处理和数据处理 以确保实验结果的准 确性
酶活力的测定
酶活力的测定
三、实验步骤与操作要点
酶活力测定的实验步骤包括样品准备、反应体系配制、温度控制、时间记录、产物或底物 浓度测定等。在操作过程中需要注意以下几点
酶活力是指酶催化特定化学反应的能力， 通常以单位时间内转换底物的摩尔数来 表示
通过测定酶活力，可以了解酶的性质、 作用机制以及底物特异性等方面的信息一、酶活力测 定的基本原理
酶活力测定的基本原 理是利用酶催化的化 学反应速率与酶浓度 成正比的性质，通过 测定反应速率来推算 酶的浓度和活力。常 用的方法有终点法、 动力学法和连续监测 法
酶活力测定结果受到多种因素 的影响，包括温度、pH值、底 物浓度、抑制剂和激活剂等。 为了获得准确的测定结果，需 要严格控制实验条件，并进行 适当的样品处理和数据处理
酶活力的测定
1. 温度
温度是影响酶活力的 重要因素之一。大多 数酶在一定的温度范 围内具有最佳活性， 温度过高或过低都会 影响酶的活性。因此 ，在测定酶活力时， 需要选择适当的温度 ，并进行温度控制以 确保实验结果的准确 性
酶活力的测定
四、时间记录
时间记录是酶活力测定的关键步骤之一。在酶促反应过程中，需要准确记录反应时间，以 便计算反应速率和产物生成量。在时间记录过程中，需要注意控制反应时间，避免过长或 过短的反应时间对实验结果的影响
酶活力的测定
五、产物或底物浓 度测定
产物或底物浓度的测定是酶活力 测定的关键步骤之一。通过测定 产物或底物的浓度，可以计算出 酶的活性。在浓度测定过程中， 需要注意选择适当的测定方法， 并进行准确的浓度计算。常用的 浓度测定方法有分光光度法、色 谱法等
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解析
溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合，A项错
误。海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中，以制备凝胶珠；凝 胶珠用蒸馏水冲洗2～3次后，可转移到发酵装臵中；搅拌可使酵母菌与 培养液充分接触，有利于发酵的顺利进行，故B、C、D三个选项正确。 答案 BCD
性，可在第三步得到的溶液中加入氯仿，使蛋白质变性。
答案 (1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 (2)DNA断裂
(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最
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DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸 水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。
材料保存温度
20 ℃ －20 ℃
花菜
＋＋ ＋＋＋
辣椒
＋ ＋＋
蒜黄
＋＋＋ ＋＋＋＋
(注：“＋”越多表示蓝色越深) 分析上述实验过程，回答下列问题： (1)该探究性实验课题名称是________。 (2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少________。 (3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论1：与20 ℃相比，相同实验材料在－20 ℃条件下保存，DNA的提 取量较多。 结论2：________。
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2．(2011· 广东理综，5)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是 ( A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 解析 猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少，是 )。
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②针对结论1，请提出合理的解释：________。 (4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA 影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三 步的基础上继续操作的步骤是：________，然后用体积分数为95%的冷酒精溶 液使DNA析出。 解析 (1)该实验中把不同的材料在不同条件(温度)下处理，目的是探究不同
二、获取信息的能力
4．(2010· 江苏生物，25)(多选)图1表示制备固定化酵母细胞的有关操 作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，下列叙述正 确的是 ( )
A．刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液 B．图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触 D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
丝状物溶解在0.015 mol/L的NaCl中，加入二苯胺试剂，需沸水浴加 热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血为实验材料，需要对材料的 细胞壁进行处理。调节NaCl溶液浓度改变不同物质在其中的溶解 度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质，故B正确。 答案 B
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材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。(2)“缓缓地”搅拌是为了减少DNA断 裂。(3)分析表格可得出结论：①相同材料在－20 ℃条件下保存，DNA的提取 量较多。原因可能是低温抑制了DNA酶的活性，DNA降解速度慢。②等质量的不 同实验材料，在相同保存温度下，从蒜黄中提取的DNA最多。(4)依据氯仿的特
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三、实验与探究能力
5．(2010· 江苏生物，32)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活 动，具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后 分成两组，一组置于20 ℃、另一组置于－20 ℃条件下保存24 h。 DNA粗提取： 第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液，充分研 磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。 第二步：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入20 mL体积分 数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮 状物缠绕在玻璃棒上。 第三步：取6支试管，分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮 状物。
第2讲 酶的应用和生物技术在其他方面的应用
一、理解能力
1. (2011· 江苏生物，15)下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是 ( A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶 B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化 )。
C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤
D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层 解析 利用酶解法和吸水涨破法使细胞解体，用于制备胞内酶；酶的纯化 和分离的方法有透析法、离心沉降法和电泳法；纤维素酶能去除棉纺织品 表面浮毛，平整织物表面，故可用添加纤维素酶的洗衣粉洗涤棉织物；多 酶片中的胃蛋白酶位于片剂的最外层，保持其他酶在胃中不被破坏。 答案 A
动情况，并据此判断分离效果。故D不正确。
答案 D
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3．(2011· 江苏生物，19)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验 中，相关叙述正确的是 A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L，滤去析出物 B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质 C．将丝状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色 D．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同 解析 用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14 mol/L时，滤取析出物；将蛋白分四步：红细胞的洗涤、血 红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中洗涤红细胞时，要用生 理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要不破坏红细胞，然后再
用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋白时
用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质 量大的蛋白质移动速度较快；血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移