项目一 免疫血清的制备与提纯
免疫血清的制备实验报告
1）取一只接种过的大白兔固定于兔笼，耳缘静脉注射合适剂量的麻醉剂麻醉。将麻醉后的大白兔固定于兔台，用棉线固定四肢，细线固定门牙于铁柱，使颈部完全暴露。
2）用剃毛剪贴着皮肤减去颈部的毛，手术刀在颈部中央切开皮肤约3-4cm，纱布吸去多余的血液。用止血钳提拉住两边的皮毛，组织剪将切口扩大至7-8cm。分别剪开黏膜层、肌肉层，用止血钳扩大开口使之与皮肤一致，游离出颈动脉约2-3cm。
实验报告
实验名称
多克隆抗体的制备一（抗
班 级
姓 名
学 号
一、实验目的
了解免疫的原理，掌握免疫方法和抗血清的制备技术。
二、实验器材
试剂：
酒精棉球、NDV灭活油乳剂疫苗、麻醉剂
器材：
兔笼、注射器、剃毛剪、手术刀、止血钳、手术剪（组织剪、眼科剪）、动脉夹、眼科剪、动脉导管、纱布、棉线、细线、培养箱、冰箱、结扎细线、离心机、温箱
3.由于抗原性物质通常具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌各种抗原决定簇的抗体，免疫血清中实际上是含有多种抗体的混合物，所以这种免疫法获得的免疫血清又称为多克隆抗体。
4.多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为了获得特异性强，效价高的抗血清，除了抗原的因素外，还需注意动物品系的选择、抗原注射的浓度、剂量、次数、间隔时间及注射途径等。对于免疫原性较弱的可溶性抗原（如蛋白质类抗原）要加入佐剂，以增强免疫性。
四、实验过程及步骤
1.免疫接种
1）取一只健康大白兔固定在兔笼中
2）酒精消毒大白兔皮肤后，通过皮下或皮内注射方式接种大白兔，共计注射8-10个位置，每一处约0.1ml。
3）为提高免疫血清效价，通常需要进行2-3次加强免疫，每次免疫间隔10-15天。然后再接免疫结束后的血清采集过程。
《疫学实验教学课件》实验一 免疫血清的制备
培养实验操作技能和团队合作精神
提高实验操作技能
通过实际操作，掌握免疫 血清制备过程中的实验技 巧和注意事项。
培养团队合作精神
在实验过程中，需要小组 成员密切配合，共同完成 实验任务。
加强实验安全意识
了解实验过程中的安全风 险，遵守实验室安全规定 ，确保实验安全进行。
实验原理
02
免疫血清的基本概念
掌握免疫血清的制备流程
包括抗原制备、免疫接种、血清分离 和纯化等步骤。
了解免疫血清在疫学实验中的应用
01
02
03
诊断疾病
利用免疫血清中的特异性 抗体检测病原体或其抗原 ，协助诊断疾病。
监测疫苗效果
通过检测免疫血清中抗体 的效价和维持时间，评估 疫苗的保护效果。
生物制品制备
利用免疫血清制备单克隆 抗体、免疫球蛋白等生物 制品。
免疫血清特异性的鉴定
总结词
通过抗原抗体反应鉴定免疫血清的特异性，了解免疫血清能否针对特定抗原产生特异性 反应。
详细描述
在实验中，将免疫血清与特定抗原进行反应，观察是否产生特异性结合。同时，采用阻 断实验等方ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，验证免疫血清的特异性。
实验结果的分析与讨论
总结词
根据实验结果，分析免疫血清的效价和 特异性，讨论实验中可能存在的误差和 改进措施。
灭活处理
为了消除血清中的生物活性，可以采用加热、紫外线照射等方法进行灭活处理。
保存方法
将灭活后的免疫血清进行分装，选择适当的保存条件，如低温、避光等，以保持血清的稳定性和有效 性。
实验结果与分析
05
免疫血清效价的测定
总结词
通过滴定法测定免疫血清效价，了解免疫血清的抗体含量和保护能力。
免疫血清的制备实验报告
免疫血清的制备实验报告
《免疫血清的制备实验报告》
实验目的：
本实验旨在通过免疫反应制备免疫血清，以便用于后续的免疫学研究和临床诊断。
实验材料和方法：
1. 实验动物：选择适合的实验动物，如小鼠或兔子，进行免疫原注射。
2. 免疫原制备：根据研究需要选择合适的抗原，并进行纯化和浓缩处理。
3. 免疫程序：将免疫原与适宜的佐剂混合，然后注射到实验动物体内，以激发免疫反应。
4. 血清采集：在免疫原注射后，定期采集实验动物的血清样本，以监测抗体水平。
5. 血清制备：通过离心和沉淀的方法，从血清中分离出免疫球蛋白，得到免疫血清。
实验结果：
经过一系列的免疫程序和血清采集，成功制备得到了免疫血清。
通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹（Western blot）等方法，验证了免疫血清中存在特定的抗体，具有对应的特异性和亲和力。
实验结论：
本实验成功制备了具有特定抗体的免疫血清，为后续的免疫学研究和临床诊断提供了重要的实验材料。
免疫血清的制备过程复杂而精细，需要严格控制各个环节，以确保免疫血清的质量和稳定性。
实验意义：
免疫血清作为一种重要的实验试剂，在免疫学研究和临床诊断中具有广泛的应
用前景。
通过本实验的制备过程，可以更好地理解免疫反应的机制，为疾病的
诊断和治疗提供重要的实验依据。
同时，免疫血清的制备也为相关领域的科研
人员提供了一种重要的实验技术和方法，有助于推动免疫学研究的进展和应用。
1-1-免疫血清制备及效价测定
测定免疫血清中抗体效价旳措施诸多，如凝集反应、沉淀反应、溶血反应、 ELISA分析等均可用于对抗体效价旳测定。
此次试验将采用溶血试验测定所获免疫血清旳效价。
• 抗原旳两种特征：免疫原性与抗原性
• 免疫原性旳本质——异物性
• 与机体亲缘关系越远，组织构造旳差别越 大，异物性越强。
试验材料
1. 40% SRBC 2. 18-22g旳BALB/C系小白鼠 3. 无菌1ml 注射器 4. 抗凝剂（枸橼酸钠或肝素） 5. 新鲜豚鼠血清（作为补体用） 6. 小试管等
实验内容
1、免疫动物
首次免疫小鼠为腹腔注射40%绵羊红细胞 （SRBC）0.2ml，后来分别于第4天、第7天和第10 天时间，以相同免疫剂量、相同免疫途径加强免疫。
小ห้องสมุดไป่ตู้腹腔注射
1. 小鼠腹腔注射能够用1ml旳注射器，配合4号针头。 2. 腹腔注射时右手持注射器，左手旳小指和无名指抓住小鼠旳
尾巴，另外三个手指抓住小鼠旳颈部，使小鼠旳头部向下。 这么腹腔中旳器官就会自然倒向胸部，预防注射器刺入时损 伤大肠、小肠等器官。进针旳动作要轻柔，预防刺伤腹部器 官。 3. 尤其是对于体重较小旳小鼠，腹腔注射时针头能够在腹部皮 下穿行一小段距离，最佳是从腹部一侧进针，穿过腹中线后 在腹部旳另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头， 并轻微旋转针头，预防漏液。
试验1-1 免疫血清制备及效价测定
实验目旳和要求
1、学习抗血清旳制备措施； 2、掌握抗血清旳搜集和保存措施； 3、掌握免疫血清效价旳测定措施。
1实验一 免疫血清的制备及应用(1)
实验一免疫血清的制备及应用（1）免疫血清（溶血素）的制备【实验原理】用绵羊红细胞(SRBC)免疫家兔，可获得抗绵羊红细胞抗体(抗SRBC抗体)。
SRBC与抗SRBC抗体结合，在补体参与下，可出现红细胞溶解，因此抗SRBC抗体也称为溶血素。
【主要试剂与器材】1.健康雄性家兔、绵羊。
2.2%碘酒、75％酒精、无菌生理盐水。
3.0.10g/L硫酸镁生理盐水溶液。
4.无菌三角瓶(内装玻璃珠)、离心管、吸管、注射器。
5.离心机。
【操作方法】1.抗原制备（1）用碘酒、75％酒精消毒绵羊颈静脉处皮肤，抽血，缓慢注入含有玻璃珠的无菌三角瓶内，轻轻摇动三角瓶，脱纤维抗凝。
抗凝绵羊血用Alsever液可保存2周。
（2）无菌取抗凝绵羊血于离心管中，加适量生理盐水，2000r/min离心5min，吸去上清液和白细胞层，再用较多的无菌盐水与红细胞混匀，离心再弃上清，重复3次，最后一次离心10min。
（3）根据红细胞压积，用0.10g/L硫酸镁生理盐水溶液配成20％SRBC悬液。
2.免疫动物（1）取健康雄性家兔，通过耳静脉免疫，免疫程序见表1-2。
表1-2 溶血素制备免疫方案【结果判断】收获的抗血清应是无菌、无溶血的。
【注意事项】注意无菌操作，并尽可能多的采集血清。
【方法评价】溶血素方法简便易行，但是动物个体间产生溶血素质量差异较大。
【临床应用】溶血素可直接用于补体参与的溶血反应，如总补体溶血活性和单个补体成分溶血活性测定。
用溶血素和SRBC做指示系统，可进行补体结合试验。
【思考题】在制备绵羊红细胞过程中为什么要洗涤并吸去红细胞表面的白细胞层?。
生化免疫技术----免疫血清的制备及效价测定
免疫血清的制备及效价测定制备免疫血清的传统方法是将抗原注入动物体内，由动物体内 B 细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。
由于抗原分子（完全抗原）具有多种抗原决定簇，每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原受体的 B 细胞系产生该决定簇的抗体，因此用抗原免疫机体获得的免疫血清一般均为多克隆抗体。
制备的免疫血清的质量（特异性、亲和力及效价高低）受多种因素的影响，主要包括抗原的性质、免疫动物的种类及状态、免疫剂量、免疫途径及免疫方案（加强免疫次数，间隔时间，佐剂的使用等）等。
因此要获得高质量的免疫血清需先通过预实验摸索确定最佳免疫方法。
测定免疫血清中抗体效价的方法很多，如凝集实验，沉淀实验、溶血实验， ELISA 等均可用于对抗体效价的测定。
第一部分、免疫血清的制备我们要制备的是多克隆抗体----抗IgG抗体的制备。
Ig是免疫球蛋白，对异种动物而言，是良好的抗原物质。
可以刺激异种动物产生抗Ig血清，经适当提取后，产生抗Ig抗体，又叫第二抗体或抗抗体。
在多数的间接标记反应中，均需制备抗Ig抗体。
【实验材料】1．动物IgG（兔源的，购买）2．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂3．青霉素和链霉素4．实验动物： BALB/c小鼠5．无菌 1ml 注射器6. 生理盐水，酒精棉等【实验步骤】1. 免疫程序：40 ug+弗氏佐剂+青霉素1 000U/ml、链霉素1 000μg/ml+生理盐水混悬液背部皮下多点注射，隔10天加强免疫2次，腹腔注射20ug+不完全弗氏佐剂，一周后收血清。
一般在末次免疫结束后的第7 天,自鼠尾取少量血,分离血清,采用间接法ELISA 分析血清中抗体的效价，达到效价即可收取。
2. 获得免疫血清：小鼠摘眼球取血,收入小试管中,3000转/分离心5分钟,上清即为免疫血清。
第二部分、免疫血清质量评价一、 效价测定抗体效价测定方法很多，本实验采用琼脂扩散法，ELISA法—）、琼脂扩散法1.操作步骤（具体见附注）⑴ 做琼脂板，打梅花孔。
《免疫血清的制备》课件
总结
免疫血清的制备是一项复杂的过程，需要严格的质量控制。同时，免疫血清 在疾病诊断、生物学研究等方面具有举足轻重的作用。
参考文献
• 张三，李四。免疫学。北京：人民卫生出版社，2015。 • 王五，赵六。生物制品生产技术。北京：化学工业出版社，2016。
将免疫原注射到动物体内，使其免疫产生特异性抗 体。
采血
采集免疫动物的血液，制备成免疫血清。
灌装和贮存
对免疫血清进行筛选、灌装和储存。
体外机制合成免疫血清的步骤
1
抗原制备
制备抗原并纯化，确保其具有特异性。
抗体产生
2
利用体外细胞培养方法合成特异性抗体。
3
免疫沉淀
用盐析法或其他方法将抗体沉淀下来。
纯化和灌装
4
对产生的免疫血清进行纯化和灌装。
免疫血清的质量控制
纯度检测方法
免疫电泳、SDS-PAGE等方法可以检测免疫血清 的纯度。
效价测定方法
ELISA、放射免疫测定等方法可以检测免疫血清 的效价。
免疫血清的应用案例
免疫血清在疾病诊断中的应用
检测患者血液中是否存在特定抗体，以确诊疾病。
免疫血清在生物学研究中的应用
免疫血清的制备
免疫血清是一种重要的生物制品，本课程介绍了免疫血清的制备方法、质量 控制和应用案例。
背景介绍
定义
免疫血清是从免疫动物血清或体外制备中获得的含有特异性抗体的血清。
用途和重要性
免疫血清广泛应用于疾病诊断、生物学研究等领域，对于人类健康和科学发展具有重要意义。
动物免疫血清的
临床免疫和免疫检验实验指导
临床免疫和免疫检验实验指导（一）免疫血清的制备与鉴定实验一、免疫血清的制备机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫（抗体）和细胞免疫（致敏的T淋巴细胞及其产物多种淋巴因子）的过程。
一种抗原能否引起免疫反应，一方面取决于抗原分子表面有无特异性的抗原决定簇。
另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。
上述条件具备时，抗原经合适途径，选择合适剂量及次数，进入机体内，经过一段潜伏期，抗体水平就逐渐升高，维持高峰，既高效价抗体。
利用此原理可制备血清学试验所需的抗血清、各种免疫球蛋白及溶血素等。
制备优质的免疫血清除需要纯化抗原外，还需注意选择合适的动物及注射的途径，抗原剂量、注射次数等有密切关系。
（一）抗原制备和动物的选择1．抗原的制备：为了制备特异性强、亲和力高和效价满意的抗血清，首先要选择合适的抗原。
抗原的特异性除与其分子量大小有关外，还与其分子表面上决定簇性质、位置、立体构型有密切的关系。
抗原种类可分为天然抗原、人工抗原及合成抗原。
在天然抗原中又可分为可溶性抗原（如血清、毒素、组织浸出液等）、颗粒性抗原（如细菌、红细胞等）及半抗原（本身无免疫原性，必须与载体结合才有免疫原性）。
2．动物的选择：实验室多选用家兔、豚鼠（或鸡），商品性生产多用马、羊，特殊情况选用猴。
在免疫前应预先测定体内有无存在低滴度交叉反应的天然抗体。
（二）抗原的注射途径和剂量1．注射抗原的途径：通常可采用静脉、腹腔或皮下途径，皮内或肌肉途径较少采用。
近期发展在局部淋巴结或足等部位注射抗原。
不同途径，抗原在体内代谢速度不同，因而产生抗体的水平不同。
在皮下组织中能长期贮留的抗原，特别是与佐剂相混合的抗原，可以从皮下组织内缓慢释放出来，有利于抗体的产生。
2．抗原剂量及注射次数：应随抗原的性质而异。
3．每次注射间隔时间：不同抗原和不同免疫方法，可从数日到数周，一般无佐剂抗原为2~4天。
加佐剂抗原为10~15天。
（三）佐剂的作用原理及种类：1．原理：佐剂又称免疫增强剂。
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项目一免疫血清的制备与提纯一、免疫血清的制备(Preparation of antiserum)【实验原理】将适当的免疫原物质注入动物体内，经一段时间动物血清中可出现大量特异性抗体，这种含抗体的血清称为抗血清(或免疫血清)。
它在血清学检测中有广泛应用。
理想的抗血清的产生主要取决于抗原的纯度和免疫原性，以及动物的应签性。
同时免疫接种时的免疫途径、抗原剂量、有无佐剂、注射次数及间隔时间等因素均可影响抗血清的质量。
制备的抗血清可直接用于某些实验，也可从中提取特异性抗体或某一组分。
下面介绍几种常用的免疫血清制备方法，免疫动物均选用家兔，这是因为：(1)其产生的血清量足够实验应用并容易驯养；(2)为采血、注射用耳血管很容易找到；(3)用兔子作免疫接种的资料较多，可方便利用；(4)能产生高效价抗体，并且可用常用的沉淀反应、凝集反应或溶血、溶菌反应等试验方法进行鉴定。
【试剂和器材】1．免疫动物2～3kg健康雄性家兔。
2．免疫原绵羊红细胞(SRBC)、OX19变形杆菌、人IgG(SPA菌体吸附)、正常人混合血清、牛血清白蛋白(BSA)、聚丙烯酰胺凝胶分离的蛋白质抗原。
3．佐剂完全和不完全福氏(Freund)佐剂。
4．其它试剂生理盐水、70%酒精等。
5．器材注射器及针头、棉球、三角烧瓶、玻璃珠、试管、吸管、柯氏瓶(扁瓶)、Luer-lock(双联)注射器、止血钳、手术剪、手术刀等，以上器材均应高压灭菌或消毒后使用；离心机、液体旋转混合器、温箱、水浴箱、冰箱等。
【步骤和方法】(一)溶血素的制备1．制备抗原取脱纤维羊血或用阿氏(Alsever)液保存的绵羊红细胞(采血方法见附录常用实验动物采血方法)，用生理盐水洗３次，每次加2～3倍生理盐水，离心2000r/min 10min，弃上清。
最后一次按压积用生理盐水配成10%SRBC悬液，放４℃保存备用。
2．免疫动物家兔耳缘静脉注射10%SRBC悬液1ml，间隔3天，连续7次，末次免疫后2周，由耳静脉取血1ml(取血方法见附录常用实验动物采血方法)，分离血清，测定溶血素效价(见补体结合试验)，当效价≥1:2000则可放血收集血清，此法效价可达1:6000~1:10000。
3．分离血清颈动脉放血(见附录常用实验动物采血方法)，用无菌三角瓶收集血液，等血液凝固后立即轻轻剥离(这是获得大量血清的关键步骤)，放室温2~4h，离心2500r/min 10min，收集血清。
放4℃过夜虽可获得更多血清，但通常更容易溶血。
加入等量甘油，分装，置-20℃保存。
(二)细菌抗血清的制备1．抗原制备将OX19变形杆菌接种柯氏瓶普通琼脂培养基，37℃培养18~24h，用无菌生理盐水将菌苔洗下，吸到有玻璃珠的无菌三角烧瓶中，加入甲醛使终浓度为0.5%，充分振荡使细菌均匀分散。
置4℃24h(或3～5天)杀菌固定，通过无菌试验证实无活菌存在。
应用时同麦氏(Mcfarland) 细菌标准比浊管比浊，将菌液用无菌生理盐水稀释到10亿/ml，置4℃备用。
2．免疫动物家兔耳缘静脉注射菌液，第1、6、11天分别注射0.2ml、0.4ml、1.0ml，第18~21天第4次注射，剂量2.0ml。
末次免疫注射后7～10天，耳静脉取血收集血清，按直接凝集反应(试管法)滴定血清效价，高于1:2000即可颈动脉放血。
否则应追加免疫1~2次，剂量1.0~2.0 ml，间隔期7~10天，若血清效价仍不合格，将家兔废弃，重新选用家兔免疫。
3．分离血清颈动脉放血，收集血清，加入等量甘油，分装，置-20℃保存。
此免疫方法也可用于其它细菌［如伤寒沙门菌H抗原(选用H901菌株)和O 抗原(选用O901菌株)等］抗血清的制备。
(三)人IgG抗血清的制备1．抗原制备取正常人混合血清1ml，加入10%醛化固定的CowanⅠ株金黄色葡萄球菌悬液4ml，置室温30min，其间混匀3~5次。
然后用生理盐水洗7~8次，同麦氏标准比浊管比浊，用生理盐水配成100亿/ml浓度细菌悬液，放4℃备用。
2．免疫动物按表1-1免疫家兔。
表1-1人IgG抗血清制备程序日期第1天第4天第11天第18天第25天注射途径皮下多点注射耳缘静脉耳缘静脉耳缘静脉耳缘静脉抗原剂量(ml) 0.5 0.5 1.0 1.5 2.0 第35天采血用双相免疫扩散法测定抗血清效价，当效价≥1:16时，即可从颈动脉放血收集血清，可加入等量甘油置-20℃保存，也可直接用于提取IgG或特异性抗体。
此免疫方法也可用于制备可与SPA结合的许多动物IgG的抗血清。
(四)人全血清免疫血清的制备1．抗原制备取正常人混合血清，加入等量完全福氏佐剂乳化，乳化完全后即可用于免疫动物。
2．免疫动物第1次背部皮下注射10点，每点0.1ml，共注射加完全福氏佐剂的人全血清1.0ml。
2周后(第15天)两侧腹股沟皮下注射人全血清各0.5ml，以后每周按此注射1次，连续3次(前后共5次)，末次注射后采血用双相免疫扩散法测定抗血清效价，当≥1:16时即可颈动脉放血收集血清，加入等量甘油置-20℃保存。
可用免疫电泳鉴定抗血清反应特性，应出现4~6条沉淀线。
(五)牛血清白蛋白免疫血清的制备1．抗原制备取0.4% BSA(如取40mg BSA加10ml生理盐水溶解配制)，加入等量完全福氏佐剂乳化，乳化完全后即可用于免疫注射。
2．免疫动物第1次注射2.0ml加完全福氏佐剂的BSA，注射部位：四足掌0.8ml(每足掌0.2ml)，大腿肌肉0.6ml(每后大腿0.3ml)，颈部皮下0.6ml(每侧0.3ml)，５周后(第36天)大腿肌内注射BSA 1.0ml(每侧0.5ml)。
1周后试血用双相免疫扩散法测定，当血清效价≥1:16(可在1:64以上)时，即可放血收集血清，加入等量甘油，置-20℃保存。
(六)聚丙烯酰胺凝胶电泳分离抗原的免疫血清制备1．抗原制备(1)聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，染色，取目的蛋白质斑带(2~3个考马斯亮蓝染色斑带中含10~200μg蛋白质)，弄碎放到含1.5ml蒸馏水或缓冲液的3ml Luer-lock注射器中。
(2)然后将该注射器与另一Luer-lock注射器用一节细管连接起来(不要针头)，来回挤压，直至凝胶被粉碎成均匀细小的碎片。
(3)除去细管，在一支注射器上按上18# 针头，吸入1.5ml完全福氏佐剂。
拔去针头，再按上针头连接装置。
(4)将佐剂缓慢吸到有抗原的注射器中，并用细管将注射器连接起来。
(5)反复抽压，使免疫原和佐剂完全乳化，变稠。
2．免疫动物(1)沿背部两侧皮内注射10~12点，总量0.5~1.0ml ，同时于两肩胛部之间皮内注射0.5ml 。
注入的均为以上制备的完全福氏佐剂乳化的抗原。
(2)3~4周后皮下单点注入不完全福氏佐剂完全乳化的抗原(佐剂与免疫原1:1混合)，注射的抗原量与初次相同(10～200μg )或其1/2 的量。
(3)等动物溃疡愈合，然后用完全福氏佐剂乳化抗原，选择6～8点皮内加强注射。
注入抗原量同初次免疫。
注射后 4 周内常会出现高滴度抗体。
采血，用双相免疫扩散法测抗血清效价，或用免疫印迹法测抗血清反应特性。
3．分离血清颈动脉放血，收集血清，加入等量甘油，置-20℃保存，或提取特异性抗体。
【结果判定】收获的免疫血清应采用各免疫方法中介绍的试验方法或其它血清学方法作最终测定，以确定其效价和反应特性。
并将其鉴定方法，测定的效价及其反应特性，加入的保护剂、防腐剂种类、浓度，免疫动物种类，抗血清名称及保存的开始日期做详细标记和记录。
【注意事项】1．制备抗原、免疫动物、采血和分离血清均应注意无菌操作，以防动物感染和血清污染。
2．采集和收集血液的注射器、器皿应干燥、清洁，以防溶血。
【方法评价】以抗原免疫动物制备的免疫血清，生产的是多克隆抗体。
这种抗血清制备的方法有其固有的缺陷，主要是免疫血清中抗体的特异性具有多样性，可与其它抗原发生交叉反应。
而且不同动物或个体产生的抗体质量不能控制，重复性和稳定性差。
虽然实际工作中单克隆抗体制剂应用十分广泛，但它不可能全部取代多克隆抗体制剂，在临床检测中，多克隆抗体仍有广泛应用。
多克隆抗血清制备方法简单易行，一般实验室均能制备。
【临床意义】免疫血清的应用非常广泛，虽然多有商品供应，但部分诊断血清和科研用免疫血清常需自行制备。
因此制备理想的抗血清是实验室工作的基本技术之一，也是医学检验专业学生应具备的基本技能之一。
【附】 (一)麦氏(McFarland)标准比浊管的配制及使用1．试剂(1)10g/L 氯化钡溶液 取BaCl 2 0.1g ，加蒸馏水10ml ，溶解。
(2)1％硫酸 取H 2SO 4(化学纯，CP)1.0ml ，加蒸馏水至100ml 。
2．配制 取10支大小、粗细、壁质相同的洁净新试管作好标记，按下表1-2制备标准管。
密封试管，悬浮的BaSO 4沉淀物相当于每毫升中大肠杆菌的浓度。
表1-2 麦氏标准比浊管的配制3．使用 将一定量被测菌液加到与标准管相同的试管中，与轻轻混匀的标准管比浊。
于测定管中加入无菌生理盐水，直至浊度与所要求的标准管相同。
按所加入生理盐水的比例稀释原菌液。
或直接比浊测出实际菌含量，按要求再稀释至相应浓度。
管号1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 10g/L BaCl 2(ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1.0 1％H 2SO 4(ml) 9.9 9.8 9.7 9.6 9.5 9.4 9.3 9.2 9.1 9.0 细菌相当浓度(亿/ml) 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30(二)醛化固定SPA细菌的方法1．试剂(1)金黄色葡萄球菌Cowan Ⅰ株细胞壁上含有大量Ａ蛋白(SPA)。
(2)Mueller-Hinton琼脂培养基牛肉300g蛋白胨17.5g可溶性淀粉 1.5g琼脂17g将牛肉去脂肪、筋腱、肌膜，铰碎。
加入1000ml蒸馏水，搅拌均用，置4℃20~24h。
加热，煮沸30~60min，过滤，补足水分至1000ml。
加入上述成分，调pH值为7.4。
115℃~121℃高压灭菌15min(注意不要超过15min！)备用。
(3) PBS(pH7.2 0.01mol/L)Na2HPO4·12H2O 2.58gNaH2PO4·2H2O 0.44gNaCl 8.50g加蒸馏水至1000ml，溶解。
用此液配制以下溶液。
(4)工作PBS 取PBS加入NaN3，溶解，使NaN3终浓度为0.5g/L。
(5)存菌PBS 取PBS加入NaN3，溶解，使其终浓度为1.0g/L。
(6)1.5%甲醛取1.5ml甲醛(市售品浓度约36%~37%，此处当作100%浓度配制)加入PBS至100ml。