单克隆抗体药物的临床前研发
最新：单克隆抗体药物治疗视神经脊髓炎谱系疾病的临床试验研究进展
最新：单克隆抗体药物治疗视棉经脊髓炎谱系疾病的临床试验研究避展视神经脊髓炎谱系疾病（neuromyelitis optica spectrum disorders , NMOSD）是一种体液免疫介导的中枢禅经系统炎性脱髓鞠疾病，多累及视神经和脊髓，真高高复发、高致残的特点，主要的致病抗体为抗水通道蛋白4( A QP4）抗体。
约70%的NMOSD患者AQP4抗体阳性，女性较男性高发（9 : 1 ），平均发病年龄为40岁。
NMOSD急性期的治疗方法包括大剂量糖皮质激素、丙种球蛋白冲击治疗和血浆置换等。
经典的缓解期预防复发药物包括口服糖皮质激素、硫瞠瞟岭、他克莫司、环抱素等免疫抑制剂。
虽然这些药物仍是当前不可替代的治疗NMOSD的常用药物，但部分患者难以忍受真带来的广泛的免疫抑制、骨髓抑制等不良反应，因此开发安全高效的药物，对阜期治疗、预防复发以及提高NMOSD患者的生活质量尤为重要。
近年来，己再多种单克隆抗体药物用于治疗NMOSD 因真靶点相对明确，作用效应较集中，不良反应相对较少，为该疾病的治疗带来新希望。
为确定这些药物的中远期疗效、安全性和不良反应等，已开展了一系列临床t鹉金。
本文就单克隆抗体药物治疗NMOSD的作用机制和临床试验的最新进展进行综述。
01、NMOSD的发病机制AQP4抗体在NMOSD的发生发展中起重要作用。
AQP4是一种位于细胞膜的转运蛋白，可根据渗透压的变化控制水分子进出细胞，在整个中枢神经系统（包括脊髓、视神经和脑）的星形胶质细胞中表达。
AQP4抗体主要由外周的B细胞产生。
真在一定的条件下可通过血脑屏障（BBB）并与血管周围的星形胶质细胞足突表面的AQP4抗原结合，来诱导补体依赖性细胞毒性（CDC）和抗体依赖性细胞毒性（ADCC）；前者指AQP4抗体和抗原结合后激活补体经典途径，形成膜攻击复合物，对星型胶质细胞发挥裂解效应；ADCC是指AQP4抗体和抗原结合后，抗体的Fe段与杀伤细胞（NK细胞、巨睦细胞等）表面的Fe受体结合，杀伤细胞通过程放穿孔素、颗粒酶等细胞毒物质直接杀伤星型胶质细胞。
单克隆抗体药物研制的关键技术之一：抗体药物靶标筛选
白作 为 抗 体 药 物 靶 标 来研 发 抗 体 药 物 。 这 种 方 法 的缺
点 主 要 集 中在 两 方 面 ：一 是 所 能 得 到 的抗 体 药 物 靶标 的 数 量 极 其 有 限 ，并 且 这 些 靶 标 都 是 十 多年 前 就 已经 发 现 的 ：二 是 历 时 长 ，一 般 需 要 十 到 二 十 年 的 时 间 。 随着 人 类 基 因组 计 划 的完 成 和 蛋 白组 学 研 究 的开 展 ， 发 现 的 新 基 因 和 新 蛋 白 越 来 越 多 ， 人 们 从 中 看 到
克 隆 抗 体 在 疾 病 治 疗 方 面 的作 用 越 来 越 受到 人 们 的重 视 。 目前 美
国Ｆ ＤＡ 已 批 准 了 ３ 种 抗 体 治 疗 药 ２ 物 及 ７ 抗 体 融 合 蛋 白药 物 ， 其 中 种 鼠 单 抗 ３ ，嵌 合 抗 体 ６ ，人 源 化 抗 体 １ 种 ， 人 抗 体 种 种 ３ ９ ， 抗 体 融 合 蛋 白７ ， 有 １ 个 用 于 治 疗 肿 瘤 ， 另 外 种 种 ３
单 克 隆抗 体 药 物 引 导 了生 物 技 术 的 第 二 次 革 新 浪
了希 望 ，但 是 如 何 尽 快从 众 多 的 基 因 中挑 选 出可 用 来
中 国 医药 技术 经 济 与 管理 Ｉ２ １ ． ０２４
４ １
国
研 发 新 药 的 基 因 ， 如 何 选 择 最 佳 的 技 术 方 法 来 挑 选 这 些 基 因 ，如 何 在 基 因和 蛋 白功 能 尚 未 充 分 了解 之前 开 发 药 物 ，如 何 建 立 抗 体 药 物 靶 标 筛 选 和 抗 体 药物 筛 选 技 术 ， 降 低 研 发 成 本 和 风 险 ， 这 些 都 是 生 物 医 药 产 业 所 面 临 的 重 大挑 战 。
人源化单克隆抗体研究进展
人源化单克隆抗体研究进展人源化单克隆抗体是一种具有高度特异性和亲和力的生物药物，通过杂交瘤技术将鼠源单克隆抗体的可变区与人类抗体的恒定区进行交换，以减少免疫原性，提高治疗效果。
近年来，随着科技的不断进步，人源化单克隆抗体研究取得了显著的进展，为肿瘤、自身免疫性疾病、神经系统疾病等治疗领域提供了新的思路和方法。
研究现状：人源化单克隆抗体方法、成果与不足人源化单克隆抗体研究主要包括抗体库的建立、抗体筛选和优化、以及抗体生产等多个环节。
目前，研究人员已成功建立了多种人源化单克隆抗体，并应用于临床试验，取得了一定的疗效。
例如，针对肿瘤治疗的人源化单克隆抗体药物能够特异性地识别肿瘤细胞，并通过激活免疫反应来杀死肿瘤细胞。
然而，人源化单克隆抗体研究仍存在一定的不足之处，如抗体药物的免疫原性、毒副作用等问题需要进一步解决。
研究方法：人源化单克隆抗体研究实验设计与数据分析人源化单克隆抗体研究的实验设计主要包括建立人源化抗体库、筛选和优化抗体，以及进行药效和毒理试验等。
在实验过程中，需要采集和处理大量的实验数据，并进行深入的统计分析和比对，以获得抗体的最佳配对组合和最佳治疗剂量等参数。
成果和不足：人源化单克隆抗体研究的成果与不足人源化单克隆抗体研究在肿瘤、自身免疫性疾病、神经系统疾病等多个治疗领域取得了显著的成果。
例如，针对肿瘤治疗的人源化单克隆抗体药物已经成功应用于临床试验，并显示出较好的疗效和安全性。
在自身免疫性疾病和神经系统疾病治疗领域的人源化单克隆抗体药物也在研发和试验阶段。
然而，人源化单克隆抗体研究仍存在一定的不足之处，如抗体药物的免疫原性、毒副作用等问题需要进一步解决。
同时，抗体药物的生产成本较高，限制了其在临床上的广泛应用。
尽管人源化单克隆抗体研究取得了一定的成果，但仍存在许多问题需要进一步解决。
未来，研究人员需要进一步探索人源化单克隆抗体的作用机制和优化方法，以获得更高效、安全、低成本的药物。
同时，需要加强抗体药物的工艺研究，提高生产效率和降低生产成本。
单克隆抗体的临床应用
单克隆抗体的临床应用随着生物技术的迅猛发展，单克隆抗体（Monoclonal Antibodies, mAb）作为一种重要的药物类别，已经在临床领域展现出了巨大潜力。
单克隆抗体通过特异性地结合到靶标分子上，可以识别和抑制疾病相关的分子，并发挥治疗作用。
本文将讨论单克隆抗体的原理、制备方法以及其在临床应用中的重要性。
一、单克隆抗体的原理单克隆抗体是由相同免疫球蛋白结构的同一种细胞克隆分泌的抗体所组成。
与多克隆抗体相比，单克隆抗体具有更高的特异性和单一的抗原结合位点。
这使得单克隆抗体在临床应用中更为理想，特别是在诊断和治疗方面。
单克隆抗体的制备方法包括小鼠杂交瘤技术和基因工程技术。
小鼠杂交瘤技术是最早用于单克隆抗体制备的方法之一，其基本原理是将抗原与小鼠免疫后，脾细胞中的B细胞与骨髓瘤细胞（如SP2/0或NSO细胞）融合，形成杂交瘤细胞（hybridoma）。
随后，通过限制稀释法或ELISA等筛选方法，筛选出特异性抗原的单克隆抗体。
尽管这种方法相对成熟，但存在一定的局限性，例如不适用于高度保守的抗原、与人类非常相似的抗原等情况。
基因工程技术则是一种更加先进且灵活的制备单克隆抗体的方法。
通过将人源或人-小鼠杂交的抗原受体基因导入到免疫缺陷小鼠的胚胎中，培育出能够产生人性化或全人源的抗体的小鼠。
然后，从这些小鼠中获得B细胞，利用单细胞PCR或限制酶切法获取到单克隆抗体的基因。
接着，将这些基因导入到真核表达系统（如CHO细胞）中，使其表达并生成单克隆抗体。
基因工程技术的优势在于可以避免小鼠免疫时产生的抗体与人体抗体产生的免疫反应，并且可以人为地修改抗体的特性，提高其稳定性、亲和力等。
二、单克隆抗体在临床应用中的重要性1. 诊断应用单克隆抗体在诊断领域有着广泛的应用。
例如，通过与荧光染料或放射性同位素标记的单克隆抗体结合，可以制成高度敏感的免疫组化试剂盒，用于肿瘤组织的检测和鉴定。
此外，在流式细胞术中，单克隆抗体与细胞表面的特定抗原结合，可以快速识别和分离不同类型的细胞。
生物治疗药物及临床应用研究
生物治疗药物及临床应用研究生物治疗药物是指利用生物材料制备出来的药物，通过针对特定的分子或细胞，以达到治疗一系列疾病的目的。
近年来，随着分子生物学和生物技术的快速发展，越来越多的生物治疗药物涌现出现，例如单克隆抗体、蛋白质药物及基因治疗等。
这些药物的研发不仅开辟了一条新的治疗途径，而且在临床应用中也取得了显著成果。
1. 单克隆抗体单克隆抗体是一种以体外免疫技术为基础制备的抗体，具有极高的亲和力和特异性，且作用目标广泛。
在临床方面，单克隆抗体主要用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病等多种疾病，例如英进制药公司的儿茶酚胺肿瘤坏死因子（TNF）α单克隆抗体英夫利昔单抗（Infliximab），已经成为治疗类风湿关节炎、炎症性肠病等疾病的有效药物。
此类药物的疗效主要通过针对特定的癌细胞或免疫细胞表面受体、细胞因子或增殖信号进行介入治疗，从而实现治疗效果。
2. 蛋白质药物蛋白质药物是一种以工程技术为基础制备的药物，它由人工合成的蛋白质组成。
这类药物的特点是分子量较大、结构复杂、溶解度低，但是在体内作用靶点突出、与体内结构相似性高、药理作用强等方面有着独特的优势。
在临床方面，蛋白质药物同样被广泛应用于治疗肿瘤、炎症性疾病、血液系统疾病、神经系统疾病等多种疾病。
例如诺华制造的转化生长因子β3类似物利勃卡唑（Recombinant human FSH、rFSH）在治疗多囊卵巢综合征等妇科疾病方面具有显著的疗效。
3. 基因治疗基因治疗是指通过对某些基因进行修饰或人工产生的基因进行替代，来治疗某些遗传性疾病或非遗传性疾病的一种治疗方法。
基因治疗药物是一种用于治疗基因缺陷、遗传病和一些难治性疾病的治疗药物，例如由普瑞斯公司制造的脊髓肌萎缩症基因治疗药物Zolgensma®。
在彻底了解难治性疾病的分子机制和生物学特性的基础上，基因治疗也被广泛应用于神经、心血管、感染等一系列疾病，成为一个快速发展的治疗领域。
总的来看，生物治疗药物具有疗效好、不良反应少、治愈范围广等优点。
单克隆抗体的优点及应用
单克隆抗体的优点及应用单克隆抗体指的是在体外培养中由单个克隆细胞产生的抗体，具有以下优点：1. 高度特异性：单克隆抗体只能识别和结合特定的抗原，从而实现高度特异性的识别分析。
这种高度特异性使得单克隆抗体在医学诊断、生物学研究和治疗中具有重要作用。
2. 高度稳定性：单克隆抗体经过长时间体外培养定向生产，具有较高的稳定性和一致性。
相比多克隆抗体，单克隆抗体的生产工艺更加可控，能够规避批次间的变异性。
3. 丰富的供应来源：单克隆抗体可以通过体外培养细胞的方式进行生产，而不依赖于动物体内免疫。
因此，可以实现大规模、高效率的抗体生产，并且能够满足临床和科研的需求。
4. 可调控的亲和力：通过对单克隆抗体的序列进行修饰和工程化，可以实现对其亲和力的调节。
这使得单克隆抗体在不同应用中，如免疫检测、药物传送和治疗等方面具有更高的灵活性。
单克隆抗体在各个领域都有广泛的应用：1. 临床诊断：单克隆抗体可用于各种免疫检测和诊断方法中，如ELISA、免疫荧光、免疫组织化学等。
例如，单克隆抗体可以用于检测特定癌细胞标志物，帮助早期诊断癌症，并监测疾病治疗的疗效。
2. 疾病治疗：单克隆抗体可以作为治疗药物，用于疾病的预防和治疗。
例如，单克隆抗体可以用于免疫疗法，通过结合特定抗原靶点来激活免疫系统，以治疗疾病如癌症、风湿性关节炎等。
3. 药物研发：单克隆抗体可用于药物研发的多个环节。
首先，通过单克隆抗体的选择，可以筛选出特定靶点的抗体药物。
其次，单克隆抗体也可用于药物的毒性测试和临床试验的监测，为药物的研发提供重要的技术支持。
4. 生物学研究：单克隆抗体在生物学研究中具有广泛的应用。
例如，可以利用单克隆抗体来研究特定蛋白质的功能、表达和定位。
此外，还可以利用单克隆抗体进行细胞或组织样本的免疫荧光染色，以实现对细胞和组织结构的分析。
5. 农业和食品安全：单克隆抗体也可以应用于农业和食品安全领域。
例如，可以利用单克隆抗体来检测和监测农业有害生物，或者检测食品中存在的有害物质和污染物。
抗体药物研制的最新进展
抗体药物研制的最新进展随着科学技术的高速发展，人类对于医疗卫生的需求也越来越高。
在治疗疾病的过程中，一种名叫“抗体药物”的疗法越来越受到了人们的关注。
它是以人体自身产生的抗体为基础，针对特定的目标进行精准治疗，不仅效果显著，而且副作用小，成为了现代医学领域的重要突破之一。
在这篇文章里，我想跟大家分享一下抗体药物研制的最新进展。
一、抗体药物的研发历程抗体药物的研发历程可以追溯到20世纪70年代，当时科学家发现，人体免疫系统可以制造出一种特殊的蛋白质——免疫球蛋白，它可以针对特定的抗原进行识别和攻击。
这一发现为抗体药物的研发提供了基础，人们开始尝试制造出受到工程改造的免疫球蛋白（抗体），用于治疗疾病。
早期的抗体药物具有很高的专一性和亲和力，但由于它们是来源于动物体内制造的，容易产生严重的免疫反应，限制了它们的应用范围。
直到20世纪90年代，人们才开始研究并制造人源化抗体，即来源于人体内的抗体。
自此以后，抗体药物研究取得了巨大的进展，很多传统疗法难以治愈的疾病得到了有效控制和治疗。
二、抗体药物的分类抗体药物可以分为多种类型，其中以单克隆抗体和多克隆抗体为主流。
单克隆抗体即来自单一克隆细胞分泌出的抗体，具有极高的特异性，因此在药物研发中应用最为广泛，被应用于临床治疗的疾病有癌症、自身免疫疾病、炎症等。
多克隆抗体是在多个克隆细胞中生产的抗体混合物，其特异性稍低，但更适合应用于治疗传染病、毒病等。
另外，还有一种名为“抗体药物联合疗法”的治疗方法，它是指将两种或多种抗体药物联合应用，以达到更好的效果和副作用的缓解。
例如，癌症的治疗中常采用的药物就是由多种抗体联合制成的。
三、抗体药物的研发进展抗体药物的研发现在已经进入了一个高速发展的时期，这得益于人类基因技术、生物工程技术等方面的突破。
目前，抗体药物研发的重点已经从单纯追求疗效，向着更为精准的治疗方向转变。
一方面，科学家们正在不断探索如何更加准确地制造抗体药物。
单克隆抗体的制备与应用
单克隆抗体的制备与应用单克隆抗体是一种高度特异性的生物分子，能够识别并结合特定的抗原，对于现代生命科学研究和临床医学诊治具有重要意义。
一、单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备主要包括以下几个步骤：（1）选择合适的免疫原：免疫原应具有较好的生物学活性、易于纯化，并且可以诱导动物产生足够的免疫反应。
常用的免疫原包括蛋白质、多肽、糖类、DNA等。
（2）免疫动物：将免疫原注射到小鼠、大鼠、兔子等动物身上，诱导其产生免疫反应。
此过程需要严格控制免疫剂量及免疫间隔时间，以保证动物身体内产生充分的免疫反应。
（3）筛选克隆：从免疫动物获得脾细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，生成杂交瘤细胞。
将杂交瘤细胞进行分离、克隆和筛选，最终获得单克隆细胞系。
（4）制备单克隆抗体：将单克隆细胞系进行扩增，并通过细胞培养和大规模发酵获得充足的单克隆抗体产物。
二、单克隆抗体的应用（1）免疫诊断：通过单克隆抗体对特定分子的识别和结合能力，可以用于免疫诊断。
例如，通过检测患者体液中特定抗原的单克隆抗体结合情况，可以诊断疾病，并对病情进行判断。
（2）药物研发：单克隆抗体在药物研发中具有广泛的应用前景。
例如，在抗肿瘤药物的开发中，单克隆抗体可以针对肿瘤细胞特异性抗原，实现有选择性地杀伤肿瘤细胞。
（3）免疫治疗：单克隆抗体可以作为一种抗体治疗手段，对病原体或某些癌细胞进行特异性杀伤。
例如，在肿瘤治疗中，单克隆抗体能够选择性地结合癌细胞表面的受体，阻断其信号传递，从而抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
（4）生物学研究：单克隆抗体可以用于生物学研究中的诸多方面。
例如，通过单克隆抗体对特定蛋白的结构和功能进行研究，可以深入了解其生物学特性和作用机制。
三、单克隆抗体的前景与挑战单克隆抗体拥有广泛的应用前景，近年来，其在医学、生命科学研究领域得到了广泛的应用。
然而，单克隆抗体的研发仍面临着一些挑战。
（1）制备难度：单克隆抗体的制备要求高度的技术和设备支持，需要在动物免疫、细胞融合、细胞培养等环节中严格把控。
抗体药物的研究进展及其应用前景
抗体药物的研究进展及其应用前景抗体药物是一种新型药物，具有高度特异性、生物学活性强等特点，近年来在疾病预防、治疗方面显示出优势，成为学术界和工业界关注的热点。
本文将介绍抗体药物的研究进展及其应用前景。
一、抗体药物的基础抗体是人体免疫系统的主要组成部分，是一种特异性的蛋白质，能识别和结合细菌、病毒、癌细胞等病原体和异物。
抗体分子结构独特，由两个轻链和两个重链组成，每个抗体分子可以结合特定抗原，并启动免疫反应。
抗体药物是利用人工合成技术制备的具有与天然抗体结构相似的药物，具有更高的亲和力和特异性。
抗体药物常见的种类包括单克隆抗体、双特异性抗体、抗体-药物共轭物和人工免疫细胞等。
二、抗体药物的研究进展1. 抗体药物在免疫治疗方面的应用抗体药物在免疫治疗方面具有广泛的应用前景。
例如，抗CD20单克隆抗体是一种用于治疗B细胞淋巴瘤、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等疾病的药物，具有较高的临床应用价值。
抗CD19和抗CD22双特异性抗体也被应用于预防和治疗B细胞淋巴瘤等疾病。
2. 抗体药物在癌症治疗方面的应用抗体药物在癌症治疗方面也具有广泛的应用前景。
例如，HER2阳性结直肠癌可以用来抗HER2单抗药物进行治疗，临床效果显著。
此外，PD-1和CTLA-4抑制剂是一些新型抗体药物，可以增强T细胞的免疫应答，被广泛用于肿瘤免疫治疗。
3. 抗体药物在病毒感染方面的应用抗体药物在病毒感染方面也具有较高的应用潜力。
例如，再生障碍性贫血患者可以用抗胸腺细胞诱导抗原单克隆抗体来抑制自身免疫反应和用抗病毒抗体治疗病毒感染。
此外，大规模制备的抗体可以用来预防医疗工作人员在处理病人时的感染风险。
三、抗体药物的应用前景抗体药物具有诸多优势，例如特异性、高效性、稳定性、可控性等，使其在医学领域拥有广泛的用途。
随着科技的不断进步，抗体药物的研发逐渐成熟，越来越多的药企加大了对抗体药物的研发投入，为推进临床转化提供了坚实基础。
未来，抗体药物的应用前景将会更加广泛，例如在疾病诊断、癌症预防、抗生素替代、病毒感染的治疗等方面会拥有更多的应用场景。
单抗药物研发原理及应用
单抗药物研发原理及应用单克隆抗体药物（mAb）是指由单一种由激活的B细胞所产生的抗体克隆，与一种特定的抗原结合。
与传统的小分子药物相比，mAb具有高度的特异性和亲和力，因此具有许多潜在的应用领域。
单克隆抗体药物的研发过程通常分为以下几个步骤：1. 抗原选择：首先确定目标疾病的治疗靶点，通常是某种病毒、细菌、肿瘤抗原或其他疾病相关分子。
选择合适的抗原结构对于获得高亲和力和特异性的mAb非常关键。
2. 抗体克隆：通过注射抗原来激活小鼠或其他动物的免疫系统，产生多种单克隆抗体。
然后，从动物的脾脏或骨髓中获得B细胞，将其与细胞瘤细胞融合形成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞可以无限复制，同时保持产生同一种抗体的特性。
3. 抗体筛选：通过体外试验和动物模型对mAb进行筛选，以评估其亲和力、特异性和生物活性。
常用的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、流式细胞术和动物实验等。
4. 产量提高：从杂交瘤细胞中提取抗体，并利用细胞培养技术来大规模生产mAb。
常见的细胞培养系统包括离心瓶培养、摇床培养和生物反应器培养等。
此外，还可以对抗体进行改造，以提高其稳定性和生产效率。
5. 临床试验：mAb经过体外和体内研究后，进入临床试验阶段。
三个临床试验阶段包括I期（安全性和耐受性评估）、II期（疗效和剂量确认）和III期（大规模疗效验证）。
临床试验通常要求大量的患者参与，并且需要监测治疗的有效性和安全性。
目前，单克隆抗体药物已在多个领域得到应用，包括：1. 肿瘤治疗：mAb可通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡或调节免疫系统等机制，来治疗不同类型的肿瘤。
例如，Herceptin（三色酚磷大H'ertuzumab）是一种治疗HER2阳性乳腺癌的单抗药物，能够选择性地抑制HER2受体的信号转导。
2. 自身免疫病治疗：mAb可以通过抑制特定免疫调节分子或与免疫细胞相互作用，来治疗自身免疫疾病，如类风湿关节炎和狼疮。
例如，Remicade（英仕曲康Infliximab）是一种治疗类风湿关节炎和克罗恩病的mAb，通过抑制肿瘤坏死因子的活性来减轻炎症反应。
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A431,A549
西妥昔单抗
爱必妥
默克－雪
（Cetuximab） （Erbitux） 兰诺
CHO-DG44-tnfα
阿达木单抗
修美乐
雅培
（Adalimumab） （Humira）
HUVEC
贝伐珠单抗
阿瓦斯汀 罗氏
（Bevacizumab） （Avastin）
经典靶点
? 单克隆抗体的制备
? 抗体的人源化
靶点 CD20 Her2 EGFR TNFα VEGF
表达细胞
抗体药
商品名
厂家
Daudi,raji,RPMI-8226
利妥昔单抗 （Rituximab）
美罗华
罗氏
（Rituxan）
MDA-MB-231,MCF-7,SK-OV-3 曲妥珠单抗
赫赛汀
罗氏
（Trasduzumab） （Herceptin）
单抗药物工作机理： 抗体依赖性细胞介导的毒作用( antibody dependent cell-
mediated cytotoxicity, ADCC) 补体依赖性细胞毒作用( complement dependent
cytotoxicity, CDC) 中和细胞因子
单 抗 药 物 作 用 机 理
单克隆抗体药物的临床前研发
? 大分子药物——生物制药
始于1982年用重组 DNA 技术进行生物合成的人胰岛素 (rHI)
举例
激素 (胰岛素，胰高血糖素，生长激素) 造血生长因子(Erythropoietin, colony stimulating factors) 干扰素 (Interferons-α, -β, -γ) 白介素 (Interleukin-2) 疫苗 (Hepatitis B surface antigen) 肿瘤坏死因子 治疗用酶 单克隆抗体
功能鉴定： ADCC, CDC, 中和细胞因子
by抗体生产部门
by药效部门
药效筛选
ADCC—LDH release
药 效 筛 选
Herceptin
ADCC Assay on SK-BR-3 Cells with NK92-CD16A
(control)
70
60
Lysis Cell
50 40 30
来源于细菌、酵母、 昆虫、植物和哺乳动 物细胞等各种表达体 系
背景知识
临床试验 药动评价 药效筛选 单克隆抗体的制备 靶点的发现与选择
研发流程
靶点的发现和选择
集中在细胞死亡通路、血管生成、细胞周期调控信号转导 等方面
例如： CD20 :表达于B细胞和成熟B细胞，调节B细胞增殖、分化；在
95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达 抗CD20单抗可用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤
EC50 ,ng/ml
Span
Avastin 25.7 101.1 -1.386 -1.8
0.04107
75.4
Pharmacokinetics, PK
药动评价 主要评估血清中药物水平，
不被肾脏清除，半衰期长；
单抗的主要代谢结果是降 解为肽段和氨基酸，无需
进行生物转化研究
Anti-drug antibodies, ADA
40 0 30 0 20 0
cell 1 0 0
%
0
1 0 -2
1 0 -1
10 0
10 1
V E G F ,n g /m l
10 2
10 3
Best-fit values Bottom Top LogEC50 HillSlope EC50,ng/ml Span
VEGF
117.7 526.2 0.6934 1.875 4.936 408.6
嵌合抗体：应用DNA 重组技 术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗 体基因的恒定区重组, 再将重组后的 基因导入骨髓瘤细胞中表达
CDR 移植抗体（改型抗体）：进 一步用人的编码构架区( FR) 替代鼠FR, 形成更为完全的人源化抗体, 即除了3 个CDR 是鼠源的外, 其余全部是人源结 构
完全人源化抗体：1、噬菌体抗体 库技术；2、转基因小鼠技术
1 0 -1
10 0 μ g /m l
10 1
10 2
Rituxan
log(agonist) vs. response -- Variable
slope (four parameters)
Best-fit values
Bottom
6.625
Top
100.1
LogEC50
-0.5091
HillSlope
120
H U V E C n e u t r a l iz a t io n a s s a y
100
viability
80 60
cell
40
%
20
0 1 0 -4
1 0 -3
1 0 -2 c o n c.,μ
1 0 -1 g /m l
10 0
10 1
A v a s tin ####
Bottom Top LogEC50 HillSlope
Target
20 10
%0
-10
Herceptin(control) ####
log(agonist) vs. response -- Variable slope (four parameters)
Best-fit values
Bottom
0.6537
Top
31.88
LogEC50
-2.545
HillSlope
100
ellLysis
90 80 70 60
C Target %
50 40 30 20
10
0
2 0%
1 0%
5%
NHS C onc.
R it u x a n m e d ia t e d C D C o n D a u d i
1 20
Lysis
1 00 80
ell
60
C
Target
40 20
%
0
-20
评估免疫原性， 是否产生ADA
Neutralizing Anti-drug antibody, NAb
1.118
Ab Concentration, [ 10-4
10 -2
10 0
10 2
? g/ml]
EC50,μ g/ml
0.002854
药 效 筛 选
CDC--CTG
# # # m e d i a t e d C D C L y s is o n U 9 3 7 _ N H S C o n c. o p t im iz a t io n
3.069
EC50, μg/ml
0.3096
药 效 筛 选
cell proliferation and antibody neutralization
V E G F In d u c e d H U V E C P r o lif e r a t io n6 0rate 5 0 0
n
proliferatio