电泳检测方法20090924
电泳的正确操作方法
电泳的正确操作方法
电泳是一种实验方法，用于分离和定量DNA、RNA或蛋白质的分子根据其大小和电荷的不同。
以下是电泳的正确操作方法：
1. 准备电泳仪和电泳槽：先确认电泳仪和电源正常工作。
将电泳槽插入电泳仪中，并加入足够的电泳缓冲液，注意不要漏电。
2. 准备样品：将待分离的DNA、RNA或蛋白质样品与适当的加载缓冲液混合，使其浓度适合电泳分离。
3. 加载样品：将混合好的样品缓冲液注入电泳槽的样品孔中，同时注意记录每个孔中的样品。
4. 设置电场：将电泳槽连接到电源上，并设置合适的电场强度和时间。
在DNA 或RNA的分离中，通常使用直流电场，而在蛋白质的分离中，则使用交流电场。
5. 开始电泳：打开电源，开始电泳过程。
根据样品的预期分离时间，进行所需的电泳时间。
6. 分析结果：电泳结束后，关闭电源，将电泳槽取下。
将凝胶置于透明平台上，使用紫外线照射仪或其他合适的方法来观察分离结果。
根据带有标记的参考标准来确定目标分子的位置。
7. 数据处理：根据分离结果进行定量分析和数据处理工作，比如测量分子大小或浓度。
需要注意的是，电泳操作中应遵守实验室安全规定，避免电源和设备的误操作或短路。
此外，根据不同的实验目的和样品特点，还可能需要进行染色、转移或其他进一步的处理步骤。
因此，在进行电泳实验前，最好参考相关的实验方法和操作手册，以确保正确操作。
电泳分析常用方法
电泳分析常用方法（一）醋酸纤维素薄膜电泳醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。
由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。
这种薄膜对蛋白质样品吸附性小，几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象，又因为膜的亲水性比较小，它所容纳的缓冲液也少，电泳时电流的大部分由样品传导，所以分离速度快，电泳时间短，样品用量少，5靏的蛋白质可得到满意的分离效果。
因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。
醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。
⒈材料与试剂醋酸纤维素膜一般使用市售商品，常用的电泳缓冲液为pH8.6的巴比妥缓冲液，浓度在0.05-0.09mol/L。
⒉操作要点⑴膜的预处理：必须于电泳前将膜片浸泡于缓冲液，浸透后，取出膜片并用滤纸吸去多余的缓冲液，不可吸得过干。
⑵加样：样品用量依样品浓度、本身性质、染色方法及检测方法等因素决定。
对血清蛋白质的常规电泳分析，每cm加样线不超过1靗，相当于60-80靏的蛋白质。
⑶电泳：可在室温下进行。
电压为25V/cm，电流为0.4-0.6mA/cm宽。
⑷染色：一般蛋白质染色常使用氨基黑和丽春红，糖蛋白用甲苯胺蓝或过碘酸-Schiff试剂，脂蛋白则用苏丹黑或品红亚硫酸染色。
⑸脱色与透明：对水溶性染料最普遍应用的脱色剂是5％醋酸水溶液。
为了长期保存或进行光吸收扫描测定，可浸入冰醋酸：无水乙醇＝30:70（V/V）的透明液中。
（二）凝胶电泳以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。
其中聚丙烯酰胺凝胶电泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子的核酸。
琼脂糖凝胶孔径较大，对一般蛋白质不起分子筛作用，但适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸等应用较广，介绍如下：⒈琼脂糖凝胶电泳的原理概述琼脂糖是由琼脂分离制备的链状多糖。
电泳检测
3. 实验原理 琼脂糖凝胶电泳对核酸的分离作用：主要是 依据它们的相对分子量质量及分子构型，同 时与凝胶的浓度也有密切关系。 ①在凝胶中，DNA片段迁移距离（迁移率） 与碱基对的对数成反比； ②不同大小的DNA需要用不同浓度的琼脂糖 凝胶进行电泳分离； ③ 不同构型DNA的移动速度次序为：供价闭 环DNA > 直线DNA >开环的双链环状DNA。
样品准备： 取已提取好的质粒DNA 5l，加入1l的加样 缓冲液，混匀； DNA样应该加在“+”极还是“-”极? 电泳： 将样品和5l 标准分子质量分别点样到梳孔中 恒压100v，电泳30-60分钟左右； 电泳结束后关闭电源，取出凝胶； 用凝胶成像仪进行摄影和记录。 电泳开始后,如何判断电泳糖于100ml烧杯中加入20mltae加热熔化至无颗粒状琼脂糖冷却到60左右加入glodview终浓度05gml摇匀即倒入预先架好梳子的胶模中凝固30min以上
实验三
质粒的电泳检测
实验目的 学习并掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的技 术 2. 实验材料 试剂：琼脂糖、TAE缓冲液、加样缓冲液、 Glodview*、标准分子量Marker 器材： 电泳仪、稳压电源、凝胶电泳成像 仪等
4. 实验步骤 制胶： ① 称取 0.2g 的琼脂糖于100ml烧杯中， 加入20mlTAE，加热熔化至无颗粒状琼脂 糖，冷却到60℃左右加入Glodview （终浓 度0.5g/ml），摇匀，即倒入预先架好梳子 的胶模中，凝固30min以上； ② 将凝胶放入电泳槽中，倒入适量的电 泳缓冲液TAE（淹过胶面），拔取梳子备 用。
1.
琼脂糖凝胶的特点
组成：主要由琼脂糖（agarose，约占80%） 及琼脂胶（agaropectin）组成。 琼脂糖凝胶通常采用水平装置在强度和方向 恒定的电场下电泳。直接用低浓度的荧光嵌 入染料“溴化乙锭”进行染色，可确定DNA 在凝胶中的位置。 琼脂糖凝胶电泳是分离、鉴定和纯化DNA片 段的有效方法。该方法具有操作方便，设备 简单，需样品量少，分辨能力高等特点。
电泳件的检验标准
;
.' 电泳件的检验标准
一、适用范围
公司所有电泳件
二、外观检查
电泳后的表面应无颗粒、疙瘩、陷穴、缩孔、针孔、水滴迹、斑痕、夹杂异物、挂流、不匀、粗糙、露底、剥落等缺陷
三、泳层厚度
泳层厚度在10-18µm
四、泳层附着力
（1）用划格法测定：即以1mm间距进行划100方格检验，划格力度深达底材，然后用3M胶布贴上，瞬间用力拉开，不得脱落20/100 （2）用圆滚线划痕法测定：用附着力测定仪测定，不低于GB/T1720中的5级。
五、泳层硬度
涂层用犁耕法测定：即以2H铅笔将笔芯前端切齐，铅笔与待测物成45度推出，表面无划痕。
六、泳层耐蚀性
电泳件要求24小时或48小时的中性实验，实验后试样的边缘以及外表面不出现白色、黑色或棕色等腐蚀点，即按GB/T6461判定覆盖层不低于5级
七、需要时，供方需出具质检报告。
电泳涂料与电泳涂膜检测指标及检测规范
电泳涂料与电泳涂膜检测指标及检测规范发布时间：2009-9-19 14:02:30 来源：庆升发布人：qyy 点击次数:1455 次电泳涂料与电泳涂膜检测指标及检测规范不挥发物的测定法一、适用范围：本标准适用于电泳漆原漆，电泳槽液及回收槽槽液的不挥发物的测定。
二、依据标准：国家标准GB6751-86《色漆和清漆，挥发物和不挥发物的测定》；EDTM-03《固成份测定法及计算方式》。
三、仪器设备和材料：1．精密天平（精确度0.001g）2．玻璃干燥器（硅胶干燥剂）3．铝箔纸4．玻璃吸管5．100ml烧杯6．细玻璃棒7．鼓风恒温烘箱8．50ml移液管四、测定方法及步骤1．抽取试样：准备好烧杯，移液管，把需要检测的漆液搅拌均匀，然后用移液管从被测液中抽取试样。
2．将铝箔纸截直径约6cm圆形纸，再将其折成直径4cm的圆盘，将截成的吕箔纸盘置于天平称重并记录为A。
3．玻璃棒搅拌被测液，使之均匀；用玻璃吸管吸取大约2g置于铝箔纸盘上精确称重为B。
4．依次置于烤箱内烘烤温度为105±2℃2小时，然后断开电源，等温度下降到70℃左右时，转移至干燥器中冷却。
5．待冷却至室温，后精确度称重为C。
6．试验平均测定至少两次。
五、结果表示：1．计算：注：NV以两次测试的算术平均值（精确到一位小数）为报告结果。
2．重复性：由同一操作者，在短时间间隔内，在同样的条件下对同一试样所测得两连续结果的差，应不超1%。
电泳漆检测技术指标检测样品检测项目技术指标检测方法电泳漆原漆外观无结块，无沉淀目视不挥发份%☆105℃×2h 乳液：35-37色膏：44-46 武科液检01细度µm 色膏：≤15武科液检15灰份%☆色膏：21-23 武科液检06MEQ酸mmol/100g 乳液：30-36 武科液检05MEQ酸mmol/100g 乳液：55-65 0.1mol/LH2SO4溶剂含量%☆ 6.8-7.2 武科液检04PH值☆乳液：6.3-6.9色膏：6.0-7.0 武科液检03导电度µs/cm☆乳液：2400-2800色膏：1550-1850 武科液检02贮存乳液：6个月；色膏：6个月；贮存条件5-35℃；密封贮存于阴凉干燥处电泳漆槽液导电度µs/cm 1000-1600 武科液检02PH值 6.0-6.6 武科液检03MEQ酸mmol/100g 26-34 武科液检05灰份%☆10-14 武科液检06槽液因体份%☆14-18 武科液检01泳透力≥98武科液检08工作温度℃28℃-32℃溶剂含量%☆2-3 武科液检04干燥性能175±5℃/20min完全干燥漆膜性能漆膜外观色泽均一，平整光滑无颗粒目视漆膜厚度µm 15-30 武科液检01漆膜硬度（铅笔）≥2H武科液检05漆膜附着力（划格1mm）0级武科液检06漆膜柔韧性mm ≤1武科液检09耐盐雾性≥1000h，单向腐蚀≤2mm武科液检12漆膜冲击强度Kg•cm50 武科液检04耐水性（40℃）≥500h，无明显变化武科液检08光泽性（60°）50-80 武科液检10杯突mm ≥6武科液检11注：☆因产品规格不同，指标也略不同，说明书上标明各规格产品详细指标。
电泳实验技术的使用方法与技巧
电泳实验技术的使用方法与技巧电泳实验是生物学、生物化学和分子生物学研究中常用的实验技术之一，广泛应用于DNA测序、蛋白质分离等领域。
本文将介绍电泳实验的使用方法与技巧，帮助读者更好地应用这一重要的实验技术。
一、基本原理与实验步骤电泳实验通过电场作用，将带电粒子（如DNA片段、蛋白质）在凝胶或缓冲液中进行分离。
首先，我们需要准备电泳仪和凝胶。
1. 凝胶的选择根据待分离物质的大小和性质选择凝胶的种类。
琼脂糖凝胶适用于DNA分离，聚丙烯酰胺凝胶适用于蛋白质分离。
2. 凝胶制备将凝胶原液混合均匀，加入适量硼酸缓冲液，加热至融化。
倒入凝胶板中，在上方贴上胶片，使凝胶均匀平整。
凝胶凝固后，取出胶片。
3. DNA样本制备提取DNA样本后，用酶切或PCR扩增的方法得到待检测的DNA片段。
4. 实验操作将凝胶放入电泳仪中，加入适量的缓冲液，将DNA样本注入凝胶孔中。
接通电源，根据样品大小和凝胶面积调节电压和电流。
等待一段时间后，关闭电源，取出凝胶进行显色。
二、实验技巧与注意事项1. 缓冲液的选择不同的缓冲液适用于不同的电泳实验。
TAE缓冲液适用于DNA电泳，TBE缓冲液适用于RNA电泳。
确保缓冲液质量纯净，不含杂质，可以使用试剂盒购买。
2. 凝胶孔的制作凝胶孔的大小和形状直接影响实验结果。
凝胶孔应该均匀分布在凝胶中，大小适当，孔间距要一致。
3. 样本的负载量负载量过多会导致凝胶中的带呈现模糊不清，负载量过少则带可能不明显，因此需要根据样本浓度和实验需要平衡负载量。
4. 电泳条件的优化试验过程中，适当调节电压、电流和电泳时间，可以提高分离效果。
但过高的电压和电流会导致凝胶破裂，过长的电泳时间会使DNA片段分离不清。
5. 显色与可视化电泳结束后，凝胶中的DNA或蛋白质并不可见，需要通过染色或荧光染料进行显示。
荧光染料比传统的染料方法更加快速、敏感。
6. 实验操作的无菌与安全电泳实验涉及操作试剂和仪器，对于DNA样本的保护应该尽可能避免污染。
电泳检测方法20090924
福泰涂装技术有限公司电着涂装技术资料涂料添加量计算方式1、ED槽体积：12000L2、EED-065 固成份为36%（树脂B）3、EEB-068A 固成份为45%（色膏P）4、假设ED槽内固成份为9%，欲提高为10%，则树脂及色膏须各添加多少公斤？正常添加树脂和色膏之重量比为4.5：1，即P/B=1/4.5则12000×（10%-9%）=120KG0.45X+0.36x4.5Χ=120Χ=65KG（色膏添加量）4.5Χ=285KG（树脂添加量）5、溶剂（S-210A）添加量计算方式：设ED槽溶剂量为2.0%，欲提升至2.2%则:12000×(2.2%-2.0%)=24KG6、备注：（１）、涂料及溶剂之添加应配于每日添加，不可数日后一次添加。
（２）、添加溶剂、中和剂时应先用纯水按1：1稀释。
电着液检验方法目录EDTM-01 P H(酸碱值)测定法EDTM-02电导度测定法EDTM-03固成份检验方法及计算方式EDTM-04灰份检验方法及计算方式EDTM-10膜厚测定标准EDTM-12漆膜附着力测定法EDTM-13漆膜铅笔硬度测定法库仑效率测定法电着涂料补充方法及程序补充料包括：树脂乳液、色膏、溶剂三种物料。
1、树脂乳液：直接加于副槽内。
2、色膏：先以约一倍纯水稀释后，加入搅拌较激烈处或副槽。
3、溶剂、中和剂：先以一倍至二倍纯水稀释后，加入搅拌较激烈处或主槽前段。
4、以上物料在生产作业中尽量不要添加，若不得已必需迅速调整槽液成份时，请慢慢添加于副槽内，才不致于影响涂装质量。
电泳实验的操作步骤与分析方法
电泳实验的操作步骤与分析方法引言：在现代生物学和分子医学领域，电泳技术被广泛应用于分离、纯化和分析生物大分子。
本文将介绍电泳实验的操作步骤和分析方法，以帮助读者更好地理解和应用这一技术。
一、背景知识在开始电泳实验之前，我们需要了解一些背景知识。
电泳是基于分子在电场中的迁移行为来进行分离的技术。
其中，核酸电泳用于分离DNA和RNA，蛋白质电泳用于分离蛋白质。
二、DNA电泳实验操作步骤1. 提取DNA样品首先，我们需要从细胞的裂解物或其他样品中提取目标DNA。
这可以通过常见的DNA提取方法，如酚/氯仿法或盐酸法来实现。
提取的DNA样品应该具备一定的纯度和浓度。
2. 制备琼脂糖凝胶接下来，我们需要制备琼脂糖凝胶。
首先，将适量的琼脂糖（通常为0.7-1.2%）溶解在缓冲液中，再添加一定量的琼脂糖染料（如溴化乙啶）。
将溶液倒入电泳槽中，并插入电极。
3. 加载DNA样品将提取好的DNA样品与DNA提取缓冲液混合，并将混合物加入凝胶齿孔中。
为了确定各样品带位置，可以在其中一些样品中加入DNA分子量标准物。
4. 进行电泳将电泳槽连接到电源，设置合适的电压和电流条件。
DNA分子在电场中会迁移，较小的DNA分子迁移较快，较大的DNA分子迁移较慢。
5. 可视化和记录结果当电泳结束后，取出凝胶并进行染色，如乙溴橙染色。
使用紫外光箱或相应的图像分析系统观察和记录结果。
DNA带的长度和强度可以被定量分析，以获取更精确的数据。
三、蛋白质电泳实验操作步骤1. 提取蛋白质样品首先，从细胞裂解液或其他样品中提取目标蛋白质。
这可以通过研磨、超声处理或其它细胞破碎方法来实现。
提取的样品应具有一定的纯度和浓度。
2. 准备凝胶根据需要，选择合适类型的凝胶，如SDS-PAGE凝胶或IEF凝胶。
根据凝胶配方，准备凝胶缓冲液，并在电泳槽中制备凝胶。
3. 加载蛋白质样品将提取的蛋白样品与载体缓冲液或其他加载缓冲液混合，并将混合液加载到凝胶孔中。
根据需要，也可以添加蛋白质分子量标准物。
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电着涂装技术资料
涂料添加量计算方式
1、ED槽体积：12000L
2、EED-065 固成份为36%（树脂B）
3、EEB-068A 固成份为45%（色膏P）
4、假设ED槽内固成份为9%，欲提高为10%，则树脂及色膏须各添加多少公斤？正常添加树脂和色膏之重量比为4.5：1，即P/B=1/4.5
则12000×（10%-9%）=120KG
0.45X+0.36x4.5Χ=120
Χ=65KG（色膏添加量）
4.5Χ=285KG（树脂添加量）
5、溶剂（S-210A）添加量计算方式：
设ED槽溶剂量为2.0%，欲提升至2.2%则:
12000×(2.2%-2.0%)=24KG
6、备注：
（１）、涂料及溶剂之添加应配于每日添加，不可数日后一次添加。
（２）、添加溶剂、中和剂时应先用纯水按1：1稀释。
电着液检验方法
目录
P H(酸碱值)测定法
电导度测定法
固成份检验方法及计算方式
灰份检验方法及计算方式
漆膜附着力测定法
漆膜铅笔硬度测定法
库仑效率测定法
电着涂料补充方法及程序
补充料包括：树脂乳液、色膏、溶剂三种物料。
1、树脂乳液：直接加于副槽内。
2、色膏：先以约一倍纯水稀释后，加入搅拌较激烈处或副槽。
3、溶剂、中和剂：先以一倍至二倍纯水稀释后，加入搅拌较激烈处或主
槽前段。
4、以上物料在生产作业中尽量不要添加，若不得已必需迅速调整槽液成
份时，请慢慢添加于副槽内，才不致于影响涂装质量。
5、。