动物克隆技术
动物克隆技术的应用及原理
动物克隆技术的应用及原理前言动物克隆技术是一项现代生物科学领域的重要研究方向之一。
它通过复制一个个体的遗传物质，从而使得新个体与被克隆个体拥有相同的基因组。
本文将介绍动物克隆技术的应用和原理。
应用动物克隆技术在许多领域有广泛的应用。
下面列举了一些常见的应用领域：1.农业•具有优良品质的家畜的克隆•增加种畜数量，提高农业产出2.医学•利用克隆动物进行药物研发和测试•克隆人体组织或器官用于移植3.生物学研究•克隆动物用于研究基因功能和表达•研究动物发育和遗传的重要工具4.物种保护•通过克隆濒危物种的个体，以提高物种的存活率•保存已灭绝物种的遗传信息原理动物克隆技术有多种方法，其中最常见的方法是体细胞核移植。
1.体细胞核移植体细胞核移植是一种将一个个体的体细胞核注入到一个没有核的胚胎中的技术。
具体步骤如下：•选择一个合适的供体细胞，通常是皮肤细胞等成熟细胞•采集供体细胞，并切取细胞核•采集一个没有核的胚胎，通常是从同种动物的卵细胞中取得•将供体细胞的细胞核注入到胚胎中•胚胎发育并植入到代孕动物体内•产生克隆动物2.克隆动物的特点克隆动物与自然繁殖的动物有一些特点上的差异：•克隆动物与供体个体有相同的基因组•克隆动物的遗传信息完全来自供体个体•克隆动物的性别与供体个体相同现状与挑战尽管动物克隆技术在许多领域有重要的应用前景，但它仍然面临一些挑战和限制：•成功率低：体细胞核移植的成功率通常较低，导致大多数的克隆尝试以失败告终。
•健康问题：克隆动物在生理和行为方面可能存在一些异常情况，并且更容易患疾病。
•道德和伦理问题：动物克隆引发了许多道德和伦理问题的讨论，包括对动物福利和人类利益的考量。
尽管存在挑战和限制，动物克隆技术在许多领域仍然具有巨大的潜力和应用前景。
随着科学技术的不断发展和突破，相信动物克隆技术将继续为我们带来更多的惊喜和研究成果。
动物克隆技术
• 克隆步骤 • 体细胞克隆的主要技术程序与胚胎细胞基本克隆相同， 主要差别在供体细胞的选择。
• 随着克隆技术的发展和人们对核质关系认识的深 入，自然状态的 G0 期细胞（如卵丘细胞）和 G1 期细胞（胎
儿成纤维细胞），可直接移入去核卵母细胞中生产克隆胚 胎。 • S期的细胞核进入受体卵母细胞后会发生碎片化，而M期 和G2期容易造成多倍体。G0/G 1期细胞的获得常用的方法 是靠血清饥饿培养诱导，但长时间的血清饥饿会导致细胞 凋亡。
• 细胞核移植：
• 常用的核移植方法显微注射有两种，即胞质内注射和 透明带下注射。
பைடு நூலகம்
• 胞质内注射：用一个外径5～8μm 的注核针吸取供体核后直 接注射进卵母细胞胞质内。 • 透明带下注射：把供体细胞核注射在透明带与卵母细胞之 间的卵周隙中，核移植后用电刺激进行细胞融合。 • 细胞融合法。用仙台病毒或PEG介导融合，这种方法效果 很不稳定而
• 2.核受体动物的选择与细胞核的移出。 • 3.供体核的移入及原核的取出。 • 4.胚泡的体外试管培养。 • 5.代母的选择与胚泡移入子宫。 • 6.克隆动物的体内发育与出生。
•
去核卵母细胞常常作为核移植的受体细胞。这是因 为在卵母细胞的细胞质含有某种特定的因子，可以使移植 核中所含有的基因表达程序发生重新排列，使已经分化了 的细胞重新回到发育过程的原点，同受精卵一样开始个体 发育过程。 • 卵母细胞的来源有两种方式：一是用激素对雌体进 行超排处理，从输卵管冲出体内成熟的MⅡ卵母细胞。二是 从屠宰场收集卵巢，吸出滤泡中的卵丘—卵母细胞复合体 (COCs)，在体外培养成熟后作为受体。 • MⅡ期的卵母细胞已经成熟，维持的时间长，并且 有较高MPF(促成熟因子maturation promoting factor)活 性有利于供体细胞核的重编程。
动物克隆的技术和原理
动物克隆的技术和原理
动物克隆是指通过人工手段复制一个动物的基因组，使其与原生态个体相同或相似的过程。
目前，动物克隆技术主要包括体细胞克隆和胚胎克隆两种方法。
体细胞克隆是利用已成熟的体细胞（如皮肤细胞）经过处理，使其转化为“全能细胞”，再将其注入到空心的卵细胞中，使其发育成胚胎，最终通过移植到代孕母体中获得一个新生个体。
这种方法最早应用于羊的克隆，被称为“多莉”，成功率较低，但是可以利用一个体细胞克隆出多个个体。
胚胎克隆是利用早期胚胎的细胞，通过细胞分裂产生多个完全相同的胚胎，再将其移植到代孕母体中发育成新生个体。
这种方法的成功率相对较高，但需要采集和操作早期胚胎，对于某些动物来说难度较大。
动物克隆技术的原理是基于细胞分裂和基因组重组的原理。
每个动物细胞都包含着完整的基因组，通过不同的基因表达和调控，才能发挥出不同的细胞类型和个体特征。
通过对细胞进行特殊处理，可以使其恢复到某种发育状态，从而重新分裂产生新的胚胎或个体。
动物克隆技术在基础研究、药物研发、种质保护等领域有广泛应用，但也存在伦理和安全等问题，需要进一步探究和规范。
- 1 -。
克隆动物技术
克隆动物技术克隆动物技术是一项十分引人注目的科学技术，在动物学领域中具有广泛的应用。
通过克隆技术可以制造出与原始个体有着相同基因组的动物，这些克隆动物在研究生物学、疾病治疗、保护濒危物种等方面都有着巨大的潜力。
一、胚胎分裂克隆技术胚胎分裂克隆技术是克隆动物技术中最常见的一种方法。
它基于一个简单的原理，即在受精卵发育初期，如果将其分裂成两个或更多的细胞团，这些细胞团每一个都能发展成一个完整的个体。
这种方法可以实现同源体克隆，即产生具有完全一致基因组的克隆动物。
这项技术在农业中广泛应用，例如将优良的农场动物进行克隆繁殖，以提高品种质量和产量。
二、核移植克隆技术核移植克隆技术是一种将一个成熟细胞的细胞核移植到一个无核的受体细胞中，然后在合适的条件下使其发育成为一个克隆个体的方法。
这项技术可以通过提取体细胞进行克隆，而不是依赖于胚胎。
核移植克隆技术的突破性在于，它允许科学家从已成年个体中提取细胞，并产生与该个体基本相同的克隆个体。
这项技术在动物学研究和医学领域中有着重要的应用前景。
克隆动物技术的进步为科学界带来了许多潜在的应用。
首先，克隆动物技术有助于研究生物学。
通过克隆动物，科学家们可以更好地了解基因如何影响生物的特征和行为。
此外，它还使得科学家们能够观察到相同基因组不同环境下的生物表现，从而深入研究基因与环境之间的相互作用。
其次，克隆动物技术对医学也具有巨大的潜力。
通过克隆技术，医学研究人员可以制造出与焦点研究相对应的动物模型。
这些克隆动物可以用于疾病模拟实验，加速药物研发进程，为人类疾病的治疗提供更准确的预测。
此外，克隆动物技术还可以用于保护濒危物种。
濒危物种的数量日益减少，为了避免物种灭绝，克隆技术可以用于繁殖那些几近灭绝的物种。
它可以提供重建种群的机会，以确保物种的生存和多样性。
当然，克隆动物技术也引起了许多道德和伦理上的争议。
一些人认为克隆技术可能导致生物多样性的减少，甚至可能导致人类滥用这项技术。
动物克隆技术概述
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把人类皮肤细胞核移植到家兔的卵母细胞里
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▪课堂讨论
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▪ 问题1：
克隆人是不是正常的人？怎样看待 克隆人？
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▪ 不管克隆技术怎样发展，克隆人怎样产生， 都是人，与被克隆人实质上是存在着年龄 差的同胞胎。克隆人生出来就是一个与常 人无异的人。
▪ 然而，正是这一点让人们觉得很难应对克 隆人出现的伦理关系。
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1.2.理论基础
细胞全能性
个体某个器官或组织已 经分化的细胞在适宜的 条件下再生成完整个体 的遗传潜力。
尚未分化的胚胎细胞具有全能性。基于 这种认识，人们采用胚胎分割及胚胎细 胞核移植技术成功克隆出了许多动物。
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2.动物克隆的发展历史：
1938年，德国胚胎学家汉斯·斯皮曼建议用成年的细 胞核植入卵子的办法进行哺乳动物克隆。 1952年，运用斯皮曼的构想，出现世界上第一只克 隆青蛙。 1962年，美国的发育生物学家约翰·格登宣布他用一 个成年细胞克隆出一只蝌蚪，从而引发了关于克隆 的第一轮辩论。 1984年，英国剑桥大学生物学家斯蒂恩·威拉德森用 胚胎细胞克隆出一只羊。这是第一例得到证实的克 隆哺乳动物。
▪ 目前，多莉羊的制备还不能重复，更不能 肯定克隆多莉羊的方法也适用于其它动物 或其它不同组织器官的细胞。
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（2）遗传、疾病问题
▪ 克隆动物夭折率高，不少克隆动物天 生患有疾病或体形过大。
▪ 克隆动物没有遗传物质的交流和互补， 将会加剧一些遗传疾病的发生。
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（3）社会、伦理学问题
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A社会关系
▪ 父子？兄弟？ ▪ 母亲？ ▪ 归属感？
少的体细胞获得了成功。还有待于科技的 进步与发展。
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动物克隆的技术和原理
动物克隆的技术和原理
动物克隆是指利用细胞核移植技术，从已存在的成年动物体细胞中提取核，通过人工手段将其注入另一动物体的卵细胞内，再用电脉冲作用或化学药物促进卵细胞发育和分裂，最终得到一个与原始动物完全相同的新生体。
动物克隆的原理主要分为三个步骤：
1、提取供体细胞：从原始动物身体中提取一种可培养、生长稳定、有遗传稳定性的成体细胞。
2、细胞核移植：将供体细胞核移植到去核卵细胞内，去核卵细胞可能经过化学或物理处理来保证卵质的完整性，并且具有激活卵细胞的能力。
3、体外培养：将去核卵细胞和供体细胞体外处理，创造一个适合供体细胞所需要的环境，用适当的培养液延长供体细胞和卵细胞的存活寿命。
需要注意的是，动物克隆技术的成功率通常较低，并且会出现许多问题，例如产生遗传缺陷和问题，导致动物寿命变短或生殖亦受到不可修复的损伤。
《动物克隆技术》课件
动物克隆技术的挑战与前景
技术难题与挑战
虽然动物克隆技术取得了一定的成果，但仍存在许多技术难题和挑 战，如细胞核移植的成功率、胚胎发育的异常等。
伦理道德问题
动物克隆技术也引发了许多伦理道德问题，如对动物的权益保护、 人类的道德责任等。
前景展望
尽管存在许多挑战，但动物克隆技术的发展前景仍然广阔，未来有望 在繁殖、医学、生物多样性保护等领域发挥更大的作用。
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目录 CONTENT
• 克隆技术简介 • 动物克隆技术的基本原理 • 动物克隆技术的实践与案例 • 伦理和法律问题 • 结论
01
克隆技术简介
克隆技术的定义
克隆技术是一种通过无性繁殖产生与原个体遗传物质完全相同的复制体的技术。
无性繁殖是指不经过生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。
对动物克隆技术的监管和规范
01
02
03
制定技术标准
制定严格的动物克隆技术 标准，确保技术的安全性 和可靠性，减少对动物的 伤害。
建立审查机制
建立独立的审查机制，对 动物克隆项目进行审批和 监督，确保其符合伦理和 法律规定。
加强国际合作
加强国际合作，共同制定 动物克隆技术的国际法律 和监管框架，促进技术的 合理应用和发展。
生物多样性保护
用于保护濒危物种和珍稀动物，通 过克隆技术可以繁殖出更多的个体 ，增加种群数量，降低灭绝风险。
02
动物克隆技术的基本原理
动物克隆技术的定义
动物克隆技术的定义
核移植
动物克隆技术是一种通过核移植、胚胎发 育和生产克隆动物的过程，实现动物的无 性繁殖。
核移植是将动物的一个细胞核转移到另一 个去除了细胞核的卵母细胞中，通过电刺 激使两者融合，形成重构卵。指通过受精或人工受精获得胚胎 ，再经过移植获得新个体的方法；体细胞克隆则是通过核移植技术将体细胞核移植到去核的 卵母细胞中，再经过胚胎发育和移植获得新个体的方法。
动物克隆技术
③建立实验动物模型，探索人类发病 规律。 ④克隆异种纯系动物，提供移植器官。 ⑤拯救濒危动物，保护生态平衡。
有关克隆动物与人存在 的问题
（1）技术不成熟
得到的克隆动物具有极大的偶然性和随机 性。迄今为止，克隆试验的成功率始终很 低。例如，在培育多莉的过程中，科学家 共克隆出２７７个绵羊胚胎，最终成功使 母羊受孕并生产的只有多莉一个。 目前，多莉羊的制备还不能重复，更不能 肯定克隆多莉羊的方法也适用于其它动物 或其它不同组织器官的细胞。
1.2.理论基础
细胞全能性
个体某个器官或组织已 经分化的细胞在适宜的 条件下再生成完整个体 的遗传潜力。
尚未分化的胚胎细胞具有全能性。基于 这种认识，人们采用胚胎分割及胚胎细 胞核移植技术成功克隆出了许多动物。
2.动物克隆的发展历史：
1938年，德国胚胎学家汉斯· 斯皮曼建议用成年的细 胞核植入卵子的办法进行哺乳动物克隆。 1952年，运用斯皮曼的构想，出现世界上第一只克 隆青蛙。 1962年，美国的发育生物学家约翰· 格登宣布他用一 个成年细胞克隆出一只蝌蚪，从而引发了关于克隆 的第一轮辩论。 1984年，英国剑桥大学生物学家斯蒂恩· 威拉德森用 胚胎细胞克隆出一只羊。这是第一例得到证实的克 隆哺乳动物。
使用最多的克隆方法 ——胚胎细胞克隆
3.克隆的基本过程
动物克隆技术的核心是核移植。 核供体动物的选择与细胞核的获得。 核受体动物的选择与细胞核的移出。 供体核的移入及原核的取出。 胚泡的体外试管培养。 代母的选择与胚泡移入子宫。 克隆动物的体内发育与出生。
4.克隆动物的研究价值和发展趋势
2003.2.14日苏格兰向外界宣布：多 莉因早衰并患有肺炎，被迫实施了安 乐死。由于早衰问题，人们怀疑“多 莉是穿着羔羊服装的老羊” 。
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2.动物克隆研究的历史和现状
世界10年克隆研究之路
1996年 第一只成年体细胞克隆羊“多利” 诞生 1997年 一头用胎盘克隆而成的荷兰牛亮相。 1998年 两头由母牛细胞克隆而成的小牛在东京出生。 一个国际研究小组宣布克隆出了三代实验鼠 2000年 曾参与克隆“多利” 羊的英国公司培育了第一 批克隆猪 2001年 一头稀有品种的克隆亚洲牛诞生，两天后死亡。 2002年 法国研究人员克隆出兔子。 2003年 美国科学家推出了一匹克隆骡。 爱荷华州的研究人员称他们克隆出了一头濒临灭绝的 爪哇 野牛。 2004年 美国加利福尼亚的一家公司培育出了第一只克隆 猫。这只猫后来成为第一只被卖出的克隆宠物。 2005年 韩国科学家宣布他们培育出了首条克隆狗叫“斯 纳皮”
效率，克服外源基因随机整合带来的消极影响。 3、克隆人的胚胎与胚胎干细胞技术结合可能会 解决目前人类器官修复和移植过程遇到的免疫排斥和 供体不足的难题。
•
当然，克隆技术的滥用也会导致严重的社会问题。
因此，加强克隆技术管理，引导它朝着人类进步的方 向发展是非常必要的。
4. 动物克隆的应用：
1．动物资源的种 质保存包括地球 上频危动物的挽 救等。 2．生产移植器官 ，培育优良品种 ，与转基因技术 相结合研制生物 反应器生产基因 药物。
1991
Yong等
山羊
• （二）胚胎克隆的操作程序
• 1、卵母细胞的去核：细管吸除法，紫外线照射法。
• 2、供体核的准备和移植：将供体胚胎分成单个卵裂球， 每个卵裂球即为供体核。
• 3、卵裂球与卵子的融合：将卵裂球和去核卵子融为一 体，形成单细胞结构。
• 4、卵子的激活：在正常受精过程中，精子穿过透明带 及卵黄膜时，引起卵子内钙离子浓度升高，卵子细胞周 期恢复，启动胚胎发育，这一现象称为激活。胚胎克隆 时，通常用一定强度的电脉冲作用卵母细胞。 • 5、克隆胚胎的培养
细 胞 核 移 植 的 方 法
体 细 胞 核 移 植
3.1、胚胎细胞核移植
• 胚胎细胞核移植又称胚胎克隆，它是通过 显微操作将早期胚胎细胞核移植到去核卵 母细胞中构建新合子的生物技术。通常把 提供细胞核的胚胎称核供体，接受细胞核 的卵子称核受体。由于哺乳动物的遗传性 状主要由细胞核的遗传物质决定，因此由 同一枚胚胎作核供体通过核移植获得的后 代，基因型几乎一致，称之为克隆动物。 通过核移植得到的胚胎可作供体，再进行 细胞核移植，称再克隆。
• （二）体细胞克隆技术的关键环节
• •
体细胞克隆的主要技术程序与胚胎细胞基
本克隆相同，主要差别在供体细胞的选择。
随着克隆技术的发展和人们对核质关系认
识的深入，自然状态的G0 期细胞（如卵丘细胞） 和G1 期细胞（胎儿成纤维细胞），可直接移入 去核卵母细胞中生产克隆胚胎，并且已在小鼠 和牛上获得成功。
3．克隆人。是全 世界注目的焦点 ，有人设计了克 隆人的技术路线
5. 动物克隆的危险性：
1．克隆动物已出现广泛的免疫缺陷或早期夭亡。 2．克隆动物过程中也极有可能产生遗传性的变异（无性系
变异），这在植物的克隆中已广泛得到研究和验证，会发
生染色体变异，基因组DNA扩增和某些转位因子的激活。 3．克隆人不但面临社会、家庭伦理道德问题，也将面临健 康安全问题。
• （三）胚胎克隆技术存在的问题：总体效率低
• 1、供体核数量的局限性：目前，胚胎克隆供体核的最 高发育阶段是绵羊的内细胞团细胞，而其他家畜必须用64细胞或更早阶段胚胎作核供体，才能获得克隆后代。 • 2、受体卵子质量的影响：
•
•
3、核质关系的影响：细胞核和细胞质关系不协调是导 致核移植效率低的一个重要因素。
第三部分 动物克隆技术 (CloningTechnology)
1 .概述 2.动物克隆的发展历史 3.克隆的基本过程。 4.克隆动物的研究价值和发展趋 势
1、概述
1.1“克隆”的定义 是指一个细胞或个体以无性繁殖方式产生 遗传物质完全相同的一群细胞或一群个体。 在动物繁殖学中，它是指不通过精子和卵子 的受精过程而产生遗传物质完全相同新个体的 一门胚胎生物技术。 根据核卵供体的来源不同可分为胚胎细胞克隆 动物和体细胞克隆动物两种。
• （三）体细胞克隆技术目前存在的问题 1、结果不稳定，效率低 2、后代死亡率高
3、用其他体细胞作供体的探索
4、细胞质遗传问题
5、供体细胞的保存和细胞周期的影响
• （四）体细胞克隆技术的发展远景
• •
•
1、克隆技术的成功将会大大提高畜牧业的生产
效率，加强濒危动物的保护力度。
2、克隆与转基因技术结合将大幅度提高转基因
术将一个细胞的细胞核移植到另一个细胞中，或者将两
个细胞的细胞核（或细胞质）进行交换，从而可能创造
无性杂交生物新品种的一项技术。
Hale Waihona Puke 胎 克 隆：使用的核供体细胞如果来自多细胞阶段 的胚胎，叫做胚胎克隆。 体细胞克隆：使用的核供体细胞来自动物体，叫做 体细胞克隆。
动物核移植技术程序
胚 胎 细 胞 核 移 植
罗斯林研究所科学家取一头 普通白绵羊的乳腺细胞，将 细胞核移植到一个剔除了细 胞核的卵子中，使之融合、 分裂、发育成胚胎，然后移 植到第三头羊的体内。科学 家共培育277个胚胎，只有 多莉成功出生。1996年7月5 日，多莉降临人世。直到 1997年2月23日才公布于众。 2003.2.14日苏格兰向外界宣布： 多莉因早衰并患有肺炎，被迫 实施了安乐死。由于早衰问题， 人们怀疑“多莉是穿着羔羊服 装的老羊” 。
•问题3：
身体上仸何一部分的细胞是否都可以用来 克隆？
•问题4：
人可以无休止地被克 隆吗？
•问题5： 是否是人类的倒退？
“多利羊”之父反对克隆人
“试管婴儿之父”反对克隆人 ——罗伯特· 爱德华
许多国家支持治疗性克隆， 反对生殖性克隆
1 器官移植：我成了零件
2 珍稀惜动物的克隆繁殖
（一）发展史
1、胚胎细胞核移植
年代 1952 代表人物 Briggs和Kings 动物 非洲豹蛙
1975
1981 1986 1987 1988 1989
Bromhall
Illmense和Hoppe Willadsen Prather Stice和Robl Prather等
家兔
小鼠 绵羊 牛 家兔 猪
4、操作技术的影响
• （四）胚胎克隆技术的发展远景
• • 胚胎克隆与胚胎分割、卵裂球培养相比，大
大提高了生产遗传同质动物的效率。
1、在研究动物个体的发生发育过程中，胚胎 细胞核移植为探索细胞质与细胞核的相互作用和胚 胎细胞的分化规律方面提供了很好的研究手段。 • 2、胚胎克隆技术的完善为体细胞克隆技术发
1、概述
1.1“克隆”的定义：是指由一个细胞或个体以无性繁殖 （asexual reproduction）或孤雌生殖而产生方式产生遗传物质 完全相同的一群细胞或一群个体。
内容：
克隆技术 广 义 胚 胎 分 割 细 胞 核 移 植
胚 胎 细 胞 核 移 植
狭 义
体 细 胞 核 移 植
1.2理论基础
展将提供有益的借鉴，在体细胞克隆没有成功的动
物中，胚胎克隆依然是理想的无性繁殖技术。
3.2、体细胞核移植
• 体细胞核移植技术又称体细胞克隆，它是把
分化程度较高的体细胞移入去核卵子中，构建新
合子的生物技术。 • • • 它与胚胎克隆技术相比，有两大优点： 第一，同一遗传性状供体核的数量可无限 获得； 第二，可通过对供体细胞的改造，加速家 畜品种改良或生产转基因动物。
使用最多的克隆方法 ——胚胎细胞克隆
有关克隆动物与人存在 的问题
（1）技术不成熟
（2）遗传、疾病问题
（3）社会、伦理学问题
A-社会关系 B-人+动物？
把人类皮肤细胞核移植到家兔的卵母细胞里
•课堂讨论
•问题1：
克隆人是不是正常的人？怎样看待 克隆人？
•问题2：
英雄、伟人可以通过克 隆再生吗？
世界第一只克隆宠物
首条克隆狗叫“斯纳皮”
3.克隆的基本过程
• • • • • • • 动物克隆技术的核心是核移植。 核供体动物的选择与细胞核的获得。 核受体动物的选择与细胞核的移出。 供体核的移入及原核的取出。 胚泡的体外试管培养。 代母的选择与胚泡移入子宫。 克隆动物的体内发育与出生。
核移植技术：所谓核移植技术就是利用显微操作技