药物中特殊杂质的检查

药物中特殊杂质的检查

一、目的要求

1．掌握阿司匹林片、盐酸普鲁卡因注射液、盐酸四环素片中特殊杂质检查的基本原理和方法；

2．掌握薄层色谱法在药物杂质检查中的应用；

3．掌握薄层色谱法的基本操作；

4. 掌握检验结果的处理与判断，能够规范书写检验原始记录及检验报告书；

5. 正确并更科学合理地解释检验中的现象，处理检验中的异常情况。

二、试剂与仪器

1．试剂（查阅《中国药典》，进行所用试剂的配制）

2. 仪器

纳氏比色管、玻璃板（5×15cm）、全自动点样器、层析缸、可见分光光度计

三、实验步骤

（一）阿司匹林肠溶片中游离水杨酸的检查

取本品5片，研细，用乙醇30mL分次研磨，并移入100mL量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即过滤，精密量取滤液2mL，置50mL纳氏比色管中，用水稀释至50mL，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液（取1mol/L盐酸溶液1mL，加硫酸铁铵指示液2mL后再加水使成100mL）3mL，摇匀，30秒钟内如显色，与对照液（精密量取0.01%水杨酸溶液4.5mL，加乙醇3mL，0.05%酒石酸溶液1mL，用水稀释至50mL，再加上述新配制的稀硫酸铁铵溶液3mL，摇匀）比较，不得更深。

（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查

薄层板的制备：取硅胶H2.5g，加0.5%羧甲基纤维素钠水溶液5.5～6mL调成糊状，均匀涂布于光滑、平整、洁净的玻璃板（5×15cm）上，置水平台上晾干，在110℃烘0.5小时，置干燥器备用。

操作：精密量取本品，加乙醇稀释使成每1mL中含盐酸普鲁卡因2.5mg的溶液，作为供试品溶液。另取对氨基苯甲酸对照品，加乙醇制成每1mL中含30μg 的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各10微升，分别点样于同一羧甲

基纤维素钠为粘合剂的硅胶H薄层板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：14）为展开剂，展开后，取出，晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液（2%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100mL，加入冰醋酸5mL制成）喷雾显色，供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不得更深。

（三）盐酸四环素片中光吸收杂质的检查（可见分光光度法）

取本品5片，研细，加0.01mol/LHCl制成1mL含1.25mg（按标示量计算）的溶液，滤过，弃去初滤液，取续滤液，在1h内，照分光光度法，在430nm波长处测定，其吸收度不得过0.62。

四、说明

1.水杨酸与三氯化铁试液作用显紫堇色，其反应方程式为：

2．盐酸普鲁卡因、对氨基苯甲酸在酸性条件下可与对氨基醛缩合而呈色，其反应为：

五、思考题

1．简要说明以上杂质检查项目的原理和方法。

2．简要说明薄层色谱法在药物杂质检查中的应用。

3．试计算阿司匹林游离水杨酸的限量、盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的限量。