安捷伦(agilent1260)高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260全自动高效液相操作规程

安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备:最好使用流动相溶解样品;进样前样品需过滤膜,除去悬浮不溶杂质。
2.流动相的选择和处理:使用高纯度试剂,所有含盐或含水溶剂必须膜过滤,100%色谱纯有机试剂,滤膜过滤后方可使用;流动相现配现用,剩余的流动相(水相)及时清理,实验间隔>2天,建议倒掉;任何溶剂,如果有可见悬浮物、菌丝,不可使用;更换流动相之前,必须事先阅读色谱柱的说明书;除非有说明,反相柱不得使用100%水。
3.开机注意事项:先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源;等各电源开启后(30s),打开在线软件;冲柱子和平衡时,暂不开紫外灯;平衡完后,打开紫外灯,设置梯度和波长或引用方法。
4.实验结束:C18反相柱应用色谱甲醇保存,不能含任何酸、盐;用甲醇替换通道,四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中,以防长菌;流速调零,再关闭软件,最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。
Agilent1260液相色谱仪操作规程

Agilent 1260 液相色谱仪操作规程一、准备工作a)启动计算机:打开计算机,登陆windows操作系统。
b)启动工作站:开启Agilent 1260各模块电源,待Agilent 1260各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色),点击LC1260(联机)。
c)开启工作站:进入工作站,点击“方法和运行控制”或者在“视图”中选择“方法和运行控制”。
打开仪器控制视图:选择“视图->系统视图”,即可显示仪器控制视图。
d)配置流动相:将流动相装入溶剂瓶中。
设置溶剂瓶参数,在溶剂瓶图形上单击鼠标左键,点击“溶剂瓶填充量”设置溶剂瓶中流动相实际体积,也可设定低体积关泵;溶剂要求:色谱级纯或优级纯乙腈或甲醇,二次蒸馏水。
e)冲洗流动相管路:反时针旋开泵模块上的溶液排空阀。
右键单击泵视图的空白处,选择“方法”,设置“流速”为5ml/min。
对于G1311X(四元泵)分别将A,B,C,D 四个通道设置“溶剂”为100%,冲洗至管线内无气泡为止; 设置溶剂比例为初始比例,“流速”为1ml/min,关闭Purge阀。
f)开启模块:开启模块:鼠标右键点击每个模块的空白处都会弹出提示框,选择“控制”即可在新的窗口中选择打开或者关闭各个模块。
也可在仪器视图中选择“打开”。
g)监视基线:点击“视图->在线信号”打开“在线图谱”。
h)平衡色谱柱、进样分析:监视压力和信号基线等待平稳后,可以进样采集分析。
二、数据采集方法编辑a)方法编辑:在“方法和运行控制”状态下,单击“方法”菜单,选择菜单中“新建方法”,调用化学工作站的默认方法DEF-LC.M ,选择“方法”菜单下的“编辑完整方法”,设置好泵参数、进样方式、柱箱温度、波长、积分参数等,即可开始编辑一个完整地方法。
b)方法存贮:在“方法和运行控制”状态下,单击“方法”菜单,选择菜单中“方法另存为”选项,方法以检测项目名存贮。
三、样品信息编辑a)运行单个样品:在“方法和运行控制”状态下,单击“运行控制”菜单,选择“样品信息”进行样品信息编辑。
安捷伦1260高效液相操作规程

安捷伦液相1260高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料(最好是外文文献)了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。
如果还不清楚样品是什么物质,最起码也应该对其极性进行了解,为选择合适的流动相和固定相打好基础。
流动相选择注意事项:①避免使用高粘度的溶剂作为流动相;②所选用的流动相一定要与样品相溶;③各流动相之间可以很好的相溶;固定相选择注意事项:a.正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团,如(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强,因此,分离的次序是依据样品中各组分的极性大小,即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如正已烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
b.反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质,表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强,通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出,而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。
2.准备工作①用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm过滤器过滤,必须达到均匀而无颗粒的状态;②流动相一定要选用色谱级别的(最好是默克、飞世尔、时联等牌子的),并且在使用之前一定要使用0.4µm过滤器过滤,再用超声波清洗仪脱气处理20-30min;③在连接柱子和色谱仪之前,阀件或管路一定要清洗干净,(一般用异丙醇将管路清洗)3.仪器操作(一)将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中:棕色瓶对应A 泵,该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水;B、C、D泵根据需要添加。
注:若流动相中有水、乙腈最好现用现处理,不宜放置太长时间。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机(1)打开计算机,登陆windows操作系统。
(2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。
(3)进行仪器配置,点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址:192.168.254.11。
把各流动相放入相应的溶剂瓶中。
(4)编辑方法。
方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项(四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定,仪器参数默认),完成后,文件→方法另存为→编辑名称,保存方法。
(5)排气。
旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”设置泵流速,排气可设置1.2ml/min,l流量梯度100,也可5ml/min,流量梯度10。
一般冲洗3-5min,注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出,观察管路中气体位置,以其排净为目的。
关泵,关闭排气阀(顺时针)。
(注意:先开排气阀,再开泵,先关泵,后关排气阀)。
(6)在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值,谨防空进。
将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。
(7)换流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器,视图,在线信号,选择信号,观察基线情况。
二、数据采集信息编辑及进样(1)编辑样品信息:点“单次样品”小瓶,或点击运行信息-单次进样,设定操作者姓名,样品数据文件名,进样量等。
(2)编辑好样品信息后方可进样。
三、数据处理(1)打开桌面“仪器1脱机”,单击“数据分析”进入数据分析画面。
(2)从“文件”菜单中选择调用信号,选择您的数据文件名,单击确定。
(3)谱图优化。
从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间,或选择“自定义量程”调整,反复进行,直到图比例合适为止。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源,待仪器自检完成后,确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位,确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件,选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单,选择“启动系统”命令,系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后,点击“准备”菜单,选择“准备系统”命令,系统开始进行一系列的自动化准备工作,比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度,确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中,注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中,按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮,开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点,选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度,确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求,设置好色谱条件,包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器,比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数,如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后,点击软件界面上的“开始”按钮,开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号,根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求,对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程,希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中,应严格按照安全操作规范进行,并及时进行维护和保养,以保证仪器的正常运行。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机(1)打开计算机,登陆windows操作系统。
(2)打开主机各模块电源(从上至下),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站,从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。
(3)进行仪器配置,点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址:192.168.254.11。
把各流动相放入相应的溶剂瓶中。
(4)编辑方法。
方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项(四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定,仪器参数默认),完成后,文件→方法另存为→编辑名称,保存方法。
(5)排气。
旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”设置泵流速,排气可设置1.2ml/min,l流量梯度100,也可5ml/min,流量梯度10。
一般冲洗3-5min,注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出,观察管路中气体位置,以其排净为目的。
关泵,关闭排气阀(顺时针)。
(注意:先开排气阀,再开泵,先关泵,后关排气阀)。
(6)在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值,谨防空进。
将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。
(7)换流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器,视图,在线信号,选择信号,观察基线情况。
二、数据采集信息编辑及进样(1)编辑样品信息:点“单次样品”小瓶,或点击运行信息-单次进样,设定操作者姓名,样品数据文件名,进样量等。
(2)编辑好样品信息后方可进样。
三、数据处理(1)打开桌面“仪器1脱机”,单击“数据分析”进入数据分析画面。
(2)从“文件”菜单中选择调用信号,选择您的数据文件名,单击确定。
(3)谱图优化。
从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间,或选择“自定义量程”调整,反复进行,直到图比例合适为止。
(4)积分。
从“积分”中选择“自动积分”,若积分结果不理想,从菜单中选“积分事件”,更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”,从“积分”中选择积分选项,则数据被积分,如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。
Agilent1260高效液相色谱仪操作规程

Agilent1260⾼效液相⾊谱仪操作规程1、⽬的确保Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪的正确使⽤及管理。
2、范围研发分析中⼼实验室Agilent 1260⾼效液相⾊谱仪。
3、责任仪器使⽤者对本标准的实施负责。
4、内容4. 1 开机4.1.1打开计算机,进⼊Windows 画⾯。
4.1.2⾃下⽽上打开1260LC各模块电源,待各模块⾃检完成后,双击电脑桌⾯上LC1260-1(Online)图标,化学⼯作站⾃动与1260LC通讯,进⼊⼯作站画⾯。
4.1.3单击【View】菜单选择【Method and Run control】项,也可单击⼯作站画⾯左下⾓【Method and Run control】项,进⼊⽅法和运⾏控制窗⼝。
4.2 安装⾊谱柱正确安装实验所需的⾊谱柱,注意⾊谱柱流速箭头⽅向,试验过程中需检查是否存在漏液。
4.3 溶剂瓶体积设置把事先配好的流动相倒⼊相应的溶剂瓶中,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下【Bottle filling】,在参数设置处输⼊各溶剂瓶(A、B、C、D)内溶液实际体积和停泵体积,单击【OK】键,即可。
4.4 设置【Seal wash】单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在seal wash这栏中选择“On”, 清洗功能开始运⾏,并设置清洗时间,每隔5min清洗0.1min。
4.4 脱⽓逆时针旋开Purge阀,单击【instrument】菜单,选择【More Quat Pump】项下“control”, 在“pump”这栏中选择“On”,泵开始运⾏。
设置“solvents”⼀栏中相应参数,将试验中所⽤到的管道逐⼀脱⽓,直⾄管内(由溶剂瓶到泵⼊⼝)⽆⽓泡为⽌所需时间,3ml/min冲洗⼤约需5min~10 min ,,完成后选择“off” , 单击OK键关泵,顺时针旋紧Purge阀。
安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程安捷伦(Agilent)1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器,具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充,以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件,并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求,在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子,将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮,设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器,并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮,开始进样。
5. 进样完成后,从进样器中取出样品瓶,并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门,并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏,如果有泄漏,则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度,确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源,并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮,开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法,如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后,关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器,保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时,注意安全,避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中,严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中,如遇到异常情况,请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程,可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。