葡萄籽提取物(GSE)有效成分的分析
浅谈葡萄籽提取物的理化结构葡萄是一种世界性水果,其种植面积和

浅谈葡萄籽提取物的理化结构葡萄是一种世界性水果,其种植面积和浅谈葡萄籽提取物的理化结构葡萄是一种世界性水果,其种植面积和产量都居首位,被誉为“水果世界的明珠”。
在我国,葡萄资源也很丰富,每年生产的葡萄达120多万吨,其中80%以上用于酿造和其他饮料生产,每年下脚料可产葡萄籽4.2万t。
意大利和法国是世界上生产葡萄酒最多的国家,目前已使70%葡萄籽得到了应用。
葡萄籽油脂可以作为婴儿和老年人的高级营养油,高空作业和飞行人员的高级保健油。
1997 年,在美国10种植物提取物市场份额中,葡萄籽提取物名列第七位[1]。
葡萄籽是原花青素的丰富资源。
近年来在提取、分离、药理和临床等方面进行了广泛的研究,表明葡萄籽是开发天然抗氧化剂的新资源。
葡萄籽提取物(grape seed extract,EGS)中含有大量多酚类、脂质类和矿物类等有益于人体的化学成分,对多种疾病有预防和治疗作用。
葡萄籽提取物还用于增强血管功能,治疗炎症、糖尿病并发症如神经病或视网膜病,促进创伤愈合,预防虫牙、癌症、视网膜黄斑变性、夜盲症、肝硬化、过敏以及与胶原病和衰老相关的胶原损坏[2]。
随着时代的发展,各种新的研究设备不断推出,给我们的研究提供了一个很好的平台。
使用理论化学、程序模型等各种先进的方法,研究其理化结构,完善各种指纹谱图,对于更好的研究物质结构与功能的关系具有重要的意义和作用。
李淑芳等研究发现葡萄籽提取物的化学成分如下:1、葡萄籽提取物中的化学成分1.1、脂质类及其他化学成分葡萄籽中约含有10% ~15%的葡萄籽油,其主要成分为亚油酸、亚麻酸等多种不饱和脂肪酸和甾醇等以及多羟基类(PHS)如白藜芦醇等。
葡萄籽油中含矿物元素钾、钠、钙和铁量较高,并含多种维生素。
酚酸类主要包括原儿茶酸、香豆酸、没食子酸、咖啡酸和丁香酸等。
1.1.2、葡萄籽油的组成及理化性质葡萄籽的含油量在14g/100g ~17g/100g之间,葡萄籽油含有大量的不饱和脂肪酸,含量高达90g/100g 以上。
葡萄籽提取物

• 无沦如何,我国原花青素的开发大都处于植化研究阶段,虽有用松树不 同部位(如松节、松针、松果和花粉)入药的应用,但未进行有效成分 的分离鉴定,难以说清疗效与原花青素的关系。尽管原花青素在植物王 国广泛存在,我国的山楂、银杏和葡萄资源也十分丰富,目前却无真正 的原花青素产品问世。
葡萄籽萃取物OPC的美容护肤功效
• 性状:红棕色粉末,气微、味涩。
• 葡萄籽提取物(GSE)是从天然葡萄籽 中提取的有效活性营养成份配以维生素E 等主要原料精制而成的营养食品。葡萄 籽提取物是从葡萄籽中提取的一种人体 内不能合成的新型高效天然抗氧化剂物 质。它是目前自然界中发现的抗氧化、 清除自由基能力最强的物质,其抗氧化 活性为维素E的50倍、维生素C的20倍。
4、美白肌肤
污浊的空气、阳光紫外线的伤害的化妆品等外来因 素活化了自由基,让肌肤在正常状况下遭受更多自由 基的攻击。自由基攻击和破坏细胞过程中,导致细胞 大量死亡和代谢紊乱,细胞内杂质无法代谢出体橡皮, 造成色素沉积,而死亡老化细胞加重了皮肤的颜色, 使皮肤灰暗无光泽,并且死亡细胞使细胞组织分裂增 殖速度减慢,新生细胞数量大量减省(新生细胞是肌 肤美的的重要因素)。 OPC能高效清除人体内的 大量自由基,并隔离污浊空气、紫外线和化妆品等外 来因素,使皮肤免受伤害,阻碍黑色素形成,促进新 生细胞的迅速分裂、增殖,进而达到美白肌肤的作用。
GSE主要功能
• 葡萄籽提取物能有效清除人体内多余的 自由基,具有超强的延缓衰老和增强免 疫力的作用。抗氧化、抗过敏、抗疲劳 增强体质、改善亚健康状态延缓衰老、 改善烦躁易怒、头昏乏力、记忆力减退 等症状。
• 抗氧化性 • 眼睛保健作用(可降低眼部退化性斑点
和白内障发病率) • 心率保健作用(减低运动性血管粥硬化) • 增强血管强度(加强血管壁的弹性) • 具有消炎、祛肿 • 降低癌症发病危险
葡萄籽提取物主要成分

葡萄籽提取物主要成分葡萄籽提取物,也称为葡萄籽提取物,是从葡萄籽中提取的天然保健产品。
它被广泛应用于食品、保健品和化妆品行业,因为它富含各种营养物质和活性成分,具有许多健康益处。
下面是关于葡萄籽提取物主要成分的相关参考内容。
1. Proanthocyanidins(Procyanidins):葡萄籽提取物的主要活性成分是原花青素(Procyanidins),这是一类富含多酚的化合物。
原花青素具有强大的抗氧化活性,可以中和自由基,减轻氧化应激,并保护细胞免受损害。
研究表明,原花青素还具有抗炎、抗衰老、抗癌和心血管保健等多种功能。
2. Flavonoids(黄酮类化合物):葡萄籽提取物中还含有丰富的黄酮类化合物,如黄酮醇、黄酮苷等。
这些化合物也具有抗氧化活性,并被认为有助于降低心脏病、癌症和糖尿病等慢性疾病的风险。
此外,黄酮类化合物还具有抗病毒、抗菌和抗炎等作用。
3. Polyphenols(多酚):葡萄籽提取物中还含有多种多酚化合物,如儿茶素和儿茶酸等。
这些多酚具有良好的抗氧化作用,可以保护细胞免受自由基的伤害。
此外,多酚还具有抗炎、抗菌、抗肿瘤和抗过敏等作用。
4. Vitamin E(维生素E):葡萄籽提取物富含维生素E,这是一种脂溶性维生素。
维生素E具有较强的抗氧化活性,可以保护细胞膜不受氧化损伤,并预防慢性疾病的发生。
此外,维生素E还具有抗炎、抗衰老和免疫增强等作用。
5. Resveratrol(白藜芦醇):葡萄籽提取物中还含有一定量的白藜芦醇,这是一种天然的多酚类化合物。
白藜芦醇具有显著的抗氧化活性,可以保护细胞免受自由基的损伤。
此外,白藜芦醇还具有抗炎、抗肿瘤、抗衰老和心血管保护等多种生理功能。
以上是葡萄籽提取物主要成分的相关参考内容。
这些成分不仅具有抗氧化的作用,还拥有许多其他健康益处。
然而,需要注意的是,各种葡萄籽提取物的成分含量和活性可能会存在差异,因此在选择和使用时,还应参考产品的具体成分和质量标准。
葡萄籽提取物可行性分1

葡萄籽提取物可行性分析一、概述1、开发背景:葡萄籽原花青素是最受美国公众青睐、是风靡美国草药市场的10种植物药之一,目前用葡萄籽提取液做成的食品、饮料、化妆品已席卷欧美、日本市场。
若仅统计普遍市场,食品商店及药店的销量,1997年美国葡萄籽提取物的销量就达到了1000万美元。
但是我国在研发领域还比较落后,市面上的产品不多,我们应该加大研发力度,做好营销策划,扩大原花青素在药品、保健食品、化妆品、食品添加剂领域的应用,而提取物作为原料需求量必然增大。
2、基本资料:【产品名称】葡萄籽提取物【英文名称】Grape seed P.E.【拉丁名称】Vitis Vinifera【来源】葡萄科葡萄成熟果实榨汁后的干燥残渣分筛出的种子。
生长在黄河以北地区,9-11月份采收。
【有效含量】原花青素。
由于其分子结构中有多电子的羟基(酚基)部分,是优良的氢或中子的给予体,因此具有超强的抗氧化能力,能有效清除人体内自由基,专家已证实它在人体内约是Ve的50倍,为Vc的20倍。
人体吸收迅速完全,口服20分钟即可达到最高血液浓度,代谢半衰期达7小时之久。
【质量标准】有效成分含量:≥95%,为纯天然生物黄酮素类物质。
【功效】具有抗炎、抗组胺、抗变应原、抗氧化剂、美容、促进血液循环等功能。
目前,主要应用于治疗关节炎、过敏症、动脉硬化、溃疡和皮肤病等。
二、研究及应用状况由于葡萄籽提取物的有效成分是原花青素,原花青素是植物王国中广泛存在的一大类多酚化合物的总称。
100多年来,在涉及的众多植物中,葡萄一直是经久不衰的研究课题。
50年代以来,人们从葡萄果实、叶和其它部位分离、鉴定的多酚化合物、脂肪酸、维生素、酶、碳水化合物、氨基酸、多肽和蛋白质、萜烯与挥发油成分以及脂类、果胶和蜡等物质达100多种。
在众多成分之中,人们感兴趣的是鞣花酸、白藜芦醇及其低聚体、花青甙和原花青素,因为葡萄的医疗功效大都与这些成分的药理活性有关,其中最感兴趣的是原花青素。
应用总氧自由基清除能力法检测葡萄籽提取物的抗氧化性

应用总氧自由基清除能力法检测葡萄籽提取物的抗氧化性目的:探讨总氧自由基清除能力法在葡萄籽提取物抗氧化性评价中的应用。
方法:热解2,2’-偶氮双(2-脒基丙烷)产生以碳为中心的氧自由基,与4-甲硫基-2-丁酮酸作用产生乙烯,采用气相色谱法检测乙烯含量。
在检测体系中添加不同浓度的葡萄籽提取物,从乙烯产量变化指示被测物清除氧自由基的能力。
结果:在0.5~10.0 mg/ml浓度范围内,葡萄籽提取物的总氧自由基清除能力存在浓度-反应关系,相关系数为0.864(n=6)。
结论:总氧自由基清除能力法可用于葡萄籽提取物抗氧化性的测定,并提出了拓展该方法的思路。
[Abstract] Objective: To investigate the application of total oxyradical scavenging capacity (TOSC) assay for evaluating the antioxidant of grape seed extract (GSE). Methods: Peroxyl radicals were generated by pyrolysis of 2,2’-azo-bis (2-methyl-propionamidine)-dihydrochloride (ABAP) at 35℃. Peroxyl radicals could oxidize the substrate α-keto-γ-methiolbutyric acid (KMBA) to ethylene, which was measured by gas chromatography.In the detection system made by adding different concentrations of GSE, indicating changes in ethylene production measured from TOSC. Results: In the range of 0.5-10.0 mg/ml, TOSC of GSE made a linear of concentration-response relationship, the correlation coefficient was 0.864 (n=6). Conclusion: TOSC Assay can be used for GSE antioxidant determination, and proposed to expand the idea of the method.[Key words] Total Oxyradical scavenging capacity; Grape seed extract; Antioxidant; Drug ldentification葡萄屬于葡萄科(Vitaceae Lindl.)葡萄属(Vitis L.)的果实,为落叶藤本植物。
葡萄籽提取物抑制乳腺癌细胞生长的实验研究

葡萄籽提取物抑制乳腺癌细胞生长的实验研究刘臣彪;陈昌杰;章尧;章菊;杨清玲;王惠【期刊名称】《蚌埠医学院学报》【年(卷),期】2009(34)4【摘要】目的:探讨葡萄籽提取物(grape seed extact,GSE)抑制乳腺癌细胞生长的分子机制.方法:利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测GSE对乳腺癌细胞的抑制作用,并筛选合适的GSE实验浓度;流式细胞术检测GSE对乳腺癌细胞内活性氧(ROS)产生的影响;半定量RT-PCR法检测肿瘤细胞中肿瘤相关基因Bcl-2和Bax表达的水平.结果:GSE抑制乳腺癌细胞的生长,作用具有剂量依赖性(P<0.01),IC50为100μg/ml;GSE降低肿瘤细胞内ROS的产生;GSE能减少乳腺癌细胞中Bcl-2基因的表达,对Bax基因无影响,其Bcl-2/Bax值显著降低(P<0.01).结论:GSE抑制乳腺癌细胞生长,可能是通过降低ROS的产生,减少相关基因Bcl-2的表达水平,进而降低Bcl-2/Bax值而实现的.【总页数】4页(P277-280)【作者】刘臣彪;陈昌杰;章尧;章菊;杨清玲;王惠【作者单位】蚌埠医学院,临床检验诊断学实验中心,安徽,蚌埠,233030;蚌埠医学院,生物化学与分子生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;蚌埠医学院,生物化学与分子生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;蚌埠医学院,临床检验诊断学实验中心,安徽,蚌埠,233030;蚌埠医学院,生物化学与分子生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;蚌埠医学院,临床检验诊断学实验中心,安徽,蚌埠,233030【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.细胞培养实验发现葡萄籽提取物对结肠癌细胞生长有抑制效果 [J], 红酒世界网2.水飞蓟宾通过降低MEK/ERK途径依赖的MMP-9蛋白表达抑制人乳腺癌细胞生长和侵袭转移机制的实验研究 [J], 车佳3.CDA-Ⅱ对乳腺癌细胞生长抑制作用的可逆性实验研究 [J], 王艳红;王忠臣;郑伟;蒋彦永4.葡萄籽提取物通过抑制Survivin的表达而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖 [J], 陈昌杰;刘臣彪;杨清玲;章菊;藤风猛5.尿多酸肽联合丁酸钠抑制乳腺癌细胞生长的体外实验研究 [J], 朱燕;赵玉亮;卜定方;石永进因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
葡萄籽提取物主要成分

葡萄籽提取物主要成分葡萄籽提取物(Grape Seed Extract,简称GSE)是从葡萄籽中提取的一种具有很高商业价值的植物提取物。
它富含多种活性成分,如多酚类化合物、有机酸和生物活性多肽等,具有广泛的药理活性。
下面将探讨葡萄籽提取物主要成分及其相关参考内容。
1. 多酚类化合物:葡萄籽提取物中最重要的活性成分是多酚类化合物,如原花青素(Proanthocyanidins)、儿茶素(Catechins)、黄酮类化合物(Flavonoids)等。
这些多酚类化合物具有强大的抗氧化活性,可以中和自由基、减少氧化应激,预防多种慢性疾病的发生。
参考文献:(1)Bagchi D, et al. Free radicals and grape seed proanthocyanidin extract: importance in human health and disease prevention. Toxicology. 2000;148(2-3):187-97.(2)Wang H, et al. Proanthocyanidins from grape seeds inhibit expression of matrix metalloproteinases in human prostate carcinoma cells, which is associated with the inhibition of activation of MAPK and NFκB. Carcinogene sis. 2006;27(4): 772-779.2. 有机酸:葡萄籽提取物中有机酸是另一个重要的成分,包括苹果酸(Malic acid)、酒石酸(Tartaric acid)和柠檬酸(Citric acid)等。
这些有机酸对人体有益,具有促进新陈代谢、提高免疫功能、抑制细胞增殖的作用。
参考文献:(1)Pandino G, et al. Grape by-products: antioxidant activity, potential effect on gutmicrobiota, and associated health benefits. Int J Mol Sci.2021;22(8):4266. (2)Taruscio TG, et al. Characterization and quantitation of polyphenolic compounds in bark, kernel, leaves,and pomace of grape (Vitis vinifera) cv. Malbec. J Agric Food Chem. 2005;53(24): 9940-9946.3. 生物活性多肽:葡萄籽提取物中还含有多种生物活性多肽,如血管紧张素转换酶抑制肽(Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitory Peptides)和血小板聚集抑制肽(Platelet Aggregation-Inhibitory Peptides)等。
武汉大学天然产物的提取葡萄籽

2. 超临界CO2萃取技术提取刺葡萄籽油的工艺研究 以萃取温度(35、40、45、50℃),萃取压力(15、20、 25、30MPa),分离温度(35、40、45、50℃),分离压力(6、 8、10、12MPa),萃取时间(40、50、60、70 min)为变量, 进行正交试验,每次装料200 g,以萃取率和油质为考察指标, 探讨超临界CO2萃取技术萃取刺葡萄籽油的工艺参数。 正交试验极差分析表明,萃取压力和分离压力是影响萃 取的两个关键因素。最佳萃取组合为萃取压力30 MPa,萃取 温度50 ℃ ,分离温度35 ℃ ,分离压力10 MPa,萃取时间 60 min,在此条件下萃取率为13.3%。
葡萄籽
葡萄紫OPC软胶囊
葡萄籽与其它原料营养比较: 名称 粗蛋白 粗脂肪 葡萄籽 12 7.23 玉米 8.8 4.5 高梁 9 3 小麦 13 2 谷子 12 3.6
葡萄籽氨基酸含量(mg/kg): 天门 氨酸 1.24 异亮 氨酸 0.455 苏氨 酸 0.36 苯丙 氨酸 0.51 丝氨 酸 0.493 赖氨 酸 0.503 谷氨 酸 2.634 组氨 酸 0.364 甘氨 酸 1.115 精氨 酸 0.961 丙氨 酸 0.603 脯氨 酸 0.775 缬氨 酸 0.72 胱氨 酸 0.16 亮氨 酸 0.799 蛋氨 酸 0.04 酪氨 酸 0.799
(3). 超声波处理对原花青 素提取率的影响 选用了5 0% 、7 0% 、 90%、99% 四个功率档次, 以80目葡萄籽粉为原料和 70%乙醇为提取溶剂,在 20℃条件下研究超声波处 理对原花青素提取率的影 响。由图2可见,随着超声 波功率档次的增加,原花 青素提取率也增加,近似 成线性关系。
六. 发展前景
纵观国内,现已有一些天然产物研究开发公司购进了大 量先进设备生产葡萄籽提取物(GSE),如天津尖峰天然产 物研究开发公司等。但是从整体来看,国内厂家GSE产品中 还存在着一些问题,主要表现为功效成分低聚原花色素的含 量良莠不齐,其次是大多数产品醇溶性差,少数水溶性差 , 再加上有机溶剂残留等缺点,与国外同类产品相比还有一定 差距。 作为天然抗氧化剂,GSE在食品、药品、化妆品等领域 有着广泛的应用前景。随着科学工作者不断地深入研究,还 将会有更多的GSE产品出现在国内外市场上,满足不同人群 的不同需求。虽然目前GSE生产中还存在着一些问题,但是 随着高新技术的不断引入,这些问题终将迎刃而解,生产出 更加安全、更高品质的GSE产品。
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科类理工类编号(学号)2010312203本科生论文(设计)张之千指导教师:邓维萍职称讲师云南农业大学基信学院化学系 650201学院:基础与信息工程学院专业:应用化学年级: 2010级论文(设计)提交日期:2012年12月10日答辩日期:答辩委员会主任:云南农业大学2012年12 月葡萄籽提取物(GSE)有效成分的分析张之千云南农业大学基础与信息工程学院,昆明 650201摘要:葡萄籽提取物(GSE)的多酚化合物包括原花青素和单体多酚,因此,采用Folin-Ciocalteu法测定葡萄籽提取物总多酚的质量分数,高效液相色谱法测定单体多酚质量分数,以总多酚质量分数减去单体多酚质量分数,即可代表样品中原花青素的质量分数。
测定结果表明,自制GSE总多酚质量分数稍高于对照样品(天津尖峰天然产物研究开发公司产品),分别为9O.5 和88.3 ;没食子酸、儿茶素质量分数明显高于对照样品;而表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的质量分数稍低于对照样品。
自制样品与对照样品的原花青素质量分数无显著差异,分别为74.6 和75.8 。
关键词:GSE;Folin-Ciocalteu法;HPLC;多酚;原花青素Analysis of Active Compounds in Grape Seeds Extracts(GSE)Abstract:As the polyphenols of the Grape Seeds Extracts(GSE)contains proanthocyanidins andmononeric phenols,the difference between total amount of polyphenols(TAPP)and monomericphenols(TAMP) could represent the content of proanthocyanidins (CP) in GSE. In thismanuscript,TAPP of GSE was determined by the Folin-Ciocalteumethod,expressed as Gallic Acid Equivalents,and TAMP determined by HPLC.The concentration of TAPP in GSE samplewhich made by this study was 90.5 ,was higher 2.4 than that of the control(88.3 ,Jianfeng GSE,Tianjin).For the TAMP case,the content of gallic acid and catechin were higher,but the content of epicatechin and epicatechin gallate were lower than that of the contro1.ForCP,no significant difference between the tWO GSEs sample was detected,was 74.6 and75.8 ,respectivelyKey words:GSE;Folin-Ciocalteu;HPLC;polyphenols;proanthocyanidins .葡萄籽提取物(GSE)有效成分的分析1 前言葡萄籽提取物(Grape Seed Extract,GSE)是从酿酒葡萄的种子中提取出来的一种多酚物质混合物叫,其中的原花青素具有极强的抗氧化性 s-,是一种极强的体内活性功能因子。
但由于GSE产品成分复杂,对其原花青素质量分数,目前尚无统一的检测方法。
而GSE包含单体多酚和聚合多酚。
GSE中单体多酚的质量分数一般在10.O 左右,主要包括没食子酸、儿茶素、表儿茶素和表儿茶素没食子酯,这4种单体的质量分数占到了GSE中单体多酚总量的90.O%以上[2]。
聚合多酚则包括由以上单体聚合而成的原花青素。
原花青素是葡萄籽中最主要的多酚类物质,质量分数一般为75 ~85 [1]。
因此,可用测定GSE总多酚和以没食子酸、儿茶素、表儿茶素和表儿茶素及没食子酸酯质量分数之和的方法来间接测定GSE 中原花青素的质量分数。
因此,可用测定GSE总多酚和以没食子酸、儿茶素、表儿茶素和表儿茶素及没食子酸酯质量分数之和的方法来间接测定GSE中原花青素的质量分数。
作者以市售GES为对照,用改良的Folin-Cio—calteu法定量测定以没食子酸计的总多酚的质量分数,HPLC法定量测定包括没食子酸、儿茶素、表儿茶素及表儿茶素没子酸酯在内的单体多酚的总量,GSE中原花色素质量分数即为用改良的Folin-Ciocalteu法测定的总多酚质量分数与用HPLC法测定的单体多酚总量之的方法,测定了采用优化工艺制备、冷冻干燥、真空包装的GSE中原花青素的质量分数。
2 材料与方法2.1 主要仪器和试剂Shimadzu高效液相色谱仪,色谱柱C s(VP一0DS)(250 mm × 4。
6 mm ,5儿m),b(VP—ODS)Cl8保护柱;紫外分光光度计。
自制葡萄籽提取物干粉,对照葡萄籽提取物干粉(天津尖峰天然产物研究开发公司产品)。
没食子酸、(+)一儿茶素、(+)一表儿茶素及(一)一表儿茶素没食子酸酯标准样品均购自美国Sigma公司。
稳定液:取0。
25 g抗坏血酸置于1 L容量瓶中,加约500 mL水,混合,溶解抗坏血酸。
加入100mL乙腈,用水稀释至刻度。
标准工作液:精确称取15 mg没食子酸、15 mg儿茶素、20 mg表儿茶素、10 mg表儿茶素没食子酸酯,置于50 mL容量瓶中,加入40 mL稳定液。
超声波降解直至完全溶解。
用稳定液稀释至刻度,得到标准贮备液。
标准贮备液用稳定液稀释1:2,1:5,1:10,1:25,1:5O倍,得到标准工作液。
样品溶液和空白溶液:称取0.5 g GSE于50 mL容量瓶中。
加入约25 mL55~60℃的热水,超声溶解30 min。
冷却至室温,加5 mL 乙腈,用水稀释至刻度。
移液管吸取2mL,移至1O mL容量瓶中。
用稳定液稀释至刻度。
0.45 m膜过滤,待用。
除不加入提取物样品外,空白溶液的制备步骤与样品制备相同。
2.2 实验方法2.2.1 Folin-Ciocalteu法测定GSE中的总多酚称取0.500 g没食子酸,用水溶解,定容至100 mL,以此母液配制质量浓度为0,50,100,150,250,500mg/L的溶液。
取6支容量瓶,分别吸取上述溶液1mL,各加水20 mL,福林一肖卡试剂5 mL,混匀,30 S,8 min内各加入2O 碳酸钠溶液15 mL,混合后用水定容。
上述溶液在2O℃下放置2 h,然后用分光光度计测定各溶液在765 nm下吸光值[6]。
处理数据,建立标准曲线。
称取0。
2 g样品,置于5O mL容量瓶中,加入约25 mL蒸馏水,超声溶解5 min,加水稀释至刻度,Folin—Ciocalteu法测定吸光度,并计算多酚纯度。
2.2.2 HPLC法测定GSE中的4种单体色谱条件:UV检测器波长280 nm,流速1 mL/min,上样量1O L,柱温3O℃。
流动相:A一2 乙酸、9 乙腈水溶液,B一8O 乙腈水溶液;梯度模式:0 min一10。
0 min-~25.0 min--~35。
0 min--~40.0 min--~60.0min,溶液A相应浓度梯度为100 一1O0 一68一68 一1O0 一1O0 。
注入空白溶液及标准样品溶液,根据数据建立没食子酸、儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯的线性曲线。
注入样品溶液,并根据各自的线性曲线,用下式进行计算。
单体质量分数(9,5)一×1O0式中:c为通过线性回归分析测定的单体质量浓度(mg/mL);、,r为样品制备液的终体积(mL);d为样品的稀释倍数;7.U为样品的质量(mg)。
3 结果与讨论3.1 GSE总多酚的质量分数标准曲线为一714。
690x(其中Y为浓度,X为吸光度,R 一0.995)。
经Folin-Ciocalteu法测定,自制葡萄籽提取物干粉中总多酚质量分数为9O.5 (以没食子酸计),对照葡萄籽提取物干粉为88.3 9,6(以没食子酸计)。
3.2 GSE中的4种单体及原花青素的质量分数参考INA 提供的出峰顺序的相关信息及空白实验结果,可判断图2中保留时间为3.296min的第一个锐锋为配制样品的稳定剂中的成分(抗坏血酸),后面4个锐锋依次为没食子酸、儿茶素、表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯。
它们的保留时间依次为4。
786,12.755,21.576,27。
112 min。
以浓度c对峰面积A进行回归,所得4种单体的标准曲线见表1。
4种单体的进样量分别在0.06~1.4/.tg、0.06~ 1.3 /.tg、0.07~ 1.7 /.tg、0.04~ 0.8g范围内线性关系良好。
4 结论自制GSE中总多酚质量分数为90.5 ,稍高于对照的88.3 。
没食子酸质量分数是对照的200多倍,儿茶素质量分数明显高于对照,而表儿茶素和表儿茶素没食子酸酯的质量分数稍低于对照;原花青素的质量分数,自制GSE与对照的原花青素质量分数相差不大,分别为74.6 和75.8 。
5 参考文献:表2 两种葡萄籽提取物各成分质量分数Tab.2 Composition content of these two grape seed extracts%[13邵云东,胡光祥,於洪建,等.葡萄籽的质量评价[J].中草药,2001,32(11):1O44—1046.[2]冯建光.葡萄籽提取物的质量评定[J].中国食品添加剂,2004,2:49—51.[3]Negro C,Tommasi L,Miceli A.Phenolic compounds and antioxidant activity from red grape marc extracts[J].BioresourceTechnology,2003,87(1):41—44.[4]凌智群,张晓辉,谢笔钧,等.原花青素的药理学研究进展[J].中国药理学通报,2002,18(1):9—12.[5]Pierre L Teissedre,Edwin N Frankel,Andrew L Waterhouse,et a1.Inhibition of in vitro human LDL oxidation by pheno1.ic antioxidants from grapes and wines[J].J Sci Food Agric,1996,70:55—61.[6]王华.葡萄与葡萄酒实验室技术操作规范[M].西安:西安地图出版社,1999.致谢:经过一个学期的努力,终于完成了这一论文。