多聚赖氨酸处理
多聚赖氨酸的配置、保存、使用
先配制成10mg/ml的浓缩液，使用前按照1：80稀释，制成工作液，浓度25ug/ml,可用于包被培养皿。
十六、各位老师，有几个关于多聚赖氨酸包被培养板的问题请教
1、pll到底溶于硼酸缓冲液还是溶于三蒸水或双蒸水
2、使用前是用灭菌的去离子水稀释吗，可不可以用双蒸水或别的
答：
多聚赖氨酸溶于硼酸缓冲液或者无菌培养用水；
十八、我的问题是多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？
答：
我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是
0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍。
我们这里的老师说，多聚赖氨酸不能用紫外线照射。
1.用赖氨酸包被培养板和培养瓶时，应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万)；
八、使用说明
操作步骤（可直接在玻片上涂布）
1.灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。
2.用之前将稀释的多聚赖氨酸溶液放在室内，使其温度到室温18-26℃
3.将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
4.在60℃烘箱1小时干燥，或室温18-26℃过夜干燥待用。
九、注意事项
我们用的多聚赖氨酸浓度为100ug/ml,一般包被3-4小时即可用.我们包被完后一般放在培养箱里,临用时拿出来洗三次，吹干即可．如果不急着用，放在培养箱里较长时间也没关系，把瓶盖拧紧即可，我最长放了２星期也没有问题。
左旋和右旋的多聚赖氨酸都可以用于包被细胞培养器具,主要看你的细胞贴壁能力如何,左旋的更利于细胞贴壁.我们一般使用
多聚赖氨酸的工作浓度各家文献报道相差很大，从
0.25 mg/ml到
0.01mg/ml都有，因为多聚赖氨酸对细胞有毒性，所以在保证贴附的前提下，浓度越低越好，还省钱。我现在用的是
gibco多聚-d-赖氨酸 用法
gibco多聚-d-赖氨酸用法
Gibco多聚D赖氨酸是一种生物化学试剂，用于生命科学研究中的细胞培养和实验。
具体用法如下：1. 培养基中的添加物：可以将Gibco多聚D赖氨酸添加到细胞培养基中，作为细胞的营养物来源之一。
通常的用量是每升培养基添加10-50 mg的多聚D赖氨酸。
2. 包被培养皿表面：可以在培养皿表面预先涂覆Gibco多聚D赖氨酸，从而提供细胞附着的基质。
在培养皿中加入适量的多聚D赖氨酸水溶液，让其在表面均匀涂敷，并在室温下干燥。
3. 组织工程和支架材料：Gibco多聚D赖氨酸也可以用于组织工程和支架材料的制备。
可以将多聚D赖氨酸加入到生物降解材料中，用于细胞生长和组织修复。
需要注意的是，具体的用法可能因研究目的、细胞类型和实验条件而有所不同。
在使用Gibco 多聚D赖氨酸前，最好参考相关的文献或咨询厂家提供的技术手册，以获取更详细的用法指导。
多聚赖氨酸细胞爬片处理原理
多聚赖氨酸细胞爬片处理原理
嘿，朋友们！今天咱来聊聊多聚赖氨酸细胞爬片处理原理。
这玩意儿啊，就像是给细胞准备了一个特别舒服的小窝。
你想啊，细胞就像一个个小精灵，它们也得有个安稳的地方待着不是？多聚赖氨酸就像是给它们铺上了一层温暖柔软的地毯。
细胞们在这上面能稳稳当当地待着，舒舒服服地生长、活动。
多聚赖氨酸为啥能有这效果呢？其实就是它有一种魔力，能和细胞相互吸引。
就好比你和好朋友，彼此之间有那种特别的吸引力，让你们喜欢待在一起。
细胞一碰到多聚赖氨酸，哎呀，就像找到了好朋友一样，紧紧地贴上去了。
这可太重要啦！要是没有多聚赖氨酸这层“魔法地毯”，细胞可能就到处乱跑，不好好待着，那我们还怎么观察研究它们呀？那我们的实验不就乱套啦？
而且啊，多聚赖氨酸的处理也有讲究呢！得恰到好处，不能太多也不能太少。
这就跟做菜放盐似的，放多了太咸，放少了没味道。
要掌握好那个度，才能让细胞在上面待得开心，我们也能得到满意的结果。
你说这多聚赖氨酸是不是很神奇？它就像一个幕后英雄，默默地为细胞提供着支持，让我们的科学研究能够顺利进行。
想想看，如果没有它，我们得费多大的劲才能让细胞乖乖听话呀！
所以啊，大家可别小看了这多聚赖氨酸细胞爬片处理。
它虽然看起来不起眼，但是作用可大着呢！它就像是打开细胞世界大门的一把钥匙，让我们能更好地了解细胞的奥秘。
怎么样，朋友们，现在是不是对多聚赖氨酸细胞爬片处理原理有了更清楚的认识啦？下次再看到相关的实验，你就知道这背后的小秘密啦！这就是科学的魅力呀，小小的一个处理，却蕴含着大大的学问呢！
原创不易，请尊重原创，谢谢!。
多聚赖氨酸处理载玻片流程
多聚赖氨酸处理载玻片流程
多聚赖氨酸（Poly-L-lysine，PLL）是一种常用的载玻片（Coverglass）表面修饰物，用于细胞培养和免疫组织化学等实验。
以下是一种常见的PLL处理载玻片的流程：
1. 准备载玻片：选择干净、无尘的载玻片，并用无水酒精或酒精灯烘烤消毒。
确保载玻片表面干燥且无油污。
2. 涂覆PLL：将PLL溶液加到载玻片表面。
可以选择将PLL溶液滴在载玻片中央，然后用微量移液器慢慢将溶液扩散到整个载玻片表面，或者使用旋涂法将PLL溶液均匀地涂覆在载玻片上。
3. 等待吸附：将涂覆好PLL的载玻片放置在无尘的环境中，让PLL溶液在载玻片表面吸附，并形成均匀的PLL层。
通常需要等待约20-30分钟，具体时间根据PLL浓度和温度而定。
4. 洗涤载玻片：将载玻片用去离子水或PBS缓冲溶液轻轻地洗涤数次，以去除未吸附的PLL和其他杂质。
避免用力刷洗或产生气泡，以防PLL层的破坏。
5. 干燥载玻片：用空气或干净的氮气吹干洗涤后的载玻片，确保载玻片表面完全干燥。
可以将载玻片放置在干燥箱中或在无尘环境中自然晾干。
6. 使用载玻片：处理好的PLL载玻片即可用于细胞培养、免疫组织化学等实验。
将培养物或样品滴在PLL处理的载玻片上，使其黏附并进行后续实验操作。
具体的操作流程可能因实验目的、PLL浓度和实验要求等而有所不同。
在进行实验前，建议参考相关文献或实验方法以获取更详细和专业的操作指导。
细胞爬片中玻片的处理
细胞爬片中玻片的处理：
方法一：先用无水乙醇脱脂,再用多聚赖氨酸处理,然后高压灭菌,然后就可以放入培养板中。
方法二：玻片和一般玻璃器皿的洗涤一样，也就是也要浸洗液，然后冲洗，蒸馏水冲洗后干燥，然后高压灭菌，这样处理过的玻片也没有问题，这个方法比较简单。
方法三:新玻片先用自来水冲洗，然后放到烤箱中烤干，再泡酸24小时，然后用自来水冲洗干净，要一片一片洗多冲几遍，直到无酸残留为止，最后用双蒸水荡三遍即可拿去高压备用。
多聚赖氨酸 树枝型大分子
多聚赖氨酸树枝型大分子
多聚赖氨酸是一种生物材料，也被称为聚赖氨酸树枝型大分子。
它是一种天然高分子聚合物，由赖氨酸单体组成。
赖氨酸是一种氨
基酸，是人体内的一种重要成分，对细胞的生长和修复起着重要作用。
因此，多聚赖氨酸树枝型大分子具有良好的生物相容性和生物
降解性，被广泛应用于生物医学领域。
从材料角度来看，多聚赖氨酸树枝型大分子具有分子量大、分
子结构独特、分子内带正电荷等特点。
这些特点使得多聚赖氨酸树
枝型大分子在药物传递、组织工程、生物材料等领域具有潜在的应
用前景。
例如，多聚赖氨酸树枝型大分子可以被设计用作药物载体，通过改变其分子结构和表面功能团，可以实现药物的控制释放和靶
向输送，提高药物的疗效并减少副作用。
从生物医学角度来看，多聚赖氨酸树枝型大分子在组织工程和
再生医学中具有重要意义。
由于其生物相容性和生物降解性，多聚
赖氨酸树枝型大分子可以被用来制备支架材料，用于修复组织缺损
和促进组织再生。
此外，多聚赖氨酸树枝型大分子还可以被用来制
备生物胶束、纳米颗粒等材料，用于药物输送和组织工程。
总的来说，多聚赖氨酸树枝型大分子是一种具有广泛应用前景的生物材料，其独特的分子结构和生物性能使其在药物传递、组织工程和生物材料等领域具有重要的应用价值。
随着生物医学领域的不断发展和进步，相信多聚赖氨酸树枝型大分子将会发挥越来越重要的作用，为人类健康事业做出更大的贡献。
多聚赖氨酸处理玻片
多聚赖氨酸处理玻片1. 引言1.1 概述概述多聚赖氨酸是一种生物相容性强且多功能的天然生物聚合物，具有广泛的应用前景。
在生物材料领域，多聚赖氨酸因其良好的生物相容性和可调控性受到了广泛的研究和应用。
除此之外，多聚赖氨酸还可以作为一种优秀的载体用于药物传递、基因转染和组织工程等领域。
然而，尽管多聚赖氨酸在生物医学领域中具有巨大的潜力，但其在玻片处理中的应用却相对较少被研究。
在病理学和细胞学等领域，制备高质量的玻片是重要的实验步骤之一。
目前常用的方法是通过利用多聚赖氨酸修饰玻片表面，提高玻片的附着力、细胞黏附和显微观察效果。
本文将重点介绍多聚赖氨酸处理玻片的方法和步骤。
首先将详细介绍多聚赖氨酸的特性，包括其生物相容性、成膜性、附着性以及与细胞相互作用的特点。
接着，将介绍利用多聚赖氨酸处理玻片的具体方法和步骤，包括材料准备、玻片表面修饰和处理等方面的内容。
通过本文的研究，相信可以有效地应用多聚赖氨酸处理玻片，并提高玻片的性能和实验结果的准确性。
此外，探索多聚赖氨酸在玻片处理中的应用还能够为其他领域的研究提供新的思路和方法。
因此，本文的研究对于推动多聚赖氨酸的应用和促进细胞学、病理学等领域的研究具有重要的意义和价值。
1.2 文章结构本文总共分为三个部分，即引言、正文和结论。
下面将对每个部分的内容做详细的介绍。
1. 引言部分在引言部分，首先会进行概述，介绍多聚赖氨酸处理玻片的背景和研究意义。
多聚赖氨酸作为一种天然产物，具有许多特殊的化学和物理性质，因此在生物医学领域有着广泛的应用前景。
然后，会详细说明本文的研究结构和目的，以引出后续的研究内容。
2. 正文部分正文部分主要包括两个小节，分别是多聚赖氨酸的特性和多聚赖氨酸处理玻片的方法和步骤。
- 2.1 多聚赖氨酸的特性在这一小节中，将详细介绍多聚赖氨酸的化学结构、物理性质以及其在生物医学领域的应用。
多聚赖氨酸具有丰富的氨基、羧基和假胺基团，以及良好的溶解性和可调节的电荷性质，这些特性使其成为理想的生物材料用于玻片表面的处理。
细胞免疫荧光步骤
方法一：1.首先需要把细胞养在玻璃片上（悬浮细胞需要用多聚赖氨酸包被过的玻璃片）2.然后在4％PFA里面室温下固定30分钟，PBS洗两次，% TX-100室温下作用1－2分钟使细胞膜通透。
3.接下来进行荧光标记，需要在一个大的容器（面积大，扁平状的，比如大的培养皿）里面，放一张用水打湿的滤纸，以保持湿度。
4.剪一片合适大小的parafilm，在上面滴上稀释在1％BSA/TBS中的一抗（稀释倍数依具体抗体而定），每个玻璃片30ul足够，把玻璃片盖在上面（细胞面朝下），室温下孵育30分钟，然后在PBS里洗三次。
5.接下来二抗孵育步骤同上。
6.最后，在载玻片加上mounting medium（大约每个玻璃片加10ul），把玻璃片放上去（细胞面朝下），37度30分钟，然后就可以在荧光显微镜下观察了。
7.抗体很重要，不能有非特异性结合。
你可以先做WB检测一下你的抗体，看看有没有杂带。
8.双标的话，可以把两个一抗一起加或者分别标记两次（可以都试一下看看那种方法合适）。
如果一个抗体需要二抗，一个是直接荧光标记的，可以把荧光标记的那个和另外一个的二抗一起加。
方法二：1.选取一抗时要来源于两种不同的动物，我用的是来源于rabbit和rat的抗体，二抗则是不同荧光信号标记的，我用的是donkey anti-rabbit-FITC（绿）和donkey anti-rat-Tex-Red（红）。
2.我的做法是两种一抗同时孵育，然后两种二抗同时孵育。
抗体浓度、孵育时间要仔细摸索，我感觉一抗4度孵育过夜比较好，背景比较清晰。
3.我的阳性对照用的是阳性组织切片，阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG，荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
4.封闭血清与二抗来源动物一致，我用的是10%的正常donkey血清。
5.其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
方法三：1.片子的制作：可以做细胞爬片，细胞甩片，还有直接在24well/12well/96well中直接染色2.细胞爬片的制作：直接购买公司的已经处理过的细胞爬片，要是自己制作的话，就用无菌的盖玻片用多聚赖氨酸处理后让细胞自己爬片3.细胞甩片：需要甩片机将细胞悬液均匀甩到玻片上。
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配制0.01%的多聚赖氨酸: 首先买来sigma 公司的多聚赖氨酸，如是25mg，就需要250ml三蒸水，用移液管将少量三蒸水加到多聚赖氨酸的小塑料瓶中，然后将溶解的多聚赖氨酸加到200ml左右三蒸水中，(已置烧杯中)。
最后加三蒸水达250ml，过滤除菌分装与小瓶中即可。
保存于-20度，近期用的话可放于4度冰箱内保存。
注意每一小瓶的量不要太满，若20ml的瓶子，只装15ml可，若太满，放于-2度有可能会将瓶子弄碎，因冻后体积增加。
(我就有这个教训) 另外烧杯，小瓶、移液管都要灭菌处理的，泡酸高压什么的。
我们用的是一种用注射器过滤的过滤器，一次性的。
一个能最多有效过滤200ml。
铺板的操作:首先要在消毒实验室，包括超净台，紫外消度20-30分钟。
消毒后30分钟进入实验室。
事先准备100ml三蒸水，经高压灭菌处理。
具体细节就不多说了。
首先打开板子，用消毒好的试管将0.01%的多聚赖氨酸加入每一孔中，大概每孔3-4滴吧。
将板子盖好放到培养箱中(37度 5%CO2)30分钟。
取出板子，用吸管将多聚赖氨酸吸出。
换吸管，加入三蒸水，冲洗三次，即将每孔内加入三蒸水，没过底，多点也行。
再将水吸出来。
反复三次。
注意换吸管，要无菌操作的。
最后将铺好的板子放于培养箱待用。
如果你做免疫组化，需要放小的玻片到孔内，就在加多聚赖氨酸之前用无菌的镊子将无菌的玻片夹到孔内即可。
我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍。
我们这里的老师说，多聚赖氨酸不能用紫外线照射。
1.用赖氨酸包被培养板和培养瓶时，应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万) ；2.感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20－30ug/ml；3.包被时间一般为6－7h，或者过夜也可；4.使用时应该先用灭菌水洗三次＋PBS（起平衡盐作用）洗一次，洗液的量应该大于包被液的量；5.“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？”，我包被时间最长的经历有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了，但是对细胞生长并无大碍，这是我曾经有过的经历，所以我会负责地告诉你；6.“多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？”，最好置于－20度保存，放置数月乃至半年都可以。
我问过博士德公司，他们分装的多聚赖氨酸是用来作免疫组化的，没有做过细胞培养实验，他们不保证能否用在细胞培养中，建议你买其他公司的吧，有固体的，分子量为15-30万，我们实验室用浓度0.01%的来促进神经细胞贴壁。
我们用的多聚赖氨酸浓度为100ug/ml,一般包被3-4小时即可用.我们包被完后一般放在培养箱里,临用时拿出来洗三次，吹干即可．如果不急着用，放在培养箱里较长时间也没关系，把瓶盖拧紧即可，我最长放了２星期也没有问题。
左旋和右旋的多聚赖氨酸都可以用于包被细胞培养器具,主要看你的细胞贴壁能力如何,左旋的更利于细胞贴壁.我们一般使用0.01%浓度的,包被过夜,第二天用双蒸水洗两三次,超净台紫外照射,风干。
可以直接买sigma的原装粉剂自己配。
还有,配好的多聚赖氨酸在4度时间不能放置太久,大概就一两周吧。
存放于-20度中的一般为0.1%的,而且不能反复冻融,只能融化一次。
最好是配好后分装。
方法是：浓度为50ng/1ml的多聚赖氨酸，加入培养板或培养瓶能均匀覆盖底部就可，放置在无菌操作台中过夜。
第二天早上用时先用双蒸水冲洗三遍再用。
各位生物秀才们，我在做细胞培养时。
用多聚赖氨酸包被过的培养皿，种细胞后，第二天发现里头根本没有细胞存活。
请教了老师后得知，在使用PLL包被过的皿时，应当用基培平衡一下Ph。
我于是用基培平衡后的皿种细胞，发现细胞还是死掉了。
反倒是用未经多聚赖氨酸包被的皿，培养细胞，里头倒是长得很好。
因为我的实验需要用多聚赖氨酸包被，你们觉得我应该如何改进？请高手指导指导，谢谢诸位了。
涂完PLL后的板要用灭菌的去离子水洗3遍，无水乙醇洗2遍，灭菌去离子水再洗3遍，试试这样如何因为自己做PC12细胞培养，想在接种前将培育皿用多聚赖氨酸包被，到园子里搜索了下，关于多聚赖氨酸的帖子不少，看了一些帖子，将大部分收集在此。
个人觉得关于多聚赖氨酸的配置、保存、使用各方面问题，这些帖子里面都解释了。
注：收集过程中，因为减少时间没有表明每一句话来自哪位战友，只是在前面标明出处帖子的链接地址。
要具体知道哪句建议出自哪位战友请到该相关帖子里查询。
我只是摘了一个帖子里某段或某句话。
一般一段话来自某一位战友。
/bbs/post/view?bid=76&id=9327093&tpg=1&ppg=1&sty=1&age=0#9327093常用的多聚赖氨酸包被可以用三蒸水，或者PBS，浓度一般为用0.1 mg/ml进行包被其他常用包被方法比较(以各种免疫分析为例)：/upload/2007/06/18/49456826.snap.jpg我配成1mg/ml的储存液，用Mini-Q(超纯水)配制，放在－20℃储存，使用时稀释10倍（也用超纯水），即终浓度100ug/ml，过滤后使用。
工作液过滤使用，如一次用不完，放在4℃储存。
多聚赖氨酸在水溶液中易分解，所以一次不要配太多工作液。
/bbs/actions/archive/post/1683809_1.html我现在要配多聚赖氨酸,书上写的用PBS配,但没写PH,浓度，向各位请教．PH应该在7.0~7.4PBS：取氯化钠7.650 g，无水磷酸氢二钠0.724 g，磷酸二氢钾0.210g 溶于蒸馏水1000 mL 中，以1N 氢氧化钠溶液调pH 值为7.0~7.4，经121℃灭菌15 分钟/bbs/actions/archive/post/3631859_1.html我准备用多聚赖氨酸涂片培养细胞,不知道多聚赖氨酸涂过的玻片如何灭菌 .能否干烤灭菌Sigma的产品说明书上写的很明白的。
另外，有本书上是这么写的，供参考：Poly-lysine-coated tissue culture surfacesTo coat coverslips: Prepare a stock solution by dissolving 25 mg/ml polylysine in 4.73 ml water (both poly-L-lysine and poly-D-lysine are used to coat tissue culture surfaces; check specific protocol for choice of isomer) and filter sterilize through a 0.22-μm filter. Store in 100-μl aliquots at −20°C.When ready to use, dilute one aliquot in 40 ml water to prepare 13 μg/ml working solution. Sterilize coverslips by autoclaving prior to coating. Dip coverslips in the working solution, then incubate 15 min to several hours in a humidified 37°C, 5% CO2 incubator. Allow surface to dry.To coat culture dishes or 8-well chamber slides: Prepare a stock solution by dissolving 100 mg poly-lysine in 100 ml water (both poly-L-lysine and poly-D-lysine are used to coat tissue culture surfaces; check specific protocol for choice of isomer) and filter sterilize through a 0.22-μm filter. Store in 5-ml aliquots at −20°C.When ready to use, dilute 1 part stock solution with 9 parts water to prepare 100 μg/ml working solution. Fill tissue culture dishes or slide wells with the working solution and incubate 1 hr in a humidified 37°C, 5% CO2 incubator, then remove solution by vacuum aspiration and allow surface to dry.Store coated tissue culture ware up to 3 months at 4°C. Use diluted solutions only once, but unused diluted aliquots can be stored up to 3 months at 4°C.你可以配置好PLL后单独将其过滤除菌，分装，待用。
玻片也是事先泡洗洁精，泡酸，双蒸水洗，烘干后高压灭菌，待用。
培养的前一天包被培养板时先把玻片放入培养孔然后把PLL加到玻片上，静置15分钟，洗出多余的PLL，然后用高压过的双蒸水洗板，培养板放入37度烘箱里过夜就可以用了。
/bbs/actions/archive/post/3979612_1.html多聚赖氨酸消毒该怎么办？？紫外照射消毒我没试过，但用0.22um的滤器消毒是没问题的（小的一次性滤器可以过滤200ml)。
在液体消毒时，如果所含成份经过高温，钴60照射发生变性者，建议用滤器（0.22），多聚赖氨酸为氨基酸类，建议用滤器，如果要求程度高，可以两个滤器过滤两次。
资料：多聚赖氨酸溶液（Poly-L-Lysine Solution）Conc.: 0.1% w/v, in water Storage: 18-26℃Thimerosal, 0.01%, added as preservative 多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂，该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。