分子生物学重组DNA技术试题.doc

分生—重组DNA技术试题一、单选1、在分子生物学领域，分子克隆主要是指（）A、DNA的大量复制B、DNA的大量转录C、DNA的大量剪切D、RNA的大量反转录E、RNA的大量剪切2、在分子生物学领域，重组DNA又称（）A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、基因工程E、DNA工程3、在重组DNA技术中，不常用到的酶是（）A、限制性核酸内切酶B、DNA聚合酶C、DNA连接酶D、反转录酶E、DNA解链酶4、多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为（）A、平头末端B、3突出末端C、5突出末端D、粘性末端E、缺口末端5、可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶称为（）A、限制性外切核酸酶B、限制性内切核酸酶C、非限制性外切核酸酶D、非限制性内切核酸酶E、DNA内切酶6、CDNA是指（）A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA2补的RNAD、在体内经反转录合成的与RNA互补的DNAE、在体内经转录合成的与DNA互补的RNA7、基因组代表一个细胞或生物体的（）A、部分遗传信息B、整套遗传信息C、可转录基因D、非转录基因E、可表达基因8、在基因工程中通常所使用的质粒存在于（）A、细菌染色体B、酵母染色体C、细菌染色体外D、酵母染色体外E、以上都不是9、就分于结构而论，质粒是（）A、环状双链DNA分子B、环状单链DNA分于C、环状单链RNA分子D、线状双链DNA分子E、线状单链DNA分子10、聚合酶链反应可表示为（）A、PECB、PERC、PDRD、BCRE、PCR11、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是（）A、化学合成法B、基因组文库法C、CDNA文库法D、聚合酶链反应E、差异显示法12、重组DNA的基本构建过程是将（）A、任意两段DNA搂在一起B、外源DNA接入人体DNAC、目的基因接人适当载体D、目的基因接入哺乳类DNAE、外源基因接人宿主基因13、ECoRI切割DNA双链产生（）A、平端B、5’突出粘端C、3’突出粘端D、钝性末端E、配伍末端14、催化聚合酶链反应的酶是（）A、DNA连接酶B、反转录酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶E、TaqDNA聚合酶15、将PstI内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属（）A、同聚物加尾连凑B、人工接头连接C、平端连接D、粘性末端连接E、非粘性末端连接16、限制性核酸内切酶切割DNA后产生（）A、3磷酸基末端和5羟基末端B、5磷酸基末端和3羟基末端C、3磷酸基末端和5磷酸基末端D、5羟基末端和3羟基末端E、3羟基末端、5羟基末端和磷酸17、重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是（）A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性核酸内切酶18、以质粒为载体。

将外源基因导入受体菌的过程称（）A、转化B、转染C、感染D、转导E、转位19、最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是（）A、营养互补筛选B、抗药性筛选C、免疫化学筛选D、PCR筛选E、分子杂交筛选20、α互补筛选法属于( )A、抗药性标志筛选B、酶联免疫筛选C、标志补救筛选D、原位杂交筛选E、免疫化学筛选21、下列常用于原核表达体系的是( )A、酵母细胞B、昆虫细胞C、哺乳类细胞D、真菌E、大肠杆菌22、在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用( )A、反转录酶B、多聚核苷酸激酶C、引物酶D、RNA聚合酶E、末端转移酶23、重组DNA技术常用的限制性核酸内切酶为（）A、I类酶B、Ⅱ类酶C、Ⅲ类酶D、Ⅳ类酶E、Ⅴ类酶25、用于重组DNA的限制性核酸内切酶识别核苷酸序列的（）A、正超螺旋结构B、负超螺旋结构C、α螺旋结构D回文结构 E、锌指结构26、下列有关重组DNA技术的叙述，正确的是（）A、重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B、所有的限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列C．选细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达E．重组DNA 技术不需要限制酶27、作为基因的运输工具-运载体，必须具备的条件之一及理由是（）A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件D．能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选E．能够转载比较大的基因28、基因治疗是把健康的外源基因导入（）A．有基因缺陷的DNA分子中B．有基因缺陷的染色体中C．有基因缺陷的细胞器中D．有基因缺陷的细胞中E．有缺陷的基因中29、应用重组DNA技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。

这里的基因探针是指（）A．用于检测疾病的医疗器械B．用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C．合成β-球蛋白的DNAD．合成苯丙羟化酶的DNA片段E．用于表达的外源基因30、基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达④提取目的基因。

正确的顺序是（）A．③②④① B．②④①③ C．④①②③ D．③④①② E．③④②①二、多选1、基因重组包括( )A、同源重组B、位点特异性重组C、插入序列转座D、细菌的基因转移与重组E、转座子转座2、下列能作为基因克隆载体的事（）A、质粒B、M13噬菌体C、病毒RNAD、λ噬菌体E、逆转录病毒的DNA3、转座的基因学效应包括（）A、复制转座可以引起缺失B、转座可以引起生物进化C、专做可以引发移码突变、基因提前终止和启动基因的表达D、转座可使插入位点产生新基因E、复制转座可引起倒位4、限制性内切酶的特点包括（）A、辨认的碱基一般为4~6个B、其识别不受DNA来源的限制C、酶切后的DNA可以产生粘性末端D、酶切后的DNA可以产生平末端E、能同时切开DNA双链5、有关cDNA文库的叙述正确的是（）A、cDNA文库可以包括该物种的全部结构基因B、cDNA包括该物种的内含子和调控区C、可以从组织中提取总RNA逆转录建立cDNA文库D、可以从组织中提取mRNA逆转录建立cDNA文库E、cDNA文库包含编码mRNA和tRNA的三、名词解释1、同源重组（homologous recombination）2、转座(transposition)3、接合作用(conjugation)4、基因重组(gene recombination)5、基因组文库((genetic DNA library)四、简答题1、简述质粒的概念和特性，常用的质粒载体有哪几种？2、简述重组DNA技术的原理及技术。

3、简述黏性末端DNA重组体的构建过程。

答案：一、单选1-5：A D E D B6-10：A B C A E11-15：D C B E D16-20：B C A B C21-25：E E B C D26-30：B AABC二、多选1、ABCDE2、ABDE3、BCDE4、ABCDE5、ACD三、名解1、DNA同源序列之间的重组，实现两者间进行单链或双链的交换，是最基本的DNA重组方式。

2、由转座因子或插入序列介导的基因的转移或重排现象。

3、细菌细胞相互接触时将遗传信息从一个细胞转移给另一个细胞的过程。

4、不同来源的DNA分子通过磷酸二酯键组合成新DNA的过程5、将某种生物的基因组DNA切割成一定大小的片段，并与合适的载体重组后导入宿主细胞，进行克隆。

这些基因组DNA片段的集合即基因组文库，包含了该生物的所有基因。

四、问答1、质粒为细菌染色体外一些双链、共价闭合环状DNA分子，是能够进行独立复制并保持稳定遗传的复制子。

质粒具有复制和控制机构，能够在细胞质中独立自主的进行自身复制，并使子代细胞保持它们恒定的拷贝数。

质粒一般具有以下特性：①自主复制性，它能独立于宿主细胞的染色体DNA 而自主复制；②质粒不相容性；③可扩增性；④可转移性。

理想质粒载体应具备①具有松弛型复制子；②在复制子外存在几个单一的酶切位点；③具有插入失活的筛选标记；④分子量相对较小，有较高的拷贝数。

常见的质粒载体有：pBR322质粒、pUC质粒载体、pGEM系列载体等。

2、重组DNA是在体外利用限制性内切酶，将不同来源的DNA分子进行特异的切割，获得的目的基因或DNA片段与载体连接，从而组成一个新的DNA分子。

重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞，并在宿主细胞中进行无性繁殖，获得大量的目的基因或DNA片段。

经重组的DNA分子能在宿主细胞中进行表达，获得相应的蛋白质。

大致步骤包括：①目的基因的获取；②载体的选择；③目的基因与运载体连接成重组 DNA；④重组DNA导入受种细胞；⑤重组体的筛选。

3、目的基因和载体可由同一种限制酶切割后产生，或由不同的限制酶切割形成互补黏性末端，经退火，彼此间很容易按碱基配对原则形成氢键。

然后由DNA 连接酶催化连接接头处的缺口，形成重组质粒。

载体DNA在限制酶切割后，用碱性磷酸酶处理，除去5’端磷酸基，以避免载体DNA自身环化。