支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)
支原体指导书
文件名称微生物标准染色方法版本文件编号状态编写日期编写审核日期审核发布日期签字【检验目的】检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。
【原理】结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。
利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色）。
【试剂】试剂名称：结核菌染色液试剂生产厂家：珠海贝索生物技术有限公司包装规格：250ml*4试剂组成：1、石碳酸复红溶液2、酸性酒精溶液3、亚甲基蓝溶液储存条件及有效期：原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【标本要求】（1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等。
（2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。
）（3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。
病人标本须密封运送以避免污染环境。
【检验方法】1、痰液标本取干酪样、脓样或可疑部分约0.05毫升，其他体液标本取离心后沉淀0.05毫升，于玻片正面均匀涂抹成10*20毫米卵圆形菌膜，自然干燥。
染色前加热固定。
2、放置在染色架上，玻片间距保持10毫米以上距离；火焰固定。
3、滴加石碳酸复红溶液盖满玻片，染色10分钟或更久。
4、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水。
5、自菌膜上端外缘滴加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色1-2分钟；如有必要，需流水洗去酸性酒精溶液后，再次脱色至菌膜无可视红色为止。
6、流水自玻片一端轻缓冲洗10-20秒，冲去酸性酒精溶液，沥去玻片上剩余的水。
7、滴加亚甲基蓝溶液，染色30秒钟。
8、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去亚甲基蓝溶液，然后沥去标本上剩余的水，待玻片干燥后镜检。
9、一张染色合格的玻片，菌膜肉眼观察为亮蓝色，无红色斑块。
牛支原体环介导等温扩增检测试剂盒等2种兽药产品说明书和标签
牛支原体环介导等温扩增检测试剂盒等2种兽药产品说明书和标签一、牛支原体环介导等温扩增检测试剂盒说明书和内包装标签（一）牛支原体环介导等温扩增检测试剂盒说明书【兽药名称】通用名牛支原体环介导等温扩增检测试剂盒商品名无英文名Loop-mediated Isothermal Amplification Detection Kit for Mycoplasma bovis汉语拼音Niuzhiyuanti Huanjiedaodengwenkuozeng Jiance Shijihe【主要成分与含量】试剂盒中含有如下成分：成分含量扩增试剂混合物1瓶甜菜碱溶液1管（0.45ml）阳性对照品1管（0.1ml）阴性对照品1管（0.1ml）显色液1管（0.06ml）【作用与用途】用于牛呼吸道分泌物中牛支原体核酸的检测。
【用法与判定】1 模板制备用无菌棉签采集牛鼻拭子、咽拭子，置无菌螺口离心管中，加盖密封，2～8℃保存应不超过24小时，-20℃以下可保存3个月，但应避免反复冻融。
向离心管中加入1ml双蒸水，充分振荡后，取出棉签。
将离心管置水浴中加热煮沸10分钟，冷却至室温，液体即可作为模板使用，-20℃保存，备用。
核酸提取液或质粒不需要上述处理，可直接作为模板使用。
2 扩增反应将甜菜碱溶液加至扩增试剂混合物中，溶解后混匀，加至反应管中，每管0.02ml。
再向反应管中分别加入模板、阳性对照品或阴性对照品各0.01ml，在反应管盖的内侧加入显色液2μl。
盖上反应管盖，注意切勿使显色液脱落。
置恒温加热器中，63±1℃反应1小时。
3 结果判定反应结束后，将管盖上的显色剂甩至管底部的反应液中，反应30秒后，观察颜色变化。
加阳性对照品的管应呈绿色，加阴性对照品的管应呈紫色，则试验成立。
样本反应液如呈绿色，则判为阳性；如呈紫色，则判定为阴性。
【注意事项】（1）各步骤分区进行。
（2）所有耗材须经DEPC水处理，并高压灭菌。
支原体检测试剂盒(ver
支原体检测试剂盒（ver.1.0）说明书上海华大天源生物科技有限公司2005年9月1．试剂和材料1．1 试剂盒组成：1）说明书2）第一阶段PCR引物混合物已分装，可做50次反应3）第二阶段PCR引物混合物已分装，可做50次反应4）阳性对照DNAPCR扩增的支原体DNA片段，无污染性5）10x反应缓冲液适用于多种DNA聚合酶1．2 试剂盒中未提供的试剂：1）DNA聚合酶2）矿物油（无热盖式PCR仪需要）3）琼脂糖凝胶4）去离子水1．3 需要的仪器：1）PCR仪2）1.5ml微量离心管3）凝胶电泳设备4）离心机5）微量移液器及其适配移液头1．4 保存方式：-20 o C2．应用及测试原理2．1应用本试剂盒采用聚合酶链式反应技术（PCR）来进行支原体的检测。
该方法灵敏度高，可用于检测各种生物材料（如细胞培养物）中所感染的支原体。
试剂盒中所含引物能特异性扩增支原体rRNA的保守区域，不会扩增真核细胞或细胞基因组。
相比较传统的在选择性培养基中对待检测样品进行长时间培养而言，本方法快速并且不会带来对实验环境的污染问题。
样品中是否含有支原体的污染可以通过电泳检查DNA扩增条带来判断，无需荧光或同位素标记过程。
本试剂盒能检测的支原体种类包括M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M.orale, M. salivarium, M. hominis, M. pulmonis, M.arthritidis, M. neurolyticum, M. hyponeumoniae, M.capricolum等等，上述支原体引起超过95%的生物材料污染问题。
注：本试剂盒仅用于研究，不能用于临床诊断及人体样品检测。
2．2 测试原理支原体的rRNA基因序列是比较保守的，而其基因间区（如16S基因和23S基因之间的区域）的长短却因物种的不同而异。
而我们的PCR检测过程分以下两步进行：1）用第一阶段PCR引物对扩增整个基因间区，引物分别结合16S和23S基因编码区域。
《支原体清除试剂》使用说明书
5) 以后每隔 1 个月进行支原体的常规检测，以保证没有新的支原体污染。
注意事项
根据细胞污染情况，一个疗程是 7-15 天检测一次，如果检测之后发现没有支原体污染，还 建议试用对半浓度继续维持 15 天，最后撤掉。由于我们支原体清除试剂对细胞生长几乎没 影响，可以重复添加，对于实验室环境比较不受控的情况，建议重复添加以预防。
《支原体清除试剂》使用说明书
关于支原体
支原体（Mycoplasma）是一种没有细胞壁的原核生物，大小约 0.1 - 0.6 微米。目前， 已发现的支原体品种有 100 多种。 由于支原体直径较小，经常可以穿过实验室常规的 0.20 微米孔径的除菌滤膜，高压过滤时，甚至可以穿过 0.10 微米孔径的除菌滤膜，造成细胞的 支原体污染。
科佰产品
货ห้องสมุดไป่ตู้ CBP50044
名称 支原体清除试剂（1000x）
规格 1ml
价格 900.00
货期 现货
产品用途
该产品专用于消除那些被支原体和某些无细胞壁的细菌感染的细胞系。在小型或大型 细胞培养中，也可以直接添加到液体培养基中来预防支原体及常见的细菌污染。该产品仅 用于基础研究，非临床用品。
运输和储存
细胞培养的支原体污染来源主要有：（1）细胞之间的交叉污染，这是支原体污染的最 主要原因；（2）细胞培养操作人员的口腔、皮肤等。（3）细胞培养用的组分，如血清、培 养液等；
支原体试检测剂盒使用说明书(中文版)
支原体检测试剂盒使用说明书1.试剂：支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。
2.实验方法:巢式PCR的方法检测支原体污染：A.待检细胞汇合率在90％以上时取100 µL细胞上清液到离心管内B.95o C孵育5分钟C.短暂高速离心15秒钟左右D.试剂盒里的组份：引物混合物(Primer Mix) 20 µL阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 µL阴性对照(Internal Control DNA) 20 µL巢式PCR一共需要做2轮PCR，本检测方法不受其他来源（如所培养细胞）DNA的影响，不但提高了检测的灵敏度，同时也提高了特异性。
(1)第一轮PCR:PCR 混合物：向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。
E.热循环程序：将准备好的PCR管放入PCR仪，运行如下程序。
PCR 混合物：向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。
F. 热循环程序：将准备好的PCR 管放入PCR 仪，运行如下程序。
试验结果：2％ 琼脂糖凝胶电泳，TBE 缓冲液，PCR 产物及Marker 均点样10µL ，于50V 下电泳1hr ，EB 染色15min ，紫外灯下观察。
电泳结果见下图：图中泳道M 为DNA Marker ，1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st )，3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物，2、4为阴性对照PCR 产物。
阳性对照管在200bp 左右，和300-400 bp 处各有一条带，证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一，大概在200-400 bp 之间)。
MycoGuardTM 支原体检测试剂盒(生物化学发光法) 使用说明书
MycoGuard TM支原体检测试剂盒（生物化学发光法）使用说明书——MycoGuard TM Mycoplasma Bioluminescent Detection KitCat.No.MPD-E-010(10次反应)MPD-E-050(50次反应)GeneCopoeia,Inc.广州易锦生物技术有限公司广州高新技术产业开发区广州科学城掬泉路3号广州国际企业孵化器F区8楼邮编：510663电话：4006-020-200邮箱：sales@网址：©2015GeneCopoeia,Inc.使用手册：MycoGuard TM Mycoplasma Bioluminescent Detection KitI.产品简介II.应用范围III.产品优势IV.试剂盒组成V.实验流程VI.实验所需仪器及材料VII.样品准备VIII.实验步骤IX.注意事项X.结果分析XI.使用限制与质量保证I.产品简介MycoGuard TM Mycoplasma Bioluminescent Detection Kit应用了一种高效的、选择性的生物化学检测，通过检测在支原体中特定酶的活性，从而测得样本中存在的支原体。
原理：支原体被溶解后，释放到培养基的支原体酶与MycoGuard TM底物相互反应，可催化ADP转换为ATP。
ATP含量的变化可通过生物发光的原理检测，由ATP激发的荧光强度与ATP浓度呈线性关系。
通过计算样本在添加底物前和添加底物后的ATP比率，可判断样品中是否存在支原体。
II.应用范围支原体污染是细胞传代及培养中的常见问题。
支原体是最小、最简单的原核生物，由于自身缺乏生物合成功能，支原体通常依靠与细胞竞争培养基中的养分存活，易导致细胞增殖速度减慢、改变基因表达、代谢特征及细胞形态等，影响实验结果的稳定性、可靠性和准确性。
支原体很难检测，传统的支原体检测方法需耗费大量时间，且无法在早期发现污染。
GeneCopoeia推出的MycoGuard TM支原体检测试剂盒可快速、简单检测出细胞培养过程中存在的支原体，便于监控细胞培养过程，或为培养基中的各组分进行常规检测。
肺炎支原体IgM说明书
肺炎支原体抗体（ IgM ）检测试剂盒（胶体金法）说明书【产品名称】肺炎支原体抗体（IgM ）检测试剂盒（胶体金法）【包装规格】40 人份 /盒或 20 人份 / 盒（详细规格见试剂盒包装标签）【预期用途】定性检测人血清中的肺炎支原体IgM 抗体，可用于支原体肺炎的协助诊疗。
【查验原理】本品应用间接法的胶体金标志免疫斑点渗滤原理，质控线采纳双抗夹心的胶体金标志免疫斑点渗滤原理。
该试剂盒里的斑点反响板上的微孔滤膜固相有肺炎支原体P1 蛋白抗原斑点，当待检测的血清中含有肺炎支原体IgM 抗体时，与微孔滤膜上的肺炎支原体P1 蛋白抗原抗原形成复合物，胶体金标志的羊抗人IgM 抗体与上述抗原抗体复合物联合，形成肉眼可见的红色斑点，即为阳性结果，不然为阴性结果。
微孔滤膜上的质控线含有羊抗人IgM 抗体，当待测血清加入后，人血清中的IgM 抗体与质控线上羊抗人IgM 抗体形成复合物，胶体金标志的羊抗人IgM 抗体再与上述复合物联合，形成肉眼可见的红色质控线。
【主要构成成份】1.斑点反响板： 40 块（或 20 块），每块斑点反响板主要由含固相肺炎支原体P1 蛋白抗原斑点的硝酸纤维膜和吸水纸构成。
2.试剂 A： 1 瓶，约 10ml （或 5 ml），无色澄清溶液，主要成份为PH7.4PBS 缓冲液、吐温－20、硫柳汞（ 0.1%）。
3.试剂 B： 1 瓶，约 8ml（或 4ml），深红色澄清溶液，主要成份为胶体金标志的羊抗人IgM 抗体、牛血清白蛋白、硫柳汞（0.1%）。
【储藏条件及有效期】试剂盒一般采纳冷链运输，并采纳最迅速的运输方式，缩短运输时间；冬季运输应注意防备制品冻结。
试剂盒储藏条件为2℃～８℃，有效期为8 个月。
【样本要求】1.本试剂盒产品仅合用于对血清样本的检测，其余样本（如，胸腹水、脑脊液、尿液等）未经过产品预期用途的有关研究，不合用于本产品的检测。
2. 样本收集：采纳静脉血于干净离心管中，不加任何抗凝剂、保护剂，置于37℃水浴 20～ 30 分钟（或置室温 1 小时以上），待纤维蛋白原充足凝结后离心（4000 转/ 分， 5～ 10 分钟）分别血清。
MP核酸检测试剂盒说明书范文
肺炎支原体（ MP）核酸检测试剂盒（PCR荧光法）说明书【产品名称】 1. 标本：痰液及咽拭子。
通用名称：肺炎支原体（ MP）核酸检测试剂盒（ PCR荧光法） 2. 收集器：应入采纳国家同意生产的一次性使用的咽拭子，拭子应该包含干净海绵头、PP 杆、英文名称： PCR-Fluorescence Detection Kit for Mycoplasma Pneumonia PP 杆与海绵头应连结坚固，经无尘冲洗包装。
【包装规格】 32 人份 / 盒3. 收集：样本收集详细方法请参照《微生物标本收集手册》一书。
【预期用途】本产品用于定性检测痰液或咽拭子中的肺炎支原体核酸。
a. 自然咳痰法以晨痰为佳，使劲咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入痰盒中，标本量应肺炎支原体（）是人类支原体肺炎的病原体，主要经飞沫传染，潜藏期2～3 周，支原体肺。
大于等于 1ml炎的临床表现和胸部 X 线检查其实不具特点性，单凭临床表现和胸部X 线检查没法做出诊疗。
若要b. 咽拭子取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，转动拭子拿出黏液。
明确诊疗，需要进行病原体的检测。
而病原体核酸检测是当前最为直接的检测手段。
3 个月； -70℃下长久保留，但应避适应症：由肺炎支原体感染惹起的肺炎等疾病。
4.寄存： 2-8℃保留，不超出 24 小时； -20℃下保留，不超出免频频冻融。
【查验原理】5.运输：采纳冰壶加冰或泡沫箱加冰密封进行运输。
本试剂盒采纳肺炎支原体（ MP ）守旧基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增地区中间的一段DNA 模板发生特异性联合，在PCR延长反响过程中， Taq 酶的外切酶活性将 5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反响系统中，进而离开了3’端荧光淬灭基团的障蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，进而实此刻全关闭反响系统中对肺炎支原体核酸的自动化检测。
【主要构成成份】构成成分规格核酸提取液含%Triton-100 、%NP40、 5%Chelex-100。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
支原体检测试剂盒使用说明书
1.试剂：支原体检测试剂盒由武汉源深生物科技有限公司提供。
2.实验方法:
巢式PCR的方法检测支原体污染：
A.待检细胞汇合率在90％以上时取100 µL细胞上清液到离心管内
B.95o C孵育5分钟
C.短暂高速离心15秒钟左右
D.试剂盒里的组份：
引物混合物(Primer Mix) 20 µL
阳性对照DNA (Positive Control DNA) 15 µL
阴性对照(Internal Control DNA) 20 µL
巢式PCR一共需要做2轮PCR，本检测方法不受其他来源（如所培养细胞）DNA的影响，不但提高了检测的灵敏度，同时也提高了特异性。
(1)第一轮PCR:
PCR 混合物：
向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，
盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。
E.热循环程序：
将准备好的PCR管放入PCR仪，运行如下程序。
PCR 混合物：
向0.2 mL PCR薄壁管中依次加入以下组分，
盖紧管盖，轻弹管壁混匀，稍加离心。
F. 热循环程序：
将准备好的PCR 管放入PCR 仪，运行如下程序。
试验结果：
2％ 琼脂糖凝胶电泳，TBE 缓冲液，PCR 产物及Marker 均点样10µL ，于50V 下电泳1hr ，EB 染色15min ，紫外灯下观察。
电泳结果见下图：
图中泳道M 为DNA Marker ，1和2为待检测细胞系的第一轮PCR 产物 (1st )，3和4为待检测细胞系的第二轮PCR 产物 (2nd ), 其中1、3为阳性对照管PCR 产物，2、4为阴性对照PCR 产物。
阳性对照管在200bp 左右，和300-400 bp 处各有一条带，证明本次实验准确可靠 (不同的支原体Mycoplasma, such as M. fermentans, M. hyorhinis, M. arginini, M. orale, M. hominis, M. arthritidis, M. hyopneumoniae and Acholeplasma laidlawii 的保守区的片段长度不一，大概在200-400 bp 之间)。
M 1 2 3 4。