菠菜色素的提取和色素分离
实验2-菠菜中色素的提取和分离
实验2■菠菜中色素的提取和分离实验2菠菜中色素的提取和分离扬州大学化学化工学院张磊091301223一.实验目的：1 •了解分离与提纯过程在科学研究和生产生活中的应用；2.掌握分离与提纯实验设计的一般思路和方法;3.掌握菠菜中色素提取的原理，步骤和影响因素；二•实验原理：1.叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂中，所以用石油醚、乙醇等能提取色素。
2.本实验选用的是吸附色谱，氧化铝作为吸附剂（极性），色素提取液为吸附液，色素提取液中各成分极性大小为：叶绿素 b （黄绿色）＞叶绿素a （蓝绿色）＞叶黄素（黄色）＞3■类胡萝卜素（橙色）。
3.柱层析法的分离原理是根据物质在氧化铝上的吸附力不同而使各组分分离。
一般情况下极性较大的物质易被吸附，极性较弱的物质不易被吸附，所以由上到下为：叶绿素 b （黄绿色），叶绿素a （蓝绿色），叶黄素（黄色），伕类胡萝卜素（橙色）。
三、实验材料：仪器：研钵、分液漏斗、层析柱（20 x 10 cm），表面皿，普通漏斗，量筒试剂：石油醚、乙醇（95%）、菠菜叶、丙酮（化学纯）、中性氧化铝，无水硫酸钠四、实验步骤与内容【探究：菠菜（或青菜）的I I处理方式】（1）小组讨论处理菠菜的各种方式，然后按照“手撕”，“划几刀，再手撕”，“剪成丁状”，“剪碎后稍加研磨”，“研磨成浆”共五种方式分为五组进行实验，最后确定控制菠菜叶取25克，加入有机溶剂15mL （9mL石油醚+6mL乙醚），浸泡时间取25min为统一条件；（2）开始分组实验，各自处理好各组的菠菜，放置在烧杯中，加入15mL有机溶剂并盖上表面皿浸泡25min。
（3）在浸泡的时间内开始装柱，首先在滴管下口装上橡皮管并夹上弹簧夹（夹紧），在管的出口处放入一小撮棉花，在棉花上放置已剪好的和滴管内径一般大小的圆形滤纸，然后用普通漏斗往里面装入中性氧化铝，最后在氧化铝上再加上和滴管内径一般大小的圆形滤纸，夹在铁架台上备用。
菠菜色素的提取和分离实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告
一、实验目的：
本次实验的主要目的是学习和掌握菠菜色素的提取和分离技术，了解菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
二、实验方法：
1、制备样品：将新鲜的菠菜叶片洗净晾干，切碎成小块备用；
2、提取菠菜色素：将切碎的菠菜叶片加入适量无水乙醇，研
磨成泥状物，过滤后取得浸提液；
3、进一步提取：将浸提液过滤并再次提取，过滤得到过滤液；
4、分离：将过滤液使用氯仿进行分离，水相和氯仿相层的色
素分离；
5、测定：将得到的色素溶于适量乙醇，测定菠菜色素的吸光度。
三、实验结果：
经过提取和分离，得到了深绿色的液体，与纯菠菜色素溶液比
较后发现两者颜色相似。
测定得到吸光度为0.54。
四、实验分析：
本次实验成功提取和分离了菠菜色素，并得到了较为准确的测定值。
在实验中，氯仿和无水乙醇是常用的有机溶剂，主要是因为在这些溶剂中菠菜色素的溶解度较高。
但是，在实验操作过程中需要注意保持实验环境的卫生和安全，氯仿是一种易挥发的有机物，需要注意防火和防烟。
五、实验结论：
通过本次实验，我们成功地提取和分离了菠菜色素，并且得到了较为准确的测定值。
同时，我们也了解了菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
本次实验的成功对于今后相关实验研究以及实际应用具有一定的指导意义。
菠菜色素的提取和分离实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言：菠菜是一种常见的绿叶蔬菜，富含多种营养物质，其中包括一种被称为菠菜色素的成分。
菠菜色素是一类天然的色素，具有良好的生物活性和抗氧化性质。
本实验旨在通过提取和分离的方法，研究菠菜色素的性质和应用。
实验材料和方法：材料：新鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、石油醚、二氯甲烷、硅胶G柱、色谱柱、色谱试纸等。
方法：1. 取适量新鲜菠菜叶片，洗净并切碎成细末状。
2. 将菠菜末置于研钵中，加入适量无水乙醇，浸泡30分钟，搅拌均匀。
3. 将菠菜浸提液过滤，收集滤液。
4. 取少量滤液，加入石油醚，振荡混合，使菠菜色素溶于石油醚中。
5. 将石油醚层收集，加入少量无水乙醇，使溶液变为淡绿色。
6. 将淡绿色溶液倒入色谱柱中，以无水乙醇为洗脱剂，收集洗脱液。
7. 将洗脱液浓缩，得到菠菜色素。
实验结果和讨论：通过以上实验步骤，我们成功地从菠菜中提取和分离出了菠菜色素。
在实验过程中，我们使用了无水乙醇作为提取剂，因为乙醇能够有效溶解菠菜中的色素成分。
同时，我们使用石油醚作为分离剂，因为石油醚能够与菠菜色素发生亲和作用，使其溶于石油醚中。
在分离过程中，我们使用了色谱柱和色谱试纸进行分离和检测。
色谱柱是一种常见的分离工具，通过其内部填充的固定相材料，能够将混合物中的成分按照其亲和性和分子大小进行分离。
我们选择了硅胶G柱作为固定相材料，因为硅胶G柱对菠菜色素具有较好的亲和性。
通过使用无水乙醇作为洗脱剂，我们成功地将菠菜色素从硅胶G柱中洗脱出来。
在实验中，我们观察到菠菜色素呈现淡绿色。
这是因为菠菜色素主要由叶绿素和类胡萝卜素等成分组成，这些成分赋予了菠菜独特的颜色。
叶绿素是一种绿色的色素，具有光合作用的功能。
类胡萝卜素则是一类黄、橙、红等颜色的色素，具有抗氧化和免疫调节等作用。
菠菜色素不仅在食品工业中有广泛应用，还在医药和化妆品等领域发挥着重要作用。
菠菜色素富含抗氧化物质，能够有效清除自由基，延缓衰老和预防疾病。
色素提取和分离实验报告
色素提取和分离实验报告色素提取和分离实验报告引言：色素是一类广泛存在于自然界中的有机化合物，具有丰富的颜色和多样的功能。
色素提取和分离是一项重要的实验技术，可以帮助我们深入了解色素的性质和应用。
本实验旨在通过提取和分离植物中的色素，探究其在不同溶剂中的溶解性和分离效果。
实验材料和方法：材料：鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、二氯甲烷、石油醚、氯化钠溶液、滤纸、试管等。
方法：1. 将鲜菠菜叶片切碎，放入试管中。
2. 加入适量的无水乙醇，用玻璃棒搅拌均匀。
3. 将悬浊液过滤，收集滤液。
4. 将滤液分成几份，分别加入丙酮、二氯甲烷和石油醚中，摇匀。
5. 观察不同溶剂中的色素溶解情况和分离效果。
结果和讨论：通过实验观察和记录，我们得到了以下结果和结论：1. 无水乙醇提取：将鲜菠菜叶片与无水乙醇混合后，溶液呈现出深绿色。
这是因为无水乙醇可以有效提取鲜菠菜叶片中的叶绿素，叶绿素是一种绿色的植物色素。
2. 不同溶剂中的色素溶解情况：在实验中，我们用丙酮、二氯甲烷和石油醚分别与提取得到的无水乙醇溶液混合，并观察其溶解情况。
结果显示，丙酮溶液呈现出深绿色，二氯甲烷溶液呈现出橙黄色，而石油醚溶液呈现出淡黄色。
这说明不同溶剂对色素的溶解性有所差异。
3. 色素的分离效果：在实验中，我们通过观察不同溶剂中的色素溶液，发现色素在不同溶剂中有不同的分离效果。
丙酮溶液中的色素分离效果最好，可以清晰地观察到绿色和黄色两个色带。
而二氯甲烷溶液中的色素分离效果较差，只能看到一个橙黄色的色带。
石油醚溶液中的色素分离效果最差，只能观察到一个淡黄色的色带。
这说明不同溶剂对色素的分离效果也有所差异。
结论：通过本实验，我们得出了以下结论：1. 无水乙醇可以有效提取鲜菠菜叶片中的叶绿素。
2. 不同溶剂对色素的溶解性有所差异，丙酮溶液中的色素溶解性最好。
3. 不同溶剂对色素的分离效果也有所差异，丙酮溶液中的色素分离效果最好。
实验的局限性和改进方向：本实验中我们只使用了鲜菠菜叶片作为色素的来源，未涉及其他植物材料。
菠菜色素的提取与分离(实验方案)
菠菜色素的提取与分离(实验方案)
菠菜色素是一种天然的色素，在食品、药品和化妆品等领域得到广泛应用。
本实验旨在通过提取和分离菠菜中的色素，探索其化学结构和性质。
实验步骤：
1.新鲜的菠菜叶子切碎后加入乙醇中，浸泡过夜。
2.过滤得到菠菜浸液，加5%的NaCl，搅拌均匀，沉淀后过滤，收集菠菜蛋白，保留上清液。
3.将上清液进行浓缩，得到浓缩液。
4.将浓缩液加入正己烷中，振荡后离心，得到两层液体，上层为绿色菠菜色素，下层为无色的正己烷。
5.倒出上层菠菜色素液，用NaOH溶液调整其PH值，得到纯净的菠菜色素。
实验原理：
菠菜色素是一种叶绿素和类胡萝卜素的混合物，其中叶绿素是绿色的，未成熟的植物中含量较高，而类胡萝卜素是黄色的，成熟的植物中含量较高。
为了提取出纯净的菠菜色素，需要将其与其他杂质分离开来。
在实验中，我们选择了乙醇作为提取菠菜中色素的溶剂，乙醇对叶绿素和类胡萝卜素有较好的溶解作用。
随着浸泡时间的延长，色素的溶解度不断增加。
在分离紫胡萝卜素和叶绿素时，利用了两种色素溶解度不同的特性。
正己烷是一种非极性溶剂，对叶绿素有良好的溶解度，而对紫胡萝卜素的溶解度较差。
因此，在将浓缩菠菜色素液加入正己烷中时，不同色素会分层，方便分离纯净的菠菜色素。
实验注意事项：
1.实验中使用的器材和试剂要洁净干燥，避免杂质污染。
2.提取菠菜中的色素时，要控制乙醇的浓度和浸泡时间，避免色素的损失。
3.在调整菠菜色素液的PH值时，要逐渐加入NaOH溶液，避免PH值过高导致色素分解。
4.实验过程中如有任何异常情况，应及时停止实验并处理。
叶绿体色素的提取与分离实验
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
（一）捕获光能旳色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色旳溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表达加，“—”表达不加。
处理
二氧化硅（少许） 碳酸钙（少许）
95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（1）A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（6）色素分离旳成果：相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
菠菜色素的提取和分离
菠菜色素的提取和色素分离10化学蔡钦辉邝力一、实验目的通过本次试验了解结构决定性质及相似相容性原理，并进一步了解叶绿素、胡萝卜素、叶黄素的极性大小。
二、实验原理绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即a-,β-和γ-胡萝卜素，其中β-异构体含量最多，最重要。
在生物体内，β-体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
本实验从菠菜中提取上述几种色素，并通过薄层层析和柱层析进行分离。
三、仪器试剂仪器：研钵、布氏漏斗、圆底烧瓶、100 mL层析柱试剂：硅胶G 95%的乙醇石油醚（60-90℃）丙酮乙酸乙酯菠菜叶干燥剂饱和食盐水四、实验步骤（1）菠菜色素的提取称取5g洗净后用滤纸吸干的新鲜的菠菜叶，用剪刀剪碎并与20mL甲醇拌匀，在研钵中研磨约5min，然后用布氏漏斗抽滤菠菜汁，弃去滤液。
将菠菜汁放回研钵，每次用20mL3:2 （体积比）的石油醚-乙醇混合液萃取2次，每次需加以研磨并且抽滤，合并深绿色萃取液，转入分液漏斗，每次用10mL盐水洗涤2次，以除去萃取液中的甲醇。
洗涤时要轻轻旋荡，以防止产生乳化。
弃去盐水-乙醇层，石油醚层用无水Na2SO4干燥后滤入圆底烧瓶，在水浴上蒸去大部分石油醚至体积约为1mL为止。
菠菜色素提取实验报告
菠菜色素的提取和色素分离曾丽兰（山西大学化学化工学院山西太原030006）摘要：在用抽滤法提取色素的过程中，由于抽滤时不好控制，非极性溶剂难免会被抽去，且在几次转移中损失较多，程序繁杂．用浸泡法操作简便易行，损失少，产率高。
故在实验中采取了浸泡法提取色素，使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。
薄层层析时使用了石油醚-丙酮=8:2，石油醚-乙酸乙酯=6:4的两种不同展开剂，对比展开效果。
在柱层析时，用不同洗脱剂分离得到不同物质，结果证明石油醚-丙酮=9:1做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。
将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定，检验实验成果。
关键词：菠菜色素；提取；分离;胡萝卜素；紫外光谱测定绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg))，差别仅是a 中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂，也是食用的绿色色素，可用于糕点、饮料水等中，添加于胶姆糖中还可消除口臭。
植物中a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。
胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体α—，β—,和γ—胡萝卜素，其中β—异构体含量最多，也最重要。
生长期较长的绿色植物中，异构体中β—的含量多达90％。
β—具有维生素A的生理活性，其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。
生物体内，β—体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前，β—体可作为维生素A使用，也可作为食品工业的色素，β一胡萝卜素还有防癌功能。
叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，在光合作用中能起收集光能的作用。
在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。
较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
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菠菜色素的提取和色素分离
菠菜色素的提取和色素分离
学号:2009296070
菠菜色素的提取和色素分离
摘要: 利用石油醚，甲醇为萃取剂萃取叶片中的叶绿
素，在薄层层析中时分别在两种不同的展开剂中展开比较展开剂的极性，在柱层析中选用适当的洗脱剂进行层析，当第一个有色成分即将滴出时，取一锥形瓶收集的橙黄色溶液即胡萝卜素，用紫外分光光度计对其进行紫外光谱的测定
关键词: 菠菜色素萃取薄层层析柱层析
引言:绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和
叶黄素（黄）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即
叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其差别仅是a
中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的
络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a的含
量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但大的烃
基结构使它易溶于醚、石油醚等一些非极性的溶剂。
胡萝卜素（C40H56）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，
即a-,β-和γ-胡萝卜素，其中β-异构体含量最多，也最重要。
在
生物体内，β-体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前β-胡萝卜素已
可进行工业生产，可作为维生素A使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油
醚中溶解度较小。
β-胡萝卜素（R = H ） 叶黄素（R = OH ）
维生素A
本实验从菠菜中提取上述几各色素，并通过薄层层析和柱层析进行分离。
1 实验部分 N
N N N H 3C CH
CH 2
R CH 2CH 3CH 3
H 3C O
CO 2CH 3CH 2CH 2
O O CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg
H 3C CH 3R CH 3H 3C R H 3C CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3
H 3C CH 3CH 3CH 2OH
CH 3
CH 3叶绿素a （R = CH ）
1.1材料、仪器设备及试剂
材料：新鲜菠菜叶片。
仪器设备：电子天平（感量0.01g）；研钵；布氏漏斗. ；圆底烧瓶；电热煲；滴管 ; 显微载玻片; 广口瓶; 滤纸; 少量脱脂棉; 层析柱
试剂：95％乙醇, 丙酮,硅胶G，中性氧化铝，甲醇，石油醚（60-90℃），丙酮，乙酸乙酯
1.2 实验流程
1.3操作步骤
1.3.1. 菠菜色素的提取
称取20g洗净后用滤纸吸干的新鲜（或冷冻）的菠菜叶，用剪刀剪碎并与20mL甲醇拌匀，在研钵中研磨约5min然后用布氏漏斗抽滤菠菜汁，弃去滤渣。
将菠菜汁放回研钵，每次用10mL 3:2（体积比）的石油醚-甲醇混合液萃取两次，每次需加以研磨并且抽滤。
合并深绿色萃取液，转入分
液漏斗，每次用10mL水洗涤两次，以除去萃取液中的甲醇。
洗涤时要轻轻旋荡，以防止产生乳化。
弃去水-甲醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥后滤入圆底烧瓶，在水浴上蒸去大部分石油醚至体积约为1mL为止。
1.3.
2. 薄层层析
取四块显微载玻片，用硅胶G加0.5%羧甲基纤维素调制后制板，晾干后在110℃活化1h。
展开剂：（a）石油醚-丙酮=8:2（体积比）
（b）石油醚-乙酸乙酯=6:4（体积比）
取活化后的层析板，点样后，小心放入预先加入选定展开剂的广口瓶内，盖好瓶盖。
待展开剂上升至规定高度时，取出层析板，在空气中晾干，用铅笔做出标记。
分别用展开剂a和b展开，比较不同展开剂系统的展开效果。
观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的Rf值的大小次序。
注意更换展开剂时，须干燥层析瓶。
不允许前一种展开剂进入后一系统
1．3.3. 柱层析
在20 x10cm层析柱中，加15cm高的石油醚。
另取少量脱脂棉，先在小烧杯用石油醚浸湿，挤压以驱除气泡，然后放在层析柱底部，轻轻压紧，塞住底部。
将20g层析用的中性氧化铝（150~160目），从玻璃漏斗中缓缓加入，小心打开柱下活塞，保持石油醚高度不变，流下的氧化铝在柱子中堆积。
必要时用橡皮锤轻轻在层析柱的周围敲击，使吸附剂装得均匀致密。
柱中溶剂面由下端活塞控制，既不能满溢，更不能干涸。
装完后，上面再加一片圆形滤纸，打开下端活塞，放出溶剂，直到氧化铝表面溶剂剩下1~2mm高时关上活塞（注意！在任何情况下，氧化铝表面不得露出液面）。
将上述菠菜色素的浓缩液，用滴管小心地加到层析柱顶部，加完后，打开下端活塞，让液面下降到柱面以上1mm左右，关闭活塞，加数滴石油醚，打开活塞，使液面下降，经几次反复，使色素全部进入柱体。
待色素全部进入柱体后，在柱顶小心加约1.5cm高度洗脱剂—石油醚-丙酮溶液9:1（体积比）。
打开活塞，让洗脱剂逐滴放出，层析即开始进行，用锥形瓶收集。
当第一个有色成分即将滴出时，取另一锥形瓶收集，得橙黄色溶液，它就是胡萝卜素。
用石油醚稀释后，作紫外光谱测定。
用石油醚-丙酮7:3（体积比）作洗脱剂，分出第二个黄色带，它是叶黄素（1）。
再用丁醇-乙醇-水3:1:1（体积比）洗脱叶绿素a（蓝绿色）和叶绿素b（黄绿色）。
1.3.4. 胡萝卜素的紫外光谱测定
将上述柱层析分离的到的橙黄色试样，稀释后加到1cm的比色皿以石油醚作空白试剂，用UV-240紫外分光光度计测定400-600nm范围的吸收
2结果与讨论
2.1胡萝卜素的提取与层析: 制板时板上硅胶厚度要一致，否则将影响色素分离结果。
层析柱高与直径之比一般为7.5：1。
装柱过程中始终保持液面高出固定相。
事先应烘干二个锥形瓶、一个漏斗和一个色谱柱.柱装的不要过紧（流速太慢）和过松（分离不好）。
在提取色素的过程中，因抽滤时石油醚甲醇萃取剂易挥发会损失部分色素，并且在几次转移中损失较多，操作繁杂，用浸泡法操作简便易行，损失少，产率高）
2.2 胡萝卜素的紫外光谱测定结果:
参考文献：
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