第4章 受精
第4章-胚胎培养PPT演示课件
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复习思考题：
1、植物胚胎培养分为哪些类型？各有何种特点 和要求？
2、胚胎培养有何意义？
3.花器官培养通常指花的哪些部分培养?常用的 基本培养基是什么?
4.在进行幼胚培养时，由于幼胚过小而分离困 难，可采取什么途径解决?
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温度。 C.光照：通常弱光培养。光暗交替有利幼胚生
长
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原胚(幼胚)的培养的条件
➢ 无机氮：
包括硝酸盐、亚硝酸盐或铵盐；
➢ 渗透压：
蔗糖，8%-10%，不同发育期，渗透压不一 样，初期高（WHY）。因为自然条件下，原 胚被一ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ高渗液体包围着。
➢ 复杂的天然提取物：
椰乳 CM有促进幼胚生长和分化的作用
4.培养：
加入生长素和CTK，诱 导形成愈伤组织或胚状 体，再分化成植株。
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二、种子培养
优点： 1.植株分化容易，无菌操作方便，
打破休眠。 2.使杂种败育种子正常萌发。
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种子结构
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培养方法：
1.种子消毒：
◇种皮厚或不饱满的用0.1%升汞浸10-20min， 或用10%次氯酸钠浸15-20min。
（2N）
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一.培养类型
1、离体胚培养时期 A.异养期 B.自养期
A.异养期，完全依赖于周围细胞中的代谢，而 且依赖于周围胚乳消耗的养料。B.自养期，胚 能吸收培养基中的无机盐和糖，经过自身的代 谢作用合成其生长所必需的物质。
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2、离体胚培养类型 ⑴成熟胚培养 ⑵幼胚培养
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2、离体胚培养类型
完全成熟的胚乳，生理活动很弱，在诱导脱分化前， 必须借助于原位胚的萌发，使其活化。
人工受精
人工授精
第一节
概述
第四章 人工授精 第一节 概述
概念
• 人工授精是利用器械采集雄性动物的精液。 人工授精是利用器械采集雄性动物的精液。 经检查和处理后， 经检查和处理后，再用器械将精液输入到 发情雌性动物的生殖道内， 发情雌性动物的生殖道内，以代替自然交 配而繁殖后代的一种技术。 配而繁殖后代的一种技术。
目录
猪的拳握法采精
第四章 人工授精 第二节 采 精
(三)电剌激法
• 本法是通过电流剌激公畜引起射精而采集精液的一 种方法。适用于各种动物。 种方法。适用于各种动物。 • 电剌激采精器由电子控制器和电极探棒两部分组成。 电剌激采精器由电子控制器和电极探棒两部分组成。 • 电剌激采精应将公畜以站立或侧卧姿势保定。保定 电剌激采精应将公畜以站立或侧卧姿势保定。 剪去包皮及其周围的被毛， 后，剪去包皮及其周围的被毛，并用生理盐水冲洗 拭干，然后将电极探棒经肛门缓慢插入直肠， 拭干，然后将电极探棒经肛门缓慢插入直肠，达到 靠近输精管壶腹部的直肠底壁， 靠近输精管壶腹部的直肠底壁，大家畜插入深度约 20-25厘米 厘米， 10厘米 厘米， 10-15厘米 厘米， 厘米。 20-25厘米，羊10厘米，犬10-15厘米，兔5厘米。然 后调节控制器，选择好频率，开通电源。 后调节控制器，选择好频率，开通电源。调节电压 由低开始，按一定时间通电及间歇， 时，由低开始，按一定时间通电及间歇，逐步增高 剌激强度和电压，直至公畜伸出阴茎，勃起射精， 剌激强度和电压，直至公畜伸出阴茎，勃起射精， 将精液收集于附有保温装置的集精瓶内。 将精液收集于附有保温装置的集精瓶内。
目录
第四章 人工授精 第二节 采精
(三)器械准备
• 采精所需要的器械要事先准备好，力求清 采精所需要的器械要事先准备好， 洁无菌，在使用之前要严格消毒， 洁无菌，在使用之前要严格消毒， 每次 使用后必须洗刷干净。 使用后必须洗刷干净。
第四章 受精
2.慢速阻止多精受精
慢速阻止多精入卵通过皮层反应得以实现。当第一个精 子与卵子发生质膜融合时，质膜融合处的卵子皮层颗粒 与卵子质膜发生融合。胞吐作用发生，皮层颗粒中的物 质释放入卵黄膜和卵子质膜之间的狭窄卵周隙中。皮层 颗粒的这种变化在一分钟之内波及全卵。
图4.15 海胆卵子的皮层反应
机制
从皮层颗粒中释放出来进入卵周隙的物质主要是蛋白 质和多糖。其中有一类蛋白水解酶能分解卵黄膜和质 膜之间起连接作用的蛋白质，卵黄膜和质膜不再紧紧 相连。 其次，该酶还破坏卵黄膜上精子受体蛋白，使精子不 可能与卵黄膜结合。
图4.7 小鼠精子顶体反应地点
2.海胆精子穿透卵胶膜和卵黄膜
海胆精子和其它无脊椎动物精子在顶体反应前没有经 过获能的阶段。当海胆精子与卵胶膜接触时，精子发 生顶体反应。
图4.8 海胆精子的顶体反应（A.精化，精子水解酶外泄；D.顶体突起。）
1.快速阻止多精受精
快速阻止多精受精由卵子质膜的电位变化来调节。
卵子质膜电位的升高为什么可以阻止多精入卵呢？
有两种可能的解释：
第一种解释认为卵子的质膜具有的精子受体是一种对电压 敏感的蛋白质。只有当卵子质膜的电位是负的状态下，该 精子受体才会与精子结合。 第二种解释认为精子质膜上有一种对电压敏感的蛋白，它 的作用是促进精卵质膜的融合。只有当卵子膜的电位是负 的状态下，精子质膜上的这种蛋白才会发挥作用。
二、皮层反应的调控
未受精的海胆卵子中贮藏有大量的钙离子。这些钙离子位 于内质网腔中，处于束缚状态。当精卵质膜融合时，钙离 子从内质网中泄漏出来，成为自由钙离子。卵子细胞质中 自由钙离子的增加触发了卵子的皮层反应。
受精卵中自由钙离子增加由下述实验证实
第4章 妊娠期妇女的护理教案精编版
授课教师马雪芩授课班级15级护理（2）班授课章节第三章正常妊娠期妇女的护理授课题目第一节妊娠生理（受精与着床）教学地点第二教室授课方式（请打√）理论课√讨论课√实训课□其他□课时安排1授课时间2016年10月13日教学分析正常妊娠期妇女的护理主要揭示妊娠生理，妊娠期母体变化及临床表现，更好的为孕妇做出健康指导教学目标认知目标：（知识）受精及受精卵的发育和植入能力目标：（专业能力、方法能力、社会能力）对妊娠孕妇做出优质的整体护理素质目标：具有高度的责任心、同情心和爱心教学重点：1、妊娠、受精、着床的概念2、受精卵的植入与输送教学难点1、蜕膜及绒毛膜的形成教学设计利用讲授、小组讨论、多媒体课件、学生全方位自主分析老师总结归纳等全方位理解本节课内容。
重点运用多媒体示教及视频的方法去教学，逐步使学生更好的理解妊娠生理过程学法设计本意主要是概念和记忆性内容，因此，为了减少理解的难度和记忆的枯燥。
学习上采用讨论式学习、视频等，帮助记忆。
教学准备人民卫生出版社《妇产科护理学》第三版教材教案、PPT小组讨论教学内容（任务）及过程设计教学组织、教学方法或采取的措施与手段和时间分配1．复习旧课导入新课（1）、雌激素对输卵管具有什么样的作用？（2）、输卵管由内向外包括那几个部位？（3）、卵巢的功能是什么？2．教学内容第一节妊娠生理妊娠是胚胎和胎儿在母体内生长发育的过程。
卵子受精是妊娠的开始，胎儿及其附属物自母体排出是妊娠的终止。
因受精日期不易确定，临床上以末次月经第1日作为妊娠的开始，妊娠全过程平均约40周，即10个妊娠月。
3min问题：1、妊娠的概念是什么？2、妊娠时间如何计算？（讨论）2min 回答1min归纳总结1min一、受精与着床：（一）受精概念：精子和卵子结合形成受精卵的过程，称为受精，1．受精部位：输卵管壶腹部与峡部连接处时间：一般发生在排卵后12小时内，整个受精的过程约需24小时2．受精卵的发育：包括桑椹期、早期囊胚期、晚期囊胚。
4第四章遗传物质-基因和染色体
第四章遗传物质——基因和染色体第一节核被膜与核孔复合体细胞核的结构：在固定和染色的细胞中，可观察到细胞有下列结构：核被膜、染色质、核仁、核液（质）四部分。
一、核被膜（nuclear envelope）亦称核膜（nuclear membrane），由此使遗传物质DNA与细胞质分开。
电镜下证实为双层单位膜呈同心性排列。
除两膜之间有间隙外，膜上还有些特化结构。
所以，认为核被膜含义深刻，包括内容多，并执行重要的生理功能。
（一）核被膜结构1 外层核被膜（ONE）（外核膜）膜厚 6.5—7.5nm，相邻细胞质的一面常有核糖体附着，并有时与内质网（RER）相连，因此显得粗糙不平。
2 内层核被膜（INE）（内核膜）：膜厚度基本同ONE，膜上无核糖体附着，显得比ONE 平滑。
但在其内表面常附有酸性蛋白质分子的聚合物组成的纤维网状结构（密电子物质），称纤维层（fibrous Lamina）或核纤层（nuclear lamina），又有内致密层之称。
其厚度约在10—20nm（30—160nm），是位于细胞内核膜下的纤维蛋白或纤维蛋白网络。
3 核周隙（perinuclear space）又有核围腔或核围池之称。
指两膜之间的空隙，宽约20—40nm（10—50nm），内充满液态无定形物质（蛋白质、酶类、脂蛋白、分泌蛋白、组蛋白等），它是核质之间活跃的物质交换渠道（有些部位直接与ER或Golgi池相通）。
4 核孔（nuclear pore）核膜并不完全连续，在许多部位，核膜内外两层常彼此融合，形成环状孔道，称为核孔，它们是核质之间的重要通道。
（二）核被膜的主要功能核孔复合体可以看作是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体，并且是一个双功能、双向性的亲水性核质交换通道。
双功能表现在它有两种运输方式：被动扩散与主动运输；双向性表现在既介导蛋白质的入核转运，又介导RNA、核糖核蛋白颗粒（RNP）的出核转运。
1、构成核、质之间的天然选择性屏障避免生命活动的彼此干扰，保护DNA不受细胞骨架运动所产生的机械力的损伤2、核质之间的物质交换与信息交流1）通过核孔复合体的被动扩散——小分子物质的转运：核孔复合体作为被动扩散的亲水通道，其有效直径为9～10nm，有的可达12.5nm，即离子、小分子（相对分子质量在60KD以下）以及直径在10nm以下的物质原则上可以自由通过。
第4章 妊娠
3．带状胎盘 狗、猫肉食性动物属于此类。胎儿绒 毛膜上的绒毛集中于绒毛膜中央在尿膜绒 毛膜上形成环带状，子宫内膜上也形成相 应的带母体胎盘。 特点： 分娩时母体胎盘组织脱落，子宫血管 破裂，故有出血现象。
犬带状胎盘
4．盘状胎盘 见于啮齿类和灵长类动物。绒毛膜上的绒毛 在发育过程中逐渐集中，局限于一圆形区域。 呈盘状，故称。
动物胚胎着床时间
牛：12－15天 28－32天开始――到40－45天完成； 羊：12－20天 14－16天开始――到28－35天完成； 猪：10－12天 14－16天开始――到25－26天完成； 马：60－65天 35－40天开始――到95－105天完成；
动物胚胎着床部位
子宫中最有利于发育的地方开始，如牛、 羊，多在子宫角基部开始，向中部发展。因 这里是子宫中动脉进入子宫的地方，血液供 应最为丰富。
（二）胎盘的生理作用 胎盘担负着胎儿的消化、呼吸和排泄器 官的作用，而且还有内分泌机能。 1．胎盘的隔（屏）障作用： 母子之间物质交换，通过胎盘，具有选择 作用。即除了单纯性弥散作用外，还能加速 弥散或主动转运作用。 ①简单的物质可以直接通过胎盘：水、Nacl、 Cu、I、VB和VC等；
②某些物质不能直接通过，须经过生化改 造后才能通过： 脂肪→脂肪酸＋甘油 蛋白质→氨基酸 葡萄糖（母体主要糖类）→胎盘转化为果 糖（胎儿血糖的70－80％）。
四、脐带
脐带是连接胎儿和胎盘的纽带，其外膜为羊膜， 形成羊膜鞘，内含：脐血管、脐尿管、卵黄 囊遗迹等。 长度：牛：30－40cm 羊：7-12cm 猪：20-25cm
血管：牛、羊：动脉两条 静脉两条，但进入脐孔 后合并为一条。 马、猪：动脉两条，静脉一条 注：牛羊脐孔组织与血管之间联系疏松， 故生下后，脐带不能撕太短，否则，易 缩至腹腔，造成内出血。
生物北师大版七年级上册第2单元第4章第1节细胞分化形成组织 PPT课件
解析：图中①②③表示细胞分裂的过程，④细胞的 形态、结构和功能产生了差异，形成了不同的组织，表 示细胞分化的过程， A 正确；人的大脑皮层主要由神经 组织构成，具有接受刺激，产生和传导兴奋的作用，B 正确；血液是一种流动的结缔组织，有营养、保护等功 能，C 正确；细胞分化指在个体发育中，细胞后代在形 态、结构和功能上发生稳定性的差异的过程。两个过程 细胞核中的遗传物质不改变，D 错误。
组织
成熟区 盐；__筛__管____：向下运输有机物
【例 1】如图是细胞的有关过程。其中①③分别表示 细胞的( )
A．分化、分裂 C．分裂、生长
B．分裂、分化 D．分化、生长
[分析](1)细胞分裂就是一个细胞分成两个细胞的过 程，细胞分裂使细胞的数目增多。(2)细胞分化是指细胞 在生长过程中细胞的形态、结构和功能发生变化的过程， 细胞分化形成了不同的组织，如动物的肌肉组织、上皮 组织、神经组织和结缔组织，植物的保护组织、营养组 织、分生组织和输导组织。(3)新分裂产生的细胞体积很 小，需要不断从周围环境中吸收营养物质，并且转变成 组成自身的物质，体积逐渐增大，这就是细胞的生长。
A．大脑的主要组织是神经组织 B．心脏的主要组织是肌肉组织 C．骨的主要组织是机械组织 D．皮肤的表面是上皮组织
解析：大脑主要由神经组织构成，因为神经组织主 要由神经细胞构成，能够产生和传导兴奋，A 正确；心 脏的主要组织是肌肉组织，主要由肌细胞构成，具有收 缩、舒张等功能，为血液循环提供动力，B 正确；骨主 要是结缔组织，具有连接、支持、保护、营养的作用，C 错误；皮肤处在身体最外面，主要由上皮组织构成，具 有保护、分泌等作用，D 正确。
生物体结构层次上它们同属于( B )
A．细胞
B．组织
八年级生物上册 第四单元 第一章 第二节 传粉与受精(
1.受精的过程及定义 花粉落到柱头上后,受 柱头上 黏液 的刺激开始萌发,长出 花粉管 。 通过花柱伸入 花粉管 ,一直到达 子房 。花粉管中有两个 胚珠 。花 粉管进入胚珠后,顶端破裂释放出 精子 ,一个精子与卵细胞 融合形成 受精卵,另一个精子与 中央细胞 融合。精子和卵细胞融合形成受精 卵的过程叫做 受精 。两个精子分别与卵细胞和中央细胞融 合的现象,叫做 双受精 。 2.有性生殖的定义 经过 两性生殖细胞 结合的生殖方式叫做有性生殖。
1
2
3
4
1.一株绿色开花植物,在完成传粉后,下一个生理活动是( )
A.开花
B.受精
C.结果
D.形成种子
关闭
B
答案
1
2
3
4
2.被子植物的卵细胞存在于下列哪一结构中?( )
A.花粉
B.花粉管 C.胚珠 D.柱头
关闭
C
答案
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（五）、遗传物质的融合
雄原核：单倍性精原核在进入卵细胞时呈高度浓缩
的状态，称为雄原核（male pronucleus）
雌原核：与之对应的卵细胞的单倍性的核称为雌原 核（female pronucleus）
合子核：雌原核和雄原核相互靠近，最后两核融合 形成合子核（zygote nucleus）
代谢抑制状态，使卵细胞活化，重新进入代谢活 跃状态，以形成新的生命个体，该过程称为卵子 活化（activation）。
海胆卵受精后活化的路径和可能机制：
精 子 诱 导 卵 激 活 的 机 制
Calcium Wave激活受精卵的发育
向卵质中注射钙离子，可以使其减数分裂继续； 向卵质中注射钙离子的螯合物EGTA，则卵不能 被激活。
第四章 受精（fertilization)
受精的概念
受精是指来自父本的精子和来自母本的卵子相互
作用产生合子的过程。卵子受精后开始了发育过 程。
授精（insemination）：使得精卵相遇，精卵质 膜融合。
受精（fertilization）：精子和卵子各自的单
倍体基因组相融合形成两倍体合子的事件。
哺乳类受精后精原核、卵 原核相互融合的过程
体外受精过程中，人雌、雄原核融合过程
原核移植试验
配子核移植试验表明：
在哺乳动物中，雄原核与雌原核在功能上并不是等
效的，它们之间的互补作用是实现胚胎发育的必要 条件
在发育中，有的产物只表达于父源的等位基因，而 有些产物只表达于母源等位基因，它们之间不能补
（二）、精子获能 (capacitaion)
精子获能 ：精子质膜表面在雌性生殖道里被改变的 过程，因此获得了受精的能力。
公牛的精子 在进入输卵 管壶腹部之 前黏附在输 卵管上皮
哺 乳 动 物 精 子 获 能 机 制
（三）、受精的专一性
动物的受精有着严格的物种特异性，这是保证其
个体发育正常进行的基本条件，也是进化中生存 选择的必然结果。
心体，以后的分裂不能正常进行，胚胎发育停止、
死亡。
研究发现有两种机制来保证受精的唯一性： 1. 快速的——膜电位的变化（快封闭反应）； 2. 稍后发生的——受精膜的形成（慢封闭反应）
多精受精（polyspermy）
多个精子入卵受精称为多精受精， 将导致胚胎发育异常或死亡。这也 是染色体与发育关系的首次证明。
受精前后海胆卵的膜电位 （快封闭反应）
电势改变产生的快速阻止：海胆 的第一个精子与卵质膜结合后的 1－3秒内，因钠离子的流入而导 致膜电位的迅速升高，从而阻止 其它精子与卵膜的结合。
慢封闭反应
形成受精膜的慢速阻止：海胆卵受精后20－60秒内，
质膜下的皮质颗粒与质膜融合，释放其内含物形成 受精膜，阻止其它精子的进入。
顶体突：一些无脊椎动物（如棘皮动物）受精过程 中产生的一种结构，由肌动蛋白单体组装成的微丝 束构成。
棘皮动物精子的顶体反应
海胆顶体反应
哺乳类精子使卵受 精时的顶体反应
仓鼠顶体反应
海胆和小鼠精卵质膜融 合过程的总结、比较
（四）、受精的唯一性
一般受精时只允许一个精子进入卵中（少数除外， 如鸟类）。多精受精由于引入了多余的染色体和中
偿替换。
卵质的重组
卵细胞受精后引起卵细胞质成分的重新排布和分
配，称为卵细胞质重组。
Hale Waihona Puke 在卵细胞质中往往存在大量形态发生原的物质， 它们的分布和浓度对于未来胚胎的发育至关重要。
卵质重组的实现有赖于微管动态构建和钙离子的 作用。
受精蛙卵细胞质的重组
（六）、卵子活化
精卵膜融合以后，精子核进入卵子，解除卵细胞
受精膜的形成和多余精子的去除
皮质颗粒的分泌
皮质颗粒的组成
蛋白水解酶 粘多糖 过氧化物酶 透明质酸
透明带反应
在哺乳动物中，皮质颗粒释放不形成受精膜，释放
的酶对透明带中的精子受体分子进行修饰（剥离 ZP3分子上的糖基），使之丧失与精子结合的能力， 称为透明带反应。
小鼠卵的透明带反 应如何防止其他的 精子再次进入卵： 皮层颗粒的释放既 可以去除ZP3上的 糖基使失去与精子 质膜结合的能力， 又可以部分水解 ZP2，使透明带变 硬。
• 精子内的细胞核、线粒体和中心体进入卵内，线粒体 与鞭毛在卵内降解。线粒体基因一般认为是母性遗传，
受精卵中控制细胞分裂的中心体都是父源的。
• 一旦精核进入卵细胞，精核解凝，精核染色质与特异 组蛋白去组装，然后与卵质内的组蛋白重新组合， DNA开始复制和转录。
海胆卵受精过程中雌、雄原核的迁移与融合
半乳糖结合蛋白 （SP56）
透明带受体激酶 （p95）
人的精子与仓鼠 卵的接触
仓鼠卵的透明带用酶消 化去掉，人的精子可以 钻入，以此来检验精子 的受精活性。
顶体反应（acrosomal reaction）
顶体反应：精子与卵膜相接触，引起精子的顶体膜
与质膜相融合，释放其内容物的过程。
顶体（acrosome）：膜围的囊泡，内含大量的水解 酶。
受精过程中发生的重要事件
卵母细胞成熟； 精子获能； 精卵间的接触和识别； 精子入卵； 卵子的激活和发育。
（一）、卵母细胞成熟
卵母细胞成熟的主要形态学标志：核膜破裂（又称
生发泡破裂，germinal vesicle breakdown），染 色体凝集，纺锤体形成和第一极体排出。
结合蛋白在顶体突起上的定位
海胆的bindin与卵结合的种的特异性
哺乳动物精卵的特异性识别
在哺乳动物中精子 与卵细胞特异识别 发生在卵细胞的透 明带部位。
仓鼠的卵细胞
小鼠透明带纤维结构模式图
透明带主链由ZP2和ZP3蛋 白重复二聚体组成，链与 链间由zp1交联。
具受体功能的精子表面蛋白
半乳糖基转移酶
受精过程中海胆卵的结构
显示精子和卵子体积的 差异
海胆受精专一性的分子基础
介导这一特异性识别的成分成为结合素（Bindin），
Bindin定位在精子顶体的突起上，Bindin和卵细胞表
面Bindin受体的结合具有高度的种间特异性，卵细胞 表面Bindin受体的分布也是有一定的局限的，就是说 精子并不可以结合在卵细胞的任意部位上。