菠菜中色素的提取
实验2-菠菜中色素的提取和分离
实验2■菠菜中色素的提取和分离实验2菠菜中色素的提取和分离扬州大学化学化工学院张磊091301223一.实验目的：1 •了解分离与提纯过程在科学研究和生产生活中的应用；2.掌握分离与提纯实验设计的一般思路和方法;3.掌握菠菜中色素提取的原理，步骤和影响因素；二•实验原理：1.叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂中，所以用石油醚、乙醇等能提取色素。
2.本实验选用的是吸附色谱，氧化铝作为吸附剂（极性），色素提取液为吸附液，色素提取液中各成分极性大小为：叶绿素 b （黄绿色）＞叶绿素a （蓝绿色）＞叶黄素（黄色）＞3■类胡萝卜素（橙色）。
3.柱层析法的分离原理是根据物质在氧化铝上的吸附力不同而使各组分分离。
一般情况下极性较大的物质易被吸附，极性较弱的物质不易被吸附，所以由上到下为：叶绿素 b （黄绿色），叶绿素a （蓝绿色），叶黄素（黄色），伕类胡萝卜素（橙色）。
三、实验材料：仪器：研钵、分液漏斗、层析柱（20 x 10 cm），表面皿，普通漏斗，量筒试剂：石油醚、乙醇（95%）、菠菜叶、丙酮（化学纯）、中性氧化铝，无水硫酸钠四、实验步骤与内容【探究：菠菜（或青菜）的I I处理方式】（1）小组讨论处理菠菜的各种方式，然后按照“手撕”，“划几刀，再手撕”，“剪成丁状”，“剪碎后稍加研磨”，“研磨成浆”共五种方式分为五组进行实验，最后确定控制菠菜叶取25克，加入有机溶剂15mL （9mL石油醚+6mL乙醚），浸泡时间取25min为统一条件；（2）开始分组实验，各自处理好各组的菠菜，放置在烧杯中，加入15mL有机溶剂并盖上表面皿浸泡25min。
（3）在浸泡的时间内开始装柱，首先在滴管下口装上橡皮管并夹上弹簧夹（夹紧），在管的出口处放入一小撮棉花，在棉花上放置已剪好的和滴管内径一般大小的圆形滤纸，然后用普通漏斗往里面装入中性氧化铝，最后在氧化铝上再加上和滴管内径一般大小的圆形滤纸，夹在铁架台上备用。
菠菜色素的提取和分离实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告
一、实验目的：
本次实验的主要目的是学习和掌握菠菜色素的提取和分离技术，了解菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
二、实验方法：
1、制备样品：将新鲜的菠菜叶片洗净晾干，切碎成小块备用；
2、提取菠菜色素：将切碎的菠菜叶片加入适量无水乙醇，研
磨成泥状物，过滤后取得浸提液；
3、进一步提取：将浸提液过滤并再次提取，过滤得到过滤液；
4、分离：将过滤液使用氯仿进行分离，水相和氯仿相层的色
素分离；
5、测定：将得到的色素溶于适量乙醇，测定菠菜色素的吸光度。
三、实验结果：
经过提取和分离，得到了深绿色的液体，与纯菠菜色素溶液比
较后发现两者颜色相似。
测定得到吸光度为0.54。
四、实验分析：
本次实验成功提取和分离了菠菜色素，并得到了较为准确的测定值。
在实验中，氯仿和无水乙醇是常用的有机溶剂，主要是因为在这些溶剂中菠菜色素的溶解度较高。
但是，在实验操作过程中需要注意保持实验环境的卫生和安全，氯仿是一种易挥发的有机物，需要注意防火和防烟。
五、实验结论：
通过本次实验，我们成功地提取和分离了菠菜色素，并且得到了较为准确的测定值。
同时，我们也了解了菠菜中色素的提取和分离原理以及实验操作过程。
本次实验的成功对于今后相关实验研究以及实际应用具有一定的指导意义。
菠菜色素的提取和分离实验报告
菠菜色素的提取和分离实验报告菠菜色素的提取和分离实验报告引言：菠菜是一种常见的绿叶蔬菜，富含多种营养物质，其中包括一种被称为菠菜色素的成分。
菠菜色素是一类天然的色素，具有良好的生物活性和抗氧化性质。
本实验旨在通过提取和分离的方法，研究菠菜色素的性质和应用。
实验材料和方法：材料：新鲜菠菜叶片、无水乙醇、丙酮、石油醚、二氯甲烷、硅胶G柱、色谱柱、色谱试纸等。
方法：1. 取适量新鲜菠菜叶片，洗净并切碎成细末状。
2. 将菠菜末置于研钵中，加入适量无水乙醇，浸泡30分钟，搅拌均匀。
3. 将菠菜浸提液过滤，收集滤液。
4. 取少量滤液，加入石油醚，振荡混合，使菠菜色素溶于石油醚中。
5. 将石油醚层收集，加入少量无水乙醇，使溶液变为淡绿色。
6. 将淡绿色溶液倒入色谱柱中，以无水乙醇为洗脱剂，收集洗脱液。
7. 将洗脱液浓缩，得到菠菜色素。
实验结果和讨论：通过以上实验步骤，我们成功地从菠菜中提取和分离出了菠菜色素。
在实验过程中，我们使用了无水乙醇作为提取剂，因为乙醇能够有效溶解菠菜中的色素成分。
同时，我们使用石油醚作为分离剂，因为石油醚能够与菠菜色素发生亲和作用，使其溶于石油醚中。
在分离过程中，我们使用了色谱柱和色谱试纸进行分离和检测。
色谱柱是一种常见的分离工具，通过其内部填充的固定相材料，能够将混合物中的成分按照其亲和性和分子大小进行分离。
我们选择了硅胶G柱作为固定相材料，因为硅胶G柱对菠菜色素具有较好的亲和性。
通过使用无水乙醇作为洗脱剂，我们成功地将菠菜色素从硅胶G柱中洗脱出来。
在实验中，我们观察到菠菜色素呈现淡绿色。
这是因为菠菜色素主要由叶绿素和类胡萝卜素等成分组成，这些成分赋予了菠菜独特的颜色。
叶绿素是一种绿色的色素，具有光合作用的功能。
类胡萝卜素则是一类黄、橙、红等颜色的色素，具有抗氧化和免疫调节等作用。
菠菜色素不仅在食品工业中有广泛应用，还在医药和化妆品等领域发挥着重要作用。
菠菜色素富含抗氧化物质，能够有效清除自由基，延缓衰老和预防疾病。
菠菜中色素的提取分离和鉴定(有机化学实验)
菠菜中的色素提取、分离及鉴定一、实验目的1.进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用2.了解菠菜中主要色素的基本性质，通过菠菜色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法及原理3.掌握用紫外光谱和荧光光谱鉴别菠菜中色素的原理及方法二、菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分,如叶绿素（绿色）、胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C 55 H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素 b(C 55H 7O 6N 4Mg)，结构见图1。
二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但分子中大的烷基结构使它易溶于丙酮,乙醇,乙醚,石油醚等有机溶剂。
胡萝卜素（ C 40H 56 ）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素，其中β - 异构体含量最多，也最重要。
在生物体内，β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。
目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素 A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（ C40H56O2 ）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与β - 胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。
N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3C OCO 2CH 3CH 2CH 2OOCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a 和叶绿素b 的结构（叶绿素a ：R=CH 3， 叶绿素b ：R=CHO ）H 3C CH 3RCH 3H 3CH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素和叶黄素的结构（β-胡萝卜素:R =H ， 叶黄素: R = OH ） 菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
菠菜叶中色素的提取实验报告
菠菜叶中色素的提取实验报告一、实验目的1、了解菠菜叶中所含色素的种类和化学性质。
2、掌握从菠菜叶中提取和分离色素的实验方法。
3、学习使用分光光度计测定色素溶液的吸光度。
二、实验原理菠菜叶中含有多种色素，如叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。
这些色素在有机溶剂中的溶解度不同，因此可以通过萃取的方法将它们分离出来。
叶绿素 a 和叶绿素 b 为吡咯衍生物，可溶于有机溶剂，如乙醇、丙酮等。
叶绿素 a 为蓝绿色，叶绿素 b 为黄绿色。
叶黄素和胡萝卜素属于类胡萝卜素，叶黄素为黄色，胡萝卜素为橙黄色，它们也能溶于有机溶剂。
根据不同色素在层析液中的溶解度不同，在层析过程中，溶解度大的色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度小的色素扩散得慢，从而将不同的色素分离开来。
三、实验材料与仪器1、材料：新鲜菠菜叶2、仪器：研钵、漏斗、玻璃棒、分液漏斗、容量瓶、分光光度计、滤纸、脱脂棉等。
3、试剂：无水乙醇、石油醚、丙酮、层析液（石油醚：丙酮＝9:1）四、实验步骤1、提取色素称取 5g 新鲜菠菜叶，剪碎后放入研钵中，加入 5mL 无水乙醇、少许碳酸钙和石英砂，充分研磨成匀浆。
将研磨好的匀浆用漏斗过滤到分液漏斗中，用 5mL 无水乙醇冲洗研钵和漏斗，将滤液合并到分液漏斗中。
轻轻振摇分液漏斗，静置分层，放出下层的水相，保留有机相。
2、制备色素溶液将有机相转移到容量瓶中，用无水乙醇定容至 25mL，得到色素提取液。
3、色素的分离取一块干燥的滤纸，剪成 15cm×3cm 的长条，在一端剪去两角，在距离剪角一端 1cm 处用铅笔轻轻画一条横线。
用毛细吸管吸取少量色素提取液，在铅笔线处点样，每次点样后吹干，重复多次，使点样处形成一条细而直的色素线。
将点样好的滤纸放入装有层析液的层析缸中，层析液液面不能超过滤纸的铅笔线。
盖上盖子，进行层析。
当层析液前沿接近滤纸的上端边缘时，取出滤纸，用铅笔标记出色素带的位置。
4、色素的鉴定用分光光度计分别测定叶绿素 a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素溶液在不同波长下的吸光度，绘制吸光度波长曲线，确定最大吸收波长。
菠菜色素的提取与分离(实验方案)
菠菜色素的提取与分离(实验方案)
菠菜色素是一种天然的色素，在食品、药品和化妆品等领域得到广泛应用。
本实验旨在通过提取和分离菠菜中的色素，探索其化学结构和性质。
实验步骤：
1.新鲜的菠菜叶子切碎后加入乙醇中，浸泡过夜。
2.过滤得到菠菜浸液，加5%的NaCl，搅拌均匀，沉淀后过滤，收集菠菜蛋白，保留上清液。
3.将上清液进行浓缩，得到浓缩液。
4.将浓缩液加入正己烷中，振荡后离心，得到两层液体，上层为绿色菠菜色素，下层为无色的正己烷。
5.倒出上层菠菜色素液，用NaOH溶液调整其PH值，得到纯净的菠菜色素。
实验原理：
菠菜色素是一种叶绿素和类胡萝卜素的混合物，其中叶绿素是绿色的，未成熟的植物中含量较高，而类胡萝卜素是黄色的，成熟的植物中含量较高。
为了提取出纯净的菠菜色素，需要将其与其他杂质分离开来。
在实验中，我们选择了乙醇作为提取菠菜中色素的溶剂，乙醇对叶绿素和类胡萝卜素有较好的溶解作用。
随着浸泡时间的延长，色素的溶解度不断增加。
在分离紫胡萝卜素和叶绿素时，利用了两种色素溶解度不同的特性。
正己烷是一种非极性溶剂，对叶绿素有良好的溶解度，而对紫胡萝卜素的溶解度较差。
因此，在将浓缩菠菜色素液加入正己烷中时，不同色素会分层，方便分离纯净的菠菜色素。
实验注意事项：
1.实验中使用的器材和试剂要洁净干燥，避免杂质污染。
2.提取菠菜中的色素时，要控制乙醇的浓度和浸泡时间，避免色素的损失。
3.在调整菠菜色素液的PH值时，要逐渐加入NaOH溶液，避免PH值过高导致色素分解。
4.实验过程中如有任何异常情况，应及时停止实验并处理。
菠菜中色素的提取分离和鉴定(有机化学实验)
菠菜中的色素提取、分离及鉴定一、实验目的1.进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用2.了解菠菜中主要色素的基本性质，通过菠菜色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法及原理3.掌握用紫外光谱和荧光光谱鉴别菠菜中色素的原理及方法二、菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分,如叶绿素（绿色）、胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素 a(C 55 H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素 b(C 55H 7O 6N 4Mg)，结构见图1。
二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
植物中叶绿素a 的含量通常是b 的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团，但分子中大的烷基结构使它易溶于丙酮,乙醇,乙醚,石油醚等有机溶剂。
胡萝卜素（ C 40H 56 ）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素，其中β - 异构体含量最多，也最重要。
在生物体内，β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。
目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素 A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（ C40H56O2 ）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与β - 胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。
N N NNH 3CCHCH 2RCH 2CH 3CH 3H 3C OCO 2CH 3CH 2CH 2OOCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg叶绿素a 和叶绿素b 的结构（叶绿素a ：R=CH 3， 叶绿素b ：R=CHO ）H 3C CH 3RCH 3H 3CRH 3CCH 3CH 3CH 3CH 3CH 3β-胡萝卜素和叶黄素的结构（β-胡萝卜素:R =H ， 叶黄素: R = OH ） 菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
菠菜中色素的提取
菠菜中色素的提取及分离赵涛食品科学一实验目的1 通过绿色植物色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法2 了解薄层色谱的基本原理，掌握薄层色谱的基本操作3 了解柱层析的基本原理，掌握柱层析的基本操作二实验原理菠菜的叶片中含有叶绿素（包括叶绿素a和叶绿素b）、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。
叶绿素是绿色植物的主要色素，分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。
高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b 共存，它们的含量约3：1，叶绿素a为一蓝黑色固体粉末，在乙醇溶液中为蓝绿色，并有深红色荧光，而叶绿素b为暗绿色固体粉末，其乙醇溶液为黄绿色，并有红色荧光。
叶绿素不溶于水，易溶于有机溶剂，常可用极性有机溶剂（例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等）从植物匀浆中提取它。
叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中，与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起，分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。
叶绿素a和叶绿素b及衍生物在600~700mm（红光）和400~500mm （蓝光）有尖锐的吸收峰，可借助这一特性来鉴定它们。
游离叶绿素很不稳定，对光和热都较敏感。
胡萝卜素是一种橙色的天然色素，属于四萜，为一长链共轭多烯，有α、β、γ三种异构体，，其中β异构体最多。
在植物组织中，它们可能以固态微粒或者以与蛋白质、脂质、或者糖类复合的形式存在，特别是在有色体中存在。
其为典型的脂溶性色素，易溶于石油醚，、乙醚而难溶于乙醇。
如遇氧化条件，易受氧化和光化学氧化形成加氧产物或者进一步分解为更小的分子，在受强热时可分解为多种挥发性小分子化合物。
叶黄素是一种黄色色素，与叶绿素同存在与植物体内，是胡萝卜素的羟基衍生物，较易溶于乙醇，在石油醚中溶解度较小。
色素所呈现的颜色和在叶绿体中的含量见下表：高等植物体内叶绿体色素的种类、颜色及含量比例项目叶绿素类胡萝卜素叶绿素a 叶绿素b β-胡萝卜素叶黄素颜色蓝绿色黄绿色橙黄色黄叶绿体内各色素的含量56 19 17 8色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。
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学生姓名： 学号： 专业班级：
实验类型：□验证■综合□设计□创新 实验日期： 实验地点： 同组学生姓名： 指导教师： 实验成绩：
一．实验名称：菠菜中的色素提取、分离及鉴定 二．实验目的：
进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用；加强有机物分离提纯技术的训练。
三．实验原理：
薄层色谱是在玻片上涂布固体吸附剂，利用样品对固体吸附剂的吸附能力不同，选择对样品溶解（解附）能力不同的溶剂，将混合物各成分按照极性大小不同随溶剂前进速度不同而分开的方法。
应用：薄层色谱可以用来分离、鉴别化合物，也可以用于跟踪反应进程。
Rf 值与分子结构的关系
Rf =
溶剂移动的距离
溶质移动的距离
展开剂的极性越大，则极性物质的Rf 值比较大，而非极性物质的Rf 值就较小；反之，展开剂的极性越小，则极性物质的Rf 值较小，非极性物质的Rf 值则较大
四．仪器和试剂：
主要仪器：研钵、烧杯、分液漏斗、锥形瓶、毛细管、展开槽、硅胶板等
主要试剂：5g 菠菜、石油醚、乙醇、丙酮、饱和NaCl 溶液、硅胶G 、羧甲基纤维素、无水42SO Na . 五．试剂物理常数：
试剂及产物
化学式 熔点 溶解性 外观及性状
叶绿素a
C 55 H 72O 5N 4Mg
117～120℃ 溶于乙醇、乙醚、丙酮、氯仿、二
硫化碳和苯,不溶于石油醚 蜡状蓝黑色微小晶体 叶绿素b C 55H 7O 6N 4Mg
20～130℃ 溶于乙醇和乙醚，难溶于石油醚 蜡状蓝黑色微小晶体 叶黄素
25640O H C
183℃
溶于油性溶剂
以乙醚加甲醇精制，得
黄色穗状物,具金属光泽的结晶 胡萝卜素β
5640H C
181℃ 溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚
红棕色结晶
学生姓名： 学号： 专业班级：
实验类型：□验证■综合□设计□创新 实验日期： 实验地点： 同组学生姓名： 指导教师： 实验成绩：
N N N
N
H 3C
CH
CH 2R
CH 2CH 3
CH 3H 3C O
CO 2CH 3
CH 2CH 2O
O
CH 3CH 3
CH 3
CH 3
CH 3
Mg
H 3C CH 3
R
CH 3
H 3C
R
H 3C
CH 3
CH 3CH 3
CH 3CH 3
叶绿素a 和叶绿素b 的结构 β-胡萝卜素和叶黄素的结构（β-胡萝卜素:R =H ，叶黄素: R = OH ） （叶绿素a ：R=CH 3， 叶绿素b ：R=CHO ）
六．实验流程
菠菜叶
碾磨
石油醚和乙醇混合物转移至分液漏斗溶液饱和NaCl 次水洗涤2浓缩干燥
色素混合物
薄层色谱分离分离脱附
色素
七．实验步骤
（1）叶绿素提取 在研钵中放入5 g 新鲜的菠菜叶，加入10 mL2：1(体积比)石油醚—乙醇混合液，适当研磨。
用倾析法将提取液转移到分液漏斗中，向提取液中加入10mL 饱和 NaCl 溶液( 防止乳化）。
用
水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
弃去水乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥，干燥后的液体倾至另一锥形瓶（如颜色太浅，可蒸发浓缩）。
（2）点样 用一内径1mm 的毛细管，吸取适量提取液，轻点在距薄板一端1cm 处平行点两点，两点距1cm 。
若一次不够可点第二次，但点样斑点直径不超过2mm 。
（3）展开 将上述预制板小心放入预先加好选定展开剂石油醚-丙酮（2：1）的展开槽中，先加盖是缸内蒸汽饱和10min ，再将薄层板斜靠于槽内壁，样点不能浸没在展开剂中。
用玻璃皿盖好，待展开剂上升至规定高度时，取出层析板在空气中晾干，用铅笔做出标记，进行观察并计算比移值。
八．实验结果
学生姓名： 学号： 专业班级：
实验类型：□验证■综合□设计□创新 实验日期： 实验地点： 同组学生姓名： 指导教师： 实验成绩：
板长7.5cm
由各组分的Rf 值的不同可以看出不同成分的极性。
以硅胶板为吸附剂Rf 值越小，样品与固体吸附剂吸附越紧，即样品与固体吸附剂分子间作用力越大，说明样品极性越强或分子量越大。
由上表中的数据可看出胡萝卜素的极性最小，依次是叶绿素a ，叶绿素b ，叶黄素的极性最大，该结果符合实际结果。
九．实验小结：
通过本次实验我了解了薄层色谱在有机物分离中的应用，熟悉和掌握薄层色谱的原理及应用；加强有机物分离提纯技术的训练。
了解了Rf 值在测定物质极性中的作用。
在一定的色谱条件下，特定化合物的Rf 值是一个常数，因此有可能根据化合物的Rf 值鉴定化合物。
根据不同色素的极性不同我们可以用不同的溶剂去提取分离，如根据相似相溶原理，我们用极性较大的溶剂去提取胡萝卜素，用极性较小的溶剂去提取叶黄素等。
内容 距板一端距离 Rf 值 起始线
1.1cm
无 黄色（叶黄素和其他色素）
2.7cm 0.258
黄绿色（叶绿素b ） 3.2cm 0.339
蓝绿色（叶绿素a ） 3.4cm 0.371 灰色（脱镁叶绿素） 4.0cm 0.468 黄色（胡萝卜素） 6.5cm 0.871 溶剂前沿
7.3cm
无。