葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状
葡萄白藜芦醇的提取研究
葡萄白藜芦醇的提取研究摘要:本文以葡萄白藜芦醇为研究对象,选择乙醇溶液作为提取溶剂,通过单因素实验和正交实验结果分析得知,葡萄白藜芦醇的最佳提取工艺为:料液比为1:20,提取时间为5h,提取温度为75℃,提取溶剂浓度为80%,并且提取时间和料液比对于提取白藜芦醇效率影响最大,在温度分析中,确定最佳的提取温度为75℃。
关键词:白藜芦醇提取单因素正交实验1 仪器与试剂1.1 仪器电子天平(JA5003):上海精称天平;PHS-3C行精密PH计:上海雷磁仪器厂;SHB-3循环水多用真空泵:郑州杜甫仪器厂;UV-754型紫外-可见分光光度计:上海第三分析仪器厂。
1.2 试剂葡萄:葡萄新鲜果实,由超市购买。
无水乙醇、甲醇、丙酮,均为分析纯,去离子水,由实验室超纯水设备纯化提供。
2 实验部分2.1 原料预处理称取200g左右经过筛选去掉细小枝干、小叶等的鲜果实,分装在4～6个培养皿中,铺开,尽量避免重叠。
然后置于真空冷冻干燥机中冻干水分,经48小时后取出,用万能粉碎机粉碎,过100目的筛子,装入密封袋中,密封、避光、4℃下冷藏。
2.2 提取方法回流提取的单因素实验:各取1g葡萄粉末,在其他条件相同的情况下,分别规定提取溶剂(乙醇)、PH、料液比、温度、时间,两次提取的时间比,以提取液稀释后对应的吸光值为指标,逐个考察各提取条件对提取效果的影响,正交试验水平表如表1所示。
3 实验结果与分析3.1 提取溶剂的选择如图1中所示,1～5分别代表乙醇提取溶剂所占的质量分数,白藜芦醇是一种多酚类化合物,极性强,故易溶于极性溶剂。
（如图1）由图1可见,4号提取吸收剂,即80%的乙醇提取效果最好,故提取溶剂选择80%乙醇溶液。
3.2 提取料液比的选择合适的料液比不仅影响到产品的得率,而且对生产成本、仪器要求都有一定的影响,选择适合浓度的料液比能提高回流提取的效率。
通过实验可知,提取的最佳料液比为1:20。
3.3 回流提取温度的选择回流提取温度对提取效果的影响可以看出,温度在75℃时效果最好,低温时不能使白藜芦醇充分溶解出来,而温度过高则会影响到它的稳定性,反而会降低提取得率。
葡萄中白藜芦醇的含量及功能研究课稿
成绩葡萄中白藜芦醇的含量及功能研究摘要：白藜芦醇在人体中有降血脂、防血栓、抗癌、抗氧化、抗菌和预防老年痴呆等多种生理功能。
在植物中也是一种抗毒素。
本文总结了葡萄不同品种及部位白藜芦醇的含量差异，并对影响白藜芦醇含量的影响因素进行了总结。
关键词：葡萄白藜芦醇生理功能含量差异影响因素白藜芦醇化学名称为芪三酚（Resveratrol，3,4',5-三羟基二苯乙烯），是植物界分布较广的羟基二苯乙烯芪类化合物，属于二苯乙烯衍生物。
白藜芦醇有顺式和反式两种异构体。
自然界中的白藜芦醇以游离态和化合态两种形式存在，化合态以糖苷和低聚物的形式存在，故白藜芦醇一般有4种存在形式：顺、反式白藜芦醇和顺、反式白藜芦醇糖苷。
1 Res对人类疾病的药理作用流行病学调查发现，长期适量饮用红葡萄酒能够降低心血管疾病的发病率和死亡率，其中的Res是主要的活性物质，并发挥了重要作用。
近年来，国内外越来越多的研究表明，Res 具有多种生物学效用。
Res能与人体内雌性激素受体结合，调节血液中胆固醇水平，有效减少人罹患心血管病的危险[2]；Res还能抑制低密度脂蛋白过氧化和血小板凝集，调节脂类蛋白代谢水平，降低人体血脂，具有良好预防动脉粥样硬化和冠心病效果[3-4]。
Res还具有强抗氧化和抗自由基功能，1.3 μg/mL的白藜芦醇能明显抑制大鼠红细胞的自氧化溶血和由H2O2引起的氧化溶血，并对小鼠心、肝、脑、肾的体内外过氧化脂质的产生有明显抑制作用[6]。
Res具有抗突变以及抗癌作用，能抑制环加氧酶和过氧化氢酶的活性，在癌细胞的起始、增殖、发展3个主要阶段均有抑制乃至逆转作用[7]；Res可使老鼠皮肤癌细胞最多可减少98%[8]，能诱导人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60的分化[9]，被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌药物。
Res具有明显的辐射保护作用[10]，并影响骨骼代谢[11]等。
Res衍生物piceatannol具有和Res相同的抗癌[12]、免疫调节、抗菌、抗脂质氧化和抗癌细胞增殖的活性[13]。
白藜芦醇的研究现状及应用前景
Ｉ＝ ｔａ ｓ Ｒｅ ｔｍ ｔ ｔ Ｈ． ｎ — ｓｅ ｒ ｒ ｏｌ
处理后 的样品容易带水 。薄层荧光扫描法的检测灵敏度较 低， 适用范 围较 窄。紫 外分光法操作简单 、 成本低 ， 但检测
Ｉ Ｇｌ ｒｎ — ｃ ｌ４ ２ ｃｔａ ｓＰｅ ｅｄ — ５
２３白藜芦醇的检 测方法 ．
醇 以及顺式 白藜芦醇糖苷 、 反式 白藜 芦醇糖苷 。后 ２种形
式在肠道 中糖 苷酶 的作用下 可释 放 出 Ｒ ｓ反式异构体 的 ｅ， 生 理活 性 强于 顺 式 异 构 体 ， 自然 界 中主 要 以 反式 存 在
常用 的检测 Ｒ ｓ ｅ 的方法有 高效液相色谱法 、 一 气 质联
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白藜芦醇 的研究现状及应 用前景
李延华 王伟君 张兰威 马 ， ， 薇 陈丽安 ，
（。 １通化师 范学院 制药与食 品科 学系， 吉林 通化 １４ ０ ；。 ３ ０２ ２ 哈尔滨工业大学 食品科 学学院，
黑龙江 哈尔滨 １０８；。 ５０６３ 东宁出入境检ห้องสมุดไป่ตู้检疫局 ， 黑龙江 东宁 １７０ ） ５２０
摘 关 要： 介绍 了 白藜 芦 醇 的资源 分 布及 化 学结 构 ， 阐述 了其 生 理 、 药理 活性 及 相应 的 营养 保健 功效 及 其在 食 品 、 妆 品及 药 品方 面 的 化 键 词： 白藜芦 醇 ； 分离 ； 健 功能 ； 用 保 应 文献 标 识码 ： Ａ 文章 编号 ：２ ４ ５ ７ （０ ８ ０ — ０ ０ ０ ５ — ０ １２ ０ ） ７ ０ １－ ３ ０
葡萄酒渣中白藜芦醇类生物活性物质研究报告进展课稿
葡萄酒渣中白藜芦醇类生物活性物质最新研究进展摘要：介绍了我国葡萄的发展历程及葡萄酒渣中的活性物质——白藜芦醇的生物学功能。
阐述了白藜芦醇的提取、纯化方法，同时展望了以葡萄酒渣为原料提取白藜芦醇而产生的巨大的经济效益和社会效益。
关键词：葡萄；白藜芦醇；提取；纯化0引言葡萄有“水果皇后”之美誉，其味甜美又清爽且营养丰富，还有补益气血、强筋骨、通经络、通淋消肿、滋肾益肝等功效，因此深受人们喜爱。
葡萄浆果中除含水分外，还含有约15%～30%的糖类(主要是葡萄糖、果糖和戊糖)，各种有机酸和矿物质，以及各种氨基酸、蛋白质、碳水化合物、粗纤维、胡萝卜素等多种营养物质。
现代研究发现，葡萄中还含有鞣质、甾类、超氧化物歧化酶等生物活性物质。
很多文献报道，葡萄的医疗保健功效大都与这些生物活性物质的药理活性有关。
每年世界葡萄总产量中80%用于酿酒，由葡萄的世界产量可知，葡萄酒的世界年产量也是个庞大的数字。
中国的葡萄酒产业发展历史较短，但随着中国经济的腾飞，其葡萄酒生产的发展速度也是相当惊人。
由于葡萄酒的大量生产和消费，同时也产生了大量的葡萄酿酒后的副产品——葡萄酒渣（葡萄皮渣、籽、梗）。
一些发达国家如法国、意大利、西班牙等这些葡萄酒生产大国，其葡萄废弃物的70%以上均能得到很好的利用，但我国常年来由于葡萄酒生产季节性强、生产集中，导致这些废弃物往往来不及处理就被随意抛弃或作为废料处理掉，这不仅影响环境卫生，而且也是对资源的极度浪费。
研究表明，酿酒后的葡萄废弃物中含有大量以植物多酚为主的生物活性物质，如白藜芦醇、酚酸、黄酮、原花青素等，这些物质具有非常重要的生理功能特性，因此有极大的开发前景。
我国的葡萄生产量居世界前列，每年我国葡萄废弃物高达几十万吨，如何将这一大批明显有利用价值的物质充分开发出来，使其得到综合有效的利用将是食品科技工作者值得研究的问题。
1葡萄酒渣中的生物活性物质白藜芦醇1.1白藜芦醇简介白藜芦醇，又称芪三酚，起初在葡萄中发现，被认为它的产生与葡萄植株对真菌的感染或非生物刺激(如紫外辐射) 有关。
sfe等方法提取山葡萄藤中白藜芦醇的研究
sfe等方法提取山葡萄藤中白藜芦醇的研究中国北方山区的葡萄藤是很受欢迎的植物，它们不仅可以提供美味的水果，而且还含有大量的生物活性物质。
其中白藜芦醇是一种多酚类化合物，具有抗氧化，抗衰老，抗炎症，抗肿瘤等多种药理作用。
本文旨在探讨从山葡萄藤中提取白藜芦醇的方法及其研究进展。
第一，从山葡萄藤中提取白藜芦醇的方法。
白藜芦醇可以通过多种技术提取，如超声波提取法、离子交换技术和萃取技术。
这些技术可以有效提取白藜芦醇。
其中超声波提取法是一种有效的方法，它可以在一定程度上提高白藜芦醇的提取率，同时保持原料物质的完整性。
离子交换技术是一种有效的方法，它可以通过离子交换模拟来实现白藜芦醇的理想分离。
最后，萃取技术是一种有效而可控的技术，可以有效地利用挥发性溶剂和萃取剂将白藜芦醇从山葡萄藤中提取出来。
第二，从山葡萄藤中提取白藜芦醇的研究进展。
近年来，研究人员已经尝试采用多种技术来提取白藜芦醇，并取得了一些成果。
首先，研究人员采用超声波提取法提取了山葡萄藤中的白藜芦醇，获得了较高的提取率。
除此之外，研究人员还尝试利用萃取技术提取白藜芦醇，结果发现经过优化处理后，从山葡萄藤中提取白藜芦醇的提取率可以达到较高水平。
最后，研究人员尝试利用离子交换技术提取白藜芦醇，结果发现，经过合适的离子交换条件，白藜芦醇的回收率也较高。
总之，白藜芦醇是一种重要的多酚类化合物，具有重要的生物活性，能够有效提高人类健康水平。
然而，目前从山葡萄藤中提取白藜芦醇的方法和研究还存在一定的缺陷，未来需要继续深入研究，提高技术的效率，以提取更多的白藜芦醇。
《以SFE等方法提取山葡萄藤中白藜芦醇的研究》中国北方山区的葡萄藤是果农们生产果实的重要来源，其中白藜芦醇是一种重要的多酚类化合物，由于其具有抗氧化，抗衰老，抗炎症，抗肿瘤等多种药理作用，被誉为“植物中的珍珠”。
本文旨在探讨从山葡萄藤中提取白藜芦醇的方法和其研究最新进展。
首先，从山葡萄藤中提取白藜芦醇的方法有超声波提取法、离子交换技术和萃取技术等，这些技术能够有效地提取白藜芦醇，尤其是超声波提取法，具有提取率高、原料物质完整性好等优点；离子交换技术可以利用模拟离子交换来实现白藜芦醇的理想分离；萃取技术是一种有效的方法，可以有效地利用挥发性溶剂和萃取剂分离白藜芦醇。
白藜芦醇提取工艺的研究
白藜芦醇提取工艺的研究报告研究目标本研究的目标是探索高效、可行的白藜芦醇提取工艺，以充分利用这种天然活性物质的药用价值。
具体而言，研究目标包括：1.确定最佳的提取溶剂和提取条件；2.优化提取工艺，使得白藜芦醇的提取效率和纯度达到最大化；3.研究不同原料和处理方法对白藜芦醇提取的影响；4.提出可行的工业化生产方案。
研究方法原料准备采用白藜芦芦苇为原料，在不同地理位置和季节采集多批样品，进行全面的比较研究。
提取溶剂选择在实验室中，使用多种溶剂进行初步提取试验，例如乙醇、甲醇、水等，通过比较提取效率和纯度，确定最佳的提取溶剂。
提取工艺优化基于初步试验结果，通过响应面试验（例如Box-Behnken设计）进行提取工艺的优化。
考虑到原料的特性，包括颗粒度、温度、提取时间、提取剂浓度等参数进行优化实验。
提取效果分析利用高效液相色谱法（HPLC）对提取液进行分析，测定白藜芦醇的含量和纯度，并进行各种参数的统计分析。
工业化生产方案在实验室最佳条件下，进行中试和大规模试验，验证提取工艺的可行性，并确定生产线的工艺参数、设备要求、工艺流程等。
研究发现提取溶剂选择乙醇为最佳的提取溶剂，其提取效率和纯度均较高。
提取工艺优化通过Box-Behnken设计的响应面试验，优化得到最佳条件：乙醇浓度60%，提取时间2小时，温度40℃，颗粒度为40目。
在这些条件下，白藜芦醇的提取效率可达到最大。
提取效果分析根据HPLC分析结果，白藜芦醇的纯度达到了98%，提取效率达到了86%。
这表明优化的提取工艺在白藜芦醇的提取中取得了良好的成果。
工业化生产方案在实验室最佳条件下进行中试和大规模试验，结果显示提取工艺在不同规模的生产中均具有可行性。
根据中试和大规模试验的实验数据，确定了工业化生产线的工艺参数、设备要求和工艺流程。
结论本研究通过对白藜芦醇提取工艺的深入研究，找到了最佳的提取条件，并实现了高效提取和高纯度的白藜芦醇产量。
通过中试和大规模试验验证了工艺的可行性，并确定了工业化生产方案。
葡萄果实不同部位白藜芦醇提取工艺及含量研究
现代农业科技2017年第19期食品科学白藜芦醇(resveratrol ,Res )又名芪三酚,化学名称为3,4,5-三羟基-1,2二苯乙烯,化学式为C 14H 12O 3,相对分子质量228.5;常态下为无色针状晶体,熔点256~257℃,易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂,是植物含有的一种天然二苯乙烯类物质,为含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物[1]。
天然白藜芦醇以游离态或糖苷形式存在,有顺、反2种异构体,其中顺式异构体光敏度强、极不稳定,反式异构体可以稳定存在[2]。
白藜芦醇广泛存在于葡萄[3]、花生皮、虎杖等天然植物中。
到目前为止,已在21科31属的72种植物中发现了白藜芦醇[4]。
现代药理学研究证明,白藜芦醇具有抗病毒、抑肿瘤、抗氧化、清除自由基、抗诱变、降血脂、保护心血管、延缓衰老、美容等作用,是一种极具开发价值的天然物质,被喻为继紫杉醇之后的又一新的绿色抗癌物质[5],在医药、保健食品领域具有广阔的开发前景。
美国天然药物研究所(CNN )研究发现白藜芦醇还具有抗艾滋病的作用[6],但目前从天然植物中提取的得率较低,因而研究有效的提取方法具有重要的意义。
1材料与方法1.1材料与器材试验材料为巨峰葡萄、马奶葡萄、进口红提和国产红提4个品种,试验试剂有无水乙醇、白藜芦醇标准品(98%)、30%H 2O 2、石油醚。
试验器材有量筒、分析天平、真空干燥箱、循环水式真空泵、恒温水浴锅、超声波清洗器、旋转蒸发器、紫外-可见分光光度计。
1.2试验方法1.2.1选择最佳乙醇浓度。
分别准确称取1g 葡萄肉粉末5组,每组4份,按照1∶6的液料比分别加入40%、50%、60%、70%、80%5种浓度的乙醇溶液6mL ,烧瓶封口后50℃水浴20min ,水浴结束后超声6min ,然后取出过滤,用石油醚去除叶绿素,吸取1mL 提取液用对应浓度的乙醇定容至25mL ,计算不同乙醇浓度下的提取率。
1.2.2选择最佳水浴时间。
葡萄愈伤组织中白藜芦醇提取工艺的研究
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葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状黄德成 李 华 王 华(西北农林科技大学葡萄酒学院,杨凌,712100)摘 要 介绍了白藜芦醇的理化性质及其提取和检测方法的研究现状,并对这些方法的优缺点作出简要总结,为葡萄籽功能性食品中白藜芦醇的检测提供参考。
关键词 葡萄籽,白藜芦醇,理化性质,提取,检测第一作者:硕士(李华教授为通讯作者)。
收稿日期:2006-08-14 白藜芦醇(resveratrol ),化学名称为3,5,4′2三羟基21,22二苯乙烯(trans 23,5,4′2trihydroxy 2stilbene ),是一种含有茂类结构的多酚化合物;少量以游离态的形式广泛存在于葡萄、虎杖和花生等天然植物或果实当中,到目前为止至少己在21科、31属的72种植物中发现了白藜芦醇[1]。
多年来人们对白藜芦醇研究结果表明,白藜芦醇具有抗癌、抗菌、抗氧化、降血脂和抗诱变等作用[2]。
在日本,已将含白藜芦醇植物提取物作为食品添加剂使用;在我国,也有将白藜芦醇提取物制成降脂、美容、减肥和抗癌天然保健食品及胶囊[3]。
但是目前国内外对白藜芦醇的检测还没有统一的方法标准[4],本文从白藜芦醇的理化性质、提取和检测方法3个方面作出简要综述,为葡萄籽功能性食品中白藜芦醇检测提供参考。
1 白藜芦醇的理化性质白藜芦醇为无色针状结晶,分子式为C 14H 12O 3,相对分子质量228125,其结构式有顺、反2种,并各自可以与葡萄糖结合形成顺、反式白藜芦醇苷(其结构见图1),白藜芦醇常与葡萄糖结合以糖苷的形式存在;白藜芦醇熔点256～257℃,261℃升华,易溶于乙醚、甲醇、乙醇、丙醇等。
在366nm 的紫外光照射下能产生荧光,并能和三氯化铁2铁氰化钾起显色反应[5]。
其反式异构体的生物活性强于顺式异构体,在紫外光照射下反式白藜芦醇能够转化为其顺式异构体。
纯白藜芦醇对光不稳定,在完全避光条件下,反式白藜芦醇可在乙醇中稳定数月,仅在高p H (≥10)下稳定性差一些;顺式白藜芦醇在避光条件下只有中性p H 下较稳定。
反式与顺式白藜芦醇在紫外光(UV )210nm 处有强吸收,其第二吸收峰分别在305～330nm 和280～295nm 。
在乙醇中,反式在308nm 的摩尔吸收系数为30000,顺式于288nm 的摩尔吸收系数为12600[6]。
R =H.trans resveratrol R =H.cis resveratrol R =G lu.trans piceid R =G lu.cis piceid 图1 白藜芦醇及其苷的化学结构2 白藜芦醇的提取目前,国内外大多采用葡萄皮、葡萄籽和虎杖等植物为原料提取白藜芦醇。
先将原料粉碎,采用有机溶剂(如甲醇、乙醇、乙酸乙酯等)进行提取,经过滤后将滤液浓缩,即得白藜芦醇粗品。
有机溶剂提取方法主要分为回流法、浸渍法、索氏法、超声波法等。
211 回流法加热回流提取白藜芦醇的溶剂主要有甲醇、乙醇和乙酸乙酯,对提取液萃取分离的萃取剂有石油醚、氯仿、乙酸乙酯等。
朱鸿津[7]利用加热回流提取虎杖中白藜芦醇的方法是称取虎杖粉末(过40目筛)50g ,用体积分数95%乙醇水浴回流提取3次,第1次用4倍质量乙醇回流提3h ,第2、3次分别用3倍质量乙醇回流提取各1h ,合并提取液,冷却,过滤,滤液减压浓缩,得到白藜芦醇粗品溶液。
回流法有着提取率较高,成本低的优点;然而由于提取时间较长,导致白藜芦醇的氧化,使检测结果失真。
212 浸渍法姚宝书[8]等人以乙酸乙酯为提取剂,考察浸提时间、浸提温度、浸提次数、料液比对提取效果的影响,确定的最适的浸提条件:提取时间40min ,温度综述与专题评论2006年第32卷第10期(总第226期)11360℃,提取次数2次,料液比(g∶mL)1∶30。
浸渍法提取效果比回流法和超声波稍低,且提取时与空气接触时间长,也会导致白藜芦醇的氧化。
213 索氏法于红霞[9]等人利用索氏法提取葡萄籽中白藜芦醇,并测定其含量,方法如下:称取适量经烘干的葡萄籽粉,置索氏提取器中,加无水乙醇回流6h,蒸干溶剂,用无水乙醇定容,测定前,将样品经流动相溶剂稀释,用高效液相色谱仪测定,以白藜芦醇标准作对照。
索氏法提取效果差,提取时间长;进一步延长提取时间,可能会有好的得率,但同时也延长了生产周期,效率反而不高。
214 超声波法李华[10]等人研究利用超声波辅助提取葡萄籽中总多酚。
考察了超声波的频率、作用时间、温度、提取时间、料液比及提取次数5个单因素对总多酚提取率的影响,并在单因素的基础上进行正交实验得到多酚提取的最佳工艺条件:温度45℃,频率为40kHz,料液比(g∶mL)为1∶12,共提取5次,每次提取时间为55min。
超声波提取法提取率高,提取时间短,且能够避免白藜芦醇在高温下的反应,已广泛应用于白藜芦醇的实验室提取。
刘树兴[11]等人以虎杖为样品考察了回流提取、热水浸提、索氏提取、超声波提取这4种方式的提取效果。
所得结果见表1。
表1 不同提取方法比较表[12]提取方法回流提取热水浸提索式提取超声波提取提取条件60℃,6h60℃,7h75℃,10h60℃,30min白藜芦醇得率/%3117218621183121由表1明显可以看出,回流提取与超声波提取的效果较好,索氏提取的效果最差。
3 白藜芦醇的检测目前,白藜芦醇的检测方法主要有高效液相色谱(HPLC)、毛细管电泳(CE)、薄层扫描(TLC)和气相色谱2质谱联用(GC2MS)等。
311 高效液相色谱法高效液相色谱是在定性的基础上定量,以纯物质作为标准物,由已知量的被测物标样推算混合物中被测物的量[12]。
它是中药制剂质量评价中常用的分析方法,也是目前企业及科研单位精确定量白藜芦醇的主要方法。
王华[4]等人采用直接进样法将处理好的酒样通过C18柱,乙腈2水流动相(体积比=1∶9～9∶1)进行梯度洗脱,紫外检测器306nm下,外标法定性、定量地测出不同葡萄酒中的白藜芦醇的含量。
张予林[13]等人采用HPLC法测定葡萄酒中的白藜芦醇,将酒样经超滤脱气后直接进样,色谱条件为:固定相为shim2park VP2ODS C18柱,流动相为乙腈-水(体积比40∶60)进行等压洗脱;流速:110mL/min,检测波长为306nm,进样量10μL。
结果表明,白藜芦醇含量在0125～40mg/L的范围内呈良好的线性关系。
高年法等人[14]采用SCR2101H柱,流动相为含40%体积乙腈的水溶液,流速为016mL/min,柱温为25℃,检测波长为306nm,进样量20μL,测出了葡萄酒中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量。
高效液相色谱法具有简便快捷、选择性好、准确度高的特点;但因白藜芦醇的异构化会导致测定损失,样品需要量大,待测组分损失较为严重。
312 毛细管电泳法毛细管电泳是利用不同离子所带电荷及性质的不同,迁移速率不同以达到分离目的,其高效、高速、微量和低消耗等优点在分析领域中占有重要的应用和发展前景。
刘芳华[15]等人以毛细管电泳结合电化学检测(ED)测定了葡萄和葡萄酒中的白藜芦醇含量。
在优化条件下,以300μm直径的碳圆盘电极为工作电极,工作电位为+0185V(vs1SCE),在100 mmol/L硼酸盐(p H=912)的运行缓冲液中,被测物浓度与峰电流在3个数量级范围内呈良好线性,检出限为1×10-7g/mL。
曹佳[16]等人在80mmol/L硼酸盐(p H=8193)的运行缓冲液中,采用电动进样,进样电压为12kV,进样时间10s,分离电压15kV的条件下,测定葡萄皮中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量,检出限为1125×10-4g/L,线性动态范围分别是4188×10-4～0131g/L和5137×10-4～0134g/L。
用毛细管电泳法测定白藜芦醇,所需设备和程序较简单,测定的定量分析结果与高效液相色谱和气2质联用一致[17],准确度高。
313 薄层扫描法薄层扫描利用薄层色谱斑点(组分)发出的荧光强度或利用荧光薄层板上暗斑的荧光淬灭程度进行定量分析;在对二苯乙烯类化合物的含量测定研究中,TLC法是较早应用的分析方法。
陈敏[18]等人以薄层扫描法同时测定葡萄酒中顺反白藜芦醇及其糖苷异构体的方法,样品用C18固相柱提取,以聚酰胺薄膜为固定相,苯2甲醇2甲酸(体积比为10∶5∶1)为展开剂进行分离,荧光扫描法定量,4种组分的线性关食品与发酵工业FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES 114 2006V ol.32No.10(Tot a l226)系良好,相关系数为019972～019996,平均回收率为9711%～9815%,RSD为210%～312%。
薄层荧光扫描法的检测灵敏度较低,与高效液相色谱相比,适用范围较窄。
314 气2质联用法气2质联用法就是利用气相色谱对混合物的高效分离能力和质谱对纯物质的准确鉴定能力而开发的分析仪器法。
气相色谱是质谱的样品处理器,质谱是气相色谱的检测器[1]。
李攻科[19]等人在SPE2GC2 MS法测定葡萄酒中顺反式白藜芦醇中确定了GC2 MS操作条件:色谱条件,进样口温度280℃,柱温采用程序升温,初温100℃,保持2min后,以10℃/min 速度升至300℃,恒温10min,载气为纯氦气,流速为110mL/min;质谱条件,接口温度280℃,EI离子源,电子能量70eV,离子源温度230℃,四极杆温度106℃,电子倍增器电压1400V,质量扫描范围30～550。
气2质联用法耗时少、样品用量少、待测组分损失少;但如果不衍生化而直接进样,色谱峰拖尾严重,且处理后的样品容易带水;样品衍生化后测定其含量,会更为简便、快速、损失小,适于大批量样品的测定。
4 小 结检测白藜芦醇时,应根据各组分的理化性质,采取相应纯化和浓缩措施,减少干扰物质对检测白藜芦醇的影响,提高白藜芦醇的浓度,从而提高检测效果。
葡萄籽中白藜芦醇含量很少,见光易发生异构化,因此在测定过程中要求避光。
不论采用哪种提取和检测方法,都应该根据白藜芦醇的性质及实验室的条件进行合理的预处理,选择最优化的提取和检测条件,从而取得较理想的检测结果。
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