细胞培养实验室构建方案-new
细胞培养实验室建设基本要求

细胞培养实验室建设基本要求.txt
细胞培养实验室建设基本要求
细胞培养实验室是进行细胞培养研究和实验的重要场所,为确
保实验的准确性和顺利进行,以下是细胞培养实验室建设的基本要求:
1. 设备和设施:
- 实验室应具备适当的面积和布局,确保实验操作的顺利进行。
- 实验室内应配置细胞培养箱、恒温培养箱、显微镜等必要的
设备。
- 实验室内应具备合适的洗手设施,并配备必要的实验室安全
设备。
2. 环境控制:
- 实验室应具备良好的通风系统,确保空气流通和污染物的排除。
- 实验室内的温度、湿度和光照条件应适宜,以满足细胞培养
的要求。
- 实验室内应设置适当的防护措施,避免细菌和真菌的污染。
3. 材料和试剂:
- 实验室应配备高质量的细胞培养耗材,如培养基、培养皿、
培养液等。
- 实验室应储备必要的实验试剂,如抗生素、细胞凋亡试剂等,并确保其保存和使用符合规范。
4. 实验操作:
- 实验室应建立严格的实验操作规范,包括细胞培养的标准操
作流程。
- 实验人员应接受相应的培训,熟悉和掌握细胞培养实验的技
术要求。
- 实验操作过程中应注意卫生和安全,遵守实验室操作规程。
细胞培养实验室建设的基本要求对于确保实验结果的准确性和
可靠性非常重要。
建立符合标准的实验室能够为科研工作提供良好
的支持,确保实验顺利进行。
细胞工程实验室设计方案

细胞工程实验室设计方案一、实验室概况细胞工程实验室是一个为细胞工程学科研究提供实验条件和设备的实验场所,主要用于细胞培养、基因编辑、转基因技术、细胞分离和分析等方面的实验研究。
实验室需要具备一定的生物安全性和实验条件,以满足相关研究需求。
二、实验室位置及面积细胞工程实验室位于学校科研楼内,总面积约为200平方米。
实验室需满足相关实验条件和生物安全标准,同时也需要考虑实验人员的日常工作环境和设备摆放等问题。
三、实验室布局设计1. 参考实验室布局示意图,将实验室空间划分为生物安全工作区、细胞培养区、基因编辑区、转基因区、细胞分析区、储存区等。
2. 生物安全工作区包括洗手间、更衣室、生物废弃物处理室等,需按照相关生物安全标准设置设施,确保实验人员和实验物质的安全。
四、实验室设备配置1. 细胞培养区设备:细胞培养箱、显微镜、离心机、共聚焦显微镜、显微切片机等。
2. 基因编辑区设备:CRISPR/Cas9系统、质粒转染仪、PCR扩增仪、电泳仪等。
3. 转基因区设备:质粒提取仪、基因枪、筛选培养箱、PCR仪等。
4. 细胞分析区设备:流式细胞仪、质谱仪、光学密度计、荧光显微镜等。
5. 储存区设备:液氮罐、冷冻离心机、冷冻箱等。
五、实验室常规操作规程1. 实验室进出口需安装生物安全门,实验室内部设施需按照生物安全等级标准进行装修和布局。
2. 实验室内部分区划分明确,不同区域的实验操作需符合相应区域的要求。
3. 实验室人员需进行生物安全操作培训和许可,使用实验设备前需进行操作规程的学习和考证。
4. 实验室设备需定期维护、清洁和标定,确保设备的正常运行和使用。
5. 实验室内部生物废弃物需按照相关规定进行分类和处理,确保安全卫生。
六、实验室安全管理1. 实验室内部设置摄像头,监控实验操作过程,防止实验事故和失窃事件。
2. 定期进行实验室安全检查和隐患排查,对可能存在的安全隐患进行改进和整改。
3. 实验室内设置应急救援设施和应急预案,保障实验人员和实验物质的安全。
动物细胞培养实验室构建方案

动物细胞培养实验室构建方案造成动物细胞培养实验室的构建方案是为了创造一个理想的环境来研究和培养动物细胞。
以下是一个可行的实验室构建方案。
一、选择合适的实验室空间选择一个适当的实验室空间对于动物细胞培养实验室的构建至关重要。
该空间应位于远离噪音和污染的地方,并具有合适的温湿度控制设备。
此外,空间的大小应能满足实验所需的设备、材料和工作区的布局。
二、安装空气处理系统空气处理系统在动物细胞培养实验室中起着至关重要的作用。
一个有效的空气处理系统能够过滤和清洁对细胞培养有害的空气污染物,如细菌、真菌和病毒。
此外,空气处理系统还可以提供恒定的温湿度,以确保细胞在合适的环境条件中生长。
三、设计无菌操作区无菌操作区是进行细胞培养必不可少的部分。
在这个区域,应该设置一台型号适中的生物安全柜,以提供洁净的工作环境,同时保护工作人员免受污染。
此外,还应设置一些必要的设备和工具,如无菌培养皿、离心机、显微镜等。
四、配置培养箱和生化分析设备为了维持细胞的生长和繁殖,培养箱是实验室中必不可少的设备之一、培养箱应该能够提供温度、湿度和CO2浓度的控制,并且具有灵活的配置和易于维护的特点。
此外,还应配置一些生化分析设备,如细胞计数仪、酶标仪等,以便对细胞的生理和生化特性进行研究。
五、建立细胞库和数据库六、设立安全措施和操作指南为了确保实验室的安全性,应设立一系列安全措施和操作指南。
这包括提供安全培训、制定实验室操作规程、提供个人防护装备和消防设备等。
此外,还应建立一个实验室管理团队,定期检查和维护实验室的设备和设施。
七、与相关领域进行合作与交流总结动物细胞培养实验室是进行生物医学研究的重要基础设施之一、通过选择合适的实验室空间、配置适当的设备和工具、建立细胞库、设立安全措施和操作指南,并与相关领域进行合作与交流,可以构建一个理想的动物细胞培养实验室。
这将为细胞生物学和生物医学领域的研究和发展提供有力支持。
细胞实验室设计方案

细胞实验室设计方案细胞实验室是进行细胞研究和实验的专门环境,为了保证实验的准确性、安全性和效率性,设计一个合理的细胞实验室是十分重要的。
下面是一个细胞实验室设计方案。
一、实验室布局设计1.实验室总体分区设计根据功能和实验流程的顺序,将实验室分为不同的工作区,包括准备区、操作区、数据分析区和储存区等。
同时,还需要确定洗手间和安全通道等设施的位置。
2.实验室设备布置设计根据实验要求和设备功能,将实验设备按照一定的布局原则进行摆放,实验设备之间的距离应该保持合适的间隔,以便操作人员操作和移动自如。
3.实验台设计实验操作台应具备防腐、耐酸碱的特性,在表面设置防滑材料。
二、实验室基础设施设计1.通风系统为了保证实验操作过程的安全性,实验室应该具备良好的通风设备,能够及时排除实验过程中产生的有害气体和异味。
2.照明设施实验室应该加强照明设施,确保实验人员能够清晰地观察实验过程。
3.实验室试剂储存设施实验室应该设置专门的试剂储存柜或货架,分类存放不同类型的试剂,避免试剂混淆,同时储存柜应设有防火、防漏等功能。
三、实验室安全设计1.紧急事故应急设备实验室的每个实验台都应配备紧急事故应急设备,如紧急洗眼器、紧急洗手器等,以便在紧急情况下及时处理。
2.防护设施实验操作员应配备个人防护设备,如实验眼镜、手套、防护服等,确保实验过程中的人身安全。
3.监控设备实验室应配备实时监控设备,监测实验室的温度、湿度、气体浓度等数据,确保实验过程中的安全性。
四、实验室管理设计1.实验室规章制度制定并实施实验室规章制度,明确实验室操作流程、实验安全等要求,加强人员培训和管理。
2.实验室卫生管理定期检查和清理实验室,保持实验室的整洁和卫生,避免交叉污染。
3.实验室记录管理建立完善的实验室记录管理制度,记录实验过程和结果,以备后续数据分析和审核。
综上所述,一个合理的细胞实验室设计方案不仅要充分考虑实验室的布局、设备布置和基础设施等要素,还需要注重实验室的安全性和管理的完善性,以提高实验效率和保证实验的准确性和安全性。
细胞培养实验室设计规划要求

细胞培养实验室设计规划要求1.空间规划与布局:实验室应根据不同的工作流程和实验操作进行合理的空间布局,同时考虑不同细胞株的分类和分离需求。
实验室的设计要充分利用空间,并提供足够的工作区域,以保证实验员的舒适度和实验工作的顺利进行。
2.生物安全性:实验室应当符合相关的生物安全标准,确保实验过程中的生物安全。
实验室内应有标准的工作台、生物安全柜、成分消毒设备、抽风系统等生物安全设备,以防止实验操作中的样品污染和实验员受到感染。
3.温度和湿度控制:细胞培养实验对温度和湿度非常敏感。
因此,实验室内应安装温湿度控制设备,以维持恒定的温度和湿度条件,确保细胞培养的稳定性和准确性。
此外,应为培养箱、CO2孵化器等设备提供合适的空间和安全的运行环境。
4.洁净度:实验室设计要求应采取洁净措施,以减少细菌和其他微生物的污染。
实验室的地面、墙壁和天花板等表面应平整易清洁,使用材料应防水、防菌和耐酸碱。
此外,实验室应提供合适的洁净工作区,以进行无菌操作和培养瓶等物品的消毒。
5.设备和器材:实验室设计应根据具体的研究需求配备相应的实验设备和器材。
例如培养箱、CO2孵化器、离心机、显微镜、培养基制备设备等。
此外,应设有特定的存储区域,用于存放细胞培养所需的试剂、培养基、生物样品等,以保证安全性和可靠性。
6.实验室通风系统:细胞培养实验过程中常涉及有害气体和显微粒子的产生,因此实验室内应配置合适的通风系统,以保持空气清洁。
通风系统应具备风量调节、风速调节、换气周期和过滤装置等功能,以确保实验室内的空气质量。
7.安全设施:实验室设计要求应配置安全设施,包括眼镜洗眼器、紧急淋浴器、灭火器等,以应对突发事故的发生。
此外,实验室的入口处应设有洗手台,并设置合适的防护设施,以确保实验员的个人安全。
8.实验室管理:实验室的设计规划还应考虑实验室管理的方便性。
例如,实验室应配备合适的实验台面、储物柜和标本架等,以方便实验员工作和存储实验物品。
细胞实验室建设要求和布局

细胞实验室建设要求和布局
一、实验室建筑要求
1、实验室的地面、墙面和其它部位应安装防水、防潮、防火等材料,使室内温度恒定,避免潮湿环境。
2、实验室的空气换气速率应达到规定的标准,保证室内空气新鲜。
3、室内所有活动场所应做好除尘处理,使微生物污染和尘埃污染降
至最低。
4、实验室室内有明显标识,做好室内各工作环节的管理,确保安全。
5、室内有明显的活动空间,并有充足的水源和电源,方便进行各种
实验活动。
二、实验室设备要求
1、热源设备:实验室里应有合适的热源设备,如台式恒温培养箱、
恒温恒湿培养箱等,便于完成各种实验。
2、冷源设备:实验室应有冷源设备,如冰箱、恒温冰柜等,用于存
放实验品和培养基,满足实验的需要。
3、通风设备:实验室的通风设备需要符合国家规定的标准,能够满
足实验室室内空气的新鲜度,保证实验室安全。
4、操作台:实验室操作台要有规格符合标准、可吸附尘埃的表面,
且样品操作台应有较高的护栏,防止样本洒落,影响实验结果精确度。
细胞培养实验室建设标准

细胞培养实验室建设标准细胞培养实验室建设标准一、空气洁净度细胞培养实验室的空气洁净度要求非常高,以保证细胞生长环境的无菌、无污染。
根据细胞培养的不同要求,实验室的空气洁净度应达到以下标准:1.基础级(Clean Work Area):无可见颗粒物,无气味,无微生物生长。
适用于普通实验操作和设备维护。
2.洁净级(Clean Area):空气中悬浮粒子浓度保持在规定限度以内,达到百级净化水平。
适用于细胞培养、分子生物学实验等高精度实验。
3.超净级(Super Clean Area):比洁净级更加严格的空气洁净度,达到千级净化水平。
适用于组织工程、干细胞培养、病毒学等高度无菌要求的实验。
二、环境控制细胞培养实验室的环境控制应满足以下要求:1.温度和湿度:实验室应保持恒温恒湿,温度控制在20-26℃,相对湿度保持在40%-65%。
2.压力:实验室应维持正压环境,防止外界污染进入。
3.噪声:实验室应控制噪声,避免影响实验操作和细胞生长。
4.光照:实验室应提供适宜的光照强度和波长,一般使用冷白光源,光照均匀,无直射阳光。
5.空气循环:实验室应采用空气循环系统,保证空气清新和无菌。
三、光线和照明细胞培养实验室的光线照明应满足以下要求:1.使用冷白光源,波长在400-700nm之间,避免紫外线等有害光线对细胞生长的影响。
2.照明均匀,无直射阳光,以提供稳定的实验环境。
3.实验室应配置紧急照明设备,以应对突然断电等情况。
四、实验台和设备细胞培养实验室的实验台和设备应满足以下要求:1.实验台应采用无菌、无尘、耐腐蚀的材料制成,易于清洁和维护。
2.实验设备应符合细胞培养实验的需求,如细胞计数器、离心机、培养箱、显微镜等。
3.实验室应配置相应的清洗、消毒设备,如超声波清洗器、高温高压灭菌器等。
4.实验室应配置必要的消防设备,如灭火器、烟雾探测器等。
5.实验室应配置相应的环保设备,如废液处理装置、废气处理装置等。
细胞实验室建设要求和布局

细胞实验室主要是在合适的温湿度、光照度、PH值、洁净度的环境下研究培养出来的细菌。
主要是运用于医学领域。
细胞实验室的建设要求:一、基本要求1、总建筑面积宜不小于1000m2。
2、洁净区使用面积宜不小于500m2。
3、洁净室的净高度应在2.5-2.8m之间。
二、总体布局1、总体平面布局应符合GB19489、GB50333、GB50346、GB50457的要求。
2、洁净区各室布局应清晰合理,不应交叉混合使用,且应符合人、物分流的原则。
3、人流通道、洁净区入口应设缓冲室。
4、废物、污染物需设置专用传递窗。
5、传递窗送风方式应采用上送侧回的方式。
6、通道门的开启方向应由低洁净级向高洁净级的方向开启。
7、所有洁净区不应安装水池和地漏。
(除更衣室外)三、环境要求1、环境设计应符合GB19489、GB50346、GB50457、《药品生产质量管理规范》和AABB的要求。
2、洁净区的环境技术指标应符合要求:3、空气洁净度等级划分应符合要求;4、二更、缓冲、细胞制备区、细胞培养区的空气洁净度应符合表1中的C级。
细胞制备操作相关区域的空气洁净度至少应在C级背景下的A级环境中进行;5、温度应控制在22±4℃,湿度应控制在45%~65%为宜;6、洁净区与非洁净区之间、不同空气洁净度的洁净区之间的压差应>10Pa。
洁净区内不同功能及级别房间之间宜保持适当的压差梯度,以防止污染和交叉污染;7、总送风量中(非单向流)应有10%~30%的新风量;8、噪声级(空态)应≤65dB(A);9、般照明的照度值宜>300LX,对照度有特殊要求的区域(细胞产品灯检区)应设置局部照明。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
细胞培养实验室构建方案
(一)细胞培养实验室的设置
细胞培养实验室与其他一般实验室的主要区别在于要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。
细胞培养实验室应分为以下几个区:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
1.无菌操作区
(1)无菌操作室:无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,最好能与外界隔离,不能穿行或受其他干扰,一般地理位置在最后部分。
理想的无菌操作室应划为三部分:
a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间,目的是为了保证操作间的无菌环境,同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。
其大小要适当,且其顶部不宜过高(不超过2.5m)以保证紫外线的有效灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。
工作台安置不应靠墙壁,台面要光滑压塑作表面,漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。
(2)净化工作台:操作简单,安装方便,占用空间小且净化效果很好。
一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种:a)侧流式或称垂直式b)外流式或称水平层流式。
净化工作台工作原理(大致相同)――通常是将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经高效空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。
净化工作台应用注意:
(1)净化工作台应安装在隔离好的无菌间或清洁无尘的房间内,以免尘土过多易使过滤器阻塞,降低净化效果,缩短其使用寿命。
(2)新安装的或长期未使用的工作台,工作前必须对工作台和周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作,然后再采用药物灭菌法或紫外线灭菌进行灭菌处理。
(3)使用净化工作台前,应先用75%酒精擦洗台面,并提前以紫外线灭菌灯照射30~50min处理净化工作区内积存的微生物。
关闭灭菌灯后应启动风机使之运转两分钟后再进行培养操作。
(4)净化工作区内不应存放不必要的物品,以保持洁净气流流型不受干扰。
(5)注意净化区内气流的变化,一旦感到气流变弱,如酒精灯火焰不动,加大电机电压仍未见情况改变则说明滤器已被阻塞,应及时更换。
一般情况下,高效过滤器三年更换一次。
更换高过滤器应请专业人员操作,以保持密封良好。
粗过滤器中的过滤布(无纺布)应定期清洗更换,时间应根据工作环境洁净程度而定,通常间隔3-6个月进行一次。
(6)净化工作台使用完毕应及时清理工作台面上的物品并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。
(7)净化工作台应定期进行功能测试,检查净化工作台各项工作指标是否达到要求,例如进行无菌试验,定期检查台面空气的洁净度是否达标。
超净工作台的无菌程度检查,超净工作台在消毒处理后,无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数;取直径约90mm平皿,在超净工作台内点燃酒精灯,在酒精灯旁,以无菌操作,将平皿半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml,制成平板,在30~35℃预培养48小时,证明无菌后将平板3个,以无菌方式带入超净工作台内左、中、右各放一个;打开平皿盖扣置,平板在空气中暴露30分钟后将平皿盖盖好,置30~35℃培养48小时,取出检查,100级清洁度要求:3个平皿上生长的菌落数平均不得超过1个。
超净工作台应定期请有关部门检查其洁净度,应达到100级(一般用尘埃粒子计数仪)检测尘埃粒径≤5祄的粒数不得超过3.5个/升;空气流量应控制在0.75~1.0m3/s;细菌菌落数平均<1个,可根据无菌状况必要时置换过滤器。
2.孵育区
本区对无菌的要求虽不比无菌区严格,但仍需清洁无尘,因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。
3.制备区
在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。
4.储藏区
主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等,此环境也需要清洁无尘。
5.清洗和消毒灭菌区
清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开,主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。
细胞实验室必备仪器:
一、CO2培养箱
CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。
细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。
Thermo系列CO2培养箱具有专业的灭菌和抑菌功能。
Hepa过滤器,箱体内达到100级空气质量;不锈钢抛光内胆,有效抑制微生物附着;
二、纯水系统
细胞培养过程中,内毒素对细胞的生长有很大的影响,水中的内毒素直接参与细胞凋亡,血清中内毒素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高,会直接导致细胞提前老化。
而常规的普通蒸馏水在玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水ddH2O是不能满足要求的,细胞培养用水一般要求双蒸水(0.8MΩ以上),因此,必须配置正式的水纯化系统,采用无内毒素纯水配制所有培养用试剂。
三、超净工作台/生物安全柜
细胞培养对无菌环境要求很高,与CO2培养箱一样,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。
实际操作经验,我建议采用新加坡ESCO超净工作台和生物安全柜。
四、液氮罐
为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,胚胎干细胞ESC,诱导多能干细胞IPS,间充质干细胞MSCs,要将细胞冻存。
冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。
在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性,同时液氮罐必需配备报警器,液氮量减少时及时添补液氮量。
五、超低温冰箱
细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30 min,转放-20℃1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。
一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。
六、恒温水浴
从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器,复苏过程中要注意水浴时间1-2min,随时观察。
七、离心机
细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。
八、移液器和细胞培养的大量耗材
细胞实验中有大量频繁的移液操作,因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。
各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量极大。
除上述仪器外,高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器。
常用的培养器皿:
培养瓶:由玻璃或塑料制成。
主要用于培养、繁殖细胞。
进行培养时培养瓶瓶口加盖螺旋瓶盖或胶塞,胶塞多用于密封培养。
国产培养瓶的规格以容量(ml)表示,如250ml、100ml、25ml等;进口培养瓶则多以底面积(cm2)表示。
培养皿:由玻璃或塑料制成,供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。
常用的培养皿规格有10cm、9cm、6cm、3.5cm等。
多孔培养板:为塑料制品。
可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。
其优点是节约样本及试剂,可同时测试大量样本,易于进行无菌操作。
培养板分为各种规格,常用的规格有:96孔、24孔、12孔、6孔、4孔等。
2
96孔培养板0.32 0.1 1×105
24孔培养板 2 1 5×105
12孔培养板 4.5 2 1×106
6孔培养板9.6 2.5 2.5×106
4孔培养板28 5 7×106
3.5cm培养皿8 3 2.0×106
6 cm培养皿21 5 5.2×106
9 cm培养皿49 10 12.2×106
10 cm培养皿55 10 13.7×106
25cm塑料培养瓶25 5 5×106
75 cm塑料培养瓶75 15-30 2×107
25 ml玻璃培养瓶15 4 3×106 100 ml玻璃培养瓶37.5 10 6×106 250 ml玻璃培养瓶78 15 7×107 2500 ml旋转培养
瓶700 100-150 2.0×108。