免疫原和抗血清的制备
免疫原及抗血清制备
稀碱、浓盐、加温等）时又可将抗原抗体解离。如果将抗原或抗体固定在不溶 性的载体上能从液相中专一性分出抗体或抗原。
• 根据这一原理，将可溶性抗原（或抗体）用化学方法偶联到不溶性载体上，当将相
应的抗血清（或抗原）按层析方法加入柱中，抗血清中的相应的抗体与抗原特异性 结合。其他蛋白成分随洗脱液流出。再改变缓冲液的PH值和离子强度，则可以使
• 1.含量鉴定：
生化方法 酚试剂法
双缩脲法 可见光吸收法
紫外吸收法 Ag宝贵，少
2纯度的鉴定：醋酸纤维薄膜电泳法－－
•
经典常用 聚丙烯酰胺凝胶电泳法
免疫电泳法
免疫双扩散法
ELISA或RIA（放免）－－
不纯，也可能是同一物质的聚合体或降解物
较纯，也不能排除在这条带中有其他成分
所以单一方法，可信度差。因而几种方法联用较可靠
消化细菌和组织cell
（6）表面活性剂处理法
第四页，编辑于星期日：十七点 四十分。
蛋白质抗原的制备和纯化：
可溶性抗原绝大部分为蛋白质
1.超速离心和梯度密度离心法： 用来分离亚细胞部分及大分子蛋白质
1）差速离心：高低速交替进行。将大分子物质分离 2）梯度密度离心：区带分离法，通过梯度密度来维持重力的稳 定性，通常分离的悬液中的颗粒比液体重，要使之上浮，必须加 入第三种成份，其密度连续或不连续升高，即所谓梯度 3）第三种成份多用甘油、蔗糖氯化色，氯化铷 适合于少部分大分子抗原，对于大量的中、小分子量的蛋白质抗原 不适用此法
免疫原和抗血清的制备
第一页，编辑于星期日：十七点 四十分。
第一节免疫原的制备
•
免疫原是能够引起机体产生抗体，并能与之发生反应的 物质
免疫原和抗血清的制备
免疫原和抗血清的制备免疫原和抗血清的制备抗原和抗体是免疫反应的基本条件也是免疫检验的两大重要因素。
抗原是制备特异性抗体的前提条件，抗体可用于纯化抗原和检测抗原，也是医学检验中用于疾病诊断和研究的重要物质。
免疫原的制备免疫佐剂抗血清的制备抗血清的鉴定和保存抗血清的纯化颗粒性抗原的制备颗粒性抗原主要是指细胞抗原和细菌抗原,制备的方法较简单,通过分离或纯培养即可得到。
细胞抗原——绵羊红细胞。
细菌抗原——菌体O抗原。
可溶性抗原的制备可溶性抗原：蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、细菌外毒素等。
（一）组织可溶性抗原的粗提（二）可溶性抗原的纯化（三）纯化抗原的鉴定（一）组织可溶性抗原的粗提1.组织均浆的制备：高速组织捣碎机法、研磨法；2.细胞的破碎：反复冻融法、超声破碎法、自溶法、酶处理法、表面活性剂处理法。
（二）可溶性抗原的提取和纯化1.超速离心法；2.选择性沉淀法：核酸去除法、盐析法、有机溶剂沉淀法、聚合物沉淀法；3.凝胶过滤法；4.离子交换层析法；5.亲和层析法；6.电泳法。
（三）纯化抗原的鉴定主要包括蛋白含量测定、分子量测定、纯度鉴定、免疫活性鉴定等。
半抗原性免疫原的制备半抗原只具有抗原性而无免疫原性；如某些多肽、多糖、激素、小分子量的药物等。
半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。
（一）载体1.蛋白质类：牛血白蛋白等；2.多肽聚合物：多聚赖氨酸等；3.大分子聚合物和某些颗粒：聚乙烯吡咯烷酮等。
（二）半抗原与载体的连接方法1.物理方法：通过电荷和微孔吸附半抗原，吸附的载体有淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、硫酸葡聚糖、羧甲基纤维素等。
2.化学方法：利用某些功能基团将半抗原连接到载体上。
如碳二亚胺法、戊二醛法等。
（三）半抗原性免疫原的鉴定与载体结合的半抗原数目与免疫原性密切相关。
所以，应测定半抗原与载体的比例，方法有：①吸收光谱分析法：②放射性核素标记半抗原渗入法。
免疫佐剂指先于抗原或与抗原同时注入体内，可增强机体对抗原的免疫应答的物质。
免疫原制备和抗血清的制备
免疫原制备和抗血清的制备免疫原制备和抗血清的制备是现代免疫学研究的重要内容之一、免疫原可以是一种物质，如微生物、细胞或其部分，也可以是一种化学物质，如蛋白质、糖类或核酸。
而抗血清则是通过动物体内或体外免疫方法获得的一种含有特异抗体的血清。
免疫原制备可以采用多种方法，最常见的方法之一是使用细菌或其他微生物制备免疫原。
先将目标微生物培养，然后进行离心、洗涤和破碎等处理，得到免疫原。
此外，还可以通过化学方法合成免疫原。
合成免疫原的方法通常是将所需的化学组分按照一定的顺序和比例进行化学反应，最终得到预期的免疫原。
免疫原的制备需要注意保持其生物活性和纯度，并进行适当的保存和贮存。
抗血清的制备需要选择适当的动物作为实验对象，如小鼠、兔等。
首先，将免疫原注入到动物体内，通过多次免疫，刺激动物产生特异性抗体。
其次，采集动物的血液，分离出血清，并进行清理和加工，最终得到抗血清。
清理和加工的过程主要包括疫苗净化、灭活处理、抗原提取和免疫原去除等步骤。
为了提高抗血清的特异性和效价，可以通过多次免疫和亲和层析等方法对抗血清进行增强。
免疫原制备和抗血清的制备在免疫学研究和临床诊断中具有重要的应用价值。
它们可以用于检测和诊断一些疾病的存在和发展，或用于治疗一些疾病。
例如，抗血清可以作为特异性抗体的源头，用于检测和鉴定病原体。
在流行病学调查中，通过检测血清中抗体的水平和类型，可以判断一些群体中其中一种病原体的暴露情况和传播链。
此外，利用抗血清可以对血型进行鉴定和配对，为输血和器官移植提供有力的支持。
总之，免疫原制备和抗血清的制备是现代免疫学研究中的关键技术。
通过合适的免疫原制备和动物免疫方法，可以获得高效的抗血清，并为疾病的检测、诊断和治疗提供重要的工具。
在未来的研究和应用中，我们可以期待这些技术的进一步发展和创新，以满足不断增长的免疫学需求。
临床医学检验技术(师)：免疫原和抗血清制备必看考点三
临床医学检验技术(师)：免疫原和抗血清制备必看考点三1、单选制备细胞核与核膜抗原前需将细胞破碎，常用的方法有（）A.研磨法B.超声破碎法C.自溶法D.酶处理法E.十二烷基磺酸钠处理正确答案：A参考解析：研磨法常（江南博哥）用于组织匀浆的制备。
2、单选从免疫血清中粗提γ球蛋白最简便的方法为（）A.亲和层析B.离子交换层析C.凝胶过滤D.超速离心E.硫酸铵盐析正确答案：E参考解析：免疫球蛋白纯化的方法很多，有单一法，但大多数采用二步法以上相结合的方法，特别是以硫酸铵盐析为基础，再经过层析柱的方法来提高免疫球蛋白及其各成分的纯度最为常用。
3、单选以下哪一个是对半抗原的正确描述（）A.只有和载体结合后才能和抗体分子结合B.是大分子C.是多肽D.没有免疫原性E.只能诱生体液免疫应答正确答案：D参考解析：半抗原是只有抗原性而无免疫原性的物质。
其可与抗体或致敏淋巴细胞特异性结合，但不能单独诱发免疫应答，在体内单独存在时不引起抗体产生，当其与蛋白质或胶体颗粒结合后，则可引起抗体形成。
半抗原可与其特异性抗体结合。
如细菌的多糖和类脂质等。
在半抗原与蛋白质结合物中，一般是蛋白质使结合物具有抗原性，而半抗原则决定结合物的抗原特异性。
4、单选下列物质中免疫原性最强的是（）A.核酸B.蛋白质C.多糖D.半抗原E.脂类正确答案：B5、单选抗原抗体结合反应最终出现肉眼可见沉淀现象，其原因是（）A.从亲水胶体变为疏水胶体B.从疏水胶体变为亲水胶体C.抗原抗体结合导致蛋白变性所致D.抗原抗体结合和盐析共同作用所致E.抗原抗体反应是单向反应正确答案：A6、单选首次与第二次免疫接种的时间间隔最好为（）A.1周内B.10~20天C.7~10天D.20~30天E.30天以上正确答案：B参考解析：初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周，再次免疫后两周内进行。
7、单选免疫接种后易引起局部持久溃疡和形成肉芽肿的佐剂为（）A.弗氏不完全佐剂B.弗氏不完全佐剂+卡介苗C.细胞因子佐剂D.多聚核苷酸E.肉毒素正确答案：B参考解析：弗氏不完全佐剂加卡介苗即弗氏完全佐剂，可提高佐剂效能，但注射后易产生局部持久性溃疡和肉芽肿。
第3章免疫原和抗血清的制备
第3章免疫原和抗血清的制备免疫原是指能够引起机体免疫反应并激发产生特异性抗体的物质。
抗血清是指动物或人体经过免疫后所产生的含有抗体的血清。
免疫原和抗血清的制备是研究免疫学和生物制剂开发的重要环节。
本文将探讨免疫原和抗血清制备的一般原则和步骤。
1.免疫原的选择选择合适的免疫原对于制备高效的抗血清至关重要。
一般来说，免疫原应具备以下特点：(1)纯度：免疫原应具有尽可能高的纯度，以避免其他成分对免疫反应的干扰。
(2)特异性：免疫原应具有与所需抗体特异性结合的能力，以激发特异性抗体的产生。
(3)免疫原性：免疫原应具有足够的免疫原性，即能够引起机体的免疫反应。
(4)安全性：免疫原应具备足够的安全性，避免潜在风险。
根据不同的应用需求，免疫原可以是多种类型的物质，如蛋白质、多肽、核酸和糖类等。
选择合适的免疫原需要根据研究目的和预期应用来确定。
2.免疫原的制备免疫原的制备通常分为化学合成和生物提取两种方式。
(1)化学合成：对于小分子的免疫原，可以通过化学合成的方法合成。
例如，对于多肽免疫原，可以设计并合成相应的多肽序列。
化学合成的优势在于可以精确控制免疫原的结构和纯度。
(2)生物提取：对于大分子的免疫原，如蛋白质和核酸，通常采用生物提取的方法。
蛋白质可以通过基因工程技术在大肠杆菌等表达系统中表达并纯化得到。
核酸可以通过DNA重组技术合成。
3.免疫反应的诱导免疫反应的诱导是指向机体注射免疫原以激发免疫反应。
免疫反应的诱导通常包括以下步骤：(1)免疫原的给药：将免疫原通过注射、给药或吸入等方式引入机体内。
(2)辅助剂的使用：为了增强免疫反应效果，通常会添加辅助剂。
辅助剂可改变免疫原的物理性质和免疫反应的过程。
(3)免疫程序的设计：根据需求设计免疫程序，包括免疫原的剂量、注射间隔和免疫次数等。
抗血清的制备是通过免疫动物或人体以获得抗体，从而制备含有抗体的血清。
一般来说，抗血清的制备包括以下步骤：(1)免疫动物的选择：选择合适的免疫动物，如小鼠、兔子或猴子等。
临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)讲义第三章免疫原和抗血清的制备
第三章免疫原和抗血清的制备第一节免疫原的制备免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
一、颗粒性抗原的制备细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。
细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。
细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。
颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。
二、可溶性抗原的制备和纯化（一）组织和可溶性抗原的粗提蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。
1组.织匀浆的制备（1）高速组织捣碎机法；（2）研磨法：组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。
2细.胞的破碎（）反复冻融法：℃冷冻，〜7融化。
（2）超声破碎法（3）自溶法（4）酶处理法：胃蛋白酶或胰酶。
（5）表面活性剂处理法：十二烷基硫酸钠。
3免.疫球蛋白片段的制备（）非共价键解离法：改变环境或用变性剂。
（2）共价键解离法：还原法或氧化法解离二硫键。
（3）溴化氰裂解法：溴化氰裂解蛋白质肽链。
（4）酶解法：木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶。
（二）可溶性抗原的提纯和纯化超速离心法：适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原，不适用于大多数中小分子抗原。
选择性沉淀法：（1）核酸去除法：核糖核酸降解法更简便。
（2）盐析法：常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。
（3）有机溶剂沉淀法：常采用乙醇或丙酮。
（）聚合物沉淀法：常用非离子型聚合物，如聚乙二醇（）G凝胶过滤法：根据分子大小进行分离纯化。
离子交换层析法：利用一些带电离子基团的凝胶或纤维素，吸附带有相反电荷的蛋白质抗原。
5亲.和层析法：与生物分子间不同的亲和性进行分离。
如抗原和抗体、酶和酶抑制物、酶蛋白和辅酶、激素和受体等。
电泳法：蛋白质在同一环境中，分子量和电荷不同，在电场中迁移速率不同进行分离。
（三）纯化抗原的鉴定蛋白质含量测定：常用的是紫外光吸收法，该法测定和的吸光度（）值。
抗血清 的制备
抗血清的制备抗血清制备是一种常见的免疫学实验技术，用于检测特定物质的存在和数量。
下面将对抗血清制备的原理、步骤及注意事项进行详细介绍。
一、原理抗血清是由动物免疫某种抗原制备得到的一种免疫血清，其中包含了特异性抗体。
抗血清制备的原理是通过注射一定量的特异性抗原到动物体内，使其产生特异性抗体，然后收集抗血清。
二、材料和试剂1.抗原：需要制备抗血清的特定抗原。
2.兔、小鼠等动物。
3.盐酸：用于调整兔抗血清的pH值。
4.取血器：用于采集动物血液。
5.离心管、离心机：用于收集血清。
6.不含菌的容器：用于保存抗血清。
三、步骤根据实验要求，制备特定抗原，可以是蛋白质、细胞、病毒、细菌等。
2.制作与抗原相应的抗体兔/小鼠选择适宜种类的动物，注射免疫原，隔一段时间后，在动物体内试验特异性抗体的出现，出现后即可采血制血清。
一般来讲，兔子被认为是制备抗血清的最佳动物，而小鼠常常会出现交叉反应。
3.采集兔血液注射完最后一次免疫原后一周左右，在一个清洁的容器上臂处用取血器采血2-3ml。
离心采集到的兔血液，定量将其分离出血清，再加入盐酸，调节pH值，即可得到兔抗血清。
5.评价抗血清的质量评价抗血清的质量，主要是通过测定抗体滴度来判断抗血清的特异性和强度。
四、注意事项1.严格控制免疫原和免疫过程，确保抗原和抗体的特异性和纯度。
2.合理选择免疫动物种类，不同种类免疫动物会对抗原产生不同反应。
3.采血时要注意安全和卫生，防止感染病毒和细菌。
4.在制备抗血清的过程中需要注意保护动物的健康和福利，并严格按照实验室安全规范操作。
抗血清制备
抗血清制备抗血清是一种广泛应用于医学、生物学、农业等领域的重要抗体。
它可以通过对动物实验的刺激来制备，具有较高的特异性和灵敏性。
本文将介绍抗血清的制备过程和应用领域。
一、抗血清的制备抗血清的制备需要对动物实验进行免疫刺激，让其产生免疫反应，生成相应的抗体。
制备抗体的方法有多种，包括:1. 多次免疫法：将抗原与适当的佐剂混合后注射给动物，每次注射间隔时间大于1个星期。
免疫周期主要根据抗原型以及免疫状态来确定。
一般情况下，需要多次免疫才能达到所需的浓度。
2. 单次免疫法：在抗原一侧布局NMDA表达杂交的细胞，给兔子单偏免疫或初免疫后再进行免疫，以提高抗体效价。
3. 聚集物制备法：将抗原加入雄鹰蛋白中，然后注射到家兔或小猪体内，以选育出抗体。
以上三种方法都有它们的优缺点，适用于不同的条件下。
二、抗血清的应用抗体在医学、生物学、农业等领域都有广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：1. 诊断：通过抗血清与疾病相关物质的特异性结合可以进行诊断，如HIV、狂犬病、乙肝等病毒感染的检测。
2. 治疗：抗体被广泛应用于治疗各种疾病，如肿瘤、自身免疫性疾病、传染病等。
3. 细胞学：抗体可用于细胞学实验，用于检测细胞内、细胞表面或细胞核内的成分，如检测肿瘤细胞、细胞分离、特定蛋白识别等。
4. 农业：抗血清可用于畜牧业和农业生产，如检测动物或植物病毒感染、食品中添加的污染物等。
三、注意事项在制备抗血清时，需要注意以下几点：1. 选择优质的抗原，并进行适当的保护、存储。
2. 用药量应适当，尽量不要过多。
3. 对免疫动物的饲养和体温要求高。
4. 在注射时要注意卫生和安全问题，防止交叉感染。
5. 制备后需要进行充分的检测和鉴定，以确定抗体的特异性和效价。
抗血清的制备是一项重要的实验技术，应用领域广泛，但同时也需要谨慎和责任心。
只有严格遵守操作规定和注意事项，才能制备出优质的抗血清，促进科学的发展。
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第三章免疫原和抗血清的制备第一节免疫原的制备免疫原指能诱导机体产生抗体或致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应的物质。
一、颗粒性抗原的制备细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。
细胞抗原（如绵羊红细胞）一般情况下经生理盐水或其他溶液洗净，配制一定浓度即可。
细菌抗原多用液体或固体培养物，经集菌后处理。
颗粒性抗原大多用静脉内注射免疫法。
二、可溶性抗原的制备和纯化（一）组织和可溶性抗原的粗提蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶、补体、细菌毒素、免疫球蛋白片段、核酸等皆为良好的可溶性抗原。
1.组织匀浆的制备通常需要先将来源于人和动物的组织和细胞破碎，再经一定的方法纯化，才能获得所需的抗原。
细胞破碎方法有：（1）高速组织捣碎机法；（2）研磨法：组织匀浆液要离心沉淀，沉淀物为组织和细胞碎片，上清液为提取可溶性抗原的材料。
2.细胞的破碎除上述机械捣碎获取外，尚有酶处理法，常用胃蛋白酶或胰酶，可获得游离的单个细胞。
细胞抗原分膜蛋白抗原、细胞质抗原（主要为细胞器）、细胞核与核膜抗原，制备这些抗原前均需将细胞破碎，方法有：（1）反复冻融法：-20℃冷冻，30～37℃融化（2）超声破碎法（3）自溶法（4）酶处理法：胃蛋白酶或胰酶（5）表面活性剂处理法：十二烷基硫酸钠3.免疫球蛋白片段的制备五种免疫球蛋白都具抗原性，皆可提取及纯化，但如分解成片段（如Fab片段、Fc片段、轻链片段等）作为免疫原可制备出分辨力更高的特异性抗血清。
制备方法有：（1）非共价键解离法：改变pH环境或用变性剂（2）共价键解离法（3）溴化氰裂解法（4）酶解法：木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或胰蛋白酶.木瓜酶可将IgG裂解成2个Fab片段及1个Fc片段；胃蛋白酶可将IgG裂解成F（ab′）2个片段及数个小片段；胰蛋白酶可将IgG切成不规则的肽链。
（二）可溶性抗原的提纯和纯化1.超速离心法：适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原，不适用于大多数中小分子抗原。
2.选择性沉淀法：选择沉淀法是采用各种沉淀剂或某些条件使抗原成分沉淀的方法。
核酸去除法、盐析法、有机溶剂沉淀法、聚合物沉淀法。
其中盐析法是最常被采用，通过硫酸铵使蛋白抗原进行初筛，提取丙种球蛋白及进行抗原浓缩。
3.凝胶过滤法：根据分子大小进行分离纯化。
4.离子交换层析法：根据所带电荷不同进行纯化分离。
5.亲和层析法：与生物分子间不同的亲和性进行分离。
6.电泳法：蛋白质在同一pH环境中，分子量和电荷不同，在电场中迁移速率不同进行分离。
（三）纯化抗原的鉴定1.蛋白质含量测定：常用的是紫外光吸收法，该法测定280nm和260nm的吸光度（A）值。
2.分子量测定采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法、凝胶过滤法等。
3.纯度鉴定采用醋酸纤维膜电泳、SDS-PAGE、毛细管电泳、等电聚焦、高效液相层析法等。
4.免疫活性鉴定采用双向免疫扩散法、免疫电泳法或ELISA法等。
三、半抗原性免疫原的制备半抗原指只具有抗原性而无免疫原性的物质。
多见于分子量小于4000的有机物质。
半抗原与载体相结合具有免疫原性。
（一）载体1.蛋白质：以牛血白蛋白最常见2.多肽聚合物：常用多聚赖氨酸3.大分子聚合物和某些颗粒聚乙烯吡咯烷酮、药用炭、羧甲基纤维素等皆常用。
（二）半抗原与载体的连接方法1.物理方法：通过电荷和微孔吸附半抗原。
2.化学方法：通过功能基团将半抗原与载体连接。
（三）半抗原性免疫原的鉴定20个以上半抗原连接在一个载体分子上，才能有效刺激免疫动物产生抗体。
第二节免疫佐剂一、佐剂的种类1.化合物：包括氢氧化铝、矿物油、吐温-80、弗氏不完全佐剂（羊毛脂与液状石蜡的混合物）以及人工合成的多聚肌苷酸：胞苷酸、脂质体等。
2.生物制剂：①经处理改造的细菌及其代谢产物，如卡介苗、脂多糖（LPS）和类脂A、源于分枝杆菌的胞壁酰二肽等；②细胞因子及热休克蛋白等。
最常用于免疫动物的佐剂是弗氏佐剂，弗氏佐剂分为弗氏完全佐剂（弗氏不完全佐剂加卡介苗）和弗氏不完全佐剂两种。
使用时加入水溶性抗原并充分乳化，使抗原与佐剂形成油包水乳剂。
佐剂和抗原的比例为1:1。
乳化的方法有两种：①研磨法。
②搅拌混合法：本法优点是无菌操作，节省抗原或佐剂，且可用此注射器直接注射。
缺点是不易乳化完全。
二、佐剂的作用机制1.改变抗原的物理性状，延缓抗原降解和排除，从而更有效地刺激免疫系统；2.刺激单核-巨噬细胞系统，增强其处理和提呈抗原的能力；3.刺激淋巴细胞增殖和分化；4.改变抗体的产生类型和诱导迟发型超敏反应。
第三节抗血清的制备抗血清的制备是将制备好的免疫原按照一定的免疫程序接种给所选择的动物，该动物在含有多种抗原表位的抗原刺激下，体内多个B细胞克隆被激活并产生针对某一抗原多种不同表位的抗体，其混合物为多克隆抗体。
采集动物血液，分离含有抗体的血清，即为抗血清。
一、免疫动物的选择常用的有家兔、绵羊、豚鼠、鸡、山羊和马。
1.抗原来源与动物种属差异越大，免疫原性越强，免疫效果越好。
2.抗体需求量大时，可选用马、绵羊等大动物。
抗血清需求量少时，可选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。
3.抗血清分为R型和H型4.对于蛋白质抗原大部分动物皆适合，常用的是山羊和家兔。
在某些动物体内有类似物质时，蛋白质抗原对这些动物免疫原性极差，如IgE对绵羊、胰岛素对家兔、多种酶类对山羊，免疫后均不易产生抗体。
二、免疫程序1.免疫原的剂量：由免疫原性的强弱、动物的个体状态和免疫时间确定。
免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受，在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高。
2.免疫途径：有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。
皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。
初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。
宝贵抗原可选择淋巴结内微量注射法。
3.间隔时间：第1次与第2次免疫间隔时间以10～20天为好，第3次及以后的间隔一般为7～10天。
三、动物采血法动物经免疫3～5次后，如抗血清鉴定合格，应在末次免疫后5～7天及时采血。
目前较常用的动物采血方法有3种：颈动脉采血法；心脏采血法；静脉采血法。
动物采血后，应尽快分离血清，分离血清的方法常采用室温自然凝固，然后置37℃或4℃使血块收缩后，收集血清。
第四节抗血清的鉴定和保存一、抗血清的鉴定1.抗体特异性的鉴定常用双向免疫扩散法。
观察沉淀线，若粗抗原及纯抗原之间皆出现一条沉淀线，且两者互相融合，则证明动物已产生单价特异性抗体；若纯化抗原出现一条，而粗抗原出现多条线，且其中一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接，也是成功的免疫，待取血后将杂抗体吸收去除，可以成为单价特异性抗体。
若不出现沉淀线，表示免疫失败。
2.抗体效价的测定颗粒性抗原采用凝集试验，可溶性抗原采用双向免疫扩散试验、ELISA等方法。
测定抗体效价有两种稀释方法，一种是将经过系列稀释的血清分别与一个浓度的抗原反应；另一种是同时稀释抗原和抗血清，分别与不同浓度的抗血清进行双向免疫扩散试验（称为棋盘滴定）。
3.抗体纯度的鉴定采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、双向免疫扩散试验、免疫电泳等。
4.抗体亲和力的鉴定二、抗血清的保存1.2～8℃保存：用于短期保存；2.冷冻保存：是常用的抗体保存方法。
将抗体分为小包装，在-80～-20℃保存，一般可保存5年，效价不会明显下降，但应避免反复冻融；3.真空干燥保存：用真空冻干机进行干燥，封装后可长期保存，一般在冰箱中可保存5～10年。
第五节抗血清的纯化抗血清纯化的目的是除去不相关成分，防止抗血清中的其他杂抗体干扰试验结果。
最常见的是提取抗血清中的特异性IgG或单价抗体。
一、特异性IgG抗体1.盐析法多采用硫酸铵盐析法或硫酸钠盐析法。
2.凝胶过滤法血清蛋白的分级分离常用凝胶过滤法，该法过滤条件温和，不影响IgG活性。
常结合盐析法提取IgG，盐析法可以去除大部分杂蛋白，提高凝胶过滤法的分离效果。
3.离子交换层析法4.亲和层析法二、单价特异性抗血清单价特异性是指血清只与其特异性抗原发生反应。
免疫得到的抗血清总是有抗白蛋白等杂抗体存在。
杂抗体的去除有两种方法：1.亲和层析法2.吸附剂方法制备蛋白质抗原时破碎组织细胞最简便的是A.反复冻融法B.超声破碎法C.表面活性剂处理法D.自溶法E.酶处理法『正确答案』A『答案解析』制备蛋白质抗原时破碎组织细胞最简便的是反复冻融法。
需制备10ml抗血清，应选择何种动物A.家兔B.小白鼠C.马D.绵羊E.猴『正确答案』A『答案解析』抗体需求量大时，可选用马、绵羊等大动物。
抗血清需求量少时，可选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。
下列佐剂中具有免疫原性的是A.脂多糖B.氢氧化铝C.石蜡油D.羊毛脂E.多聚核苷酸『正确答案』A『答案解析』生物制剂具有免疫原性，所以具有免疫原性的是脂多糖。
厂家生产的抗IgG制剂一般的保存方法为A.液体4℃保存B.液体-10℃保存C.真空干燥保存D.25℃保存E.加叠氮钠保存『正确答案』C『答案解析』抗血清的保存：①2～8℃保存：用于短期保存；②冷冻保存：是常用的抗体保存方法。
将抗体分为小包装，在-80～-20℃保存，一般可保存5年，效价不会明显下降，但应避免反复冻融；③真空干燥保存：用真空冻干机进行干燥，封装后可长期保存，一般在冰箱中可保存5～10年。
最常用的半抗原载体是A.牛血清白蛋白B.牛甲状腺球蛋白C.人血清白蛋白D.人甲状腺球蛋白E.球蛋白『正确答案』A『答案解析』半抗原载体常用的有人血白蛋白、牛血白蛋白、血蓝蛋白、牛甲状腺球蛋白等。
以牛血白蛋白最常用。
A.盐析沉淀法B.有机溶剂沉淀法C.凝胶过滤D.离子交换层析E.亲和层析1.经典的蛋白质抗原纯化分离方法为『正确答案』A『答案解析』经典的蛋白质抗原纯化分离方法为盐析沉淀法。
2.根据抗原分子大小进行纯化分离的方法为『正确答案』C『答案解析』凝胶过滤法：根据分子大小进行分离纯化。
3.根据抗原所带电荷不同进行纯化分离的方法为『正确答案』D『答案解析』离子交换层析法：根据所带电荷不同进行纯化分离。