淋巴细胞标志和功能的检测
淋巴细胞各项免疫表型的临床意义
淋巴细胞各项免疫表型的临床意义通过流式细胞仪分析淋巴细胞免疫表型，对于了解淋巴细胞的分化、功能，鉴别新的淋巴细胞亚群有重要价值；更重要的是，通过研究大多数疾病的特异性淋巴细胞亚群或某些细胞表面标志的存在、缺乏、过度表达等，对一些疾病，如免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤等诊断、治疗、免疫功能重建和器官移植监测等有重要的临床意义。
一．T细胞1.总淋巴细胞数（1）增多：见于百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。
（2）减少：见于传染病急性期、放射病和细胞免疫缺陷等。
2.总T细胞（CD3+细胞）（1）增高：提示体内的T细胞免疫功能增强，见于临床某些自身免疫性疾病（如SLE）、重症肌无力、慢性活动性肝炎、甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、器官移植排斥反应、T细胞性白血病等。
（2）降低：提示体内的T细胞免疫功能减弱，见于某些白血病、应用免疫抑制药、放疗过程中、先天性细胞免疫缺陷、艾滋病、多发性骨髓瘤、传染性单核细胞增多症，以及过劳等造成机体免疫功能处于相对较低的其他一些情况。
3.T4细胞（CD3+CD4+细胞）（1）增高：提示体内存在细菌等病原微生物感染，主要见于临床各种细菌性感染性疾病。
（2）降低：提示体内存在病毒等病原微生物感染，主要见于临床各种病毒感染性疾病，以HIV感染时减少最为明显。
T4细胞减少也见于γ免疫球蛋白缺乏症、胸腺发育不良、严重联合免疫缺陷病、严重创伤、大手术等。
4.T8细胞（CD3+CD8+细胞）（1）增高：提示体内存在病毒或胞内寄生菌等病原微生物感染，主要见于HBV、CMV、EB等病毒及结核杆菌感染等。
（2）降低：T8细胞减少见于γ免疫球蛋白缺乏症、胸腺发育不良、严重联合免疫缺陷病、糖尿病等。
5.T4/ T8细胞比值（1）增高：可以是T4淋巴细胞增高或T8淋巴细胞减少所致，见于某些自身免疫性疾病，如SLE、多发性硬化、器官移植排斥反应等。
（2）降低：可以是T4淋巴细胞减少或T8淋巴细胞增加所致，见于艾滋病、再生障碍性贫血、某些白血病、传染性单核细胞增多症、免疫缺陷综合征、某些病毒感染、恶性肿瘤、结核病等。
医学免疫学实验六 淋巴细胞功能检测
CCK8法与其他检测法的优势
实验材料
小鼠、75%酒精、PBS缓冲液（PH7.4） 红细胞裂解液、RPMI-1640不完全培养液 、胎牛血清、刀豆蛋白A、CCK8检测试剂 盒
眼科剪刀、镊子、酒精棉球、注射器枕芯、 无菌平皿、尼龙指套、15mL离心管、微量 移液器、枪头、血球计数板、计数器
淋巴细胞在体内外接受有丝分裂原刺激后，静止淋 巴细胞向母细胞转化。这种转化的细胞DNA合成增 加，细胞体积增大，胞质增多以及出现有丝分裂等 形态变化。
淋巴细胞体外检测方法---形态检测法
主要根据淋巴细胞在转化为淋巴母细胞的过 程中，细胞形态结构发生明显改变，经染色 镜检即可计算出淋巴细胞的转化率。
96孔板布局
PBS孔
调零孔 未刺激组 刺激组
K8检测：培养结束后，每孔（调零组、未 刺激组、刺激组）加入10 μL CCK8溶液，将 培养板在培养箱内孵育1-4小时，用酶标仪测 定在450nm处吸光度。
优点：简便易行，仪器简单 缺点：受实验者主观因素影响，准确性和重复
性较差
同位素渗入法
根据淋巴细胞转化程度与DNA合成增加呈明显正相关 ，此时若加入用同位素标记的DNA前体物质胸腺嘧啶 核苷（3H-TdR），即可被转化的淋巴细胞摄取而渗入 到DNA分子中。培养结束，通过检测β射线来测定渗入 淋巴细胞内3H-TdR的量，能客观精确分析淋巴细胞的 转化程度。
淋巴细胞功能检测
实验目的
掌握免疫细胞基本培养方法 掌握一到两种淋巴细胞功能检测技术 了解淋巴细胞体外检测的原理
基本概念
T细胞在体外培养时，如受到一定物质刺激 ，可出现体积增大转化为母细胞、代谢旺盛 、蛋白质和核酸合成增加等细胞转化现象， 所以通过淋巴细胞体外增殖反应实验，可了 解T细胞功能
淋巴检查科目-概述说明以及解释
淋巴检查科目-概述说明以及解释1.引言1.1 概述淋巴检查是一种用于评估人体淋巴系统功能和健康状况的检查方法。
淋巴系统是人体的重要组成部分，它包括淋巴液、淋巴器官和淋巴管道。
淋巴系统在维持体液平衡、免疫防御以及废物清除等方面发挥着重要作用。
淋巴检查科目是通过对淋巴液、淋巴器官和淋巴管道的检测来评估淋巴系统的功能和健康状况。
淋巴检查科目包括淋巴器官的超声检查、淋巴结活检、淋巴液细胞学检查等。
这些检查项目能够提供淋巴系统结构与功能的详细信息，有助于医生判断淋巴系统是否存在异常或疾病。
淋巴检查在临床中有着广泛的应用。
它可以用于评估淋巴结肿大、淋巴癌、免疫功能异常等疾病的病因和进展情况，并指导相应的治疗方案制定。
此外，淋巴检查还可用于评估淋巴系统在感染、外伤和手术等应激状态下的应对能力。
总之，淋巴检查科目是一项重要的医学检查，可以对淋巴系统的功能与健康进行全面评估。
它在临床上有着重要的应用价值，能够为医生提供有力的诊断依据和治疗指导，促进患者的康复和健康。
1.2文章结构1.2 文章结构本文将以淋巴检查科目为主题展开讨论，并按照以下结构布局：第一部分：引言1.1 概述：介绍淋巴检查的背景和意义，解释为什么淋巴检查对人体健康至关重要。
1.2 文章结构：本部分，详细介绍文章的结构和各个部分的内容。
1.3 目的：明确本文的目的，即探讨淋巴检查的科目，并为读者提供相关知识和信息。
第二部分：正文2.1 淋巴检查科目1：解释第一个淋巴检查科目，在检查中的作用及其重要性，并提供相关的检查方式和操作过程。
2.2 淋巴检查科目2：详细介绍第二个淋巴检查科目，包括其应用领域、常见的检查方法和临床意义。
2.3 淋巴检查科目3：讨论第三个淋巴检查科目，强调其在疾病诊断和预防中的重要性，并列举常见的检查指标和结果分析。
第三部分：结论3.1 总结：对前面章节进行总结，强调淋巴检查科目的综合作用和重要性。
3.2 结果分析：分析各个淋巴检查科目的结果，探讨其在临床实践中的应用前景。
T淋巴细胞亚群检测参考值
T淋巴细胞亚群检测参考值淋巴细胞表面标志物检测：E玫瑰花形成试验、免疫荧光法（IFA）、荧光激活细胞分类法（FACS）、免疫金银法以及免疫酶染色法等。
E玫瑰花形成试验SRBC+CD2参考值Et 64.4%±6.7%免疫荧光法T淋巴细胞表面标志物检测意义可用于T淋巴细胞计数，T淋巴细胞亚群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。
CD3 分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面，是总T淋巴细胞的重要标志，CD3+ 常见于甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。
CD3+ 主要见于免疫缺陷病，如AIDS、先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺陷病等。
亦可见于恶性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。
T细胞分化抗原测定白细胞分化抗原（cluster differentiation，CD）CD3代表总T淋巴细胞，CD4是辅助、诱导T细胞的标志，CD8是抑制、杀伤性T细胞的标志。
应用单抗和荧光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。
参考值：免疫荧光法（IFA）：CD3为63.1%±10.8%；CD4 为42.8%±9.5%；CD8 19.6%±5.9%；CD4 /CD8为（2.2±0.7）/1。
流式细胞术：CD3 61%~85%；CD4 28%~58%；CD8 19%~48%；CD4 /CD80.9~2.0/1。
T细胞分化抗原测定临床意义CD3CD4+T细胞下降常见于某些病毒感染性疾病，如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等；升高见于类风湿性关节炎活动期。
CD8+ T细胞下降常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合征、重症肌无力、DM（II型）以及膜型肾小球肾炎等；升高见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢性乙肝。
CD4 +/CD8+比值下降，常见于AIDS、瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。
也见于部分感染性疾病如传染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等；增高见于类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。
淋巴细胞亚群12项报告解读
淋巴细胞亚群12项报告可以提供关于机体免疫系统的信息，帮助医生了解机体的免疫状态和诊断相关疾病。
以下是关于淋巴细胞亚群的解读：总T淋巴细胞（CD3+）：这是T淋巴细胞的总体标志，正常参考值通常在700-2000/μl 之间。
增高表示总T淋巴细胞水平较高，机体免疫力好，肿瘤患者的预后较好。
降低则表示总T淋巴细胞水平较低，机体免疫力差。
辅助/诱导T淋巴细胞（CD4+）：这是辅助性T淋巴细胞，具有免疫调节功能。
增高通常表示机体免疫力好，肿瘤患者的预后较好。
降低可见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制患者。
抑制/细胞毒性T 淋巴细胞（CD8+）：这是细胞毒性T淋巴细胞，具有杀伤功能。
其水平的变化与CD4+细胞的数量相互影响，形成一个平衡状态。
NK细胞（CD16+CD56+）：自然杀伤细胞，不需要抗原预先致敏，即可直接杀伤某些肿瘤细胞和病毒感染细胞，是机体抗肿瘤、抗感染的重要免疫因素。
B淋巴细胞（CD19+）：B淋巴细胞可以产生免疫球蛋白，参与体液免疫。
增高可能表示B细胞介导的体液免疫亢进，降低则可能表示体液免疫功能缺陷或下降。
γδT淋巴细胞（CD3+CD16+CD56+）：这是一种特殊的T淋巴细胞亚群，与NK细胞相似，具有杀伤作用。
调节性T淋巴细胞（CD4+CD25+Foxp3+）：这种细胞具有免疫抑制功能，是维持机体免疫耐受的重要因素之一。
活化T淋巴细胞（HLA-DR+）：活化T淋巴细胞是T淋巴细胞的活化状态标志，增高表示机体的免疫应答活跃。
记忆T淋巴细胞（CD45RO+）：记忆T淋巴细胞是T淋巴细胞的记忆状态标志，可以长期存活并在再次接触相同抗原时迅速增殖分化。
淋巴细胞分类和标记
淋巴细胞是免疫系统中的一种白细胞，它们在机体的免疫反应和免疫防御中发挥着核心作用。
根据功能、形态和表面标志物的不同，淋巴细胞主要可以分为以下几类：
1. T淋巴细胞（T细胞）：
- 标记：CD3+，这是所有成熟T细胞的共同标记。
进一步细分，有：
- 辅助性T细胞（Helper T cells, Th细胞）：通常表达CD4分子，如Th1、Th2、Th17等亚群。
- 细胞毒性或抑制性T细胞（Cytotoxic or Suppressor T cells, Tc/Ts细胞）：主要表达CD8分子。
2. B淋巴细胞（B细胞）：
- 标记：CD19、CD20、CD22是B细胞常见的表面标志物，而成熟的B细胞还表达BCR（B细胞受体），即抗体分子。
3. 自然杀伤细胞（NK细胞）：
- 标记：虽然NK细胞不是严格意义上的淋巴细胞（因为它们不通过胸腺发育成熟），但通常也归入广义的淋巴细胞范畴。
NK细胞的主要标记包括CD56和CD16。
此外，还有一些特殊的淋巴细胞亚群，例如调节性T细胞（Regulatory T cells, Tregs）表达CD4+CD25+FoxP3+；记忆性T细胞（Memory T cells）
有不同的表型，如CD45RO+或CCR7-等。
这些不同类型的淋巴细胞在免疫应答中各有分工，协同工作以保护身体免受外来病原微生物的侵害，并维持机体内的免疫平衡。
淋巴细胞免疫12项解析
淋巴细胞免疫12项解析淋巴细胞免疫12项指的是人体免疫系统内特定的12项指标，可以检测气体交换、急性期反应、细胞免疫功能等方面的信息，是评估人体免疫功能状态的重要指标之一。
下面将针对每项指标进行解析。
1. 总淋巴细胞计数：是指人体内所有淋巴细胞的数量，包括T、B、NK细胞等。
通过该项指标的检测可以初步了解人体免疫系统的总体状态。
2. CD3+细胞计数：指的是具有CD3表面标志的T淋巴细胞数量，这类细胞在人体免疫系统中扮演了非常重要的角色。
CD3+细胞计数可以初步了解人体的细胞免疫状态。
3. CD4+/CD8+细胞计数：CD4+和CD8+分别是T细胞亚群的代表性分子，二者的比例可以反映人体免疫系统的平衡状态。
如果CD4+/CD8+的比值增高，则说明免疫力下降。
4. CD19+细胞计数：CD19+细胞是B淋巴细胞数量的代表，它的检测可以反映人体的体液免疫状态。
5. NK细胞计数：NK细胞是一种重要的免疫细胞，是人体体液免疫和细胞免疫中不可缺少的细胞。
NK细胞计数可以反映人体的免疫防御水平。
6. IFN-γ：是一种细胞因子，它参与了人体细胞的抗病毒和抗肿瘤防御。
IFN-γ水平的升高表明细胞免疫功能的增强。
7. IL-2：是一种促进T细胞增殖和增强细胞免疫功能的细胞因子，IL-2水平的升高可以反映出T细胞免疫功能的增强。
9. IL-6：是一个促炎性因子，参与了许多生理过程，如发热、急性期反应等。
IL-6水平的升高可以反映出机体免疫炎症反应的增强。
10. IL-10：是一种抗炎因子，它能够抑制细胞免疫和体液免疫反应，因此IL-10水平的升高表明机体正处于免疫抑制状态。
总的来说，淋巴细胞免疫12项检测可以反映出机体免疫系统的代谢、细胞免疫功能、体液免疫功能、免疫调节等方面的信息，对于了解机体的免疫状态起到了非常重要的作用。
同时，通过对这些指标的监测，还可以帮助医生制定合理的免疫调控方案，从而改善机体的免疫状态，提高身体的抗病能力。
淋巴细胞标志和功能的检测
淋巴细胞标志和功能的检测人体内的淋巴细胞分为T细胞、B细胞和包括NK细胞为代表的第三群细胞，下分若干亚群，各有其特异的表面标志和功能，据此建立许多相应的检测方法。
临床上各种类型的免疫缺陷症、自身免疫病以及肿瘤等均可出现不同群淋巴细胞数量和功能的变化。
因此计数外周血和组织内淋巴细胞及其亚群的数目或比例，以及它们所显示的功能强弱，可藉此判断机体的细胞免疫水平，对临床认识疾病，探讨其发病机制、观察病情、判断预后、考核疗效以及防治疾病等方面可提供极为有用的信息。
第一节T细胞表面标志的检测一、特异性抗原的检测检测人T细胞的特异性抗原，曾采用抗人脑、抗人胸腺细胞和抗人T细胞等抗血清，通过细胞毒试验或免疫荧光染色加以鉴定。
自抗白细胞分化抗原的单克隆抗体问世以来，上述诸多方法均被新方法取而代之。
常用以鉴定和检测计数T细胞的表面分化抗原如表21-1所示。
表21-1 T胞表面主要CD抗原及其特异性用单克隆抗体检测T细胞表面抗原的方法有两大类，一类是用标记抗体着染，如免疫荧光法、酶免疫法、生物素－亲和素（或链霉亲和素）系统的ABC法以及免疫金银染色法；另一类是用抗体致敏的红细胞作花环试验。
两类方法各有优缺点。
以下叙述有代表性的方法。
（一）间接免疫荧光法本法是将分离获得的外周血单个核细胞分别与抗相应CD的单克隆抗体（如CD2、CD4、CD8）结合后，洗去游离的抗体，继加荧光素标记的抗小鼠IgG抗血清，经温育结合后，洗去多余的标记抗体，取样制片，用荧光显微镜观察并计数约200个单个核细胞，以荧光阳性细胞与计数细胞总数之比，求得相应CD抗原阳性的T百分率。
如有条件，细胞经荧光标记抗体着染后，用流式细胞仪计数，快速而准确，但需要较多的投资，难以普及应用。
（二）免疫细胞化学法通常用酶免疫检测法，如APAAP酶免疫桥联法。
为减少非特异性着染，可选用生物素－链霉亲和素系统试剂作ABC法染色。
该类方法可用普通显微镜观察，凡呈棕黄色的细胞为相应CD抗原阳性细胞，计其占总淋巴细胞的百分率。