核酸扩增检测用试剂
HER2基因扩增检测试剂盒说明书
HER2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）说明书【产品名称】通用名称：HER2基因扩增检测试剂盒（荧光原位杂交法）英文名称：Zyto Light SPEC HER2/CEN17 Dual Color Probe Kit【包装规格】货号Z-2020-5：5测试/盒货号Z-2020-20：20测试/盒【预期用途】本试剂盒用于检测经10%中性缓冲福尔马林固定、石蜡包埋的乳腺癌组织切片中HER2基因的扩增状态。
本试剂盒尤其适用于免疫组织化学HER2（ERBB2）蛋白检测结果为不确定的标本的检测。
HER2基因扩增是确定靶向治疗适应症的重要指标，基于本试剂盒未与具体药物联合进行临床评价，临床医生应在本检测结果基础上结合患者病情、药物适应症、治疗反应及其他检测结果对患者的个体化治疗进行综合判断。
【检验原理】荧光原位杂交技术（Fluorescent In Situ Hybridization, FISH）是一种以荧光标记的核酸探针与组织中的特异核酸分子进行杂交的技术，其基本原理是利用荧光标记的核酸探针在变性后根据碱基互补配对原则准确识别待检样本中的靶核酸序列，经退火复性后形成靶DNA与核酸探针杂交体，通过荧光检测系统（荧光显微镜）直接观察和分析染色体或基因的数量或结构的状态。
本试剂盒内HER2/CEN17双色探针液（以下简称为探针）设计序列来源图见图1和图2。
将样本经福尔马林固定、石蜡包埋后制成4±1μm厚度的切片，固定于粘性玻片上。
切片经预处理后，将HER2/CEN 17双色探针液与待测样本DNA变性、杂交。
杂交完成后，通过一系列洗涤缓冲液洗去未结合探针，并用DAPI（4，6-二咪基-2-联苯基吲哚）对样本中的细胞核复染成蓝色。
DAPI是一种蓝色荧光素，为DNA特异性染色剂。
探针杂交信号可通过配置相应滤光片的荧光显微镜进行观察。
在显微镜下观察细胞核内的荧光信号，对HER2基因（绿色荧光染料ZyGreen：激发波503nm，发射波528nm，同FITC）和CEN17着丝粒（橙红色荧光染料ZyOrange：激发波546nm，发射波572nm，同罗丹明）信号进行计数，计算比值（HER2/CEN17），从而判断HER2基因状态。
体外诊断试剂分类和常见产品技术原理及应用
体外诊断试剂的分类（三）
按照技术方法分： 1.比色法（颜色反应）；2.分光光度法； 3.凝集法；4.散射法（沉淀反应）； 5.透射比浊法（沉淀反应）；
6.速率法、终点法（产物或底物量）；
7.标记技术；8.生物亲和；9.免疫技术； 10.发光技术；11.荧光技术；12. 放射技术；
13.形态分析； 14.流式细胞；15.电泳技术；
普通生化类试剂（清洁环境）
★原理：与普通生化试剂（十万级要求）类相同。 ★产品涉及：无机离子检测、血气电解质类、血液分析仪用试剂类等试剂。
★ 工艺要求：除生产可在清洁环境中进行操作外，生产工艺和关键控制点与普通生化试剂（十万级要求）类相同。
（第十四类） 干化学类试剂
干化学试剂（条、卡或盒）：干化学尿液分析试纸条； 尿微量白蛋白（UALB）测试卡
常见的体外诊断产品技术原理及应用
在实际应用中，单一技术往往不能满足检测需要，因此，诊断试剂会联合使用多种技术。常见的体外诊断产品：
1.生化分析仪、生化试剂；
2.酶标仪、酶免试剂； 3.免疫化学发光仪及试剂；
4.胶体金（乳胶、荧光）免疫层析试剂；
5.血细胞分析仪、细胞检测试剂；
6.尿液分析仪、尿液检测试剂（试纸）；
注：*号的品种，预期用途为血源筛查时按药品受理和审评，为临床诊断时，按第三类医疗器械进行管理。
体外诊断试剂的分类（二）
二、 按医疗器械受理和审评的体外诊断试剂 ：
1、临床血液学和体液学检验试剂
2、临床化学检验试剂 3、临床免疫学检验试剂 。 4、微生物学检验试剂 5、组织细胞学检验试剂 6、变态反应、自身免疫诊断检验试剂（盒） 7、遗传性疾病检验试剂 8、分子生物学检验试剂 9、其它检验试剂（盒）
核酸检测试剂盒原理
核酸检测试剂盒原理首先是核酸提取试剂。
核酸通常嵌入在细胞或病毒颗粒中，因此需要使用核酸提取试剂将核酸从样本中提取出来。
核酸提取试剂通常包含一个蛋白酶，它能够分解蛋白质，使得核酸从蛋白质的包裹中释放出来。
此外，核酸提取试剂还包含一些溶剂，如盐和酒精，用于使细胞或病毒颗粒破裂和沉淀，从而获得含有核酸的上清液。
接下来是核酸扩增试剂。
核酸检测通常需要扩增核酸的数量，以达到检测的灵敏度。
核酸扩增试剂通常包含一个DNA聚合酶，它能够在一定的温度下，将核酸模板作为引物，合成新的DNA链。
核酸扩增试剂还包含了核酸模板的引物和适当的缓冲液，以调节反应的条件。
在核酸扩增的过程中，还需要考虑PCR（聚合酶链式反应）或RT-PCR （逆转录聚合酶链式反应）的选择。
PCR是一种将DNA扩增到指数级别的技术，它利用DNA聚合酶在高温下对DNA模板进行连续扩增。
而RT-PCR则是先将RNA逆转录成DNA，再进行扩增。
RT-PCR广泛应用于病毒检测和基因表达分析等领域。
最后是核酸标记试剂。
核酸检测通常需要通过标记物来检测核酸的存在和数量。
核酸标记试剂通常包含了一种标记物，如荧光染料或放射性同位素。
对于荧光染料标记，核酸标记试剂中通常含有可与核酸结合的一对引物，其中一对引物上带有荧光染料，另一对引物标记有Quencher。
引物与核酸结合后，荧光染料和Quencher之间的距离很近，因此无荧光信号。
在核酸扩增的过程中，当核酸扩增到引物位点时，荧光染料和Quencher被分离，发出荧光信号。
对于放射性同位素标记，核酸标记试剂中通常含有一种放射性同位素，如32P或35S，它能够与核酸结合。
标记的核酸通过放射性示踪仪来检测。
最后，核酸检测的结果可以通过聚合酶链式反应仪（PCR仪）或放射性示踪仪来记录和测量。
PCR仪可以记录PCR反应的温度变化和荧光信号，从而得到核酸的扩增曲线和定量结果。
放射性示踪仪可以测量核酸标记物的辐射量，从而得到核酸的数量。
一、诺华单人份核酸检测试剂参数
一、诺华单人份核酸检测试剂参数1.适用于核酸检测设备，试剂原理：转录介导扩增技术。
★2.试剂灵敏度：常规工作模式下： HIV-1：21.2 IU/ml、HCV: 5.4 IU/ml、HBV: 3.4 IU/ml★3.检测形式：检测系统能够在同一反应管内同时进行HBV DNA/HCV RNA/HIV-1 RNA三项核酸检测4.内置的过程控制：核酸检测试剂盒包含有内对照，能够监控核酸提取、扩增和检测全过程5.灵活的试管兼容性：检测试剂适合用于标本类型为血清以及EDTA、ACD、CPD、CPDA抗凝的血浆★6.全封闭系统：核酸提取、扩增、检测在同一密闭系统中进行，核酸纯化产物的转移无需人工干预7.扩增系统：扩增反应体系由仪器自动加样，检测试剂有防污染设计，降低污染发生★8.应急标本检测：检测系统能满足随时插入应急标本进行检测的需求。
9．检测模式：适用于单检或混样检测，对血站现有采供血流程应无影响。
★10.应急模式：单采血小板和应急标本必须实施单检模式，单采血小板和应急标本的判定由血液中心自行指定。
11.其他检测性能：针对HIV-1，具有两个或两个以上的检测区域。
二、BECKMAN COULTER丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（乳酸脱氢氨法）参数一、适用Beckman Coulter AU400分析仪二、试剂用途：定量测定人血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）三、技术参数1．试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。
2．储藏和稳定性：在2-8℃不开封储藏时，试剂可保持稳定到声明的失效期；开封后，在分析仪上储藏时，可保持稳定30天3.参与反应成分的最终浓度：Tris 缓冲液，pH：7.15 (37°C) 100 mmol/LL- 丙氨酸 500 mmol/L2-氧戊二酸盐 12 mmol/LLDH ≥ 1.8 kU/LNADH 0.20 mmol/L4、线性：在3-500U/L(0.05-8.33ukat/L)的浓度范围内，实验结果呈线性。
核酸类检测试剂盒
临床核酸类(DNA/RNA)检测试剂盒应用及推广乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒（HCV）、人类免疫缺陷综合症病毒(HIV)是对构成对人类构成严重威胁的主要病毒，乙肝是由HBV引起的，全球约有3.5亿HBV携带者，占总人口5%，其中亚洲和非洲所占比例较重。
我国是病毒性肝炎的高发区，平均年发病率为120-140/10万。
中国有1.2亿乙肝携带者，占全球的1/3，其中约1/4将发展为慢性肝病，部分患者可发展为肝硬化，甚至演变为肝癌。
丙型肝炎是由HCV引起的，HCV慢性感染可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)，据WHO统计，全球HCV感染率约为3%，估计全球有1.7亿人感染HCV，是HBV携带者人数的50%，HIV感染者的5倍。
HCV携带者在我国较HBV（乙肝）携带者为少，在健康人群中抗HCV阳性率为0.7%-3.1%。
艾滋病是由HIV引起的,截止2004年底，全球约有3940万人感染HIV/艾滋病，其中95%生活在发展中国家，到2010年前，世界126个中、低收入国家还将有4500万人感染艾滋病病毒，其中40%在亚洲和太平洋地区。
2003年底，我国有48%的县报告了HIV/AIDS，现存HIV/AIDS约84万，全人群感染率为0.07%。
由于HIV、HCV、HBV有相似的传播途径，因此，共感染情况比较常见。
相关的临床或实验室诊断方法：目前，临床实验室诊断方法主要是酶联免疫检测（EIA）。
随着第三代乃至第四代EIA试剂的出现，显著增加了筛查和检测的灵敏度，在很大程度上减少了血源传播病毒性疾病发生的概率。
例如在美国，HCV的感染率已从80年代的每年大约180000例，减少到现在的每年大约30000例。
新感染的减少主要是由于在1990年引入了丙型肝炎病毒输血EIA筛查以及此后几年EIA试剂的更新换代。
目前在美国，存在被当前的血清学检测方法所遗漏的HCV阳性供体比例大约为1:103000，相应的比例在德国为1:200000，在英国为1:250000。
HER2基因扩增检测(dPCR法)的操作规范与质控标准
HER2基因扩增检测（dPCR法）的操作规范与质控标准一、检测实验室总体要求开展HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）检测HER2基因扩增的实验室应符合中国国家卫生健康委员会《临床基因扩增检验实验室工作规范》，原则上dPCR临床检测实验室应分为3个隔开的工作区域：①试剂贮存和准备区，②标本制备区，③dPCR扩增区和扩增产物分析区。
每一区域都应有专用的仪器设备。
与上述特定实验区有关的各个房间及设备物品必须有明确的标识，以避免不同工作区内的设备物品，如加样器、试剂等的移出或不同的工作区间发生混淆。
进入各个工作区必须按单一方向进行，即从试剂贮存和准备区到标本制备区再到dPCR扩增区和扩增产物分析区。
实验室各区应制定相应标准操作规程和严格的质控文件。
由省级临床基因扩增实验室验收合格的实验室方可进行试验。
二、检测流程及操作规范HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）适用于HER2基因扩增的检测，其检测过程分为样本采集、核酸纯化及定量、dPCR检测和出具报告4个阶段。
用户需根据产品使用说明书针对整个操作流程形成标准操作流程（standard operation procedure，SOP）并对SOP 进行验证，验证后对操作人员进行培训后方可开展检测。
1、样本采集、保存及转运甲醛溶液固定、石蜡包埋组织样本要求肿瘤含量不低于10%，需采用4%甲醛溶液固定，严格按照《临床技术操作规范病理学分册》进行石蜡包埋。
每例样本切5~10 μm的切片10张，其中1张切片用于确定肿瘤组织样本中肿瘤细胞比例，可采用临床常用方法；余下的1~9张切片用于提取样本DNA。
切片及刮取肿瘤组织过程中，要避免不同病例组织间的交叉污染。
外周血样本由于常规采血管中cfDNA的半衰期仅2 h，需使用PAXgene Blood ccfDNA Tube（德国Qiagen公司）以保持cfDNA的稳定。
按使用说明书采集血样，采集到血样之后立即轻轻翻转采血管混合8~10次。
分子生物学实验报告试剂
一、实验背景分子生物学是一门研究生物大分子如核酸、蛋白质等结构与功能的科学。
在分子生物学实验中，试剂的选择和使用对实验结果的准确性至关重要。
本实验报告将详细介绍分子生物学实验中常用的试剂及其作用。
二、实验试剂1. 核酸提取试剂（1）酚/氯仿：用于从细胞中提取DNA和RNA，具有强烈的蛋白变性作用。
（2）异丙醇：用于DNA的沉淀，降低DNA的溶解度。
（3）无水乙醇：用于RNA的沉淀，降低RNA的溶解度。
（4）RNA酶抑制剂：防止RNA降解，保证实验结果的准确性。
2. DNA提取试剂（1）Tris-HCl缓冲液：用于DNA的提取，调节pH值，保持酶的活性。
（2）EDTA：抑制金属离子与DNA结合，防止DNA降解。
（3）SDS（十二烷基硫酸钠）：用于蛋白质的变性，使蛋白质与DNA分离。
（4）蛋白酶K：降解蛋白质，去除蛋白质杂质。
3. DNA纯化试剂（1）琼脂糖凝胶：用于DNA的分离和纯化。
（2）DNA纯化试剂盒：用于DNA的纯化和回收。
4. DNA扩增试剂（1）PCR反应缓冲液：提供反应所需的pH值、盐浓度等。
（2）dNTPs（脱氧核苷三磷酸）：作为PCR反应的原料。
（3）引物：用于PCR反应的特异性扩增。
（4）Taq酶：DNA聚合酶，负责DNA的合成。
5. DNA检测试剂（1）溴化乙锭（EB）：用于DNA的染色，便于在紫外光下观察。
（2）琼脂糖凝胶电泳缓冲液：用于DNA的电泳。
（3）DNA标记物：用于DNA的定量分析。
6. 蛋白质提取试剂（1）裂解缓冲液：用于蛋白质的提取，保证蛋白质的完整性。
（2）蛋白酶抑制剂：防止蛋白质降解。
（3）SDS：使蛋白质变性，便于与核酸分离。
7. 蛋白质纯化试剂（1）柱层析：用于蛋白质的纯化。
（2）凝胶过滤：用于蛋白质的纯化。
8. 蛋白质检测试剂（1）考马斯亮蓝G-250：用于蛋白质的定量分析。
（2）BCA法：用于蛋白质的定量分析。
（3）SDS-PAGE凝胶：用于蛋白质的分离和纯化。
结核杆菌TBPCR荧光扩增检测说明书
结核杆菌TBPCR荧光扩增检测说明书【正文】结核分枝杆菌（TB）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒说明书 Operation Introduction for Mycobacterium tuberculosis(TB) PCR Fluorescence Diagnostic Kit 前言本试剂盒采用一对PCR引物和一个荧光双标记的探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，从而将PCR技术和荧光检测技术结合起来，实现了对TB 核酸的自动化检测。
检测灵敏度为10个TB菌/毫升。
试剂盒在PCR循环结束后无需开盖。
试剂盒中采用了dUTP-UNG酶防污染系统。
本品可用于可疑结核病患者经处理的痰液标本结核分枝杆菌核酸的定性检测，可用于结核病的辅助诊断。
试剂盒组成※ 贮存条件及有效期本试剂盒贮存于-20℃的条件下有效期为一年（请于有效期内使用）。
自备试剂 4％ NaOH、灭菌生理盐水样本采集、存放及运输1．采集：以清晨第一口痰为宜。
先用清水漱口，嘱患者用力咳出深部的痰于无菌样本保存管，密封，即可送检。
2．存放：待测样本在2-8℃保存不应超过24小时；-20℃保存不超过三个月；-70℃以下长期保存。
应避免反复冻融。
3．运输：采用冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。
适用仪器 1．BIO-RAD iCycler荧光PCR检测仪、PE Gene Amp 7700荧光PCR检测仪 2．Roche LightCycler荧光PCR检测仪 3．其它荧光PCR检测仪，如PE-5700、PE-7000、基因公司Rotor-Gene、MJ公司Opticon Monitor、大和Line-Gene荧光定量PCR检测仪等使用方法1．样本处理（样本处理区）1.1. 首先对痰液样本进行目测，若样本中唾液占绝大部分，则需重新采集样本。
1.2. 目测合格后，在样本中加入2～3倍体积4%的NaOH溶液，置于摇床上，在150rpm、37℃条件下处理30min或常温下1Hr，使其充分液化（无明显固状物并且吸出时无拖丝现象即为液化完全；若液化不完全，可适当再加入少量4%的NaOH溶液直至液化完全）。
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YY/T 1182-2010核酸扩增检测用试剂（盒）1范围本标准规定了核酸扩增检测试剂（盒）【以下简称“试剂（盒）”】的术语和定义、命名和分类、技术要求、试验方法、标识、标签和说明书、包装、运输和贮存等。
本标准适用于核酸扩增检测试剂（盒）的质量控制。
核酸扩增检测试剂（盒）应包括核酸提取、核酸扩增及产物分析试剂组份，如核酸扩增检测试剂（盒）内不含有核酸提取组份，应由生产企业说明或指定提取试剂（盒）。
本标准不适用于基因分型、基因芯片和病毒基因分型/突变检测用试剂（盒）及血源筛查的试剂（盒）。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 21415-2008 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性3术语和定义以下术语和定义适用于本文件。
3.1 聚合酶链反应polymerase chain reaction,PCR聚合酶链反应或多聚酶链反应是一种对特定的DNA或RNA片段在体外进行快速扩增的方法，由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成。
3.2 PCR杂交（膜上、板上）PCR hybridization具有一定同源序列的两条核酸单链（DNA或RNA）可以通过氢键的方式，按碱基互补配对原则相结合，探针结合于特定核酸序列或PCR产物的杂交过程可以在液相中进行，也可以将其中一个固定在固相载体上进行。
3.3 PCR 电泳 PCR electrophoresis根据PCR产物分子质量和所带电荷的不同在电场中进行分离的技术。
3.4实时荧光PCR real-time polymerase chain reaction,PCR在PCR过程中利用荧光染料释放的荧光定量的变化直接反映出PCR扩增产物量的变化，荧光信号变量与扩增产物变量成正比，并通过对荧光的采集和分析以达到对原始模板量进行分析的PCR。
注：在每个循环中检测扩增产物是否可被检测。
3.5测量系统的线性 linearity of a measuring system给出的测量结果与样品中被测量的值直接成比例的能力。
注1：对与体外诊断医疗器械，线性相关于测量结果在一给定测量范围经校正或线性化以后的测量示值。
注2：线性通过测量包含被测量已知配方或其间相对关系（不必绝对知道）的样本来评估。
当测量结果相对被测量绝对或相对数值作图时，所画曲线对直线的符合程度及线性度的量度。
3.6样本线性 linearity of series diluted samples对高浓度样本进行系列稀释，得到的检测浓度对数值与稀释比例之间相关。
3.7分析特异性 analytical specificity测量程序只测量被测量的能力。
3.8测量精密度 precision of measurement在规定条件下，相互独立的测量结果间的一致程度。
注1：测量精密度不能用于被测量有关的数字值表示，在指定目的下只能以“足够”或“不足”进行描述。
注2：精密度的程度通常与精密度相反的测量不精密度统计量表示，如标准差和变异系数。
注3：给定测量程序的“精密度”可以根据特定的精密度条件进行分类。
“重复性”与基本不变的条件有关，常称为“序列内精密度”或“批内精密度”。
“重现性”与条件改变有关，如：时间、不同实验室、操作者和测量系统（包括不同校准和试剂批号）。
3.9计量学溯源性 metrological traceability通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。
注1：通过校准传递方案确定的（参考）测量程序实现每一步比较。
注2：溯源性有几种类型。
本标准使用术语“计量学溯源性”。
3.10检测限 detection limit,limit of detection样品中以一定概率可被申明与零有差异的被测量的最低值。
注1:也被描述为“最低检测限”（minimum detectable concentration）(或剂量或值)。
注2：有时被不正确地指作分析灵敏度。
注3：本标准中的最低检测限为区别于零的不低于95%可信区间的最低浓度。
3.11定量限 limit of quantitation给定分析程序能定量检测分析物的最小浓度或量。
3.12阈值循环数Ct（Cp）cycle threshold,crossing point实时监测扩增过程中，反应管内的荧光信号到达指数扩增时经历的循环周期数。
主要的计算方式是以扩增过程前3到15个循环的荧光值的10倍标准差为阈值，当荧光值超过阈值时的循环数则为阈值循环数（Ct）。
3.13基因型 genotype一个有机体的遗传组成，即明确界定具体等位基因位点的基因组。
3.14内标internal control在同一反应管中与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子，其目的是鉴别仪器故障、试剂因素、聚合酶活性因素或样本中存在抑制物等造成的结果不理想的原因。
4命名和分类4.1命名***核酸（DNA或RNA）扩增检测试剂（盒）(方法学)。
4.2分类可按如下方式分类：a)根据核酸扩增检测分析采用的方法学原理分为：实时荧光PCR试剂（盒）、RT-PCR试剂（盒）、PCR杂交检测试剂（盒）、PCR-电泳法检测试剂（盒）等。
b)根据对试验结果的判定可分为：定量和定性。
5技术要求5.1外观外观应满足以下条件：a)试剂（盒）应符合生产企业规定的外观要求；b)试剂（盒）应组份完全，包装外观清洁、无泄漏、无破损；标志、标签字迹清楚。
5.2溯源性生产企业应根据GB/T 21415-2008及有关规定提供所用核酸标准品的来源、溯源的赋值过程和相应要求，以及测量不确定度等内容。
5.3 测量系统的线性5.3.1样本线性线性相关系数︱r︱≧0.980。
5.3.2试剂（盒）系列标准品线性试剂（盒）标准品应不少于4个浓度，宜包含线性范围上限和下限，线性相关系数︱r︱≧0.980。
5.4准确度5.4.1定性试剂对阳性参考品进行测定，检测结果应为阳性。
5.4.2定量试剂准确度应符合如下要求之一：a)检测国家标准品（或参考品）/国际标准品（或参考品），绝对偏差不超过±0.5个对数数量级；b)回收试验：回收率在85%~115%范围内。
5.5分析特异性分析特异性应满足以下要求：a)检测一定数量的不含被测物的样本，结果应为阴性；b)检测可能引起非特异反应的样本，如与被测物种属相近、感染部位相同或感染症状相似的其他样本，结果应为阴性。
5.6亚型检测能力检测生产企业规定试剂检测范围内国内常见亚型，应能检出。
注：只有当分析物具有不同亚型时应满足此项要求。
5.7 精密度5.7.1 定性试剂批内精密度应符合Ct值的变异系数（CV,%）≦5%5.7.2定量试剂批内精密度应符合检测浓度对数值的变异系数（CV,%）≦5%。
5.8 检测限/定量限5.8.1定性试剂检测限应符合生产企业声称的值。
5.8.2定量试剂定量限应符合生产企业声称的值。
适用时，检测限应符合生产企业声称的值。
5.9 干扰物质对血液样本，检测含有生产企业规定浓度的干扰物质如血红素及其代谢产物、脂血等样本，及含过量EDTA抗凝剂的样本，应符合生产企业规定的要求。
5.10稳定性可选用以下方法进行验证：a)效期稳定性：生产企业应规定产品的有效期。
取到效期后的样品检测测量线性、准确度、分析特异性、亚型检测能力、精密度、检测限/定量限、干扰物质，应分别符合5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9的要求。
b)热稳定性试验：测量线性、准确度、分析特异性、亚型检测能力、精密度、检测限/定量限、干扰物质，应分别符合5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9的要求。
注1：热稳定性不能用于推导产品有效期，除非是采用基于大量的稳定性研究数据建立的推导公式。
注2：根据产品特性可选择a),b)方法的任意组合，但所选用方法宜能验证产品的稳定性，以保证有效期内产品性能符合标准要求。
6试验方法6.1外观在自然光下目视检查外观，结果应符合5.1的要求。
6.2溯源性生产企业提供的溯源性资料应符合5.2的要求。
6.3测量系统的线性6.3.1样本线性在生产企业规定的线性范围内，取接近线性范围上限的高值样本按一定比例（例：5倍或10倍）稀释为至少5种浓度，其中低值浓度样本需接近线性范围的下限。
按试剂（盒）说明书进行操作，将每一浓度样本重复检测3孔，计算每一浓度的对数值和Ct均值，以浓度的对数值为Y，Ct均值为X,进行线性拟合，计算其线性相关系数r,结果应符合5.3.1的要求。
6.3.2试剂（盒）系列标准品线性按试剂（盒）说明书进行操作，试剂（盒）中每一标准品重复检测3孔，计算每一标准品的标示浓度的对数值与Ct值的均值，以浓度的对数值为Y, Ct均值为X,进行线性拟合，计算其线性相关系数r，结果应符合5.3.2的要求。
6.4准确度6.4.1定性试剂对阳性参考品进行测定，检测结果应符合5.4.1的要求。
6.4.2定量试剂建议按如下优先顺序，采用下列方法之一测试定量试剂（盒）的准确度，应符合5.4.2的要求。
a)绝对偏差用试剂盒对参考物质或有证参考物质（CRM）和相应的参考测量程序按照符合GB/T 21415-2008规定的溯源顺序进行测试，重复测定3次，取测试结果均值（M）,按公式（1）计算绝对偏差（B）,结果应符合5.4.2a)的要求。
或用有参考方法定值的高、中、低3个浓度的样本（可参照EP6-A的要求适当添加被测物，以获得高浓度的样品）对试剂（盒）进行测试，每个浓度样品重复测定3次，分别取测试结果均值，按公式（1）计算绝对偏差，结果应符合5.4.2a)的要求。
B=M-T (1)式中：B-绝对偏差；M-测试结果均值；T-参考物质标示值，或各浓度人血清定值。
b)回收试验在样品中加入一定体积标准溶液（标准溶液体积与样本体积比应不大于1:20，或其体积比不会产生基质的变化，加入标准溶液后样品总浓度必须在试剂（盒）测定线性范围内），重复测定3次，取平均值，按公式（2）计算回收率，结果应符合5.4.2b)的要求。
R=c×(V0+V)-c0×V0×100% (2)V×c s式中：R-回收率；V-加入标准溶液的体积；V0-样品的体积c-样品加入标准溶液后的测定浓度c0-样品的测定浓度c s-标准溶液的浓度6.5分析特异性检测可能引起非特异反应的样本，如与被测物种属相近、感染部位相同或感染症状相似的其他样本，结果应符合5.5的要求。
6.6亚型检测能力检测生产企业规定实际检测范围内国内常见亚型样本，样本个数应至少一个亚型有一个样本，检测结果应符合5.6的要求。