聚赖氨酸 许可证执行标准批文

关于批准ε-聚赖氨酸等4种食品添加剂新品种等的公告（2014年第5

号）

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附录 A

检验方法

A.1 安全警示

试验方法规定的一些试验过程可能导致危险情况。操作者应采取适当的安全和防护措施。

A.2 一般规定

本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682—2008中规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.3 鉴别试验

易溶于水，略带苦味。

A.4 ε-聚赖氨酸含量的测定

A.4.1 试剂和材料

A.4.1.1 硫酸钠溶液：0.30 mol/L。称取42.6 g硫酸钠溶解并定容至1000 mL，用乙酸调pH为4.0。

A.4.1.2 ε-聚赖氨酸标准贮备溶液：10.0 mg/mL。称取1.0 g ε-聚赖氨酸标准样品，溶解并定容至100 mL。

A.4.1.3 ε-聚赖氨酸标准溶液：1.0 mg/mL。移取10.0 mL ε-聚赖氨酸标准贮备溶液于100 mL容量瓶中，定容至100 mL。

A.4.2 仪器和设备

凝胶渗透色谱仪：配有紫外检测器。

A.4.3参考色谱条件

A.4.3.1凝胶柱：水相凝胶过滤色谱（7.8 mm ×300 mm）。

A.4.3.2检测温度：30 ℃。

A.4.3.3检测波长：210 nm。

A.4.3.4流速：0.5 mL/min。

A.4.3.5进样量：20 μL。

A.4.3 分析步骤

A.4.3.1 标准曲线的绘制

分别移取0.00 mL、5.00 mL、10.00 mL、15.00 mL、20.00 mL、25.00 mL ε-聚赖氨酸标准溶液至25 mL容量瓶中并定容，溶液经0.22 μm微孔滤膜过滤。打开色谱仪，并调至工作状态，待基线平稳后，依次将上述ε-聚赖氨酸标准溶液注入凝胶柱中，进样量为20 μL，记录峰面积，以标准溶液中ε-聚赖氨酸的质量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

A.4.3.2 试样测定

准确称取0.1 g试样，溶解定容至100 mL。配好的试样溶液经0.22 μm微孔滤膜过滤，进样量为20 μL，进行凝胶渗透色谱检测，记录峰面积，并根据标准曲线查得试样中ε-聚赖氨酸的质量。

A.4.4 结果计算

ε-聚赖氨酸含量的质量分数w，按公式（A.1）计算：

m1

w= ——×100%…………………………………（A.1）

m

式中：

m1——从标准曲线中查得的ε-聚赖氨酸质量，单位为克（g）；

m——试样质量，单位为克（g）。

实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2 %。