检验技师考试知识点-蛋白质定性检查
蛋白质定性检查是医学检验主管技师考试需要了解的知识点，整理了相关内容，希望对广大复习备考的考生有所帮助。
1、潘氏球蛋白定性试验原理
脑脊液中蛋白质主要是球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色混浊或沉淀。
2、试剂
5%苯酚溶液：取纯苯酚25ml，加蒸馏水至500ml，用力振摇，放置37℃温箱内1～2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。
饱和苯溶液：取苯酚10ml，加蒸馏水至100ml，充分混匀，置入37℃温箱中数小时，见底层有酚析出，上层即为饱和酚溶液。
避光保存，一般置棕色瓶内保存。
3、操作
取试剂2～3ml，置于小试管中，用毛细滴管滴入脑脊液1～2滴，在黑色背景下立即观察结果。
4、结果判断
阴性（－）：无混浊，清晰透明，不显雾状。
极弱阳性（±）：微呈白雾状，对光不易看到，在黑色背景下才能看到。
弱阳性（+）：呈灰白色白雾状。
阳性（++）：呈白色薄云雾状混浊。
强阳性（+++）：呈白色絮状沉淀或白色浓云块状。
最强阳性（++++）：立即形成白色凝块。
5、方法学评价
潘氏（Pandy）试验所需标本量少，操作简单，结果观察较为明确，临床试验室常用此法。
但该方法过于敏感，有一部分正常人也可出现极弱阳性（±）结果医^学教育.网搜集整理。
6、注意事项
（1）红细胞过多时，须先离心使细胞沉淀，吸取上清液进行试验。
（2）试验中所用试管应十分洁净，否则易出现假阳性结果。
（3）所用试剂苯酚如不纯，亦可引起假阳性反应；室温低于10℃，酚饱和度低，亦可引起假阳性结果。
7、正常参考值
正常脑脊液中蛋白质含量仅是血浆蛋白的1/200，即0.2～0.4g/L，其成分以白蛋白为主，故蛋白定性试验结果为阴性或极弱阳性（±）。
8、临床意义
有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应，如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。
脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入脑脊液中，亦可呈阳性反应。
蛋白质定性定量分析ppt课件
2021/6/15
29
2、利用微电极直接测定凝胶表面的p H而得知样品的等电点；
3、将凝胶切成等距离(5nm)的小块， 浸于水中，用精密试纸测定pH。以凝 胶块距正极的距离为横坐标，pH为纵 坐标作用图得出胶的pH梯度曲线。根 据待测样品在凝胶中的位置而得出蛋
白质样品的等电点。
2021/6/15
30
与标准蛋白比较，得出样品蛋白的含量。
2021/6/15
31
2021/6/15
32
2021/6/15
33
2021/6/15
34
免疫印迹技术的基本操作(例PKC)
1、细胞裂解物的制备 2、细胞裂解液蛋白含量测定 3、细胞裂解物SDS－PAGE电泳 4、蛋白质转膜 5、目的蛋白的检测
2021/6/15
转变为硫酸铵。
Pr＋H2SO4
CO2＋H2O＋(NH4)2SO4
(NH4)2SO4+2NaOH NH4OH+HCl
NH4OH+H2SO4 NH4Cl+H2O
2021/6/15
3
2021/6/15
4
2021/6/15
5
2021/6/15
6
凯氏法的评价： 优点：
1、适用于一切形态的样品； 2、不用比色，对混浊不透明的样品也可 进行分析； 3、结果的精、准度较高。
其它蛋白质定性定量分析技
术
蛋白质的电泳染色定量分析
特定蛋白质在总蛋白中所点比例的分析：最
早应用于血浆蛋白电泳分离后白蛋白和球蛋
白的比例测定。其方法有二，其一是将染色
后的蛋白区带剪下，用适当的溶剂提取后比
色测定；其二用反射扫描仪处理后，计算各
蛋白质定性
百泰派克生物科技
蛋白质定性
蛋白质定性分析是根据蛋白质相关性质对蛋白质的种类进行分析，定性蛋白质组学指在组学水平上进行蛋白质定性分析。
百泰派克生物科技提供蛋白质定性分析以及蛋白质组学定性分析服务。
蛋白质定性分析
蛋白质定性，指通过非量化的手段分析蛋白质性质以确定蛋白质的种类。
蛋白质分子非常复杂，与其性质相关的特征参数有很多，包括蛋白质的分子量、等电点、氨基酸序列（一级结构）、高级结构、以及蛋白质间的相互作用等等。
利用蛋白质的这些性质参数，可以借助相关的仪器设备进行蛋白质定性分析。
蛋白质定性的常见方法包括有电泳（如SDS-PAGE）、层析、ELISA、western blot、图像分析技术、测序（如基于Edman降解的N端测序）以及质谱法等。
蛋白质定性检测有助于推断蛋白质的功能和作用机理，且在对蛋白质进行定量之前可先进行定性分析。
蛋白质定性。
蛋白质组学定性分析
蛋白质组学定性分析指在组学水平上对蛋白质进行定性分析，也称为定性蛋白质组学。
定性蛋白质组学研究的方法有多种，其中基于质谱的方法是蛋白质组定性检测的主要方法之一。
质谱可以通过分子量测定、N/C端测序、全序列分析以及翻译后修饰分析等大规模、高通量地进行蛋白质组定性。
临床检验技师考试_临床检验基础讲义_第十三章浆膜腔积液检验
第十三章浆膜腔积液检验考纲正常情况下，人体的胸腔、腹腔和心包腔、关节腔统称为浆膜腔，内有少量的起润滑作用的液体。
病理情况下，浆膜腔内有大量液体潴留而形成浆膜腔积液。
根据产生的原因及性质不同，将浆膜腔积液分为漏出液和渗出液，它们产生的机制和原因见下表。
第 1 页共9 页第 2 页 共 9 页一、胸腔、腹腔和心包腔积液检查 （一）标本采集与保存1.细菌学 结核杆菌标本量-10ml ；厌氧菌培养-1ml 。
2.化学（肝素抗凝）及免疫学-2ml 。
3.常规及细胞学（EDTA-Na 2抗凝）-2ml 。
4.观察凝固现象留取标本后应及时送检，不能及时送检的标本可加入适量乙醇以固定细胞成分。
（二）理学检查1.量 正常浆膜腔内均有少量的液体。
2.颜色 正常为淡黄色。
【临床意义】漏出液颜色较浅，渗出液颜色随病情而改变。
如表：浆膜腔积液的颜色变化及临床意义3.透明度 细胞、细菌和蛋白含量有关。
漏出液清晰透明，渗出液不同程度浑浊。
4.凝块 正常浆膜腔液无凝块。
渗出液由于含有较多的纤维蛋白原和细菌，细胞破坏后释放凝血活酶，可自行凝固。
漏出液不易凝固，渗出液自行凝固。
5.比密 其高低与其所含溶质的多少有关。
漏出液＜1.015，渗出液＞1.018。
（三）化学检查1.蛋白质（1）检测原理1）黏蛋白定性检验：又称Rivalta试验。
浆膜间皮细胞在炎症反应刺激下分泌黏蛋白增加，黏蛋白是一种酸性糖蛋白，其等电点为pH3～5，在稀乙酸溶液中产生白色雾状沉淀。
2）蛋白质定量检验：浆膜腔积液中蛋白质定量，采用与血清蛋白质相同的双缩脲法测定。
积液蛋白电泳可对积液的蛋白组分进行分析。
（2）参考值Rivalta试验：漏出液阴性；渗出液阳性。
蛋白质定量：漏出液＜25g/L；渗出液＞30g/L。
（3）方法学评价：Rivalta试验是一种简便快速过筛试验，无须特殊仪器，但只能测定黏蛋白，积液蛋白质定量可测定清蛋白、球蛋白、纤维蛋白原等蛋白质的含量，蛋白电泳可对蛋白组分进行分析，故蛋白质定量和蛋白电泳有助于积液的性质判断。
检验技师士考点：尿蛋白定性试验方法
检验技师士考点：尿蛋白定性试验方法
检验技师/士考点：尿蛋白定性试验方法
尿蛋白定性尿蛋白定性实验是尿常规检查中必做的一项实验，是诊断肾脏疾病和病变的重要常规指标之一。
尿蛋白定性试验常通过半定量方式或加号方式检测尿液中排出的'蛋白质的多少，用于判断和了解肾脏功能是否出现问题及问题的严重性，其结果可用阴性、微量、1--4个加号表示，也可用数值表示，加号越多或数值越高则尿蛋白越多。
1.试带法
利用pH指示剂的蛋白误差原理。
本法对清蛋白较敏感，对球蛋白不敏感，仅为清蛋白的1/100～1/50，且可漏检本周蛋白。
尿液pH增高可产生假阳性。
本法快速、简便、易于标准化，适于健康普查或临床筛检。
2.加热乙酸法
为传统的经典方法，特异性强、干扰因素少。
能同时检出清蛋白及球蛋白尿，但敏感度较低，一般在0.15g/L左右。
本法能使含造影剂尿液变清，可用于鉴别试验。
3.磺基水杨酸法
又称磺柳酸法。
操作简便、反应灵敏、结果显示快，与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应;敏感度高达0.05～0.1g/L，因而有一定的假阳性。
被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。
蛋白质的检验方法
蛋白质的检验方法
蛋白质是生命体内重要的组成部分，对于维持生命活动和调节生理功能起着至关重要的作用。
因此，对蛋白质进行检验是十分必要的。
蛋白质的检验方法主要包括定性检验和定量检验两种，下面将分别介绍这两种方法。
定性检验是指通过实验方法来判断样品中是否含有蛋白质。
常用的定性检验方法有：
1. 硫酸沉淀法，将待检样品加入硫酸，再加入硝酸银。
如果有蛋白质存在，会生成白色沉淀。
2. 碱性铜蛋白法，将待检样品加入碱性铜蛋白溶液，如果有蛋白质存在，会生成紫色沉淀。
3. 生物素-亲和素法，利用生物素和亲和素之间的特异性结合来检验蛋白质的存在。
定量检验是指通过实验方法来确定样品中蛋白质的含量。
常用的定量检验方法有：
1. 比色法，利用蛋白质与某种试剂（如布拉德福试剂）发生显色反应，通过比色计或分光光度计测定吸光度，再根据标准曲线来确定蛋白质含量。
2. 琼脂糖凝胶电泳法，通过电泳将待检样品中的蛋白质分离，再利用染色方法来定量分析。
3. 酶标记法，利用酶标记的抗体或配体与待检样品中的蛋白质结合，通过酶的底物来测定蛋白质的含量。
总的来说，蛋白质的检验方法多种多样，可以根据实际需要选择合适的方法进行检验。
在进行蛋白质检验时，需要注意实验条件的控制，避免干扰因素对结果的影响。
同时，也要严格按照操作规程进行操作，确保实验结果的准确性和可靠性。
希望以上介绍的蛋白质检验方法能够对您有所帮助，如果您对蛋白质的检验方法还有其他疑问，欢迎随时咨询。
蛋白质的定性方法
蛋白质的定性方法
1. 化学性质法：利用蛋白质的化学性质进行定性，如蛋白质的氨基酸组成、含硫基团、酶活性、凝固性、胶体性等。
2. 免疫学检测法：利用蛋白质与其特定抗体之间的结合反应来进行定性，如免疫印迹法、免疫荧光法、酶联免疫吸附试验等。
3. 质谱法：利用质谱技术对蛋白质进行定性，如飞行时间质谱、四极杆质谱、电喷雾质谱等。
4. 染色法：利用染色剂与蛋白质的反应来进行定性，如布拉德福德染色法、戈姆西染色法、表面染色法等。
5. 电泳法：利用蛋白质在电场中的迁移速度和电荷差异来进行定性，如聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳等。
2020检验学考试资料：血浆蛋白质检查要点
血浆蛋白质检查要点一提到蛋白质大家可能最先想到是鸡蛋、牛奶、豆浆和瘦肉等各类食物，蛋白质作为主要的一类营养物质与人们的日常生活息息相关。
人体血浆中的蛋白质除营养作用外还具备多种生理功能，对其进行定性、定量的检测对机体生理功能的评估具有重要作用。
血浆蛋白质检查主要考察功能、实验室检测及主要血浆蛋白质这三大方面。
一、血浆蛋白质具有九大功能：1.营养作用。
2.维持血浆胶体渗透压。
3.充当运输载体。
4.缓冲血液PH。
5.起到催化作用的酶。
6.抑制组织蛋白酶的作用。
7.参与机体的代谢调控。
8.参与凝血，纤溶过程。
9.参与体液免疫（免疫球蛋白）。
蛋白质功能在考试中常爱出现，要求重点掌握，这里整理一条口诀帮助大家来记忆：运输营养渗透压，酶促抑制代调控，凝溶免疫PH。
二、血浆蛋白质测定：1.血清蛋白电泳分析蛋白质主要分为清蛋白和球蛋白两大类，正常情况下通过电泳可以得到五个区带分别对应清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白。
在疾病状态时电泳图谱会发生相应改变。
肾病综合症时清蛋白下降；肝硬化出现融合区带β-γ桥。
M蛋白血症的M蛋白常在γ或β带出现。
2.血浆蛋白质定量检测利用双缩脲比色法测定总蛋白，溴甲酚绿法测定清蛋白，球蛋白由总蛋白、清蛋白差值计算得出。
清/球蛋白比（A/G）正常值1~2/1。
比值下降提示实质性的肝损伤。
三、主要血浆蛋白质主要的血浆蛋白质包括:前清蛋白（PA）、清蛋白（ALb）、α1-抗胰蛋白酶（AAT）、α1-酸性糖蛋白（AAG）、触珠蛋白（Hp）、α2-巨球蛋白（AMG）、铜蓝蛋白（CP/CER）、转铁蛋白（TF/TRF）/C-反应蛋白（CRP）、血清淀粉样蛋白A（SAA）、β2-微球蛋白（β2-MG）名称和缩写要能够与之对应。
种类很多同样可以通过口诀帮助记忆：前清蛋白清蛋白，抗胰酸性α1白，触珠铜蓝是α2，转铁微球β带，还有C反淀粉样，别忘巨球非时相。
总结下具有代表性的特点:具有运输作用有PA、ALb、CER、TRF；ALb血浆中含量最多,是重要的营养蛋白;血浆中最大蛋白的AMG；肝病时PA变化较ALb早；溶血时Hp的含量是下降的。
医学检验—临检基础(二十五)
医学检验—临检基础（二十五）脑脊液检查一、脑脊液的化学与免疫学检查包括酸碱度、蛋白质、葡萄糖、氯化物、酶学、蛋白电泳、免疫球蛋白等（一）酸碱度正常脑脊液pH为7.31～7.34，且相对稳定。
中枢神经系统炎症时，脑脊液pH低于正常，化脓性脑膜炎时脑脊液的pH明显减低（二）蛋白质1.脑脊液蛋白质含量增高是血-脑脊液屏障功能障碍的标志。
2.脑脊液蛋白质的检验有定性和定量两种方法，并可根据需要计算蛋白商（球蛋白/清蛋白）和脑脊液清蛋白指数（R alb）[脑脊液清蛋白（g/L）/血清清蛋白（g/L）]（1）蛋白商反映了脑脊液球蛋白与清蛋白的比例变化。
①蛋白商增高：提示脑脊液球蛋白含量增高，见于多发性硬化症、神经梅毒、脑脊髓膜炎、亚急性硬化性全脑炎等。
②蛋白商减低：提示脑脊液清蛋白含量增高，见于化脓性脑膜炎急性期、脑肿瘤、脊髓压迫症等。
（2）屏障障碍的程度：轻度（Ralb 10×1O-3）中度（Ralb 20×10-3）重度（Ralb ＞20×10-3）3.潘氏试验（Pandy试验）（1）是脑脊液蛋白质定性试验（2）原理：球蛋白+石碳酸——不溶性蛋白盐白色沉淀（3）参考值：正常为阴性或弱阳性（三）脑脊液葡萄糖和氯化物1.脑脊液葡萄糖约为血糖的60%，氯化物约为血液的1.2-1.3倍。
成人：120～130mmol／L。
（原因：脑脊液中蛋白质含量较少，为了维持脑脊液和血浆渗透压的平衡（Donnan平衡）。
2.脑脊液葡萄糖临床意义（1）葡萄糖减低：①细菌性脑膜炎和真菌性脑膜炎，以化脓性脑膜炎早期减低最明显；②脑寄生虫病等；③脑肿瘤；④神经梅毒；⑤低血糖昏迷、胰岛素过量所致的低血糖状态。
（2）葡萄糖增高：①新生儿及早产儿；②糖尿病或静脉注射葡萄糖；③脑或蛛网膜下腔出血所致的血性脑脊液；④病毒性脑膜炎或脑炎；⑤急性颅脑外伤、中毒、缺氧、脑出血等所致丘脑下部损伤等。
3.脑脊液氯化物临床意义（1）氯化物减低：①细菌或真菌感染，特别是化脓性、结核性和隐球菌性脑膜炎的急性期、慢性感染的急性发作期。
2020检验学考试资料：尿液蛋白质实验室检测方法
2020检验学考试资料：尿液蛋白质实验室检测方法尿液蛋白质检查在检验科也是一个常规检测项目，对尿液蛋白质在实验室的检测手段是事业编考试中的重要考点，本文旨对尿液蛋白质检查方法在事业编考试中经常考察的内容进行总结归纳，以帮助大家复习备考。
对于尿液中蛋白质检测的实验室检查方法有很多，分为定性和定量两种实验类型，常用的对尿蛋白定性检测方法有以下几项：(1)试带法：试带法这种方法对清蛋白比较敏感。
优点为快速、简便、易于标准化，缺点是对球蛋白的敏感性比较低且会漏检本周蛋白。
本法适用于临床筛查。
(2)加热乙酸法：可以同时检测出清蛋白和球蛋白。
优点为特异性强、干扰因素少，缺点为敏感度比较低。
本法可用于鉴别实验且为传统的经典方法。
(3)磺基水杨酸法：可以检测清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白。
优点为反应灵敏、结果反应快，操作简单，缺点为灵敏度比较高实验中会存在一定的假阳性。
本法为NCCLS认为的检查尿蛋白的参考方法，也为检查尿蛋白的确证实验。
对于尿蛋白的定量检测也有很多的方法，比如现在应用比较广泛的比色法，具有比较高的特异性和敏感性的尿蛋白电泳法，对于尿蛋白定量检测的方法还有沉淀法、比浊法、染料结合法等方法。
以上几项检查项目可以进行简单归纳，对于尿蛋白的检测的定性实验有：试带法、加热乙酸法和磺基水杨酸法，尿蛋白的定量试验有：比色法、比浊法、沉淀法、尿蛋白电泳法等。
接下来我们看一道例题：【单选题】不符合磺基水杨酸法尿蛋白测定的是：A.操作简便B.灵敏度比较高C.只能用来检测清蛋白D.该法为检查尿蛋白的确证实验【答案】C。
解析：磺基水杨酸法的优点有反应灵敏、操作简单和结果反应快，所以选项A、B均为正确选项。
该法与清蛋白、球蛋白、糖蛋白、本周蛋白均能发生反应，C选项错误。
本法为检查尿蛋白的确证实验，D选项正确。
故本题选择答案C。
初级检验技师考试复习必备考点(111-120)
初级检验技师考试复习必备考点（111-120）【考点111】蛋白尿的定义当尿液中蛋白质超过150mg/24h或超过100mg/L时，蛋白定性试验呈阳性，即称为蛋白尿。
【考点112】检查胎儿肺成熟度的试验检查胎儿肺成熟度的试验：羊水泡沫试验、羊水吸光度测定以及卵磷脂/鞘磷脂(L/S)测定。
【考点113】检查胎儿肾成熟度的试验检查胎儿肾成熟度的试验：肌酐测定和葡萄糖测定。
【考点114】草酸盐抗凝剂和使用方法草酸盐：常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。
草酸盐不适于凝血检查。
双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。
双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
【考点115】肝素抗凝剂和使用方法肝素：加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。
肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。
但肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。
【考点116】枸橼酸盐抗凝剂和使用方法枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。
枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。
适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。
【考点117】抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点：①特异性;②可逆性;③比例性;④阶段性。
【考点118】半抗原半抗原：指某物质在独立存在时只具有抗原性而无免疫原性。
半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。
【考点119】血友病血友病甲缺乏的是Ⅷ因子;血友病乙缺乏的是Ⅸ因子。
【考点120】LPL的激活剂和抑制剂LPL的激活剂和抑制剂：ApoCⅡ是LPL 的激活剂，而ApoCⅢ则是LPL的抑制剂。