lb培养基的配置实验方案
LB配料
实验室常用培养基的配制方法Ampicillin (100 mg/ml)IPTG(24 mg/ml)X-Gal (20 mg/ml)LB 培养基■ 组份浓度100 mg/ml Ampicillin■ 配制量50 ml■ 配制方法 1. 称量5 g Ampicillin 置于50 ml 离心管中。
2. 加入40 ml 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3. 用0.22 μm 滤器过滤除菌。
4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。
■ 组份浓度24 mg/ml IPTG■ 配制量50 ml■ 配制方法 1. 称量1.2 g IPTG 置于50 ml 离心管中。
2. 加入40 ml 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。
3. 用0.22 μm 滤器过滤除菌。
4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。
■ 组份浓度20 mg/ml X-Gal■ 配制量50 ml■ 配制方法 1. 称量1 g X-Gal 置于50 ml 离心管中。
2. 加入40 ml DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50 ml。
3. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃避光保存。
■ 组份浓度1%（W/V）Tryptone，0.5%（W/V）Yeast Extract，1%（W/V）NaCl■ 配制量 1 L■ 配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L 烧杯中。
Tryptone 10 gYeast Extract 5 gNaCl 10 g2. 加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml），调节pH 值至7.0。
4. 加去离子水将培养基定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，4℃保存。
TB 培养基0.5%（W/V）Yeast Extract1%（W/V）NaCl0.1 mg/ml Ampicillin■ 配制量 1 L■ 配制方法 1. 称取下列试剂，置于1 L 烧杯中。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制之袁州冬雪创作LB一般被诠释为Luria-Bertani，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来历于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤.LB培养基是近些年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，稀释干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、动力、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝结剂.琼脂在常常使用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝结，通常不被微生物分解操纵.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素，琼脂凝结点为40℃，所以添加抗生素最好在50～55℃.LB培养基用途：用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理：蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持平衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝结剂.LB培养基配制方法配制每升培养基，应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀.3.倒板：一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟.4.保管：用封口胶封边，并倒置放于4℃保管，一个月内使用. 配400ml的话成分按比例减少就好了，pH还是要按规定的.。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制LB一般被解释为Luria-Bertani，然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤。
LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基之一。
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。
酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料。
胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。
酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌。
LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌。
有时需在培养基中添加抗生素，琼脂凝固点为40℃，所以添加抗生素最好在50～55℃。
LB培养基用途：用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。
LB培养基使用原理：蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。
lb培养基配方
lb培养基配方LB培养基是由Bertani于1951年开发的一种常用的培养基。
它是一种富含营养物质的培养基，适用于多种细菌的生长和培养。
LB培养基常被用于细菌的培养和研究中，提供了细菌生长所需的营养物质和能量来源。
下面是LB培养基的配方和制备方法。
配方如下：1. 十氯酸钾（KClO₃）：0.05 g/L2. 酵母浸粉（Yeast extract）：5 g/L3. 蛋白胨（Peptone）：10 g/L4. 氯化钠（NaCl）：10 g/L5. 水：适量制备方法：1. 将酵母浸粉、蛋白胨和氯化钠加入适量的水中，搅拌溶解。
2. 加入十氯酸钾，继续搅拌混合。
3. 将溶液加热至沸腾，然后冷却至室温。
4. 调整溶液的pH值为7.0（如果需要）。
5. 用适当的容器（如试管或烧杯）装载培养基，然后用自动灭菌器（如高压灭菌器）进行灭菌。
注意事项：1. 在制备培养基时，要注意实验室卫生和操作规范，避免污染和交叉感染。
2. 使用无菌的工具和容器，避免微生物的污染。
3. 制备后的培养基应保持在适当的温度和环境条件下，以确保细菌的生长。
4. 若长时间存储，建议将培养基分装于适当的容器中，并密封保存在低温（如4℃）的冰箱中。
总结：LB培养基是一种简单易制备、适用范围广的细菌培养基，提供了细菌所需的营养物质和环境。
其配方简单，制备方法方便，常被广泛应用于生物学研究和实验室中的细菌培养。
请注意，以上为LB培养基的一般配方和制备方法，具体使用时还需根据实验需要进行调整和优化。
同时，个人在实验室操作时应遵循相关的实验安全规范和操作规程，确保实验的顺利进行。
lb培养基的配置流程
lb培养基的配置流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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以下是 LB 培养基的配置流程：一、实验材料1. 胰蛋白胨（Tryptone）2. 酵母提取物（Yeast Extract）3. NaCl4. 琼脂粉（Agar）5. 蒸馏水6. 1mol/L NaOH7. 1mol/L HCl8. 培养皿9. 三角瓶10. 移液器11. 电子天平12. 高压灭菌锅二、实验步骤1. 称量根据配方，称取所需量的胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl，放入三角瓶中。
lb培养液的配制
如对您有帮助，请购买打赏，谢谢您！1．称量：准确称取各成分。
蛋白胨0.5g，酵母提取物0.25g，氯化钠0.5g，加水50ml。
配置LB固体培养基时还需加1g琼脂。
2．溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到50mL。
配置LB固体培养基时还需加琼脂，整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
3．调pH：用1mol/L NaOH溶液调节pH至偏碱性。
4．灭菌：在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基，加上棉塞。
将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅内，1kg压力灭菌15min。
5．倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。
向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。
否则，空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。
三、灭菌和消毒1．无菌技术：①对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；②将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰旁进行；④避免已灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2．消毒方法：①日常生活经常用到的是煮沸消毒法；②对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法；③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒；④实验操作者的双手使用酒精进行消毒。
3．灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅；③表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制之五兆芳芳创作LB一般被解释为Luria-Bertani，然而按照其创造人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法，这个名字来源于英语lysogeny broth，即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最普遍和最普通的细菌根本培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl.酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小份子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，普遍用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化蛋白胨：一种优质蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩枯燥而成的白色粉末，含有丰厚的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长情况(如渗透压)，其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要参加一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在滚水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分化利用.固体培养基中琼脂的含量按照琼脂的质量和蔼温的不合而有所不合.由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁衍.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化蛋白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0，121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素，琼脂凝固点为40℃，所以添加抗生素最好在50～55℃.LB培养基用途：用于一般细菌培养，特别用于份子生物学试验中大肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理：蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制办法配制每升培养基，应该在950 ml去液态lb培养基离子水中参加：胰化蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的参加：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时(手可触摸)参加抗生素，以免温度太高导致抗生素失效，并充分摇匀.3.倒板：一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟.4.保管：用封口胶封边，并倒置放于4℃保管，一个月内使用. 配400ml的话成分按比例削减就行了，pH仍是要按规则的.。
LB培养基怎样配制
LB培养基怎样配制之马矢奏春创作LB一般被解释为Luria-Bertani, 然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法, 这个名字来源于英语lysogeny broth, 即溶菌肉汤.LB培养基是近年来用于培养基因工程受体菌(年夜肠杆菌)的经常使用培养基之一.LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基, 有时又称普通培养基, 含有酵母提取物、胰化卵白胨和NaCl.酵母提取物：酵母经破壁后将其中卵白质、核酸、维生素等抽提, 再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成份的淡黄色粉末, 其中氨基酸含量30%以上, 总卵白50%以上, 核苷酸10%以上, 广泛用作生物培养基和食品调味品制造原料.胰化卵白胨：一种优质卵白胨, 是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化, 浓缩干燥而成的白色粉末, 含有丰富的氮源、氨基酸等.酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;卵白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压), 其次是提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在经常使用浓度下96℃时溶化, 一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化.琼脂在40℃时凝固, 通常不被微生物分解利用.固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的分歧而有所分歧.由于这种培养基多用于培养细菌, 因此, 要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性, 以利于细菌的生长繁殖.LB培养基配方(每升)酵母提取物 5g胰化卵白胨 10g氯化钠 10gNaOH调pH至7.0, 121℃、20min高压灭菌.LB固体培养基LB培养基 1L琼脂粉 15gNaOH调pH至7.0, 121℃、20min高压灭菌.有时需在培养基中添加抗生素, 琼脂凝固点为40℃, 所以添加抗生素最好在50～55℃.LB培养基用途：用于一般细菌培养, 特别用于分子生物学试验中年夜肠杆菌的保管和培养.LB培养基使用原理：卵白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂.LB培养基配制方法配制每升培养基, 应该在950 ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化卵白胨10g 酵母提取物5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.2.抗生素的加入：高压灭菌后, 将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中, 待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素, 以免温渡过高招致抗生素失效, 并充沛摇匀.3.倒板：一般10ml倒1个板子.培养基倒入培养皿后, 翻开盖子, 在紫外下照10-15分钟.4.保管：用封口胶封边, 并颠倒放于4℃保管, 一个月内使用. 配400ml的话成份按比例减少就行了, pH还是要按规定的.。
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实验LB培养基的配置
一、实验目的
明确培养基配置原理
通过对LB培养基的配置，掌握配置培养的一般方法
二、实验原理
LB培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。
其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖。
LB培养基的配方如下：
酵母提取物5g 蛋白胨10g
NaCl 5g 琼脂15～20g
水1000mL pH 7.4～7.6
三、实验设备
试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH试纸（pH 5.5～9.0），棉花，牛皮纸，记号笔，
麻绳，纱布等。
四、实验试剂
酵母提取物，蛋白胨，NaCl，琼脂；
1mol/L NaOH，1mol/L HCl；
五、操作步骤
1．称量
按培养基配方比例依次准确地称取酵母提取物、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。
蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。
另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3．调pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH 偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7.6。
反之，则用1mol/L HCl 进行调节。
注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物，其pH的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）。
4．分装
按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面，分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
5．加塞
培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能。
6．包扎
加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
7．灭菌
将上述培养基以1.05kg/cm2（15磅/英寸2），121.3℃，20分钟高压蒸汽灭菌。
如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。
8．搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
9．无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24～48小时，以检查灭菌是否彻底。