实验二十七亚甲蓝分光光度法测定阴离子洗涤剂

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阴离子合成洗涤剂亚甲蓝分光光度法方法验证

阴离子合成洗涤剂亚甲蓝分光光度法方法验证摘要：通过能力验证，确认实验室达到标准方法要求，实验室具备有测试水质阴离子合成洗涤剂的分析能力。

亚甲蓝染料与阴离子合成洗涤剂在水溶液中能够形成蓝色化合物，产生的蓝色化合物易被有机溶剂萃取，水溶液中仍有未反应的亚甲蓝，有机相中蓝色的强度可测得阴离子合成洗涤剂的含量。

关键词：生活饮用水；阴离子合成洗涤剂；亚甲蓝1.方法验收情况1.1试样分析及标准曲线的绘制量取50.0mL水样，置于125ml分液漏斗中，另取7个分液漏斗,分别加入十二院基苯磺酸钠标准使用溶液0.00ml、0.50ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml,加水至至50mL。

酚酞溶液作指示剂,用氢氧化钠溶液和硫酸溶液调解每一个分液漏斗PH＜8.2，即红色刚刚褪去，再加入5mLHCl3及10mL亚甲蓝溶液，剧烈振摇30s，静置分层，如果水相中的蓝色消失，应该减少水样的取样量，重新测定。

将分液漏斗下层的HCl3放入第二套分液漏斗中，加入25m1洗涤液，剧烈振摇30s，静置分层，将HCl3缓慢放入25mL比色管中。

再各加5mL HCl3，重复前面步骤，合并HCl3于比色管中，同样再操作一次，最后用HCl3定容。

在650nm波长处，用3cm比色皿，以HCl3作参比，测定吸光度。

表1 标准溶液系列1.2检出限的验证每次取50ml加标量为0.25mg/L的空白水样，重复测定7次后计算平均值、标准偏差、相对标准偏差、检出限等各项参数。

检出限按试（1）计算（1）式中：MDL—方法检出限；n—样品的平行测定次数；T—自由度为n-1，置信度为99%时t分布；S—n次平行测定的标准偏差其中当自由度为n-1，置信度为99%时的t可参考表2表21.3精密度的验证每次取5ml加标量为2.00mg/L和4.00mg/L的空白水样，重复测定六次重复测试，计算平均值、标准偏差。

表3 方法检出限、测定下限测试数据表1.4准确度的验证每次取5ml加标量为2.00mg/L、4.00mg/L和6.00mg/L的空白水样，重复测定六次重复测试，计算平均值、加标回收率。

亚甲蓝分光光度法测定水中阴离子表面活性剂的优化探讨

前二杯１０ｎｌｎｌ比色皿所接的滤液，将第三杯滤液用于比色，其结果准确可靠。另外，对不同部门生产的标准溶液进行
了比对，结果发现，采用国家环保部生产的标准样品进行量值溯源、考核、比对或仪器校正等也均应采用其相同标准
ｄｅｐａｒｍｅｔｎｔｉｎｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅ．
ＴｈｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＵｓｉｎｇＭｅｔｈｙｌｅｎｅＢｌｕｅＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔ￣ｅＭｅｔｈｏｄｔｏＤｅｔｅｍｌｉｎｅＡｎｉｏｎｉｃＳｕｒｆａｃｔａｎｔｓｉｎ
ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ，ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｎｄａｉｓｔｎｒｕｍｅｎｔｓａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ，ｅｔｃ．，ｎｄａｈｅｔｓｔａｎｄａｒｄｓａｍｐｌｅｉｓｐｒｏｄｕｃｅｄｙｂｔｈｅｓｔａｔｅｅｎｖｉｏｒｎｍｅｎｔａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
２Ａｋｅｓｕｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌｔｅｃｈｎｉｃａｌｉｎｓｉｔｔｕｔｅ，ＡｋｅｓｕＸｉｎｊｉａｎｇ８４３０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｄｉｓｃａｒｄｅｄｑｕａｎｔｉｔｙｏｆｐｒｉｍａｒｙｉｆｌｔｒａｔｅｗａｓｄｉｓｃｕｓｓｅｄ，ｗｉｃｈｈｐｒｏｄｕｃｅｄｉｎｅｘｔｒａｃｔｐｒｏｃｅｓｓｗｈｅｎｄｅｔｅｃｉｔｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｆｏａｎｉｏｉｃｎｓｕｒｆａｃｅａｃｉｔｖｅａｇｅｎｔｉｎｗａｔｅｒ．Ｉｔｆｏｕｎｄｔｈａｔｔｈｅｉｆｒｓｔｔｗｏｃｕｐｓｏｆｔｈｅｉｆｌｔｒａｔｅｉｎ１０ｎｌｌｎｃｕｖｅｔｔｅｓｈｏｕｌｄｂｅｄｉｓｃａｒｄｅｄ，ｔｈｅｔｈｉｒｄ

海水—阴离子洗涤剂的测定—亚甲基蓝分光光度法

FHZDZHS0044 海水阴离子洗涤剂的测定亚甲基蓝分光光度法F-HZ-DZ-HS-0044海水—阴离子洗涤剂的测定—亚甲基蓝分光光度法1 范围本方法适用于海水中阴离子洗涤剂的测定。

对有较深颜色的水样本法受干扰。

检出限：10.0μg/L.2 原理阴离子洗涤剂与亚甲基蓝反应，生成蓝色的离子对化合物，用氯仿萃取后，在波长650nm 处测定吸光度。

测定结果以直链烷基苯磺酸钠(LAS，烷基平均碳原子数为12)的表观浓度表示，实际上是测定了亚甲基蓝活性物质(MBAS)。

有机的硫酸盐、磺酸盐、羟酸盐、酚类及无机的氰酸盐、硝酸盐和硫氰酸盐等引起正干扰，有机胺类则引起负干扰。

3 试剂除非另作说明，所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水或等效纯水。

3.1 氯仿(CHCl3)。

3.2 硫酸C(H2SO4)=0.5mol/L。

3.3 氢氧化钠溶液C(NaOH)=1mol/L：称取10.0g氢氧化钠(NaOH)溶于水并稀至250mL，搅匀，保存于聚乙烯瓶中。

3.4 氯化钠溶液，300g/L。

3.5 亚甲基蓝溶液：于1000mL烧杯中加入500mL水，加入50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O），搅拌下缓缓加入6.8mL硫酸（ρ1.84g/mL），加入50mg亚甲基蓝（C16H18N3 ClS·3H2O），搅拌溶解，加水至1000mL，混匀。

移入棕色试剂瓶保存。

3.6 洗涤液：于1000mL烧杯中加入500mL水，加入50g磷酸二氢钠，搅拌下缓缓加入6.8mL 硫酸（ρ1.84g/mL），搅拌溶解，加水至1000mL，混匀。

3.7 直链烷基苯磺酸钠(LAS，烷基平均碳原子数为12，标准试剂)标准溶液3.7.1 直链烷基苯磺酸钠标准贮备溶液，1.00mg/mL：称取100.0mg LAS 溶于50mL水中，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

此溶液1.00mL含1.00mg LAS。

在冰箱内保存，可稳定6个月。

阴离子合成洗涤剂的测定

FHZDZDXS0101 地下水阴离子合成洗涤剂的测定亚甲蓝分光光度法F-HZ-DZ-DXS-0101地下水—阴离子合成洗涤剂的测定—亚甲蓝分光光度法1 范围本方法适用于地下水中阴离子合成洗涤剂的测定。

最低检测量为5μg，若取100mL水样进行测定，最低检测浓度为0.05mg/L。

2 原理阴离子洗涤剂的种类较多，常用的洗涤剂是烷基苯磺酸钠，当其在水中浓度过大时，易使水产生泡沫，影响感官性状，同时由于烷基苯磺酸盐不易被氧化和生物分解，往往随着生活污水或工业废水进入地表水、地下水中，是水质污染评价的一项指标。

阴离子洗涤剂（烷基苯磺酸钠以及烷基磺酸钠）和亚甲蓝作用生成蓝色化合物，易溶于有机溶剂中，当用氯仿萃取后，此蓝色化合物进入氯仿层中，而未作用的亚甲蓝则仍留在水相中，根据氯仿层蓝色的强度，以标准比较法计算水中阴离子洗涤剂的浓度。

能与亚甲蓝反应的物质对本法均有干扰。

酚、有机硫酸盐、磺酸盐及大量氯化物、硝酸盐、硫氰化物等均可使结果偏高。

试验证明水中常见的Cl-允许含量为600 mg/L、NO3-为40mg/L。

二者同时存在时，允许含量为Cl- 300mg/L，NO3- 20mg/L。

3 试剂除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，二次去离子水或等效纯水。

3.1 三氯甲烷（氯仿，CHCl3）。

3.2 亚甲蓝溶液：称取30mg亚甲蓝（C6H18ClN3S·3H2O）溶于500mL纯水中，加入6.8mL 硫酸（ρ1.84g/mL），加50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O），溶解后用纯水稀释至1000mL。

3.3 洗涤液：取6.8mL硫酸（ρ1.84g/mL）及50g磷酸二氢钠溶于纯水中，并稀释至1000mL。

3.4 十二烷基苯磺酸钠标准溶液3.4.1 十二烷基苯磺酸钠标准贮备溶液，1.00mg/mL：称取0.5000g十二烷基苯磺酸钠（C12H25·C6H4·SO3Na）溶于纯水中，移入500mL容量瓶中并稀释至刻度，摇匀。

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法GB 7494-37 方法确认

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法GB7494-37方法确认1.目的通过分光光度法测定水中阴离子表面活性剂的浓度，分析方法检出限、回收率及精密度，判断本实验室的检测方法是否合格。

2.适用范围本标准适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质（MBAS）。

亦即阴离子表面活性物质。

3.职责3.1检测人员负责按操作规程操作，确保测量过程正常进行，消除各种可能影响试验结果的意外因素，掌握检出限、方法回收率与精密度的计算方法。

3.2复核人员负责检查原始记录、检出限、方法回收率及精密度的计算方法。

3.3技术负责人负责审核检测结果及检出限、方法回收率、精密度分析结果。

4.分析方法4.1测量方法简述4.1.1空白试验:按同试样完全相同的处理步骤进行空白实验，仅用100ml蒸馏水代替试样。

4.1.2测定4.1.2.1将所取试份移至分液漏斗，以酚酞为指示剂，逐滴加入1mol/L氢氧化钠溶液至水溶液呈桃红色，再滴加0.5mol/L硫酸到桃红色刚好消失。

4.1.2.2加入25ml亚甲蓝溶液，摇匀后再移入10ml氯仿，激烈振摇30s，注意放气。

过分的摇动会发生乳化，加入少量异丙醇（小于10ml）可消除乳化现象。

加相同体积的异丙醇至所有标准中，再慢慢旋转分液漏斗，使滞留在内壁上的氯仿液珠降落，静置分层。

4.1.2.3将氯仿层放入预先盛有50ml洗涤液的第二个分液漏斗，用数滴氯仿淋洗第一个分液漏斗的放液管，重复萃取三次，每次用10ml氯仿。

合并所有氯仿至第二个分液漏斗中，激烈振摇30s，静置分层。

将氯仿层通过玻璃棉或脱脂棉，放入50ml容量瓶中。

再用氯仿萃取洗涤液两次（每次用5ml），此氯仿层也并入容量瓶中，加氯仿到标线。

4.1.2.4每一批样品要做一次空白试验及一种校准溶液的完全萃取。

4.1.2.5每次测定前，震荡容量瓶内的氯仿萃取液，并以此液洗三次比色皿，然后将比色皿充满。

在652nm处，以氯仿清洗比色皿。

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法本方法规定了测定水溶液中的阴离子表面活性剂的亚甲蓝分光光度法.阴离子表面活性剂是普通合成洗涤剂的主要活性成分,使用最广泛的阴离子表面活性剂是直链烷基苯磺酸钠(LAS)。

本方法采用 LAS 作为标准物，其烷基碳链在 C10~C13之间，平均碳数为 12，平均分子量为 344.4。

1范围本方法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质 (MBAS)，亦即阴离子表面活性物质。

在实验条件下，主要被测物是 LAS、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠，但可能存在一些正的和负的干扰(见第 8 条)。

当采用 10mm 光程的比色皿，试份体积为 100mL 时，本方法的最低检出浓度为 0.05mg/L LAS，检测上限为 2.0mg/L LAS。

2原理阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质 (MBAS)。

该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长 652nm 处测量氯仿层的吸光度。

3试剂在测定过程中，仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或具有同等纯度的水。

3.1氢氧化钠(NaOH)：1mol/L。

3.2硫酸(H2SO4)：0.5mol/L。

3.3氯仿(CHCl3)。

3.4直链烷基苯磺酸钠贮备溶液称取 0.100g 标准物 LAS(平均分子量 344.4)，准确至 0.001g，溶于 50mL 水中，转移到 100mL 容量瓶中，稀释至标线并混匀。

每毫升含 1.00mgLAS。

保存于 4℃冰箱中。

如需要，每周配制一次。

3.5直链烷基苯磺酸钠标准溶液准确吸取 10.00mL 直链烷基苯磺酸钠贮备溶液(3.4)，用水稀释至 1000mL，每毫升含 10.0μgLAS。

当天配制。

3.6亚甲蓝溶液先称取 50g 一水磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)溶于 300mL 水中，转移到1000mL 容量瓶内，缓慢加入 6.8mL 浓硫酸(H2SO4，ñ=1.84g/mL)，摇匀。

亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的不确定度分析

亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的不确定度分析根据实际工作中所测饮用水中LAS含量较低,而LAS为常规必检项目, 本文通过亚甲蓝分光光度法测阴离子表面活性剂的方法，得出本方法的不确定度以定量表达本方法的可信程度，数值只有包含了不确定度才真正有意义。

1.实验部分1.1 原理阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652nm处测量氯仿层的吸光度。

1.2试剂与仪器在测定过程中，使用分析纯试剂和蒸馏水，7230G可见光分光光度计, 配有10 mm光程的比色皿。

氯仿(CHCl3),分析纯,十二烷基苯磺酸钠标准溶液(1000mg/L)。

当天配制10.0mg L的标准贮备液。

亚甲蓝溶液和洗涤液按GB5750-85.16.1配制。

1.3 实验方案及过程按照《生活饮用水标准检验法》GB5750-85-16.1的步骤进行实验，于250mL 容量瓶中分别加入适量的水，再移取系列直链烷基苯磺酸钠标准溶液于250mL分液漏斗中，加水刚好100mL，以酚酞为指示剂，滴加NaOH溶液至刚好呈桃红色，再滴加0.5mol/L硫酸至桃红色刚好消失。

加入25mL亚甲蓝溶液，用氯仿萃取三次，萃取液用洗涤液洗涤，定容50mL，用分光光度计于波长652nm处测吸光度。

1.4测量的数学模型1）回归曲线：y=a+bx2）浓度计算公式：c=m/v3）根据样品测定计算公式的独立分量，根据不确定度的传播规律，亚甲蓝分光光度法测定水中直链烷基苯磺酸钠标准溶液测量的合成相对标准不确定度公式表达为：式中：u rel (C)—水中LAS 浓度的相对标准不确定度；u rel (C LAS )—LAS 标准贮备液中引入的相对标准不确定度；u rel (f)—将贮备液稀释至使用液引入的相对标准不确定度；u rel (m)—标准网线拟合求得LAS 含量时引入的相对标准不确定度；u rel (A)—重复测定时引入的相对标准不确定度；u rel (R)—回收率引入的相对标准不确定度；2. 不确定度的评定2.1 LAS 标准溶液引入的不确定度u 1标液浓度：1.000±0.020mg/mL其不确定度为:U 11=0.020/3=0.011547mg/mL 、灵敏度系数c 11=0.02。

氨氮的测定,亚甲蓝分光光度法测定阴离子洗涤剂,微量液-液萃取气相色谱法监测水中的苯系物,食盐中微量碘的测

实验一氨氮的测定报告完成人：xxx同组实验者：xxx一.实验目的1.掌握絮凝沉淀法和蒸馏法进行水样预处理的操作和技能。

2.掌握用纳氏试剂比色法（传统法）测定氨氮的原理和技术。

二.实验原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应，生成淡红棕色胶态化合物，其颜色深浅与氨氮含量成正比，通常可在波长410-425nm范围内测其吸光度，计算其含量。

本法最低检出浓度为0..25mg/L，测定上限为2mg/L。

水样最适当的预处理后，本法可适当用于地面水、地下水、工业废水和生活污水中氨氮的测定。

三、实验仪器和试剂(一) 实验仪器1、氨氮蒸馏装置2、分光光度计3、PH计4、50mL比色管(二)实验试剂1、无氨水：每升蒸馏水中加0.1mL硫酸，在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去50mL初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

2、1mol/LHCL：量取43mL浓盐酸，用水稀释至500mL.3、1mol/L NaOH：将20g氢氧化钠溶于水并稀释至500mL4、轻质MgO：将MgO在500o C下加热，以除去碳酸盐5、0.05%溴百里酚蓝指示剂：称取0.05%溴百里酚蓝置玛瑙研钵内，研细，用新煮沸放冷的水稀释至100ml6、2%硼酸吸收液：称取20g硼酸溶于无氨水，稀释至1L7、10%ZnSO4：称取10gZnSO4溶于无氨水，稀释至100mL８、２５％NaOH：称取２５g氢氧化钠溶于无氨水，稀释至100mL，储存于聚乙烯瓶中。

9. 纳氏试剂:可选择下列方法之一制备:①称取碘化钾5g,溶于10mL无氨水中,边搅拌边分次少量加入二氯化汞(HgCl2)粉末2.5g,直至出现微量朱红色沉淀不易溶解时,充分搅拌混合,并改为滴加二氯化汞饱和溶液,当出现少量朱红色沉不再溶解时,停止滴加。

将上述溶液徐徐注入氢氧化钾溶液中（15g氢氧化钾溶于50mL无氨水中，冷却至是室温），以无氨水稀释至100mLl，混匀。

于暗处静置过夜，将上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。

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实验二十八亚甲蓝分光光度法测定阴离子洗涤剂
一﹑实验目的
1.学习萃取和索氏提取的基本操作。

2.学习测定水样中阴离子洗涤剂的方法。

二﹑实验原理
阴离子洗涤剂主要指直链烷基苯磺酸钠和烷基磺酸钠类物质。

洗涤剂的污染会造成水面产生不易消失的泡沫，并消耗水中的溶解样。

水中阴离子洗涤剂测定方法，常用的有亚甲蓝分光光度法和液相色谱法，前者操作简便，但选择性较差，后者需要有专用设备。

阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂(包括直链烷基苯磺酸钠﹑烷基磺酸纳和脂肪醇硫酸钠)作用，生成蓝色的离子对化合物，这类能与亚甲蓝作用的物质统称亚甲蓝活性物质（MBAS）。

生成的显色物可被三氯甲烷萃取，其色度与浓度成正比，并可用分光光度计在波长652nm 处测量三氯甲烷层的吸光度。

由于测定对象是水中溶解态的阴离子表面活性剂，样品在测定前需经中速定性滤纸过滤以除去悬浮物。

因此，吸附在悬浮物上的表面活性剂不计在内。

三﹑实验仪器
1．分光光度计
2．250mL分液漏斗
3．索氏抽提器（150mL平底烧瓶，φ35×160 mm抽提桶，蛇型冷凝管）。

四﹑试剂
1．4%氢氧化钠溶液
2．3%硫酸
3．三氯甲烷
4．直链烷基苯磺酸钠标准储备溶液：称取0.100g标准物LAS(平均分子量344.4，称准至0.001g)，溶于50mL水中，转移到100mL容量瓶中，稀释至标线，混匀，每毫升含1.00mgLAS。

保存于4℃冰箱中。

如需要，每周配制一次。

5．直链烷基苯磺酸钠标准溶液：准确吸取10.00mL直链烷基苯磺酸钠标准储备溶液，用水稀释至1000mL，每毫升含10.0μgLAS。

当天配制。

6．亚甲蓝溶液：称取50g磷酸二氢钠（NaH
2PO
4
·H
2
O）置于烧杯中，溶于水，
缓慢加入6.8mL浓硫酸，混匀，转移入1000mL容量瓶中。

另称取30mg亚甲蓝（指示剂级），用50mL水溶解后也移入容量瓶中，用水稀释至标线，摇云。

此溶液储
于棕色试剂瓶中。

7．洗涤液：称取50g磷酸二氢钠（NaH
2PO
4
·H
2
O）置于烧杯中，溶于水，缓
慢加入6.8mL浓硫酸，用水稀释至1000mL。

8．酚酞指示剂溶液：将1.0g酚酞溶于50mL乙醇，然后边搅拌边加入50mL 水，滤去沉淀物。

9．玻璃棉或脱脂棉：在索氏提取器中，用三氯甲烷提取4hr，取出干燥，保存在清洁的具塞玻璃瓶中备用。

五﹑实验步骤
1．校准曲线的绘制
取一组分液漏斗10个，分别加入100，99，97，95，93，91，89，87，85，80mL水，然后分别移入0，1.00，3.00，5.00，7.00，9.00，11.00，13.00，15.00，20.00mL直链烷基苯磺酸钠标准溶液，摇匀。

按“水样测定”步骤操作，以测得的吸光度扣除空白实验值（零浓度标准溶液的吸光度）后，与相应的LAS量绘制校准曲线。

2.试样体积
为了直接分析水和废水样,应根据预计的亚甲蓝表面活性物质的浓度选用试样体积,如下表:
当预计的MBAS浓度超过2mg/L时,按上表选取试样量,用水稀释至100mL。

3．水样测定
将待测水样(100mL)移入分液漏斗中，以酚酞为指示剂，逐滴加入4%氢氧化钠溶液至水溶液呈紫红色，再滴加3%硫酸到紫红色刚好消失。

加入25mL亚甲蓝溶液，摇匀后再加入10mL三氯甲烷，激烈振摇30s，注意放气。

过分的振摇会发生乳化现象，必要时，可加入少量异丙醇（小于10mL）以破乳（标准系列亦应加入相同体积的异丙醇）。

再慢慢旋转分液漏斗，使滞留在壁上的三氯甲烷液珠降落，静置分层。

将三氯甲烷层放入预先盛有 50mL洗涤液的第二个分液漏斗内，用数滴三氯甲烷洗第一个分液漏斗的颈管。

重复萃取三次，每次用10mL三氯甲烷。

合并所有三氯甲烷萃取液至第二个分液漏斗中，激烈摇动30s，静置分层。

将三氯甲烷层通过玻璃棉或脱脂棉放入50mL容量瓶中，再用三氯甲烷萃取洗涤液两次（每次用量5mL），此三氯甲烷层也并入容量瓶中，加三氯甲烷到标线，摇匀。

在652nm处，以三氯甲烷为参比，测定样品﹑标准系列和空白实验的吸光度。

测定时应使用相同光程的比色皿。

以样品的吸光度减去空白实验的吸光度后，从校准曲线上查得LAS 的含量。

4．空白实验
按“水样测定”步骤进行空白实验，仅用100mL 水代替试样。

在实验条件下，以10mm 光程比色皿，空白实验的吸光度不应超过0.02。

否则应仔细检查器皿和试剂是否有污染。

六﹑计算
本方法用亚甲蓝活性物质报告结果。

以LAS 计（平均分子量为344.4）。

V
m
C
式中：C —水样中亚甲蓝活性物质的浓度，mg/L ； V —水样体积，mL ；
M —从校准曲线上读取的LAS 量，μg 。

数据列表表示如下:
1．标准曲线的绘制:
2测定:
七﹑讨论
八﹑注意事项
1．实验室用玻璃器皿不能用各类洗涤剂清洗。

使用前先用水彻底清洗，然后用（1+9）盐酸-乙醇洗涤，最后用水冲洗干净。

2．绘制校准曲线和水样的测定，应时用同一批三氯甲烷﹑亚甲蓝溶液和洗涤液。

3.分液漏斗的活塞不得用油脂润滑，可在使用前用三氯甲烷润湿。