血清丙氨酸氨基转移酶测定

1.实验原理

国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。

ALT

L-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮

LDH（乳酸脱氢酶）

酸+ L-谷氨

丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。

2. 标本：

2.1 病人准备：12小时禁食。

2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。

3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。

4. 标本运输：常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。

6. 实验材料

6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒

6.1.1 试剂组成

Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/L

L-丙氨酸800mmol/L

LDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/L

a-酮戊二酸18mmol/L

NADH 0.18mmol/L

6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。

7. 仪器：日立7060生化分析仪

8. 操作步骤

8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件

8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件

9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11. 计算方法：以罗氏复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

12. 参考值范围[4]

女性<31U/L

男性<41U/L

13. 临床意义[1,2]：丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给 -酮酸的反应。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。

而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。比率<1预示中度的肝损伤；比率>1和严重肝病有关，常见慢性肝病。

14. 线性范围4～800U/L

15. 超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。

16. 病危报警值的处理：复查后电话通知临床。