细胞培养中的注意事项
细胞培养的注意事项
细胞培养的注意事项细胞培养技术是现代生物技术的重要组成部分，它广泛应用于生物医学研究、药物筛选、病原体繁殖和疫苗生产等方面。
然而，在进行细胞培养时，需要注意一些细节问题，以确保细胞的生长繁殖和培养结果的稳定性。
下面，就对细胞培养中需要注意的事项进行介绍。
一、无菌操作细胞鲜活度非常敏感，细胞培养最重要的是保持无菌状态，避免细胞感染，而这需要在实验室中采取无菌操作。
在一些细胞培养实验操作中，需要消毒实验器材，瓶口、瓶盖和培养皿盖等操作工具。
要确保使用的培养基和培养液都是无菌的。
在培养细胞时候，尤其要注意勿触碰到其它无菌品或样品。
二、选择适当的细胞种类生物体内细胞种类繁多，每一种细胞都有其特定的培养条件。
因此，选择最适合自己研究的细胞类型，比如从同一物种的组织细胞、肿瘤细胞、细菌、病毒中选取。
在选择种类时，要注意是否具有比较稳定的特性，易于培养、扩增、观察，同时可用于大量研究和应用，如肝脏细胞、淋巴细胞、上皮细胞等。
三、培养条件和培养基培养细胞需要准备培养基和培养条件。
培养基中必须含有所需的营养成分，而不同类型细胞所需营养物也各不相同，所以要选择适宜的培养基，如黄草酸-蛋白酶消化培养基、麦芽糖琼脂-方解石培养基等。
同时，还应注意控制培养条件，如细胞的生长条件、生长周期、接种密度、污染、氧气浓度调节、CO2浓度，以及培养时温度、湿度、光线和气体供应控制。
四、防止细胞污染细胞培养容易受到细菌、真菌、病毒、和其他污染物的污染，这不仅对培养的细胞产生破坏，也会对实验研究造成很大的干扰。
在进行细胞培养实验之前，要先将操作工具、培养皿、试管等器具进行消毒，然后再通风室中进行操作。
同时，也应注意实验室的环境要保持干净，衣着要规范。
五、监测细胞状态细胞状态监测是细胞培养实验的重要环节，实验者需要不间歇地检查细胞的状态，如生长状况、细胞形态、生长周期、污染情况等，如果出现细胞损伤、变异、感染等，应及时将污染的细胞删除，更换培养基和器具，努力保证培养状态的良好.细胞培养是较为复杂的实验，它需要实验者细心谨慎，把握好每一个环节。
细胞培养注意事项大全
细胞培养注意事项大全一、细胞培养实验室的基本要求细胞培养实验室必须具备以下设施和基本条件，以确保实验的准确性和可靠性，同时为研究人员提供一个安全、舒适的工作环境。
1.实验室布局：实验室应合理布局，功能明确，便于清洁和消毒。
室内布局包括细胞培养区、仪器设备区、试剂储存区、清洗区、办公区等。
各区域应相对独立，避免交叉污染。
2.实验室温度和湿度：实验室应保持恒定的温度和湿度，通常温度为20-26℃，湿度为40%-60%。
3.空气洁净度：细胞培养对空气洁净度要求较高，建议配备高效空气过滤器（HEPA），确保室内空气洁净。
4.光照和空气流通：实验室应有良好的自然光照或人工照明，同时具备良好的空气流通性。
5.电源和插座：实验室应提供稳定的电源和充足的插座，以满足各种仪器设备的需要。
6.实验台和储存柜：实验台应具备防震、防腐、防火等功能，储存柜应具备防潮、防尘、防霉等功能。
7.清洁和消毒设施：实验室应配备适当的清洁和消毒设施，如紫外线灯、酒精灯、灭菌器等。
8.防护设备：实验员应佩戴防护设备，如实验服、一次性手套、口罩等，以防止细胞培养过程中的污染和交叉污染。
二、细胞培养的基本操作细胞培养是一项技术性很强的工作，需要掌握各种基本操作技能，以保证实验的准确性和可靠性。
以下是细胞培养的一些基本操作。
1.细胞复苏：将冷冻保存的细胞从液氮中取出，迅速放入37℃水浴中融化，然后离心洗涤、消化，最后加入新鲜的细胞培养基中。
2.细胞传代：当细胞密度达到一定程度时，将细胞从培养瓶中取出，消化成单个细胞，然后分种到新的培养瓶中继续培养。
3.细胞冻存：将处于对数生长期的细胞消化成单个细胞，然后与冷冻保护剂混合后放入低温冰箱中冷冻保存。
4.细胞观察：定期观察细胞的生长状况，包括生长速度、形态、颜色等方面。
5.细胞计数：通过显微镜或细胞计数仪对细胞数量进行计数，以评估细胞的生长速度和密度。
6.细胞分离：根据细胞的密度、大小、表面电荷等特性，通过离心、过滤等方法将不同细胞分离出来。
细胞培养中的注意事项
细胞培养中的注意事项
1.消毒操作
在进行细胞培养之前必须对工作台、培养器、培养物品、培养液等进行消毒处理，以避免细菌交叉污染。
必须使用丙酮或酒精将培养器表面彻底清洗干净。
2.注意温度
应选用温度恒定的培养箱或恒温槽进行培养，保持恒定的温度和湿度，避免细胞过冷或过热。
此外，还要注意避免温度突变，可能会影响细胞的生长和健康。
3.培养物的质量
该细胞的培养必须选用优质培养物，以保证细胞的品质和生长状态。
如果培养物质量不好，细胞的健康和增殖速率都会受到影响。
4.培养物的数量
在培养细胞时，必须确保培养物的数量和容积适当，以保证细胞的充分增长和合理分裂，以及抵御微生物和腐败的攻击。
5.注意操作技巧
在进行细胞培养之前一定要注意自己的操作技巧，保持双手、工具和培养器的干净，避免污染，同时避免因不当操作而对细胞造成损害。
6.培养时间的控制
在进行细胞培养时，必须严格控制培养时间，避免过度培养，以影响细胞的生长和健康。
同时也要注意密切观察生长状态，及时调整培养时间。
7.注意细胞的来源
在使用细胞进行培养的时候，必须注意细胞的来源，切勿使用受过辐射或有感染性的细胞。
同时避免使用已经失去生长能力的细胞进行培养。
8.垃圾清理
在进行细胞培养完成之后，必须将培养器和培养物进行垃圾清理处理，保持实验室的清洁卫生。
mkn45细胞培养注意事项
mkn45细胞培养注意事项
细胞培养是生物学研究中非常重要的技术之一，以下是关于
mkn45细胞培养的注意事项：
1. 无菌操作，细胞培养需要在无菌条件下进行，以防止细菌、
真菌或其他微生物的污染。
在进行培养前，需要对培养皿、培养液、培养室等进行严格的消毒处理。
2. 细胞培养液配制，对于mkn45细胞的培养液配制，需要根据
细胞的生长特性和营养需求来选择适当的培养基，通常是含有营养
物质和生长因子的培养基。
同时，需要注意培养液的pH值、渗透压
等参数的调节。
3. 培养条件，mkn45细胞的培养需要在适当的温度、湿度和气
体条件下进行。
一般来说，细胞培养室需要保持在37摄氏度、5%二
氧化碳的条件下进行培养。
4. 细胞密度控制，在细胞培养过程中，需要控制细胞的密度，
避免细胞过度密集或者过度稀疏。
通常可以通过显微镜观察细胞的
密度，并根据需要进行细胞的传代或分裂。
5. 污染检测，定期对培养的细胞进行细菌、真菌等微生物污染
的检测，以确保细胞培养的纯度和质量。
6. 操作规范，在进行细胞培养时，需要严格按照操作规程进行，避免操作失误或者交叉污染。
同时，需要注意个人防护，避免对细
胞培养的影响。
总之，mkn45细胞培养需要严格遵守无菌操作、培养液配制、
培养条件、细胞密度控制、污染检测和操作规范等注意事项，以确
保细胞培养的成功和细胞的健康生长。
希望以上回答能够帮助到你。
细胞培养过程中的注意事项及试剂配制
细胞培养过程中的注意事项及试剂配制一.常用设备准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台。
配液室的设备：扭力天平和电子天平（称量药品）、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）。
培养室的设备：液氮罐、储品柜（存放杂物）、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱（-80℃）、空调、二氧化碳缸瓶、边台（书写实验记录）。
必须放在无菌间的设备：离心机（收集细胞）、超净工作台、倒置显微镜、CO孵箱（孵育培养物）、2水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱（放置serum和培养用液）。
二.无菌操作无菌室的灭菌：1.定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5％过氧乙酸擦拭。
2.CO孵箱（培养箱）灭菌：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者20.5％过氧乙酸，再用紫外灯照射3.实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-30分钟4.实验后灭菌：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。
实验人员的无菌准备：1.肥皂洗手。
2.穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋3.用75％酒精棉球擦净双手。
无菌操作的演示：1.凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面2.靠近酒精灯火焰操作。
3.器皿使用前必须过火灭菌4.继续使用的器皿（如瓶盖、滴管）要放在高处，使用时仍要过火。
5.各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。
如吸管不能碰到废液缸。
6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。
三.器械的清洗和消毒玻璃器械洗消：(1)新的玻璃器皿的洗消：1.自来水刷洗，除去灰尘。
2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。
3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。
细胞培养的注意事项
相关疾病：每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些惨痛经验教训可以分享呢?早走早脱身，从此专注黑生物1. 严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干。
2. 不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套。
3. 有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测。
4. 水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)。
5. 晚上离开的时候最好给细胞房照紫外，超净台是用完就开。
6. 最好的是同一时间就你一个人在用细胞房在养细胞。
非科班出身经验分享1. 别怕浪费。
枪头什么的只要有可能污染就换，如果用酒精灯就什么都稍微烤一下，别直接放到火上，离一段距离。
2. 动作要既轻柔又有力。
动作太重会有一堆一堆的气泡，动作太轻就吹不下来... 刚开始的时候吹细胞太痛苦了，稍微一下就起泡。
后来就是吹的时候枪里的培养基不要一次全都压出来，留一点，枪的最头部尽量深的在液面以下。
3. 离开过操作台的东西再进操作台之前一定要用酒精喷一遍，包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。
4. 实验结束后对实验台的消毒。
紫外什么的，用前用后都照个30 分钟。
5. 身体的各个部分尽量的少接触不需要接触的地方的地方。
比如实验台，又比如培养箱内部。
6. 细胞的密度根据细胞的性质、传代的时间以及自己的心情来定。
培养基的话最多最多不要超过2 天就要换一次。
细胞可以不传代，但是培养基是一定要换的。
大概就是，不该碰的地方不碰，有影响的地方少碰; 该使劲的时候绝对不含糊，不该使劲的地方一定忍住。
如果是比较简陋的操作台就一定要摆个酒精灯，所有操作紧密围绕在酒精灯周围进行。
如果是高级台子就多用酒精喷喷。
感觉生物的实验，心疼钱就还是不要做了。
最后一点点绝对非科班的经验。
癌细胞真是坚挺。
有一次实在是不想传了，放了 5 天吧，感觉都长了几层出来，培养基都黄了。
细胞培养注意事项
细胞培养注意事项细胞培养是一项非常复杂和关键的实验技术，需要仔细选材、操作，使用特殊的设备和培养物质来维护和生长细胞。
以下是细胞培养方面的一些注意事项。
2.清洁卫生：细胞培养需要在无菌环境下进行，所以在实验同时需要注意整个实验室的清洁和卫生。
摆放培养皿前要用70%酒精消毒，实验前需要穿着实验服、手套以及戴着口罩和帽子，以避免细菌、病毒和其他污染物的污染。
3.玻璃器皿消毒：细胞培养中使用的各种玻璃器皿比如培养皿、移液管和试管等都需要高温干烤，以达到无菌状态，避免细菌的污染。
4.培养基的制备：培养基是细胞培养的重要环节，制备时应该按照说明书和协议的要求来配制各种含量的物质，这个过程中要避免任何可能的污染，同时要保持连续性的搅拌，以达到适当的均匀度。
5.细胞的处理：处理细胞的时候也需要注意无菌操作，用消毒工具取出细胞，避免使用手指抓取细胞，同时需要正确的切割和品种选择，否则会影响细胞分化和生长的快速性。
6.维护培养环境：在细胞培养过程中，需要保持适当的pH、温度、湿度和氧气含量，不同类型的细胞需要不同的培养条件，只有维持好了培养环境，细胞才能健康有效的生长。
7.对细胞进行质检：在细胞培养的过程中，每天需要对细胞进行质检，观察细胞的数量和形态、细胞的状态与否，在有必要时需要决定是否要加入新的元素来维护生长。
8.记录培养记录：每项实验操作完成后，都要详细记录实验的步骤、培养基的成分、培养条件和细胞的生长状况，以便可以及时分析可能出现的问题并作出相应的调整。
总之，细胞培养是一个耗时、复杂、困难的过程，它需要小心谨慎的选择，不断调整并做好记录。
坚持遵守这些注意事项和要求，才能保证细胞培养实验最好的效果和结果。
细胞培养的步骤以及注意事项
细胞培养的步骤以及注意事项
细胞培养是一种重要的实验技术，它有助于我们了解细胞生物学、生理学以及疾病的发生和发展机制。
以下是细胞培养的步骤以及注意事项：
步骤：
1. 细胞的收集：从组织样本中得到细胞，比如从动物、植物或
人类的器官中取得。
2. 细胞的处理：将细胞进行脱离、切割、分离等处理，从而得
到单个的细胞。
3. 细胞的培养基准备：选择适合细胞类型的培养基，加入营养
物质和生长因子以维持细胞的生长和分裂。
4. 细胞的接种：将处理好的单个细胞加入到培养基中，并放置
于培养箱中，控制其温度、湿度、氧气和二氧化碳浓度等环境因素。
5. 细胞的观察和维护：观察细胞的形态、生长速度、分裂情况等，同时需要定期更换培养基、检测细胞的纯度和健康状态。
注意事项：
1. 保持无菌环境：细胞培养需要在无菌环境下进行，防止培养
基和细胞被细菌、真菌等污染。
2. 确保细胞的纯度：细胞培养需要保证细胞的纯度，避免异质
性细胞或细胞株的混淆。
3. 控制培养环境：细胞培养需要控制培养环境，包括温度、湿度、氧气和二氧化碳等，以确保细胞的正常生长和分裂。
4. 定期更换培养基：培养基中的营养物质和生长因子会随着时间的推移而减少，因此需要定期更换培养基，以维持细胞的生长和分裂。
5. 避免过度培养：过度培养会影响细胞的健康和生长速度，因此需要在适当的时候停止培养，或将细胞进行冻存以备后续使用。
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细胞培养中的注意事项1 冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。
另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。
2 细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。
3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。
每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。
4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。
血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。
来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
5 何谓FBS, FCS, CS, HS ?FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum)是相同的意思，两者都是指胎牛血清，FCS乃错误的使用字眼，请不要再使用。
CS (calf serum) 则是指小牛血清。
HS(horseserum)则是指马血清。
6 培养细胞时应使用5 %或10% CO2？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。
当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5 g时，则应使用5%CO2培养细胞。
7 何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。
8 培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。
9附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA浓度？应如何处理？一般使用之trypsin-EDTA 浓度为0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4Na。
第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于–20C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。
10 悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。
分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。
11 欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5 - 10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡。
12 细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。
细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因。
13 细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5 - 10% DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 -95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。
注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成。
14 DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO(如SigmaD2650)，其本身即为无菌状况，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。
若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜。
15 冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于4 C 30~60分钟→ (-20 C 30分钟) → -80 C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vapor phase长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 C 至–80 C 以下，再放入液氮槽vaporphase长期储存。
*-20 C 不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80C冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
16 细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial，融合瘤细胞则以5x106 cells/mlvial为宜。
17 应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。
主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。
严格无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。
18 如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？加入相应抗生素，直接灭菌后丢弃之。
19 支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。
除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之。
20 支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究任一数据。
故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义。
21 侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株。
22 CO2培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。
23 为何培养基保存于4C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于4 C 冰箱中，培养基内之CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性，而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenolred)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。
培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。
若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值。
24 各种细胞培养用的dish，flask是否均相同？不同厂牌的dish或flask，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，虽对大部分细胞没有太大之影响，惟少数细胞则可能因使用厂牌不同之dish或flask而有显著之生长差异。
25购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。
建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
26 购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。
血清使用错误或血清的品质不佳。
解冻过程错误。
冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。
悬浮细胞误认为死细胞。
培养温度使用错误。
细胞置于–80C太久。
27 收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。
另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
28 如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。
在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。
总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始，各种目的无血清培养最好首选AIMV（12005）培养基（SFM）。
29 L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗？它在溶液中不稳定吗？L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。
脱掉氨基后，L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。
L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解，但是确切的降解率一直没有最终定论。
L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成，而氨对于一些细胞具有毒性。
30GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？GlutaMAX-I二肽是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。
一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。
GlutaMAX-I二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，GlutaMAX-I二肽溶液有最小的降解，如果在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。
31 什么培养基中可以省去加酚红？酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。
研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，（特别是雌激素）。
为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。
由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。
32 培养基中丙酮酸钠的作用是什么？丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是，如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢丙酮酸钠。
33目录上说，Hank’s平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用，不需要CO2培养箱。
原因是什么？Hank’s 平衡盐溶液(HBS)和Earle’s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别？HBS和EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平，在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks(0.35g/L)中高。
碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡，以维持溶液的PH值。
Eagles液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hanks液在CO2培养箱中会变酸。
如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagles液，。
如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks液就可以了。
34二价离子抑制胰蛋白酶活性吗？使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么？二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。
EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。
建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。
35当在无血清培养基中添加抗生素时，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。
血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。
在无血清培养条件下，抗生素不被灭活，可能对于细胞达到毒性水平。
36一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。
因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
37大部分添加物和试剂最多可以冻融3次，如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，将会影响它的性能。
38在溶解的一周内使用贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液。