【实验】培养基的配制和灭菌
实验二.培养基的配制及灭菌
实验二培养基的配制及灭菌一、实验目的：1. 掌握常用培养基的制备方法；2. 了解培养基的成分、类型及特点；3. 学会玻璃仪器的洗涤和灭菌前的准备工作。
4.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。
二、实验原理人工配制的培养基是植物组织培养的营养基础，不同材料对培养基的要求不尽相同，适当地设计和选用培养基对组织培养是至关重要的，一个完整的培养基配方应包含有无机盐、有机营养、水、植物生长调节剂、琼脂及其他成分。
培养基的主要成分的详细内容见课本p26~29。
为了省时和减少多次称量的误差，一般先将药品配制成浓缩一定倍数的母液，用时稀释，储存于冰箱低温（2~4摄氏度）中待用。
基本培养基有8中母液，即大量元素母液、微量元素母液、有机物母液、钙盐母液、铁盐母液、肌醇母液、镁元母液、生长调节物质母液，基本培养基的配制方法有两种：一是可以将培养基的每种成分配成单一化合物的母液，便于配制不同种类的基本培养基时使用；二是配成几种不同的混合液，这样在大量配制同一种培养基时更省时、省力。
在配制母液时应注意防止沉淀产生。
绝大多数生长调节物质不溶于水，可以加热并不断搅拌促使溶解，必要时加入稀酸或稀碱等物质促溶。
各类植物生长调节物质的用量极小,它们对外植体愈伤组织的诱导和根、芽等器官分化起着重要和明显的调节作用。
通常使用的浓度单位是mg/L。
配制好的培养基应在24h之内完成灭菌工作，以免造成杂菌大量繁殖。
灭菌方法有：高温高压灭菌、过滤除菌、射线除菌等方法。
培养基常采取高压灭菌的方法，灭菌时间一般是在0.105MPa压力下，温度121摄氏度时，灭菌时间应根据容积的体积确定，所需最少时间见课本P32表2ˉ2。
培养基必需保证绝对无菌，否则因其营养丰富细菌、真菌极易滋生而导致植物死亡。
灭菌后的培养基不宜马上使用，以免造成培养材料的损失。
（一）、组成培养基的五类成分目前，大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
实验一培养基的配制与灭菌
实验一培养基的配制与灭菌一、目的掌握培养基母液的配制方法；培养基的配制和灭菌技术；不同质地实验用品的灭菌方法。
二、方法步骤1、母液配制一般大量元素、微量元素和其它成分分别配制成100－200倍母液，使用时按比例稀释即可。
配好的母液需贮存于2～4℃的冰箱中，定期检查有无沉淀和微生物污染，如果出现沉淀或微生物污染，则不能使用。
2、植物激素配制植物激素一般配制成浓度为0.1—1.0mg/ml的溶液，贮存在2～4℃下备用。
由于多数激素难溶于水，所以配制时应按下面步骤进行：IAA：先用少量95%乙醇使之充分溶解，再加蒸馏水定容至需要浓度的体积。
NAA：可溶于热水中，也可采用与IAA同样的方法配制。
2,4-D：先用少量1mol/L的NaOH溶液充分溶解，然后缓慢加入蒸馏水定容至需要浓度体积。
细胞分裂素类：KT和BA等细胞分裂素类物质均溶于稀盐酸，应先用少量1mol/L的HCl溶解后再稀释至需要浓度。
赤霉素：赤霉素的水溶液稳定性较差，一般用95%的乙醇配制成5～10mg/ml的母液低温保存，使用时再稀释。
3、培养基配制按实际配制培养基体积，取各母液的需要量加入一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中，再加入实际配制培养基体积约2/3—3/4的蒸馏水，然后以每升所用蔗糖的量称取放入培养基并使其溶化。
用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl调整pH至5.6—5.8，以0.6%—0.8%的比例加入琼脂，并搅拌加热使琼脂完全溶化，用蒸馏水定容至终体积，混合均匀后分装于培养器皿中，然后进行高压灭菌。
4、培养基灭菌分装好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌条件为温度121℃，压力0.105MPa，灭菌时间与培养基容量的关系如下表所示。
培养基体积与灭菌时间的关系三、结果与分析1、培养基的母液配制情况。
2、培养基配制时的注意事项。
四、提交实验报告附：MS培养基配方。
培养基的配制及灭菌实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除培养基的配制及灭菌实验报告篇一：培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目：培养基的制备与灭菌二、实验目的：1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材：1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理：1、培养基的制备包括一下几种成分：（1）水分：主要成分。
（2）n源：包括无机氮和有机氮。
（3）c源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
（4）无机盐：如nacl、Kh2po4等。
微量元素：cu、K、mg、s、p、Zn。
有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类：按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌：用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
（1）高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般0.1mpa、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基，110℃、30min。
（2）干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。
（3）紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DnA复制。
（4）过滤除菌：实验室中用微孔滤膜（孔径一般为0.22μm）。
除病菌需更小。
五、实验步骤：1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gnacl放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入1.5g琼脂。
实验一 培养基的制备与灭菌
实验一培养基的制备与灭菌一、实验目的1. 了解配制培养基的一般方法和步骤;掌握牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯葡萄糖(蔗糖)培养基的制备方法。
2. 了解灭菌的原理，掌握高压蒸气灭菌的操作方法。
二、实验器材1. 药品:牛肉膏;蛋白胨;氯化钠;葡萄糖(蔗糖);琼脂;1N NaOH;1N HCl等。
2. 仪器及其他:试管;锥形瓶;量杯;玻璃棒;漏斗;纱布;棉花;报纸;天平或台秤;马铃薯;电炉;铝锅;灭菌锅等。
三、实验方法(一)配制培养基的基本过程:(1)称量:按照培养基配方，称取各种原料放于锅中;(2)溶解:锅中加入所需水量(自来水)，加热溶解。
要不断搅拌，以免糊底烧焦，最后加水补足失去的水分;(3)调pH值:按配方要求调节;(4)过滤:用过滤纸或多层纱布过滤，一般无特殊要求，此步可以省去。
(5)分装:按实验要求，可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。
分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上而造成污染。
分装量:斜面培养基装入的培养基约为试管高度的l/5,1/4，灭菌后制成斜面。
分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜。
(6)加棉塞:试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞。
制作棉塞时，应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块，铺展于左手拇指和食指扣成的圆孔上，用右手食指将棉花从中央压入圆孔中制成棉塞，然后直接压入试管或锥形瓶口。
也可借用玻璃棒塞入，也可以用折叠卷塞法制作棉塞(见图)。
棉塞的形状、大小和松紧度要合适，四周紧贴管壁，不留缝隙，才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用。
棉塞不宜过紧或过松，塞好后以手提棉塞，以瓶、管不下落为准。
棉塞的2/3应在管内，上端露出1/3，便于提拔。
如制作时不慎沾上培养基则不可再用。
(7)包扎:加塞后，将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸或双层报纸，以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。
若培养基分装于试管中，则应以7支在一起，再于棉塞外包一层牛皮纸，用绳扎好。
然后用笔注明培养基名称、组别、日期。
实验一培养基的配制及灭菌
实验一培养基的配制及灭菌培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
各类微生物对营养的要求不尽相同，因而培养基的种类繁多。
在这些培养基中，就营养物质而言，一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。
培养基的配制，一是要求在营养成分上能满足所培养微生物生长发育的需要，二是培养基在使用前不带菌，三是以灭菌后和保存过程中营养成分不发生变化。
培养基的灭菌通常在培养基配制后进行，其目的是杀灭培养基中残存的微生物或活的生物残体，保证培养基在贮存过程中不变质，也防止其他生物对培养的污染。
一、实验目的1．掌握实验室常用玻璃器皿的清洗、干燥和包扎方法。
2．明确培养基的配制原理。
3．掌握配制培养基的一般方法和步骤。
4．了解湿热和干热灭菌的原理，并掌握有关的操作技术。
二、实验原理灭菌是指杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽孢的过程。
消毒是指用物理、化学或生物的方法杀死病原微生物的过程。
灭菌的原理就是使蛋白质和核酸等生物大分子发生变性，从而达到灭菌的作用，实验室中最常用的就是干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。
因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160～170℃），时间长（1～2h）。
但干热灭菌温度不能超过 180℃。
否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。
高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大。
实验七 培养基的配制和灭菌
（二）培养基灭菌
培养基分装好后，塞上棉塞，外面再包一牛皮纸，便 可灭菌。灭菌的时间和温度按各培养基规定进行，以保证 灭菌效果和不损坏培养基的必要成分。培养基经灭菌后， 可放在37恒温箱培养24小时，无菌者方可使用。 在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽灭菌 和干热灭菌。一般培养基和水等用高压蒸汽灭菌，而玻璃 器皿常用干热灭菌。蒸汽灭菌为105-121℃，15-20分钟， 干热灭菌为160-170℃，1-2小时。目的都是使细菌体内蛋 白质凝固变性而达到灭菌的目的。 在同一温度下，湿热杀菌效力比干热大，因为在湿 热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固，同时湿热 穿透力强，而且当蒸汽与被灭菌物体接触凝成水分时，又 可放出热量，使温度迅速增高，从而增加灭菌效力。
高压蒸汽灭菌步骤如下： 高压蒸汽灭菌步骤如下：
灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。 1. 灭菌器内加入一定量的水，将包扎好的物品放入其中。 接通电源， 2. 接通电源，进行加热 排除高压锅内的空气，可将排气阀打开， 3. 排除高压锅内的空气，可将排气阀打开，待排出大气后 关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到0.5kg/cm2 0.5kg/cm2时再 关闭排气阀；或关闭排气阀，待压力上升到0.5kg/cm2时再 打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气阀。 打开排气阀，待压力回复到0时再关闭排气阀。 当压力达1.05kg/cm2 1.05kg/cm2时 此时灭菌器内的温度为121℃ 121℃， 4. 当压力达1.05kg/cm2时，此时灭菌器内的温度为121℃， 维持20min 对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、 20min。 维持20min。对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸等 物时，应适当降低压力，延长时间。 物时，应适当降低压力，延长时间。 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时， 5. 灭菌时间一到，切断电源，待压力降至零时，才能打开 排气阀，然后打开灭菌器盖， 排气阀，然后打开灭菌器盖，取出物品
培养基的制备与灭菌实验报告
培养基的制备与灭菌实验报告一、引言在微生物学研究中，培养基的制备与灭菌是非常重要的步骤。
培养基是供养微生物生长和繁殖所必需的营养物质的混合物，而灭菌则是为了消除其中的有害微生物，保证培养基的纯净度。
本实验旨在探讨培养基的制备与灭菌的方法与步骤，以及其对微生物培养的影响。
二、培养基的制备2.1 选择培养基成分培养基的成分根据所需培养的微生物种类和目的而定，常见的成分包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
在制备培养基之前，需要明确所需微生物的营养需求，选择合适的成分。
2.2 配制培养基根据所选的成分和配方，按照一定比例将各种成分溶解在适当的溶剂中，常见的溶剂包括蒸馏水和生理盐水。
注意溶解顺序和温度，保证各种成分充分溶解。
2.3 调节pH值微生物对pH值的要求各不相同，因此在制备培养基时需要调节pH值。
使用酸碱溶液逐滴加入培养基中，同时使用pH试纸或pH计检测pH值，直到达到所需的范围。
2.4 灭菌前的处理在灭菌之前，需要对培养基进行一些处理，包括过滤、加热和冷却等。
过滤可以去除其中的固体杂质和大颗粒微生物。
加热可以杀灭其中的有害微生物，常用的方法包括高温灭菌和压力灭菌。
冷却后的培养基可以用于微生物的培养。
三、灭菌实验3.1 高温灭菌高温灭菌是常用的灭菌方法之一，其原理是利用高温杀灭微生物。
将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入高温灭菌器中。
设置合适的温度和时间，一般为121℃，15-20分钟。
高温灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.2 压力灭菌压力灭菌是一种利用高温和高压杀灭微生物的方法。
将配制好的培养基倒入培养瓶中，盖上瓶盖，放入压力灭菌器中。
设置合适的温度和压力，一般为121℃，15-20分钟。
压力灭菌后的培养基可以用于无菌条件下的微生物培养。
3.3 灭菌效果验证灭菌后的培养基需要进行灭菌效果验证，以确保其中没有活菌存在。
常用的方法包括接种试验和平板计数法。
接种试验是将灭菌后的培养基接种到无菌平板上，观察是否有菌落生长。
实验三 培养基的配制与灭菌
1、葡萄糖发酵培养基 蛋白胨 10g NaCl 5g 葡萄糖 10g 水1000mL 1.6%溴甲酚 紫水 pH 7.4-7.6 将蛋白胨、NaCl、葡萄糖加入水中，加热调pH至7.4-7.6， 加入1.6%溴甲酚紫水溶液。分装试管内倒置一杜氏小管， 塞上硅胶塞，灭菌。 2、乳糖发酵培养基 蛋白胨 20g 乳糖 10g 水1000mL 1.6%溴甲酚紫水溶液 1mL pH 7.4-7.6 将 蛋 白 胨 、 乳 糖 加 入 水 中 ， 加 热 调 pH 至 7.4-7.6 ， 加 入 1.6%溴甲酚紫水溶液。分装试管内倒置一杜氏小管，塞上 硅胶塞，灭菌。 3、M.R.与V.P.试验培养基 蛋白胨 5g 葡萄糖 5g K2HPO4 5g 水1000mL 分装试管，塞上硅胶塞，灭菌。
6.到时间后停止加热，待压力下降至常压后， 慢慢打开排汽口，然后打开锅盖，• 出灭菌物。注意 取 在压力未降至0时，切勿打开锅盖，否则突然降压， 会招致玻璃器皿破损或培养基沸腾，沾湿棉塞冲出管 外 7.取出灭菌物后，若试管应在琼脂未凝固之时将 试管摆成斜面。应用此法灭菌是否彻底的一个关键是 在压力上升之前必须将锅内的冷空气完全驱尽，否则 压力表指针所指的压力不能代表锅中的真正温度。
2.摆入上述包装好的待灭菌培养基，但不 能摆得太挤，以免影响蒸汽通过和灭菌效果。 3.加盖旋紧螺旋，使蒸汽锅密闭不漏气(若 为手提式应对角螺旋均匀旋紧)。
4.打开排气阀，通入热源，自开始产生蒸汽至 蒸汽猛烈的喷出而无空气时关紧放气阀。 5.升温升压：继续加热，至压力计读数达 0.1Mpa(121.5°)后保持30分钟。
4、明胶培养基 牛肉膏 3g 蛋白胨 10g NaCl 5g pH 7.0-7.2 分装试管，塞上硅胶塞，灭菌。 5、硝酸盐培养基 明胶 150g 水1000mL
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(2) 常用的灭菌方法：
灼烧灭菌：接种用具和接种过程中的试管口或瓶 口放在酒精灯火焰的充分燃烧层中进行灼烧灭菌。
(2) 常用的灭菌方法： 干热灭菌：将玻璃器皿、金属用具等能耐高温并 需要保持干燥的物品放到干热灭菌箱内，在 160～170OC中加热1～2h即可。
到目前为止 几十项诺贝尔生理学和医学奖、化学奖
都与微生物学有关
微生物基础知识
病毒 原核生物 微生物的分类 真菌 原生生物 特点： 结构都相当简单,个体多数十分微小。通常 要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚。
专题2 :微生物的培养与应用
主要内容
一、培养基作用、种类 二、无菌技术 三、制备牛肉膏蛋白胨培养基 四、纯化大肠杆菌
一、培养基
1.培养基定义：
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配
置出供其生长繁殖的营养基质称培养基。
2.培养基的营养构成
(1)基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ①碳源 无机碳源：CO2、CO32-、HCO3- 自养微生物
有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等 异养微生物
②氮源
无机氮源：NH4＋、NO3有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
的代谢产物 素、牛肉膏、蛋
白胨等
特殊营 生长必不可少的 酶和核酸的组 维生素、氨基
养物质 微量有机物
成成分
酸、碱基等
在生物体内含量 水 很高，在低等生
物体内含量更高
为微生物提供除 碳、氮以外的各 无机盐 种重要元素，包 括大量元素和微 量元素
不仅是优良的 溶剂而且可维 持生物大分子 结构的稳定 细胞内的组成 成分，生理调 节物质；某些 化能自养菌的 能源，酶的激 活剂
注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源
牛肉膏
又称牛肉浸膏，是采用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、 过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。 有牛肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。
富含：糖类、碳源、维生素、磷酸盐等
蛋白胨
蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥 而成的外观呈淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。 蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在 胃内蛋白质的初步消化产物之一就是蛋白胨。蛋白胨 富含有机氮化合物，也含有一些维生素和糖类。
试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计 制备方法：在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用：
大肠杆菌在伊红美蓝 培养基上典型特征
大肠杆菌菌落呈黑色中心 ,有金属光泽
4.培养基配制原则：
（1）目的要明确：要根据所培养的微生物的种类、培 养的目的等，选择原料配制培养基。
3.消毒与灭菌的概念
（1）消毒定义： 指使用较为温和的物理或化学方法仅
杀死物体表面或内部一部分对人体有害的 微生物。（不包括芽孢和孢子）
对象：操作空间、双手
（2）灭菌的定义：
使用强烈的理化因素杀死物体内外 所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达 到完全无菌之过程。
对象：接种环、接种针、玻璃器皿、 培养基等
（2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 （碳源和氮源的比最为重要）
如：谷氨酸生产中 C:N=4:1菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少。 C:N=3:1菌体繁殖受抑制但谷氨酸的合成量大增。
（3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。 细菌pH为：6.5-7.5；放线菌pH为：7.5-8.5； 真菌pH为：5.0-6.0。
富含：氮源、一些维生素
(2)特殊营养：维生素、碱基等 （牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
(3)pH、氧气的需求
例如: 培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素； 培养霉菌时需将PH调至酸性； 培养细菌时需将PH调至中性或微碱性； 培养厌氧型微生物时则需要提供无氧的条件。
培养基的成分及功能
营养要素 含义
碳源
凡能提供所 需碳元素的 物质
氮源
凡能提供所 需氮元素的 物质
作用
主要来源
构成生物体细 无机化合物：CO2、 胞的物质和一 NaHCO3； 些代谢产物； 有机化合物：糖
有些是异养生 类、脂肪酸、花
物的能源物质 生饼粉、石油等
无机化合物：N2、 合成蛋白质、 NH3、铵盐、硝酸盐； 核酸以及含氮 有机化合物：尿
要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。
常见选择培养基举例： 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 唯一碳源为纤维素的培养基：分解纤维素的细菌
鉴别培养基
用途：鉴别不同种类的微生物 原理：依据微生物产生的某些代谢产物与培养基中特定
4.常用的消毒与灭菌的方法
(1) 常用的消毒方法：
煮沸消毒法:在100℃煮沸5-6min可以杀死微 生物细胞和一部分芽孢。
巴氏消毒法：在70-75 ℃煮30min或 80 ℃ 煮 15min可以杀死不耐高温的液体中的微生物，并 且使液体中的营养成分不被破坏。（如牛奶）
化学药剂消毒法:用70%的酒精擦拭进行皮肤 消毒;用氯气消毒水源等。
区别： 加入琼脂的量决定培养基的形态。
熔点：96℃ 凝固点：40℃ 注意：一般细菌不能利用琼脂。
培养基种类 固体培养基
特点
作用
菌落 外观固态
微生物的纯化、分离、计数
半固体培养基 液体培养基
容器倒放不致流出， 观察微生物的运动、 剧烈震动则破散 鉴定菌种
呈液态
常用于工业生产
选择培养基
用途：从众多微生物中选择、分离出所需要的微生物 原理：依据某些微生物对某些物质的抗性而设计 制备方法：在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需
二、无菌技术
1、获得纯净培养物的关键：防止外来杂菌的入侵
2、无菌技术包括：
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ；
（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进 行灭菌 ；
（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒 精灯火焰附近旁进行；
（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相 接触。
3.培养基的类型和用途
据化学成分可分为：_天__然__培养基和_合__成__培养基
培
养 基
据外观物理状态可分为：液__体__培养基半__固__体__培养
的 基和_固__体__培养基
类
型 据培养基功能可分为：选__择__培养基和_鉴__别_培养基
和基础培养基
比较：固体培养基和半固体培养基、液体培养基。