超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
人超氧化物歧化酶(SOD)说明书活性
人超氧化物歧化酶（SOD）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中超氧化物歧化酶（SOD）的活性。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人超氧化物歧化酶（SOD）水平。
用纯化的人超氧化物歧化酶（SOD）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入超氧化物歧化酶（SOD），再与HRP标记的超氧化物歧化酶（SOD）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的超氧化物歧化酶（SOD）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人超氧化物歧化酶（SOD）活性浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：720U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
超氧化物歧化酶试剂盒说明书
超氧化物歧化酶试剂盒说明书
超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒通常用于测定样品中超氧化物歧化酶的活性。
这些试剂盒通常由几种试剂组成，包括底物、辅酶、酶标记物等。
在使用试剂盒时，通常需要按照说明书中的步骤进行操作，以下是一般情况下SOD试剂盒说明书可能包含的内容：
1. 试剂盒组成，说明试剂盒包括哪些试剂，每种试剂的作用和成分，以及如何储存这些试剂。
2. 实验原理，解释SOD试剂盒用于测定超氧化物歧化酶活性的原理，包括底物的反应、辅酶的作用等。
3. 试剂准备，详细说明每种试剂的准备方法，包括稀释、配制缓冲液等。
4. 样品处理，说明如何处理待测样品，包括样品的稀释、预处理等步骤。
5. 反应步骤，详细说明如何进行反应，包括试剂的加入顺序、温度、时间等条件。
6. 光度计测定，说明如何使用光度计测定反应产物的吸光度，
以及如何计算样品中SOD的活性。
7. 数据分析，解释如何分析实验得到的数据，包括如何绘制标
准曲线、计算样品中SOD的活性等。
8. 注意事项，列出在实验中需要特别注意的事项，包括安全注
意事项、试剂盒的稳定性等。
总的来说，SOD试剂盒说明书会全面介绍试剂盒的组成、原理、操作步骤以及数据分析方法，帮助用户正确、准确地使用试剂盒进
行实验。
在使用试剂盒时，务必严格按照说明书的要求进行操作，
以确保实验结果的准确性和可靠性。
超氧化物歧化酶的活性测定
超氧化物歧化酶的活性测定超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，简称 SOD)广泛存在于生物体内的含Cu、Zn、Mn、Fe的金属类酶。
它作为生物体内重要的自由基清除剂，可以清除体内多余的超氧阴离子，在防御生物体氧化损伤方面起着重要作用。
离子(O2-)是人体氧代谢产物，它在体内过量积累会引起炎症、肿瘤、色斑沉淀、衰老等疾病，超氧阴离子与生物体内许多疾病的发生和形成有关。
由于SOD能专一消除超氧阴离子(O2-)而起到保护细胞的作用，SOD作为一种药用酶，具有广阔的应用前景，并引起了国内外医药界、生物界和食品界的极大关注。
按金属辅基成分的不同可分成3种类型。
最常见的一种含有铜锌金属辅基(CuZn-SOD)，主要存在于真核细胞的细胞质中，在高等植物的叶绿体基质、类囊体内以及线粒体膜间隙也有存在，CuZn-S0D酶蛋白的分子量约为3.2×104，纯品呈蓝绿色，每个酶分子由2个亚基通过非共价键的疏水基相互作用缔合成二聚体。
每个亚基(肽链)含有铜、锌原子各一个，活性中心的核心是铜。
第二种含有锰离子(Mn-SOD)，主要存在于真核细胞的线粒体和原核细胞中，在植物的叶绿体基质和类囊体膜上也有存在，纯品呈粉红色，由4条或2条肽链组成。
第三种是Fe-S0D，过去一直认为只存在于原核细胞中，近来发现有一些真核藻类甚至某些高等植物中也有存在。
Fe-SOD纯品呈黄色或黄褐色，由2条肽链组成，多数情况下每一个二聚体中含有一个Fe原子。
[原理]SOD的活力测定方法很多，常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。
其中化学法应用最普遍，化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -，利用SOD分解而间接推算酶活力。
在化学方法中，最常用的有黄嘌呤氧化酶法，邻苯三酚法，化学发光法，肾上腺素法，NBT-还原法，光化学扩增法，Cyte还原法等。
其中改良的邻苯三酚自氧化法简单易行较为实用。
化学发光法和光化学扩增法不适用于测定Mn-SOD，但对于Cu/Zn-SOD反应极灵敏。
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA检测试剂应用方法
小鼠超氧化物歧化酶（SOD）ELISA检测试剂应用方法小鼠超氧化物歧化酶（SOD）ELISA检测试剂说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被超氧化物歧化酶（SOD）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。
颜色的深浅和样品中的超氧化物歧化酶（SOD）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品活性。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、20、40、80、160、320U/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
超氧化物歧化酶（SOD）活性测定方法
超氧化物歧化酶（SOD ）活性的测定方法
一、试剂
1. 0.1mol/L HCl
2. 10mmol/L HCl
3. 0.1mol/L Tris 标准溶液：12.114g 三羟甲基氨基甲烷溶于蒸馏水，并定容至1000ml.
4. 50mmol/LTris 缓冲溶液：50ml0.1mol/L Tris 标准溶液中加入0.1mol/L HCl 19.9～22.0ml,定容至100ml ，PH 为8.20。
5. 30mmol/L 邻苯三酚盐酸溶液：3.7833g 邻苯三酚溶于10mmol/LHCl 中，并用10mmol/LHCl 定容至1000ml.
二、仪器
1. 紫外分光光度计
2. 酸度计
3. 恒温水浴锅
三、操作方法
1.邻苯三酚自氧化速率测定
在试管中加入4.5ml 50mmol/LTris 缓冲溶液，于25℃保温20min,加入10～20ul 30mmol/L 邻苯三酚，立即计时并摇匀，倾于比色杯内，于325nm 下，每隔1min 测吸光值一次，空白以10mmol/L HCl 代替邻苯三酚，要求自氧化速率控制在0.070 OD/min 左右。
%1004
min 1min 5⨯值值－第第自氧化速率＝OD OD 2.SOD 活性测定
将样液加入到Tris 缓冲溶液中，其余步骤同自氧化速率测定方法。
活力单位定义：将一定条件下使每毫升反应液自氧化速率抑制50%的酶量定义为一个单位（u ）。
样品质量样液体积样品稀释倍数自氧化速率速率自氧化速率－样液氧化＝活力（⨯⨯⨯⨯5.4%50%100)/SOD ml u。
植物超氧化物歧化酶 SOD ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）超氧化物歧化酶（SOD）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被超氧化物歧化酶（SOD）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的超氧化物歧化酶（SOD）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、12.5、25、50、100、200U/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
大鼠超氧化物歧化酶SODELISA试剂盒使用说明书
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中SOD含量。
实验原理小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒使用说明书超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内一种重要的超氧阴离子自由基清除剂，分为 Cu,Zn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD 3类，在生物界分布较广，其主要作用是能专一地清除生物氧化中产生的超氧阴离子自由基(O2-.)，有助于减少和阻止脂质的过氧化反应、延缓机体衰老。
本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中SOD水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入SOD抗原、生物素化的抗大鼠SOD抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的SOD呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成1. 酶联板：一块（96孔）2. 标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，其浓度为500U/mL，做系列倍比稀释后，分别稀释成500 U/ml，250 U/mL ，125 U/mL，62 U/mL，31 U/mL，15.2 U/mL，7.6 U/mL其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 U/mL，临用前15分钟内配制。
3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释。
7. 检测溶液B：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液B1：100稀释。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
人总超氧化物歧化酶(SOD)说明书(含量)
人超氧化物歧化酶（SOD）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中超氧化物歧化酶（SOD）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人超氧化物歧化酶（SOD）水平。
用纯化的总SOD 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入超氧化物歧化酶（SOD），再与HRP标记的超氧化物歧化酶（SOD）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人超氧化物歧化酶（SOD）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人超氧化物歧化酶（SOD）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：540ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
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超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0170规格：50T/24S 产品内容：
提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体160μL×1支，4℃保存；使用前先离心再吹打混匀。
试剂三：液体11mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1支，4℃保存。
试剂五：液体2mL×1瓶，4℃保存；临用前将试剂四加入试剂五中，并震荡溶解。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水产品说明：
SOD（EC 1.15.1.1）是一种广泛存在于生物体内的金属酶，是重要的氧自由基清除剂，能催化超氧化物阴离子发生岐化作用，生成H 2O 2和O 2。
SOD 不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是H 2O 2主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O 2-)，O 2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，后者在560nm 处有吸收；SOD 可清除O 2-，从而抑制了甲臜的形成；反应液蓝色越深，说明SOD 活性愈低，反之活性越高。
操作步骤：
一、样品的前处理：1.
细菌或培养细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞
（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1:5-10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提
取液），进行冰浴匀浆；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
3.血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至560nm，蒸馏水调零。
2.测定前将试剂一、三和五37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴5min以上。
3.样本测定（在EP管中加入下列试剂）
试剂名称（μL）测定管对照管空白管1空白管2样品9090--
试剂一240240240240
试剂二6-6-
试剂三180180180180
蒸馏水480486570576
试剂五30303030充分混匀，37℃水浴30min后，置于1mL玻璃比色皿测定560nm下的吸光度，分别记为A测定、A对照、A空1、A空2，计算ΔA测定=A测定-A对照，ΔA空白=A空1-A空2。
注意：
1、样本和试剂二使用时在冰上放置
2、样本较多时，可按表格配置工作液（包含试剂一、二、三），试剂五必须最后加入。
3、空白管1和空白管2各只需做1~2管；每个样本有一个对照管。
4、反应完成后，可能有沉淀生成，混匀后测定即可。
三、SOD活性计算：
1、抑制百分率的计算
抑制百分率＝(ΔA空白-ΔA测定)÷ΔA空白×100%
尽量使样品的抑制百分率在30-70%范围内，越靠近50%越准确。
如果计算出来的抑制百分率小于30%或大于70%，则通常需要调整加样量后重新测定。
如果测定出来的抑制百分率偏高，则需适当稀释样品；如果测定出来的抑制百分率偏低，则需重新准备浓度比较高的待测样品。
2、SOD酶活性单位：在上述黄嘌呤氧化酶藕联反应体系中抑制百分率为50%时，反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位。
3、SOD酶活性计算：
（1）血清（浆）SOD活性(U/mL)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V反总]÷V样×F
=11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)×F
（2）组织、细菌或培养细胞SOD活力计算：
A按样本蛋白浓度计算
SOD活性(U/mg prot)=[抑制百分率÷（1-抑制百分率）×V反总]÷（V样×Cpr）×F
=11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷Cpr×F
B按样本鲜重计算
SOD活性(U/g鲜重)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V反总]÷(W×V样÷V样总)×F
=11.4×抑制百分率÷(1-抑制百分率)÷W×F
C按细菌或细胞个数计算
SOD活力(U/104cell)=[抑制百分率÷(1-抑制百分率)×V反总]÷(500×V样÷V样总)×F
=0.0228×抑制百分率÷(1-抑制百分率)×F
V反总：反应体系总体积，1.026mL；V样：加入反应体系中样本的体积，0.09mL；V样总：加入提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；500：细胞或细菌总数，500万，F：样本稀释倍数。