植物细胞融合(实验)
植物细胞融合(实验)
准备仪器
准备适当的显微镜、离心 机、摇床、培养皿等实验 仪器。
分离原生质体
表面消毒
将实验材料表面消毒，以避免污染。
酶解
用适当的酶溶液处理实验材料，使细胞壁分解，释放 出原生质体。
分离
将酶解后的组织用离心机或过滤法分离出生质体。鉴定通过形态学观察、分子生 物学技术或免疫学技术等 方法对融合细胞进行鉴定。
培养与繁殖
将筛选和鉴定合格的融合 细胞进行培养和繁殖，以 备后续实验或应用。
03
植物细胞融合实验结果分 析
融合细胞的筛选结果
1 2
筛选方法
采用抗性筛选和荧光激活细胞分选（FACS）等 方法，从融合细胞群体中筛选出具有稳定融合特 征的细胞。
筛选和培育融合细胞
在融合后的细胞中筛选具有双亲遗传 特征的融合细胞，并进行进一步的培 育和筛选。
克隆和繁殖
对筛选出的融合细胞进行克隆和繁殖， 获得具有特定性状的植物个体。
02
植物细胞融合实验步骤
准备实验材料
01
02
03
选择实验材料
选择健康、无病虫害的植 物组织作为实验材料，如 根、茎、叶等。
准备试剂
植物细胞融合(实验)
目录
• 植物细胞融合实验简介 • 植物细胞融合实验步骤 • 植物细胞融合实验结果分析 • 植物细胞融合实验的应用与展望 • 结论
01
植物细胞融合实验简介
植物细胞融合的定义
01
植物细胞融合是指将来自不同植 物的细胞通过物理或化学方法诱 导融合，形成一个具有双亲遗传 特征的融合细胞的过程。
植物细胞融合技术可以用于新品种的培育和遗传改良，未来可以开展 相关研究，为育种工作提供新的工具和方法。
植物体细胞杂交技术的流程
植物体细胞杂交技术的流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!植物体细胞杂交技术的流程一、准备工作阶段。
在开展植物体细胞杂交技术之前，要进行充分的准备。
植物组织培养第七章植物原生质体培养及细胞融合
202X
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第 七 章 植物原生质体培养及细胞融合
陈传红 制作 2007 / 5
202X
本章内容提要： 原生质体培养的发展与意义 原生质体的分离 原生质体的培养 植物细胞的融合 体细胞杂种鉴定方法
1975年柑桔原生质体培养成功；
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现有：苹果、猕猴桃、柿、枇杷、马铃薯、番茄、矮牵牛等作物的原生质体培养成功；木本植物中柑桔最为成功。
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陈传红 制作 2007 / 5
番茄+马铃薯？
陈传红 制作 2007 / 5
3、融合方法
01
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1、机械分离（Machanical isolation）
Cut plasmolyzed tissue and subsequent deplasmolysis results in expansion and release of the protoplasts from the cut ends of the cell.
高度液泡化的细胞
陈传红 制作 2007 / 5
2、 酶解分离（Enzymatic isolation）
双子叶外植体/培养细胞
单子叶植物胚性细胞
2.1 材料 应选择生长旺盛的植物体幼嫩部分。叶肉细胞分离原生质体，来源方便，有明显的叶绿体，便于在融合中认识。 但禾本科叶肉原生质体往往不能分裂,因此常采用悬浮细胞作为分离原生质体的材料，最适宜的细胞是处于对数生长早期的细胞。
单击添加副标题
清新立春时节
什么是原生质体（Protoplast）？
1880, Hanstein：质壁分离时，能够与细胞壁分开的那部分细胞物质 含义：去掉细胞壁的由质膜包裹、具有生活力的裸露细胞。
植物细胞融合
结果与分析
活力很低， 活力很低，取 该条件下作为 一个融合亲本
取该条件下作为 一个融合亲本
融合原生质体细胞的分裂
初始培养的1 初始培养的1-2 天, 异核体较易识别。 异核体较易识别。
绿色的霸王原生质体 与红色的草木樨状黄 芪原生质体粘连。 芪原生质体粘连。
UV照射3 UV照射3分钟的霸王原生质体 照射 与经R 6G处理的草木樨状黄 与经R-6G处理的草木樨状黄 芪原生质体融合产物
优点： 优点：可以收集到数量 较大的纯净原生质体， 较大的纯净原生质体， 同时避免收集过程中 原生质体因相互挤压 而破碎。 而破碎。
活力检测
酚藏花红染色法： 酚藏花红染色法： 0.1%酚藏 0.1%酚藏 花红能使有活力的 原生质体染成红色， 原生质体染成红色， 无活力的原生质体 不着色。 不着色。
返回
亲本原生质体的预处理
预 处 理
的 原生质体 的 原生质体
处理
·
处理的
处理
处理
处理的
处理
返回
原生质体诱导融合
融合比例：大约1:1 融合比例：大约1:1 诱导剂：聚乙二醇(polyethyleneglycol诱导剂：聚乙二醇(polyethyleneglycol(polyethyleneglycol PEG)融合诱导液 PEG)融合诱导液 最终状态： 最终状态：形成杂种小愈伤组织
具体步骤
1.亲本原生质体的分离、收集纯化及活力检测 亲本原生质体的分离、 亲本原生质体的分离 2.亲本原生质体的预处理 2.亲本原生质体的预处理 3.原生质体诱导融合 3.原生质体诱导融合 4.杂种融合细胞的鉴别和筛选 4.杂种融合细胞的鉴别和筛选 5.杂种融合细胞的培养和杂种愈伤组织的形成及分化 5.杂种融合细胞的培养和杂种愈伤组织的形成及分化 6.杂种愈伤组织的RAPD分析和线粒体CAPS分析 杂种愈伤组织的RAPD分析和线粒体CAPS 6.杂种愈伤组织的RAPD分析和线粒体CAPS分析 7.杂种愈伤组织对渗透胁迫的抗性分析 7.杂种愈伤组织对渗透胁迫的抗性分析 8.PEG PEG胁迫下杂种愈伤组织的游离脯氨酸含 8.PEG胁迫下杂种愈伤组织的游离脯氨酸含
植物细胞融合(实验)
Potato plants growing in a test tube
Phenotype of intraspecific diploids of S. tuberosum
US-W9310.3 Somatic hybrid US-W9545.99
在原生质体细胞膜与膜紧密接触的部 位，膜内蛋白质颗粒易位并凝聚。接着可 能是相邻的剥去蛋白质的细胞膜间的类脂 质与类脂质反应。继之，类脂质分子的扰 动和重排导致接触的细胞膜局部发生融合， 形成很小的细胞质桥，之后它逐渐扩大， 两个原生质体最终融合。
使用化学促融剂时，Ca2+是必需的。 关于Ca2+的作用机理，有的认为是Ca2+和 PO43-形成不溶于水的配合物，成为细胞间 的钙桥，由此引起融合。也有解释为Ca2+ 结合到带负电磷脂的电离基上，使磷脂分 子在膜上相互分离，由此引起融合。
Putative somatic hybrid plants
A fertile somatic hybrid
Phenotype of somatic hybrids clearly shows characteristics of both parents
S. brevidens somatic hybrid S. tuberosum
电融合法原生质体的融合结果
原生质体成串（40×）
原生质体融合（图1）
电融合法原生质体的融合结果
原生质体融合（图2） 原生质体融合（图3）
简述植物细胞融合过程
简述植物细胞融合过程植物细胞融合是指两个或多个植物细胞融合成一个细胞的过程。
这种细胞融合过程在植物中具有重要的生物学意义，可以产生新的基因组合，促进遗传变异和进化。
下面将以标题“植物细胞融合过程”为线索，简述植物细胞融合的过程。
植物细胞融合过程主要分为两类：有性融合和无性融合。
有性融合是指两个植物细胞通过生殖细胞的融合来形成新的细胞。
无性融合则是指两个植物细胞通过非生殖细胞的融合来形成新的细胞。
在有性融合中，花粉管是植物细胞融合的重要组成部分。
花粉管是花粉萌发后形成的管状结构，它通过花粉管的生长，将花粉颗粒中的两个生殖细胞输送到雌蕊内。
当花粉管生长到胚珠位置时，花粉管会穿过胚珠表皮，进入胚珠内部。
然后，花粉管会与胚珠中的一个特殊细胞——卵细胞融合，形成受精卵。
受精卵是植物细胞融合过程中的一个重要步骤，它具有两个细胞核，一个是雄性核，来自花粉管，另一个是雌性核，来自卵细胞。
无性融合是植物细胞融合过程中的另一种方式，它包括多种形式，如质体融合、细胞融合等。
在质体融合中，两个植物细胞的质体会融合成一个新的质体。
质体是细胞内的一种特殊结构，具有自主繁殖的能力。
质体融合可以促进基因的重新组合和遗传变异，对植物的进化起到重要作用。
细胞融合则是指两个植物细胞的细胞质融合成一个新的细胞质。
细胞融合在植物繁殖和生长过程中起到重要的作用，可以增加植物的遗传多样性。
植物细胞融合过程中，融合的细胞通常需要通过某种方式接触和识别对方细胞。
这通常涉及到一系列的信号传递和识别机制。
例如，在花粉管与卵细胞融合的过程中，花粉管会释放一种化学物质，称为花粉管引导物质，它能够吸引和诱导花粉管的生长方向，使其朝向卵细胞。
同时，卵细胞也会释放化学物质，称为卵细胞诱导物质，它能够识别花粉管的到来，并与之融合。
植物细胞融合过程中，细胞融合的结果通常是形成一个新的细胞，这个细胞具有两个或多个细胞核。
这种细胞被称为合子细胞。
合子细胞具有两个或多个不同的基因组合，因此具有较高的遗传多样性。
植物体细胞融合技术
2.1．1植物细胞工程的基本技术--------植物体细胞融合技术学习目标1、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。
2、尝试进行植物组织培养。
学习重点1、植物组织培养的原理和过程2、植物体细胞杂交的原理一、 植物体细胞杂交技术1．概念：不同种植物的 ，在一定条件下融合成 ，并把杂种细胞培育成新的 的技术。
2．过程 不同的植物体细胞果胶酶纤维素酶−−−→−不同细胞原生质体−−−→−人工诱导原生质体融合 →杂种细胞→杂种植株。
3．植物体细胞杂交步骤：(1)去掉细胞壁，分离出有活力的 ，目前最常用的去细胞壁的方法是酶解法，也就是在温和条件下用 、 去除植物细胞的细胞壁。
(2)不同植物体细胞原生质体融合，必须通过 法和 法来诱导融合。
方法有： 等促使原生质体融合。
化学法是用(PEG)作为诱导剂来诱导融合。
融合后再生出 。
(3)用植物组织培养方法进行培育，可得到杂种植株。
如图在此过程中需要注意的问题有：①植物体细胞杂交过程中，植物体细胞融合所依据的生物学原理是 ；植物组织培养的理论基础是 。
②体细胞融合成功以后，既有AB 型杂种细胞，还能形成AA 型和BB 型两种融合细胞，但只有AB 型细胞是植物体细胞杂交所形成的杂种细胞，因此在杂种细胞形成后还应有一个 过程。
③目前常用的去除细胞壁的方法是 ，保证了原生质体活性。
植物体细胞融合完成的标志是新细胞壁的形成。
④植物体细胞杂交过程仍以植物组织培养为前提，通过植物组织培养完成杂种植株的培育过程。
⑤植物体细胞杂交的最大突破是克服远缘杂交不亲和的障碍，但是目前仍有许多理论和技术问题没有解决，离推广应用仍有一定距离。
【当堂检测】 1．不能．．用于人工诱导原生质体融合的方法是 （ ） A ．振动 B ．电刺激 C ．PEG D ．重压 2．与传统的有性杂交法相比，植物体细胞杂交的最大优点是 （ ） A ．可使两个亲本的优良性状组合到一起 B ．可以克服远缘杂交不亲和的障碍 C ．可以培育出高产性状明显的新品种 D ．可以降低生成成本，提高接济效益3．植物体细胞杂交的过程实质是 （ ）A ．细胞质融合的过程B ．细胞核融合的过程C ．细胞膜融合的过程D ．细胞原生质体融合的过程 4．原生质体融合后，需诱导产生细胞壁，参与此过程的细胞器是 （ ） A ．叶绿体、高尔基体 B ．线粒体、高尔基体 C ．叶绿体、线粒体 D ．线粒体、内质网 5．高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织，下列叙述错误．．的是 （ ）A ．该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B ．该愈伤组织的细胞没有全能性C ．该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞D ．该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 6．以下不能．．说明细胞具有全能性的实验是 （ ） A ．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B ．紫色糯性玉米种子培育出植株 C ．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D ．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株7．植物组织培养过程中的脱分化是指 （ ）A ．植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B ．未成熟的种子经过长期培养，培养出幼苗的过程C ．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程D ．取植物的枝芽培育成一株新植物的过程8．在脱分化形成愈伤组织的过程中，下列各项为非．必要条件的是（）A．培养基需要消毒灭菌B．给予适宜的温度C．给予充足的光照D．给予适宜的养料和激素9．通过植物体细胞杂交，获得一个杂种植株需要的步骤是（）A．分离原生质体→诱导原生质体融合→组织培养→得到杂种植物B．分离原生质体→原生质体直接融合→组织培养→杂种植株C．获取细胞→原生质体融合→组织培养→杂种植株D．获取细胞→原生质体直接融合→组织培养→杂种植株10．胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（）A．愈伤组织B．再分化C．形成完整植株D．取离体组织11．利用植物的茎尖、茎段、花药、花粉等，在无菌的条件下，放在玻璃器皿中人工配制的培养基上，使它发育成完整的植株。
植物细胞融合成功的标志
植物细胞融合成功的标志植物细胞融合成功的标志，这可是个有趣的话题哦！你知道吗，植物的世界里也有许多秘密，像一部神秘的小说，总有惊喜等着我们去发现。
想象一下，两个植物细胞就像两个小伙伴，可能在某个阳光明媚的下午，相遇了！他们互相看了看，可能心中一阵小激动，然后就开始“握手”融合了。
嘿，听上去是不是像是在讲一段友情故事？一旦细胞融合成功，首先映入眼帘的就是颜色的变化。
说真的，这可不是普通的变化哦！像是变魔术一样，一瞬间你就能看到它们变得鲜艳夺目。
你想，原本的单一颜色一下子变成了五颜六色，那种感觉就像是过年一样，喜庆得不得了。
再说了，这种颜色的变化不仅好看，更是植物健康的标志。
你知道的，颜色越鲜艳，细胞的活力越强，简直就像在说：“我在这里，充满能量！”细胞的形态也会发生大变化。
嘿，你想象一下，两种细胞结合后，它们的形态会像什么？就好比两个好朋友的结合，各自的特点融合在一起，诞生出一个全新的个体。
这个新个体就像是一种新的生物，充满了无限可能。
看看这些变化，简直让人感叹，生命的奥秘真是奇妙无比。
然后，我们不得不提的就是细胞分裂的能力。
融合成功后，新的细胞会开始像春天的花朵一样，迅速生长。
就像是孩子们在操场上追逐嬉戏，越长越大，越长越壮。
这样生长的速度，可不是开玩笑的，真的是快得让人眼花缭乱。
每当我看到植物快速生长的样子，心中总会涌起一种难以言表的欣喜，仿佛看到了生命的奇迹在眼前绽放。
植物细胞融合后，还会影响到它们的遗传特征。
嘿，这可真是科学的神奇之处！两种不同的遗传特征在这里结合，就像是两种美味的食材，碰撞出新的火花。
你可能会想，哎呀，这样的结合会不会让植物变得奇奇怪怪？其实不然！许多新品种的植物就是这样产生的，个个都散发着独特的魅力，让人忍不住想要亲近。
再说了，融合成功的细胞还会有更强的抗逆性，面对各种恶劣环境的挑战。
这就好比是在说：“来吧，恶劣的天气，我们不怕！”这份勇气让植物更加顽强，就像是那些勇敢的小战士，时刻准备迎接挑战。