临床检验基础_网织红细胞计数
一、网织红细胞(Ret)计数
优点：操作简单、快速，同时可获得多项血细胞参数。 缺点： ①不同的仪器使用的溶血素不同，形成不同的Hb 衍生物，某些溶血剂形成的衍生物稳定性差，故应严 格控制溶血剂的加入量及溶血时间。 ②有些溶血剂虽加入KCN,但衍生物并不是HiCN,而 是氰化血红蛋白仪器需经过校正后才能进行Hb测定。 ③ 低色素性贫血、某些肝病等，由于RBC具有抵 抗溶血剂的作用，导致RBC溶血不完全而影响Hb测定。
RET分型
较成熟RBC稍大，直径8.0～9.5µm。
0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
骨髓，
外周难见
(0.08%)
周围血少量
(0.15%)
外周最多
（60%以上）
பைடு நூலகம்
花冠型
有核
丝球型
充满，相互连接
网型、
松散，连成网
破网型
稀疏，丝点状
点粒型
散在，细颗粒 细丝状
ICSH 及NCCLS的定义：网织红细胞是已不含有细胞核的红细胞， 应分四型： Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 。
染色后，使含有RNA的RBC被计数，自动计算出RET的%及绝对数。优点：
测量细胞多，避免主观因素、方法易于标准化。国外已广泛使用，国 内逐步推广使用。但成本高。
近年来，新型多参数血细胞分析仪具有Ret计数功能。
【质量控制】
1.抗凝血最好在4h内处理，保存在4º C，可延长至8h. 2.染色温度控制在37º C为宜，无论何种染液，室温（25º C） 以下染色时，RET检出率明显减低，故要求37º C恒温染 色。 3. 玻片法容易使血液中的水分蒸发，造成涂片困难，受染料沉 淀的干扰，故已少用。 4. 试管法为手工RET计数的首选方法，染液与血液的比例以 1:1为宜，严重贫血时可适当增加血液比例。 5. 推制血膜不宜太薄或太厚，否则会造成RET分布不均。 6. ICSH推荐使用Miller窥盘作Ret计数，其CV=10%±
临床检验基础实验报告
一、实验目的通过本次实验，掌握临床检验基础实验的操作方法，熟悉各种检验原理及临床意义，提高对临床检验结果的理解和应用能力。
二、实验内容1. 血液标本采集和血涂片制备（1）皮肤采血法：在手指指腹内侧采血，用于红细胞计数、血红蛋白测定等。
（2）静脉采血法：在肘静脉采血，用于血常规、生化检验等。
（3）血涂片制备：将采集的血液涂于载玻片上，固定后进行染色和显微镜观察。
2. 血液一般检验（1）红细胞计数：采用改良牛鲍血细胞计数板，计算一定体积内红细胞数量，计算红细胞计数。
（2）血红蛋白测定：采用氰化高铁血红蛋白测定法，计算血红蛋白浓度。
（3）红细胞形态检查：观察红细胞形态，判断有无贫血、红细胞形态异常等。
（4）血细胞比容测定：采用微量法，测定红细胞在全血中所占体积百分比。
（5）网织红细胞计数：采用试管法，计算网织红细胞数量。
（6）红细胞沉降率测定：采用魏氏法，测定红细胞沉降速度。
（7）白细胞计数：采用血液分析仪，计算白细胞总数。
（8）白细胞分类计数：采用血液分析仪，计算各类白细胞百分比。
（9）白细胞形态检查：观察白细胞形态，判断有无感染、炎症等。
（10）嗜酸性粒细胞直接计数：采用试管法，计算嗜酸性粒细胞数量。
3. 血栓与止血一般检验（1）血小板计数：采用血液分析仪，计算血小板总数。
（2）凝血酶原时间测定（一步法）：测定凝血酶原时间，判断凝血功能。
（3）活化部分凝血活酶时间测定：测定活化部分凝血活酶时间，判断凝血功能。
（4）纤维蛋白原含量测定：测定纤维蛋白原含量，判断凝血功能。
（5）凝血酶时间测定：测定凝血酶时间，判断凝血功能。
4. 血型鉴定与交叉配血（1）ABO血型鉴定：采用正向、反向定型，确定受血者血型。
（2）交叉配血：将受血者血清与供血者红细胞混合，观察有无凝集反应；将受血者红细胞与供血者血清混合，观察有无凝集反应。
三、实验结果与分析1. 血液标本采集和血涂片制备（1）皮肤采血法：成功采集手指指腹内侧血液。
网织红细胞计数简介
网织红细胞计数简介目录•1拼音•2英文参考•3网织红细胞计数的别名•4正常值•5化验结果意义•6网织红细胞计数校正•7化验取材•8化验方法•9化验类别•10参考资料1拼音wǎng zhī hóng xì bāo jì shù2英文参考retic. ct.reticulocyte count3网织红细胞计数的别名RC4正常值目测法：成人：0．5－1．5%，新生儿：2－6%。
5化验结果意义网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，在周围血液中的数值可反映骨髓红细胞的生成功能，因而对血液病的诊断和治疗反应的观察均有其重要意义。
网织红细胞增多，见于：（1）骨髓红细胞增生旺盛：急性溶血性贫血、出血性贫血。
（2）判断疗效：缺铁性贫血及巨幼细胞性贫血病人，在补充铁剂及维生素B12、叶酸之后，网织红细胞应迅速增多。
网织红细胞减少，见于：红细胞生成减低。
再生障碍性贫血病人，典型病例常低于0.5%。
6网织红细胞计数校正网织红细胞计数一般以占外周血红细胞（RBC）百分数表示，因此易受贫血程度的影响。
矫正方法有两种：网织红细胞百分数与红细胞绝对数乘积即绝对网织红细胞计数（正常范围:24 000 ~ 84 000/ 立方毫米）。
另一消除贫血程度影响的方法是，网织红细胞百分数与实际红细胞压积的积再除以正常红细胞压积（45）。
值得注意的是，上述矫正方法往往会使网织红细胞计数低于实际值，因此如果观察值已较低，则矫正值无意义。
矫正仅用于网织红细胞百分数增高时。
7化验取材血液8化验方法血常规检查9化验类别血常规检查临床血液学检查10参考资料《新编临床检验与检查手册》、《新编化验员工作手册》免责声明：本文内容来源于网络，不保证100%正确，涉及到药方及用法用量的问题，不保证正确，仅供参考。
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临床检验基础名词解释
1、血清（serum）血液离体自然凝固后，分离出来的液体。
2、血浆（plasma）全血抗凝离心后去除血细胞剩下的成分。
3、抗凝剂（anti coagulant）应用物理或化学方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。
能够阻止血液凝固的化学试剂或物质，称为抗凝剂或抗凝物质。
4、红细胞计数（RBC）是血液一般检验的基本项目，常作为诊断贫血和红细胞增多的主要指标之一。
5、血红蛋白（hemoglobin，Hb）RBC 的运输蛋白，其主要功能是吸收肺部的氧气，并输送至全身各组织。
6、有核红细胞（nucleated erythrocyte）成熟的红细胞是无细胞核的，成分是蛋白质和铁，有运输氧的功能。
但是人体内细胞生长不可能没有细胞核，所以有核红细胞实际上是未成熟的红细胞。
有核红细胞所占比例很少。
7、靶形红细胞（target cell）红细胞中心部位染色较深，周围为苍白区域,而细胞边缘又深染，形如射击之靶。
有的中心深染区不像孤岛而像从红细胞边缘延伸的半岛状态或柄状，而成不典型的靶形红细胞。
靶形红细胞直径可比正常红细胞大或正常，但厚度变薄；靶形红细胞常见于各种低色素性贫血，在珠蛋白生成障碍性贫血时尤易见到。
8、网织红细胞（Reticulocyte，Rtc）介于成熟RBC和晚幼RBC之间的细胞，略大于成熟RBC，其胞质中含有少量残存的嗜碱性物质RNA，用煌焦油蓝染色时成网状故名网织红细胞。
9、嗜碱性点彩RBC（basophilic-stippling cell）是不完全成熟的红细胞，胞质内残存的核酸变性、聚集形成颗粒，经碱性染料染色后，细胞内可见到深染的颗粒；若以瑞氏染色，则在粉红色的胞质中见到紫红色或蓝黑色颗粒。
10、豪焦小体（Howell-Jolly body）又称染色质小体，成熟红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个直径为1~2μm暗紫红色圆形小体，为核碎裂、溶解后的残余部分。
见于脾切除后、无脾症、脾萎缩、脾功能减低、红白血病、某些贫血（如巨幼红细胞性贫血）。
临检--网织红细胞计数(Ret)
网织红细胞计数（Ret）【定义】网织红细胞是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，属于尚未完全成熟的红细胞，其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸（RNA），经活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，颗粒与颗粒连缀成线，线连接成网，故而得名。
【分型】根据网织红细胞发育阶段分为4型，分别是：Ⅰ型（丝球型）：红细胞充满网状物，见于骨髓。
Ⅱ型（网型）：红细胞网状物结构松散，见于骨髓。
Ⅲ型（破网型）：红细胞网状物结构稀少，呈不规则枝点状排列，见于外周血。
Ⅳ型（点粒型）：红细胞内为分散的细颗粒、短丝状网状物，见于外周血。
【检测原理】1.普通光学显微镜法2.网织细胞计数仪法和血液分析仪法【操作方法】1.显微镜试管法操作（1）加染液：于试管中加入10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液2滴，再加新鲜血2滴，立即混匀，置37℃下15～20min。
（2）制片：取1小滴制成薄血涂片，自然干燥。
（3）观察：在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。
（4）计数：在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数。
（5）计算：网织红细胞分数=（计数的网织红细胞数）/1O00，网织红细胞绝对值（×109/L）=红细胞数×1012/L×网织红细胞分数。
2.显微镜法注意事项（1）网织红细胞必须活体染色，WH0推荐使用新亚甲蓝染液，其染色力强且稳定。
煌焦油蓝染液操作简单、费用低廉，但易产生沉淀、工作效率不高、精度差。
染液与血液比例以1:1为宜，严重贫血时，可适量增加血量。
（2）为提高网织红细胞计数精度和速度，ICSH推荐使用Miller窥盘，方法是将Miller 窥盘置于目镜内，选择红细胞散在且分布均匀的部位（3）用小方格（A）计数红细胞，大方格（B）计数网织红细胞，按下式计算：（4）注意鉴别网织红细胞与HbH包涵体。
Ret为蓝绿色网状或点粒状物质，分布不均，HbH包涵体为蓝绿色圆形小体，均匀散布于整个红细胞内。
网织红细胞计数操作规程
网织红细胞计数操作规程目的：本实验旨在规范网织红细胞计数的标准操作，以确保实验数据的准确性。
原理：网织红细胞是未完全成熟的红细胞，其包体较一般红细胞稍大，胞浆中尚有嗜碱性残留物质，可被煌焦油蓝等染成蓝色颗粒状、线状及网状结构物。
网织红细胞的数量可用百分率或每立方毫米血液中的绝对值数来表示。
材料：煌焦油蓝（灿烂甲酚蓝）、枸橼酸钠、生理盐水、香柏油、载物片（玻璃片）、推片（磨去边的玻璃片）、试管（2ml）、毛细吸管或枪头（200微升）、光学显微镜。
操作规程：染色液配制：将煌焦油蓝0.4g和3.5%枸橼酸钠20ml研磨溶解后加入生理盐水至100ml，过滤备用。
室温下可保存6个月。
血膜片制备：1.染色：取试管一支，用毛细管或枪头于其中加入染液2～5滴，然后再加入新鲜血液1滴轻摇混合，染色10～15min。
2.制片：取载物片一片，用毛细管或枪头吸取血液染色液1小滴于载物片上，并用推片约45度角推制成舌型血膜片，自然干燥备用。
3.观察：用显微镜观察，取血膜片滴入香柏油1滴，将血膜片置于显微镜载物台，用油镜观察网织红细胞。
4.计数：取计数器在油镜下检查计数红细胞，即计数红细胞中网织红细胞的数量，检查计数1000个红细胞中网织红细胞的数量，并得出千分率再除以10即为百分率。
计算公式：百分率=1000个红细胞中网织红细胞的数量/1000注意事项：1.载物片使用前必须经过酸或碱液浸泡脱脂处理后方可使用。
2.血膜片制备需要反复练推片，熟练推制血膜片的技巧。
3.血膜片的厚薄要适中，过厚或过薄均无法进行观察。
4.室温过低时，血液染色时间要适当延长，以确保细胞着色更充分。
5.血膜片需在3天内检查计数，否则其网状结构会褪色，不易观察清晰。
临床检验基础题库含答案
临床检验基础题库含答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、不会引起嗜酸性粒细胞数量增多的疾病是( )。
A、肠寄生虫B、湿疹C、支气管哮喘D、伤寒E、慢性粒细胞白血病正确答案：D2、网织红细胞计数的临床意义错误的是( )。
A、判断骨髓RBC造血情况B、观察贫血治疗效果C、骨髓移植后监测造血恢复D、溶血性贫血时网织红细胞增多E、贫血时网织RBC都增多正确答案：E3、成人少尿是指少于( )。
A、20ml／h或300ml／24hB、37ml／h或500ml／24hC、50ml／h或200m1／24hD、17ml／h或400ml／hE、7ml／h或100m1／24h正确答案：D4、英文缩写HCT表示( )。
A、血细胞比容B、血小板比容C、平均红细胞体积D、红细胞体积分布宽度E、平均红细胞血红蛋白量正确答案：A5、以下哪种成分可用苏丹Ⅲ染色鉴别( )。
A、肠黏膜上皮细胞B、大肠杆菌C、淀粉颗粒D、肌纤维E、脂肪滴正确答案：E6、镜下血尿的红细胞数量应为( )。
A、>20个／HPB、>10个／HPC、>5个／HPD、>3个／HPE、>15个／HP正确答案：D7、引起干化学试带法酮体结果假阳性的物质是( )。
A、新霉素B、维生素CC、庆大霉素D、L一多巴代谢物E、氯丙嗪正确答案：D8、MCV增大，RDw增高见于( ) 组题：A、正常色素性红细胞B、低色素性红细胞C、高色素性红细胞D、嗜多色性红细胞E、碱性点彩红细胞正确答案：A9、关于网织红细胞计数的叙述，错误的是( )。
A、在显微镜计数法中，玻片法优于试管法B、使用Miller窥盘辅助显微镜计数，可提高精密度C、常用煌焦油蓝染色D、WHO推荐的染料是新亚甲蓝E、常采用显微镜计数法正确答案：A10、ABO血型系统中最多见的亚型为( )。
A、A亚型B、B亚型C、AB亚型D、O亚型E、B亚型与AB亚型正确答案：A11、ICSH对血液分析仪白细胞计数的评价方案，不包括下列哪些项目( )A、可比性B、携带污染C、总重复性D、精密度E、不确定度F、HFRG、MAPSSH、GRAN<正确答案：E12、离心法尿沉渣检查，正常情况下透明管型可见的数量为( )。
临床测定网织红细胞方法及结果分析
临床测定网织红细胞方法及结果分析标签：测定;网织红细胞; 方法;结果;分析临床应用CD-3500全自动血细胞分析仪”根据多角度激光散射法”的检测原理进行网织红细胞（Ret）计数，即当细胞通过检测器时会受到特定波长的激光照射，感受器从不同的角度得到红细胞的光散射信号，根据这些信号仪器可以判别并计数网织红的绝对值和百分比并能显示各细胞群的光散射强度分布图。
我们对该仪器的临床应用进行了分析。
一、试验材料及资料来源1.1试验材料：1.美国Abbott公司CD-3500）全自动血细胞分析仪。
2.美国肚击狱公司提供的Ret专用试剂和质控品3.EDTA-2K 抗凝剂。
4.1%的天青Ⅰ生理盐水溶液。
5.普通光学显微镜。
1.2资料来源：二、方法与结果分析1.仪器的稳定性试验：每天在进行临床标本的网织红细胞计数之前，先用作试剂空白计数两次，再按常规法测定网织红细胞质控物（批号为G087-2 ),连续监测两周（11个工作日）。
结果均符合要求2.临床标本测试结果的重复性试验：取新鲜抗凝血5份，每份标本吸20ug，加入3.7ml的染液中，室温放置15min 后上机测定，每份标本连续测定20次，计算其、s、CV %（高、低值各分2组），高值1分别为17.23%、0.60%、3.48%；高值2分别为6.63%、0.28%、4.22%；中值分别为：2.21%、0.16%、7.22%；低值1分别为：0.63%、0.06%、9.50% ；低值2分别为0.26%、10.03%、11.5%。
3.仪器的携带污染率试验：取Ret 高值标本1份（Ret=6.63 % , RBC =3.76 ×1012/ L ) ，连续计数3次后立即进行空白计数3次。
根据下列公式计算：携带污染带= ×100%，得到CD-3500的平均携带污染率0.26%4.仪器测试的灵敏度及其与显微镜法的相关性试验：收集有代表性的临床标本共10份（其中再障2例，声带息肉2例、原发性血小板减少症2例、缺铁性贫血恢复期1例、溶血性贫血3例），分别用仪器法和显微镜法进行Ret计数两种方法Ret对比结果表明：对于低值标本，仪器法的灵敏度和分辨力较好；但Ret8.0%的区域内仪器法则要低。
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（四型） 外周血 哪型多？
花冠型
丝球型
网型
破网型 HeiLmyer分型
点粒型
(二)染色原理 网织红细胞内RNA的磷酸基 （带负电荷）能与 灿烂甲酚蓝、新 亚甲蓝等碱性染料的有色反应基团 （带正电荷） 结合，形成核酸与碱 性染料复合物的多聚体，凝成颗粒， 其颗粒又联缀成线，而构成浅蓝或 深蓝的网织状结构。
网织红细胞 （reticulocyte）计数
界于晚幼红细胞和成 熟红细胞之间的过渡 阶段细胞。因其胞质 中残存的核糖核酸经 碱性染料活体染色后， 呈现点状或线网状结 构，故名网织红细胞。
网织红细胞的形态特点和 分型
Ret通常较成熟红细胞稍大，直径8.0～9.5 微米。
HeiLmyer分型
（五型） NCCLS和ICSH分型
小结
本章节我们学习了网织红细胞计数，我 们要知道网织红是哪个阶段的红细胞， 它的升高表示什么，它的减低又代表什 么，熟练掌握有二、填空 依据ICSH的定义，网织红细胞分（）（）（） （）型。 三、是非题 1、网织红细胞是幼稚红细胞。 2、再生障碍性贫血网织红细胞降低。 3、溶血性贫血网织红细胞增多。 4、网织红细胞是反映骨髓造血状态的指标。
３、临床意义
（2）评价疗效 网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血 分别给予铁剂、维生素B12或叶酸治疗 3-5d后，网织红细胞计数值开始上升， 7-10d达到最高(10%左右)；两周以后 逐渐降至正常水平，红细胞、血红蛋白 开始升高。 骨髓移植、EPO治疗后：若骨髓开始恢 复造血功能，网织红细胞计数值上升。
２、参考值
• 成人：0.005～0.015（0.5%～ 1.5%)
• 新生儿：0.03～0.06 • 绝对值：(24～84) ×109/L
３、临床意义
（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型 再障时，明显降低。绝对值低于15×109/L可 做为急性再障的辅助诊断指标。 失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明 显高于正常。 营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持 正常、轻度升高或降低。
第一章 网织红细胞计数 （reticulocyte,Ret）
检验教研室
教 学 目 标
1、掌握网织红细胞计数方法、原理 2、掌握网织红细胞计数参考值、临 床意义
主 要 内 容
1、网织红细胞计数原理、参
考值 2、RET计数临床意义 3、质量控制
教学重点与难点
重点： 网织红细胞计数概念、临床意义 难点： 1、显微镜下特点 2、临床意义
四、选择题 1、成人网织红细胞的相对参考值： A 0.5%～1.5% B 0.5%～1.0% C 0.5%～2.5% D 0.1%～1.5% 五、简述网织红细胞的临床意义。
１、计数方法
（1）手工方法： 米勒（Miller）窥盘法
该方法可明显提高计数的准确性和 准确性.
A
1
3
B
将Miller窥盘放在显 微镜目镜中,通过窥盘 中大小方格间的9比1 比例关系计算RBC数和 网织RBC。
（２）流式细胞仪法：
抗凝全血噻唑橙染色，用流式细胞仪分析 样本中10000个细胞，报告网织红细胞%和 平均荧光强度。 荧光强度越强，细胞越幼稚。 流式细胞仪分析简便，结果精确、灵敏， 消除了取样带来的误差。
３、临床意义
（3）放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制， 早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织 红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功 能恢复后，又见上述指标依次上升。
网织红生成指数 • （Reticulocyte production index,RPI） • 病人网织红细胞/d * 病人PCV/正常人 PCV（男0.45，女0.40） • 意义： • ＞3提示溶血性贫血或急性失血性贫血； • ＜1提示为骨髓增生低下或红细胞系成熟 障碍性贫血。