植物磷含量的测定钼锑抗比色法
植物磷含量的测定钼锑抗比色法
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女人创业励志语推荐1. 一个有信念者所开发出的力量，大于99个只有兴趣者。
土壤中有效磷的快速测定方法
份全过程空白溶液ꎬ 由公式 ＬＤ ＝ ＫＳ 求出检出限ꎬ 见
现ꎬ 稀释倍数在 ２ 倍时精密度较高ꎬ 且与标准值最接
系数ꎬ 取 ３ꎬ 求得酸性土壤检出限为 ０ １８ｍｇｋｇ ꎻ 中
钠浸提时ꎬ 盐分过高ꎬ 需进行稀释倍数试验ꎬ 结果发
近ꎬ 当稀释倍数过大 时ꎬ 由 于 溶 液 中 磷 含 量 相 对 较
５ ３１
４ ７１
０ １３
１ ３１
９ ７１
０ ３５
２ ６２
５ ３４
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
３
８ １５
８ １８
８ ５８
８ ５０
８ １８
７ ５０
３ 方法检出限
在仪器最佳工作条件下ꎬ 按方法步骤分别测定 １２
Ａｌ － Ｐ 起水解作用而浸出 [１１] ꎮ 因石灰性土壤用碳酸氢
－１
释 ４ 倍时为 ０ ２１ｍｇｋｇ ꎬ 稀释 ８ 倍时为 ０ ３０ｍｇｋｇ ꎮ
－１
－１
４ 方法精密度和准确度
分别取 １２ 份 ＡＳＡ － ４ａ、 ＡＳＡ － ７ 与 ＡＳＡ － ９、 ＡＳＡ －
※农业科学
农业与技术 ２０２１ꎬＶｏｌ ４１ꎬＮｏ １３ ３ ５
※农业科学
农业与技术 ２０２１ꎬＶｏｌ ４１ꎬＮｏ １３ ３ ３
土壤中有效磷的快速测定方法
韩张雄 李敏 端爱玲 杨树俊
( 江苏省地质工程勘察院ꎬ 江苏 南京 ２１００１２)
１０、 ＮＡＳ － ４ 样品分中性、 石灰性、 酸性ꎬ 利用本方法
石灰性土壤中有效磷的精密度 ( ＲＳＤ) <５ ０％ꎬ 相对
碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项
碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项碳酸氢钠浸提－钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项摘要介绍了碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定石灰性和中性土壤有效磷的注意事项，以供参考。
关键词Olsen法；测定；土壤有效磷；注意事项国家农业标准中，采用碳酸氢钠浸提－钼锑抗比色法（Olsen法）测定石灰性土壤中（中性及酸性土可参照使用）的有效磷含量（其中操作规程以下简称规程），其中校准曲线或回归方程较易做出或求出，因此也较容易测定。
但是，要提高其测定准确性，减轻劳动量还需要注意以下几点。
（1）所用的试剂要按规程要求准确配制。
一是选用质量合格的仪器、药品、试剂、纯水，要求测定者首先对要使用的仪器进行校准，在试剂的配制中注意观察药品、试剂、纯水的颜色，发现异常要查找原因；二是精确称取或量取；三是按规程要求的步骤顺序配制，调节酸碱度。
但需要说明的是：①该规程要求的钼锑抗显色剂，称取的抗坏血酸（C6H8O6左旋，旋光度+21°－22°）0.5g溶于100mL钼锑贮备液中测定的结果，土壤有效磷含量要低于称取1.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中测定的结果。
②配制磷标准贮备液的KH2PO4 要选用优级纯的，而且要经过105℃烘干2h，并冷却后再称取配制。
（2）所需试剂要按规程要求保存与使用。
钼锑贮备液要盛放于棕色瓶中，避光存放；钼锑抗显色剂要现用现配。
（3）所用的器械要反复冲洗干净，有的还要干燥。
测定中所用的（刻度、胖肚）吸管、塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶、容量瓶、瓶塞、比色皿要反复冲洗干净，塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶需烘干后再用。
（4）要严格土液比、温度、振荡频率及振荡时间。
由于这4个方面对浸提出的磷含量有至关重要影响，因此一定要严格控制。
①要严格土液比。
即风干土样准确称取2.50g （电子天平先预热30min，再校准后使用），加入的碳酸氢钠浸提剂准确量取50.00mL。
②要严格浸提温度。
植株全磷含量测定钼锑抗比色法
植株全磷含量测定钼锑抗比色法
植株全磷含量测定是一种常用的分析方法，钼锑抗比色法是其中一种常用的测定方法。
该方法基于钼酸钠在酸性条件下与磷酸盐形成复合物，被还原的钼酸钠被锑砷汞反应还原为蓝色化合物，通过比色法测定其吸光度来计算样品中磷的含量。
该方法的具体步骤如下：
1. 样品制备：将植株样品取适量，经过研磨、筛选等处理后，按照规定的方法进行矿酸或硝酸-过氧化氢消化。
2. 样品处理：取消化后的样品，加入硝酸、氯化钾等试剂，使磷酸盐转化为磷酸根离子。
3. 钼锑试剂的制备：将钼酸钠、醋酸和硫酸混合，加入氯化锑钠，制备钼锑试剂。
4. 反应：将处理后的样品加入钼锑试剂中，经过适当时间的反应后，被还原的钼酸钠被锑砷汞反应还原为蓝色化合物。
5. 吸光度测定：将反应产物在特定波长下进行比色测定，根据标准
曲线计算样品中磷的含量。
该方法的优点是简单、快速、精确，适用于大面积的植物磷素含量测定。
但是该方法也存在一些限制，例如样品中的其他化合物可能会影响测定结果，需要进行干扰消除等处理。
土壤全磷的测定-氢氧化钠熔融—钼锑抗比色法
土壤全磷的测定氢氧化钠熔融—钼锑抗比色法1、方法提要土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液中的磷酸根与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法定量测定。
2、适用范围本方法适用于各类土壤全磷含量的测定。
3、主要仪器设备3.1分光光度计；3.2高温电炉：升温至1200℃，温度可调；3.3镍(或银)坩埚：容量≥30mL；3.4具塞三角瓶：50mL。
4、试剂4.1氢氧化钠；4.2无水乙醇；4.3碳酸钠[ρ(Na2CO3)=100g·L-1]溶液：称取10.0g无水碳酸钠溶于水，稀释至100mL；4.4 5%硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸缓缓加入90mL水中，冷却后加水至100mL；4.5硫酸溶液[c(12H2SO4)=3mol·L-1]：量取168mL浓硫酸缓缓加入到盛有约800mL水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L；4.6二硝基酚指示剂：称取0.2g2，6-二硝基酚溶于100mL水中；4.7酒石酸锑钾溶液[ρ(K(SbO)C4H4O6·12H2O)=5g·L-1]：称取酒石酸锑钾0.5g溶于100mL水中；4.8硫酸钼锑贮备液：量取126mL浓硫酸，缓缓加入到400mL水中，不断搅拌，冷却。
另称取钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]10.0g溶于温度约60℃的300mL 水中，冷却。
然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。
再加入5 g·L-1酒石酸锑钾溶液100mL，冷却后，加水稀释至1L，摇匀，贮于棕色瓶中；4.9钼锑抗显色剂：称取1.5g抗坏血酸(左旋，旋光度+21~22°)溶于100mL 钼锑贮备液中。
此溶液有效期不长，须随配随用；4.10磷标准贮备液[ρ(P)=100μg·mL-1]：准确称取经105℃下烘干2h的磷酸二氢钾(优级纯)0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至1L。
总磷的测定钼锑抗分光光度法
２．标准曲线的绘制 将冷却后的校准系列＋蒸馏水至50mL+1mL抗坏血酸+2mL钼酸盐充分混 匀,放置15min显色后，用10mm比色皿，于700nm处，以零浓度溶液为参比， 测量吸光度绘制以磷含量（µg）对吸光度的校准曲线。
A
.
. .
.
.
.
ug
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
Sino-Dutch Demonstration Researcher and Training Centre for Water Treatment
实验原理
水中磷的测定，通常按其存在的形式不同，分别
测定总磷、溶解性正磷酸盐和可溶性总磷酸盐，下 图为测定水中各种磷的流程图
消解 水样 用0.45μm过滤 消解 可溶性正磷酸盐 可溶性总磷酸盐 总磷
721分光 光度计
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３、水样的测定
将冷却后的水样＋蒸馏水至50mL+1mL抗坏血酸 混匀+2mL钼酸盐充分混匀，放置15min显色。用10mm 比色皿，于700nm波长处，以零浓度溶液为参比，测 量吸光度。从校准曲线上查出含磷量。
五、注意事项
１、如试样中浊度或色度影响测量吸光度时，需做补偿校正 ２、室温低于13℃时，可在20～30℃水浴中，显色15min ３、操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含 磷酸盐的洗涤剂刷洗 ４、比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸 附的磷钼蓝显色物
总磷的测定(钼锑抗分光光度法)【新】
总磷的测定(钼锑抗分光光度法)【新】一、实验原理总磷是指水样中的无机磷和有机磷的总和。
钼锑抗分光光度法根据磷酸根离子与钼酸根离子和锑酸根离子在酸性环境下生成黄色复合物且特征吸收峰在690nm左右，利用分光光度计在此波长处进行吸光度的测定，从而测定水样中的总磷含量。
二、实验步骤1.试样准备：取一定量的水样，如饮用水、自来水、河水等，用过滤纸过滤掉悬浮颗粒直至澄清；2.取样：取所需的水样进行测定，并记录测定的样品编号、样品名称及取样时间等信息，并标明测定条件；3.样品预处理：（1）①如果水样中有余氯，加入少量的亚硫酸钠或碘化钾溶液去除余氯；②加入1ml 的稀硝酸，防止存在的磷酸根受还原而使结果偏低。
（2）氢氧化钠溶液（6mol/L）和氟化钠（70g/L）的混合溶液：取一定量的氢氧化钠和氟化钠混合溶液（比例约为1:10），加入到已预处理的水样中，使其呈现明显的碱性反应，即pH值控制在10.5-11.0之间。
4.配制钼锑试剂：取5g的钼酸铵和0.5g的锑酸钠加入到2L的硫酸中（浓度为0.3mol/L），摇匀，得到浓度为0.005mol/L的钼锑试剂。
5.光度测定：将经过预处理的水样分别加入分析室的比色皿中，加入相应的钼锑试剂，然后加入适量的硫酸稀释，充分混匀后孵育5min左右，利用分光光度计在690nm处读取吸光度值。
6.计算试样中总磷的含量：利用预先绘制的标准曲线，查找吸光度值对应的总磷含量。
三、实验注意事项1.水样应取中间部位，避免表面污染、底部沉积物或悬浮物对结果产生干扰。
2.水样需要预处理，如去除余氯、加入稀硝酸等，以确保结果的准确性。
3.钼锑试剂的配制要求精确，避免出现含杂质或浓度过高过低等情况，影响结果准确性。
4.光度测定时要注意避免外界光线的干扰，同时保持试剂反应时间、温度、pH等因素的一致。
5.标准曲线的绘制要进行多次实验和重复测定，以获得较准确的测定结果。
6.实验过程中需遵守实验室安全规范，注意实验室对应的安全措施，如佩戴防护眼镜、手套等。
土壤有效磷钼锑抗比色法
土壤有效磷钼锑抗比色法
这种分析方法的优点之一是具有较高的灵敏度和准确性，能够
准确测定土壤中微量的有效磷含量，对于科研和土壤肥力评价具有
重要意义。
另外，这种方法操作简便，成本较低，适用于大批量土
壤样品的分析，因此在土壤肥力评价和农业生产中得到了广泛应用。
然而，钼锑抗比色法也存在一些局限性，比如在高盐度土壤或
含有有机物较多的土壤中可能会出现干扰，影响测定结果的准确性。
因此，在实际应用中需要综合考虑土壤样品的特性，选择合适的分
析方法。
总的来说，土壤有效磷钼锑抗比色法是一种常用的测定土壤有
效磷含量的分析方法，具有高灵敏度和准确性，但在实际应用中需
要注意方法的局限性并综合考虑土壤样品的特性。
总磷的测定(钼锑抗分光光度法)解读
六、思考题
１、过硫酸钾消解的作用？ ２、用分光光度计测吸光度时，如果比色皿中有气 泡对结果有什么影响？
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总磷的测定
（钼锑抗分光光度法 ）
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实验目的
１、了解磷（总磷、溶解性正磷酸盐和溶解性总磷） 的测定方法
２、掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及计 算方法
A
AX
mX
m
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数据处理
C(PO43-,mg/L)= mx / V mx— 由校准曲线查得的磷含量（ug） V — 水样体积（mL）
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蓝色络合物（磷钼蓝）
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１、预处理
实验步骤
（１）水样
取适量的进水和出水于50mL具塞比色管＋蒸馏水于25mL 标线＋4mLK2S2O8加塞后管口包一小块双层纱布并用线扎紧， 置于高压蒸汽消毒器中消解
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土壤有效磷测定方法
①紫外可见分光光度计；②恒温振荡机或往返式振荡机；③带盖塑料瓶；④酸度计；⑤具塞；⑥比色管25mL;⑦150mL试剂三角瓶。
3相关试剂的制定
3.1 无磷活性炭粉
将活性炭粉先用1:1盐酸浸泡24h，然后移至平板，抽气过滤，用水淋洗4-5次，再用浸提剂浸泡24h，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用。
土壤有效磷测定方法
氮、磷、钾、钙等大量元素，是植物生长发育不可缺少的，虽然作物对这些元素需要的量相差很大，但是它们对作物生长发育起的作用同等重要，而且不可相互代替。过多地使用某种营养元素，不仅会对作物产生毒害，还会妨碍作物对其它营养元素的吸收，引起缺素症。例如磷过多会降低钙、锌、硼的有效性。土壤有效磷的测定，不仅可了解近期磷素供应水平状况，而且是植物合理施肥的依据之一。因此，推广测土配方施肥，大力宣传植物所需营养元素的重要性及测定土壤营养元素的含量迫在眉睫。现就土壤有效磷的测定方法介绍如下：
4.2标准曲线的绘制
分别吸取5ug/mL磷标准溶液0mL，0.50mL，lmL，1.50mL，2mL，2.50mL，3.00mL于25ml比色管中，加入浸提剂10mL，显色剂5mLJ慢慢摇动使C02逸出再以水稀释至刻度，充分摇动，逐尽C02，定容，既为含磷0.00，0.10,0.20,0.30,0.40，0.50，0.60ug/mL磷的标准系列溶液。在室温高于20%处放置30min后，进行比色，测量吸光度值和浓度值，绘制标准曲线或建立回归方程。
1 方法原理及适用范围
碳酸氢钠提取采取钼锑抗比色法。石灰性土壤中的有效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，可用pH值8.50，浓度0.05mol/L的碳酸氢钠提取到溶液中。磷酸一钙可直接溶于碳酸氢钠水溶液中，而磷酸二钙与碳酸氢钠反应成为磷酸钠而溶解，钙则成为碳酸钙的沉淀而析出。其反应式为：
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植物磷含量的测定钼锑
抗比色法
Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】
植物磷含量的测定（钼锑抗比色法）
一、实验目的?
1．掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。
2．练习实际测量以及定容的操作。
3．练习分光光度计的使用。
二、实验原理?
植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。
在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。
三、实验试剂
（1）2mol/LNaOH溶液
（2）0.2%二硝基酚指示剂?
（3）0.5mol/L?H2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。
（4）钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml)，缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。
另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。
然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。
再加入0.5％酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸2.75mol/L。
（5）钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。
（6）5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。
分析纯)，100ml水，加
5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。
吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。
四、实验步骤
1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00～5.00ml(V2,含P5～30ug)于50ml容量瓶中,
用水稀释至约20ml,加1～2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/L?NaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴0.5mol/L?H2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪去呈淡黄色,然后加入钼锑抗显色剂5.00ml,摇匀,
用水定容(V3)。
在室温高于15℃的条件下放置30min后,用1cm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点。
2、校准曲线或直线回归方程:
准确吸取ρ(P)=5mg/L标准工作溶液0,1,2,4,6,8ml,分别放入50mL容量瓶中,加水至20ml,同上步骤显色并定容,即得0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8mg/LP标准系列溶液,与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。
五、结果计算
W
p =
6
10
m
(V1/V2)
V3
c
⨯
⨯
⨯
×1000
式中:W
p
——植物磷的质量分数,g/kg;
c——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度,mg/L;
V1——消煮液定容体积,ml;
V2——吸取测定的消煮液体积,ml;
V3——显色液体积,ml;
m——称样量,g;
六、注意事项
1、室温低于15℃时，可在30～40℃水浴中，显色30min。
2、植物磷含量0.5g/kg为低量，1.0~2.0g/kg为中量，大于2.0g/kg为高量。