培养基配制和灭菌方法验证解读
实验二.培养基的配制及灭菌
实验二培养基的配制及灭菌一、实验目的：1. 掌握常用培养基的制备方法；2. 了解培养基的成分、类型及特点；3. 学会玻璃仪器的洗涤和灭菌前的准备工作。
4.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。
二、实验原理人工配制的培养基是植物组织培养的营养基础，不同材料对培养基的要求不尽相同，适当地设计和选用培养基对组织培养是至关重要的，一个完整的培养基配方应包含有无机盐、有机营养、水、植物生长调节剂、琼脂及其他成分。
培养基的主要成分的详细内容见课本p26~29。
为了省时和减少多次称量的误差，一般先将药品配制成浓缩一定倍数的母液，用时稀释，储存于冰箱低温（2~4摄氏度）中待用。
基本培养基有8中母液，即大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、钙盐母液、铁盐母液、肌醇母液、镁元母液、生长调节物质母液，基本培养基的配制方法有两种：一是可以将培养基的每种成分配成单一化合物的母液，便于配制不同种类的基本培养基时使用；二是配成几种不同的混合液，这样在大量配制同一种培养基时更省时、省力。
在配制母液时应注意防止沉淀产生。
绝大多数生长调节物质不溶于水，可以加热并不断搅拌促使溶解，必要时加入稀酸或稀碱等物质促溶。
各类植物生长调节物质的用量极小,它们对外植体愈伤组织的诱导和根、芽等器官分化起着重要和明显的调节作用。
通常使用的浓度单位是mg/L。
配制好的培养基应在24h之内完成灭菌工作，以免造成杂菌大量繁殖。
灭菌方法有：高温高压灭菌、过滤除菌、射线除菌等方法。
培养基常采取高压灭菌的方法，灭菌时间一般是在0.105MPa压力下，温度121摄氏度时，灭菌时间应根据容积的体积确定，所需最少时间见课本P32表2ˉ2。
培养基必需保证绝对无菌，否则因其营养丰富细菌、真菌极易滋生而导致植物死亡。
灭菌后的培养基不宜马上使用，以免造成培养材料的损失。
（一）、组成培养基的五类成分目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
实验一培养基的配制与灭菌
实验一培养基的配制与灭菌一、目的掌握培养基母液的配制方法；培养基的配制和灭菌技术；不同质地实验用品的灭菌方法。
二、方法步骤1、母液配制一般大量元素、微量元素和其它成分分别配制成100－200倍母液，使用时按比例稀释即可。
配好的母液需贮存于2～4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀和微生物污染，如果出现沉淀或微生物污染，则不能使用。
2、植物激素配制植物激素一般配制成浓度为0.1—1.0mg/ml的溶液，贮存在2～4℃下备用。
由于多数激素难溶于水，所以配制时应按下面步骤进行：IAA：先用少量95%乙醇使之充分溶解，再加蒸馏水定容至需要浓度的体积。
NAA：可溶于热水中，也可采用与IAA同样的方法配制。
2,4-D：先用少量1mol/L的NaOH溶液充分溶解，然后缓慢加入蒸馏水定容至需要浓度体积。
细胞分裂素类：KT和BA等细胞分裂素类物质均溶于稀盐酸，应先用少量1mol/L的HCl溶解后再稀释至需要浓度。
赤霉素：赤霉素的水溶液稳定性较差，一般用95%的乙醇配制成5～10mg/ml的母液低温保存，使用时再稀释。
3、培养基配制按实际配制培养基体积，取各母液的需要量加入一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中，再加入实际配制培养基体积约2/3—3/4的蒸馏水，然后以每升所用蔗糖的量称取放入培养基并使其溶化。
用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调整pH至5.6—5.8，以0.6%—0.8%的比例加入琼脂，并搅拌加热使琼脂完全溶化，用蒸馏水定容至终体积，混合均匀后分装于培养器皿中，然后进行高压灭菌。
4、培养基灭菌分装好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌条件为温度121℃，压力0.105MPa，灭菌时间与培养基容量的关系如下表所示。
培养基体积与灭菌时间的关系三、结果与分析1、培养基的母液配制情况。
2、培养基配制时的注意事项。
四、提交实验报告附：MS培养基配方。
培养基的配制及灭菌实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告篇一：培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）n源：包括无机氮和有机氮。
（3）c源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如nacl、Kh2po4等。
微量元素：cu、K、mg、s、p、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DnA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gnacl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告一、实验目的1、掌握培养基的配制方法和原理。
2、学习并掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法和操作要点。
3、了解灭菌在微生物实验中的重要性。
二、实验原理（一）培养基的配制培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
不同的微生物对营养物质的需求不同，因此需要根据培养的微生物种类和实验目的来选择合适的培养基配方。
培养基通常包含碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等成分。
在配制培养基时，需要按照一定的比例准确称量各种成分，并将其溶解在水中，调节 pH 值至合适范围，最后定容至所需体积。
（二）灭菌灭菌是指杀灭或去除物体上所有微生物（包括芽孢和孢子）的方法。
在微生物实验中，为了防止杂菌污染，必须对培养基、实验器具等进行灭菌处理。
高压蒸汽灭菌是一种常用的灭菌方法，其原理是利用高温高压使微生物的蛋白质和核酸变性失活，从而达到灭菌的目的。
一般在 121℃、1034 kPa 的条件下灭菌 15 20 分钟，可以杀灭包括芽孢在内的所有微生物。
三、实验材料和仪器1、材料牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、NaOH 溶液、HCl 溶液、蒸馏水等。
2、仪器电子天平、药匙、玻璃棒、烧杯、量筒、pH 试纸、三角瓶、移液管、高压蒸汽灭菌锅、培养皿等。
四、实验步骤（一）培养基的配制1、计算根据培养基配方，计算所需各种成分的用量。
例如，配制 1000 mL 牛肉膏蛋白胨培养基，需要牛肉膏 3 g、蛋白胨 10 g、氯化钠 5 g、琼脂 15 20 g。
2、称量用电子天平准确称量各种成分。
先称取琼脂，放入三角瓶中，然后分别称取牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，放入另一个烧杯中。
3、溶解在烧杯中加入适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使各种成分溶解。
将溶解后的溶液倒入三角瓶中，用少量蒸馏水冲洗烧杯，冲洗液也倒入三角瓶中。
4、调节 pH 值用 pH 试纸测定培养基的初始 pH 值，然后用 1 mol/L 的 NaOH 溶液或 1 mol/L 的 HCl 溶液调节 pH 值至 72 74。
实验一 微生物培养基的制备与灭菌知识讲解
实验一微生物培养基的制备与灭菌（8课时）一、目的要求1、学习配制微生物培养基的一般方法和步骤。
2、掌握高压蒸汽灭菌的原理和操作方法。
二、基本原理正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础。
由于微生物种类及代谢类型的多样性，因而用于培养微生物的培养基的种类也很多，它们的配方及配制方法虽各有差异，但一般培养基的配制程序却大致相同，例如器皿的准备，培养基的配制与分装，棉塞的制作，培养基的灭菌，斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相同。
三、实验材料1、药品：牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂粉、1mol/L的NaOH和1mol/L HCl溶液。
2、仪器及玻璃器皿：电子天平、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、酒精灯、移液管、试管、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿和玻璃棒等。
3、其他物品：药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、报纸、线绳和注射器等。
四、操作步骤（一）玻璃器皿的洗涤玻璃器皿在使用前必须用洗涤剂洗刷干净，然后用自来水冲净，置于烘箱中烘干后备用。
（二）牛肉膏蛋白胨培养基的配制1、培养基配制（1）称量：按培养基配方计算出各成分的用量，然后用电子天平进行准确称量后倒入一烧杯中。
注意：称量药品时，一定要用称量纸而不能用滤纸。
称药品用的药匙不要混用，称完药品应及时盖紧瓶盖。
（2）溶解：用量筒称量所需体积的水（根据实验需要可用自来水或蒸馏水），倒入烧杯中，用玻璃棒搅动溶解即可。
（3）调pH：一般用pH试纸测定培养基的pH，可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl 溶液进行调节。
调节pH时，应逐滴加入NaOH或HCI溶液，防止局部过酸或过碱，破坏培养基中成分。
边加边搅拌，并不时用PH试纸测试，直至达到所需pH为止。
注意：pH值不要调过头，以免回调而影响培养基内各离子的浓度。
2、制备液体培养基（1）用量筒准确量取20ml培养基，倒入100ml三角瓶中，塞好棉塞，用报纸包好瓶口并用棉线包扎好，灭菌。
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、引言在微生物学研究中，培养基的制备与灭菌是非常重要的步骤。
培养基是供养微生物生长和繁殖所必需的营养物质的混合物，而灭菌则是为了消除其中的有害微生物，保证培养基的纯净度。
本实验旨在探讨培养基的制备与灭菌的方法与步骤，以及其对微生物培养的影响。
二、培养基的制备2.1 选择培养基成分培养基的成分根据所需培养的微生物种类和目的而定，常见的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基之前，需要明确所需微生物的营养需求，选择合适的成分。
2.2 配制培养基根据所选的成分和配方，按照一定比例将各种成分溶解在适当的溶剂中，常见的溶剂包括蒸馏水和生理盐水。
注意溶解顺序和温度，保证各种成分充分溶解。
2.3 调节pH值微生物对pH值的要求各不相同，因此在制备培养基时需要调节pH值。
使用酸碱溶液逐滴加入培养基中，同时使用pH试纸或pH计检测pH值，直到达到所需的范围。
2.4 灭菌前的处理在灭菌之前，需要对培养基进行一些处理，包括过滤、加热和冷却等。
过滤可以去除其中的固体杂质和大颗粒微生物。
加热可以杀灭其中的有害微生物，常用的方法包括高温灭菌和压力灭菌。
冷却后的培养基可以用于微生物的培养。
三、灭菌实验3.1 高温灭菌高温灭菌是常用的灭菌方法之一，其原理是利用高温杀灭微生物。
将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入高温灭菌器中。
设置合适的温度和时间，一般为121℃，15-20分钟。
高温灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.2 压力灭菌压力灭菌是一种利用高温和高压杀灭微生物的方法。
将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入压力灭菌器中。
设置合适的温度和压力，一般为121℃，15-20分钟。
压力灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.3 灭菌效果验证灭菌后的培养基需要进行灭菌效果验证，以确保其中没有活菌存在。
常用的方法包括接种试验和平板计数法。
接种试验是将灭菌后的培养基接种到无菌平板上，观察是否有菌落生长。
培养基的配制与灭菌实验报告
培养基的配制与灭菌实验报告一、实验目的1.掌握培养基的配制方法；2.掌握培养基的灭菌方法；3.了解常用的培养基配方和用途。
二、实验仪器和试剂仪器：称量器、自动调pH计、恒温培养箱、高压灭菌器等。
试剂：各种常用的培养基配方、蒸馏水、紫外灯、酒精等。
三、实验步骤1.准备工作首先准备好需要的试剂和仪器，经过试剂和仪器的消毒处理后，将其放置在试验台上，以备使用。
2.培养基的配制培养基的配制是实验的关键步骤之一。
在实验过程中，我们使用锥形试管来制备试验的培养基。
首先需要称量出所需的重量并将其加到试管中，之后按照规定的比例加入蒸馏水、糖和其他的试剂，搅拌均匀。
最后使用自动调pH计来调节培养基的pH，确保在制备培养基过程中能够准确地保持pH值在标准范围内。
3.培养基的灭菌在实验中，我们使用高压灭菌器对制备好的培养基进行灭菌处理，以确保在培养试验过程中，培养基中不会出现杂菌和异物的干扰。
在灭菌过程中，我们需要将培养基放入高压灭菌器中，通过高压和高温来杀死细菌和其他微生物。
同时，也需要不断监测培养基的温度和压力，确保灭菌过程的正常进行。
四、实验结果根据实验的结果可以发现，在正确地配制和灭菌培养基的情况下，我们可以得到符合规定标准的培养基样品。
通过实验，我们也可以更加深入地理解常见的培养基配方和用途，为今后的实验研究提供更加可靠和高质量的实验基础。
五、实验思考在实验过程中，我们还需要注意以下几个问题：1.实验时需要仔细操作，避免粗心大意和疏忽带来的不好的影响。
2.在配制和灭菌时，需要严格遵守规定的操作流程和步骤，以免影响前后实验结果的统一性和准确性。
3.值得注意的是，在配制和灭菌过程中，需要注意卫生和消毒处理，以避免细菌和其他微生物的污染和繁殖。
4.在实验过程中，还需要对实验结果进行仔细的分析和讲解，以便更好的理解和掌握实验原理和方法。
综上所述，在实验培养基的配制和灭菌实验中，需要做好多方面的考虑和准备，以确保实验能够顺利进行，并能获得稳定、高质量和高准确度的结果。
培养基的配制与灭菌的实验原理
培养基的配制与灭菌的实验原理1. 培养基的配制1.1 配制的基本概念好啦，各位小伙伴，今天我们要聊聊培养基的配制，听上去是不是有点小复杂，但别急，让我们一起来简单搞懂这玩意儿。
培养基呢，就是我们用来培养微生物的“餐桌”，给它们提供一切所需的营养，好让它们在实验室里像“锅里煮的饺子”一样，茁壮成长。
要想培养基配制得恰到好处，就得搞清楚它的成分，这些成分一般包括碳源、氮源、矿物质、维生素等等，基本上就是“食材”的大合集。
我们会根据不同的微生物选择不同的“食谱”，这样才能让它们在我们的“餐桌”上大快朵颐。
比如，细菌特别喜欢在“营养琼脂”这个大餐上打滚，而真菌则偏爱“马铃薯葡萄糖培养基”，就像你喜欢披萨，他喜欢汉堡一样。
1.2 配制步骤说到配制过程，可得细细说说。
这可不是随便往一盆里搅几下就完事儿的事儿。
首先，我们得准备好各种原料，按照规定的比例把它们混合在一起。
像是“调味料”，我们也得精确计算，比如要加多少克的氨基酸，多少克的糖类，精确得就像给蛋糕配方量糖一样。
混合好了之后，还得将它们溶解在水里，搅拌的时候可别急，慢慢搅拌，避免出现“结块”的情况。
然后，接下来就要将混合液加热，通常是用高温高压的方式来杀死液体中的所有微生物，这一步就像是在做“清汤”，得彻底干净。
2. 灭菌的必要性2.1 为什么要灭菌那么，为啥培养基在配制好后还得做一轮灭菌呢？这就好比是咱们在吃饭前，要把手洗干净一样。
灭菌的目的是为了杀死所有可能的细菌、真菌和其他微生物，确保它们不会在咱们的培养基里横行霸道，影响实验结果。
试想一下，如果咱们的培养基里还有其他微生物，那就像是餐桌上多了几个“讨厌的客人”，它们不仅抢走了微生物的“食物”，还可能把“餐厅”弄得一团糟。
灭菌的过程，就是通过高温、高压或化学药品，把所有可能的干扰因素一网打尽，确保微生物的培养环境是“干净整洁”的。
2.2 常用的灭菌方法谈到灭菌，常用的方法有几种。
最常见的就是高压蒸汽灭菌，这种方法就像是给培养基做“深层清洁”，通过高温高压杀死所有微生物。
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硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案文件编码：硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案目录1、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证计划2、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证小组名单3、硫乙醇酸盐流体培养基配制和火菌方法验证方案4、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证培训记录5、硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证附属记录6硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证报告7、硫乙醇酸盐流体培养基配制和火菌方法验证合格证书硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证计划根据我公司认证领导小组的要求及验证委员会的安排，对硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法进行验证，具体安排如下：—、年月日一年月日，制定验证方案，由硫乙醇酸盐流体培养基配制和火菌方法验证小组组长负责起草。
二、年月日一年月日，验证方案讨论、修改、审批和培训。
三、年月曰一年月日，验证工作实施。
四、年月日一年月日，根据验证情况与记录，书写验证报告。
五、年月日一年月日，验证报告审核批准，合格证发放。
硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证小组名单组长:成员:一、目的通过验证验证所采用的硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法，适合于我公司硫乙醇酸盐流体培养基的制备，为质量控制试验提供优质培养基。
并培养基配制和灭菌的操作方法，为培养基配制和灭菌人员提供正确的操作方法，使培养基配制和灭菌标准化、程序化。
二、适用范围本方案适用于本公司硫乙醇酸盐流体培养基的配制和灭菌方法的验证。
三、内容1.概述培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。
使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按照培养基厂商提供的使用说明配制，如质量/体积、PH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等。
培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能引起颜色变化、透明度降低、PH的改变。
因此，培养基应采用验证的灭菌程序灭菌，培养基灭菌方法和条件，应通过适用性检查试验进行验证。
此外，对高压灭菌器的蒸汽循环系统也要加以验证，以保证在一定的装载方式下的正常热分布。
温度缓慢上升的高压灭菌器可能导致培养基的过热，过度灭菌可能会破坏绝大多数的细菌和真菌培养基促生长的质量。
灭菌器中的培养基的容积和装载方式也将影响加热的速度。
因此，应根据灭菌培养基的特性，进行全面的灭菌程序验证。
根据培养基的特性，按制定的方法进行配制和灭菌，根据验证结果判断是否符合验证标准。
若符合，按验证的方法和条件进行培养基的配制和灭菌，若不符合，重新制定方案，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。
2.验证项目及认可标准连续验证3次配制的硫乙醇酸盐流体培养基。
3.验证依据3.1.SN/T1538.1-2005培养基制定指南32 《药品生产验证指南》（2003版）（国家食品药品监督管理局）3.3.《药品生产质量管理指南》（2010版）34 《中华人民共和国药典》（2010年版二部）3.5.《中国药品检验标准操作规程》（2010年版）4.验证方法与内容4.1.实验准备4.1.1.器具：电磁炉（最大功率2000W）、大烧杯（2000ml）、不锈钢锅、玻璃棒、25&50ml 试管、硅胶塞、细绳、牛皮纸、分析天平、药匙、量筒（100ml、1000ml）等。
4.1.2.设备4.1.3.培养基及试剂4.14 验证用菌株来源于贵州省药品检验所4.2.验证内容4.2.1.执行标准a.配制容器及配套器具的清洗严格按照《玻璃器皿清洗操作规程》执行。
b.培养基的配制严格按照《培养基管理规程》执行。
c.自动台式灭菌器严格按照《TMQ.R-3870型台式灭菌器使用维护保养操作规程》执行.d.取同一批硫乙醇酸盐流体干粉培养基配制三批进行以下验证。
4.2.2.配制灭菌过程a.称量取硫乙醇酸盐流体干粉培养基29.25克，加纯化水1000ml,加热煮沸使其完全溶解。
每次按照此处方量配制8547ml。
b.灭菌前的pH值测定取已配制好的硫乙醇酸盐流体培养基100ml，放冷至25C调节PH值至7.2-7.4范围内。
以此比例来调节剩下的培养基的pH值。
c.分装将已调节好PH值的硫乙醇酸盐流体培养基分装至25&50ml试管中，分装的管数为190〜200管范围，用牛皮纸按40管/捆的方式包扎结实。
其中一管只装约20ml，以备灭菌后最终pH值测定。
d.灭菌器中的培养基的数量及装载方式（满载）将分装好的5捆（40管/捆）培养基试管置于灭菌器中，按下图A、B、C、D、5捆培养基中间的其中一支试管，同时将已编号的5支校正好的留点温度计插入6支待灭菌培养基试管内，开始灭菌。
将已装载好的硫乙醇酸盐流体培养基在121C条件下灭菌15分钟。
灭菌结束后记录各留点温度计点温度。
同时取出5支已灭菌嗜热脂肪芽抱菌，直接置56〜60C培养24〜48小时，另取一支未经灭菌的嗜热脂肪芽抱菌指示剂一起培养，作为阳性对照。
根据颜色判断灭菌效果，培养后全部保持紫色灭菌合格。
若由紫色变为黄色为不合格。
对照管应由紫色变为黄色为该指示剂有效。
e.灭菌后的pH值的测定取20ml管已灭菌的硫乙醇酸盐流体培养基，放冷至25C 测定pH 值，应在6.9-7.3范围内。
f.外观性状灭菌后培养基应对其外观性状仔细检查，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。
贮存中培养基发生颜色变化、浑浊；固体培养基表面产生裂缝或涟漪等异常现象，不符合使用规定时，应停止使用，重新进行配制和灭菌程序验证。
4.2.3.硫乙醇酸盐流体培养基的适用性检查无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基等应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。
本检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。
a.无菌性检查每批培养基随机取5支（瓶），培养14天，应无菌生长。
b.灵敏度检查菌液制备接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生抱梭菌的的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30〜35C培养18〜24小时；上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml 含菌数小于100cfu （菌落形成单位）的菌悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用，若保存在2〜8 C,可在24小时内使用。
培养基接种取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100cfu 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、生抱梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照，培养三天，逐日观察结果。
结果判断空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。
5.组织实施5.1.验证机构的组成5.2.公司验证委员会，负责所有验证工作的领导和组织、审批验证方案和验证报告、发放验证证书。
5.3.硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证工作小组，负责该验证项目的验证方案起草、实施、组织与协调实施，负责验证样品检测，完成各项记录，根据检验和验证结果进行评定、完成验证报告四、附件及相关表格文件硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证报告文件编码：一、验证概述培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。
适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。
《中华人民共和国药典》2010年版二部规定：在实验室中，若采用已验证的配置和灭菌程序制备培养基且过程受控，那么同一批脱水培养基的适用性检查试验可只进行一次。
本公司采用的培养基均是北京三药科技开发公司生产的市售脱水培养基。
为规范生测实验人员在配制培养基时标准化、程序化并符合《中华人民共和国药典》2010年版二部规定，特对培养基的配制程序进行验证。
1.验证组织与实施1.1.验证小组成员及职责分工1.2.本验证由质量部负责并由相关人员根据《硫乙醇酸盐流体培养基配制和灭菌方法验证方案》所规定的方法与步骤实施。
2.实施时间为：年月日一年月日。
二、各项目验证结论1.灭菌前后pH值日期：年月日2.外观性状3.留点温度计温度记录日期：年月日4.指示剂培养结果日期：年月日5.灭菌后培养基无菌性检查5.1.配制批号：日期：年月日52配制批号：日期：年月日53配制批号：日期：年月日6.灭菌后培养基灵敏度检查6.1.菌液计数结果日期：年月日6.2.培养基灵敏度检查结果日期：年月日6.3.培养基灵敏度检查结果日期：年月日培养基灵敏度检查结果日期：年月日配制批号检查项目第一天第二天第三天结果判定7•保存三周后培养基无菌性检查7.1.培养基无菌性检查结果配制批号：日期：年月日7.2.培养基无菌性检查结果配制批号：日期：年月日7.3.培养基无菌性检查结果配制批号：日期：年月日8.保存三周后培养基灵敏度检查8.1.菌液计数结果日期：年月日82 保存三周后培养基灵敏度检查结果日期：年月日8.3.保存三周后培养基灵敏度检查结果日期：年月日8.4.保存三周后培养基灵敏度检查结果日期：年月日建议、结果分析和验证总结1.建议1.1.加强生测室检验人员的操作技能培训，使培养基配制和灭菌过程标准化，程序化。
1.2.当硫乙醇酸盐流体培养基在日常无菌检测时，应对其外观性状进行检查，不符合要求时严禁使用，并对其重新配制和灭菌。
2.结果分析及验证总结2.1.根据上述验证过程及结果分析，本公司生测实验室对硫乙醇酸盐流体培养基的配制和灭菌程序进行验证，其验证结果符合《中华人民共和国药典》（2010年版二部）的要求，其使用期限定为三周。
日常硫乙醇酸盐流体培养基的配制和灭菌采用此验证程序进行。
2.2.再验证周期根据《中华人民共和国药典》（2010年版二部）的要求，当重新购进一个批号的硫乙醇酸盐流体培养基或更换培养基厂家或配制和灭菌程序改变时，应重新进行培养基的配制和灭菌程序验证。
书中横卧着整个过去的灵魂一一卡莱尔人的影响短暂而微弱，书的影响则广泛而深远一一普希金人离开了书，如同离开空气一样不能生活——科洛廖夫书不仅是生活，而且是现在、过去和未来文化生活的源泉法耶夫书籍把我们引入最美好的社会，使我们认识各个时代的伟大智者—史美尔斯书籍便是这种改造灵魂的工具。
人类所需要的，是富有启发性的养料。
而阅读，则正是这种养料--------- 雨果。