抗链球菌溶血素

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检验科生化抗链球菌溶血素ASO测定的标准操作规程

检验科生化抗链球菌溶血素ASO测定的标准操作规程

检验科生化链球菌溶血素“O”测定的标准操作规程【目的】体外检测血清抗链球菌溶血素“O”(AS0)含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP,室负责人监督落实。

2.本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯,应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理抗链球菌溶血素“O”试剂是大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬液,颗粒表面包被有链球菌溶血素“O”,当含有ASO的样品与之混合时,发生明显的凝聚反应,通过测定600nm处吸光度值的变化,即可计算出样本中抗链球菌溶血素“O”的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司ASO试剂盒,为液体双试剂,其各组分如下:试剂1(R1)叠氮化钠 0.1%磷酸盐缓冲液 13mmol/L试剂2(R2)抗链球菌溶血素“O ”致敏胶乳颗粒抗原2.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准。

2.2校准间隔2.2.1试剂批号变更时,使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。

2.2.2 室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。

抗链球菌溶血素O

抗链球菌溶血素O

抗链球菌溶血素“O”(ASO)测定试剂盒(胶乳凝集法)【产品名称】通用名称:抗链球菌溶血素“O”(ASO)测定试剂盒(胶乳凝集法)商品名称:抗链球菌溶血素“O”(ASO)测定试剂盒(胶乳凝集法)英文名称:Anti-streptomycin Reagent Kit(Slide Latex Agglutination Test)【包装规格】每包装盒为:胶乳液5ml;阳性对照0.5ml;阴性对照0.5ml【临床意义】对血清中ASO定性或半定量测定,做辅助诊断用。

【检验原理】本试剂胶乳液石油溶血素“O”和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。

ASO胶乳的灵敏度调整到200IU/ml,超过上述滴度即出现肉眼可见凝集颗粒,试用本试剂血清标本不需要稀释即可直接测定。

【主要组成成份】胶乳液成份:抗链球菌溶血素“O”胶乳、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液阳性对照成份:羊抗SLO抗血清、牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液阴性对照成份:牛血清白蛋白、磷酸盐缓冲液不同批号试剂盒中的乳胶液、阳性对照和阴性对照不能混用。

【储存条件及有效期】储藏温度2-10℃,切勿冷冻。

有效期一年。

【适用仪器】手工操作【样本要求】经离心获得新鲜血清样本,贮存于2-8℃,48小时内使用,时间过长须冰冻贮存。

【检验方法】定性实验:试剂使用前,预置达室温;轻轻混匀胶乳试剂;核对阴性和阳性对照;在反应板孔中加一滴未稀释血清(50μl);然后加一滴胶乳试剂在血清中;搅匀、轻轻摇动使其充分混和,二分钟后观察结果。

阴性和阳性对照同上法操作。

半定量实验:血清以生理盐水(0.9g氯化钠溶解于蒸馏水中,稀释至100ml)倍比稀释,可参照下法操作。

稀释倍1:2 1:4 1:8血清100μl生理盐水100μl 100μl 100μl→100μl→100μl标本量50μl 50μl50μlIU/ml >400 >800 >1600【参考值(参考范围)】正常参考范围:0-200IU/ml【检验结果的解释】凝集出现可判断样本中ASO>200IU/ml阳性;无凝集出现可判断样本中ASO<200IU/ml阴性。

实验二 ASO试验

实验二  ASO试验

实验二抗链球菌溶血素“O”(ASO)试验
——胶乳凝集法
【实验目的】
1.掌握ASO试验的原理及临床意义
2.熟悉ASO试验的操作步骤和结果分析
【实验仪器、材料】
1. ASO测定试剂盒(胶乳液5ml、阳性对照0.5ml、阴性对照0.5ml)。

2.待测患者血清、生理盐水、移液枪、黑色方格反应板等。

【实验内容】
一、定性实验
1.冰箱中取出试剂,核对阴性和阳性对照,平衡至室温;
2.准备黑色反应板(3孔:待测血清标本/阳性对照/阴性对照),标记;
3.分别加一滴(50ul)未稀释血清样本、阳性对照、阴性对照;
4.各反应孔中加一滴胶乳试剂(用前颠倒混匀);
5.搅匀、轻轻摇动使其充分混合,2分钟观察结果。

二、半定量实验
待测患者血清以生理盐水倍比稀释后,不同稀释倍数血清各取50ul,加入胶乳试剂观察结果。

血清稀释度和ASO滴度关系大致如下:
结果判断:
❖若胶乳颗粒凝集为阳性反应,可判断样本中ASO>200IU/ml;
❖胶乳颗粒不凝集仍保持均匀胶乳状者为阴性反应,可判断样本中ASO<200IU/ml;
❖1:2凝集为“+”,1:4凝集为:“++”,1:8凝集为“+++”,不凝集为“-”。

【实验结果】
1.定性实验
2.半定量实验
【结果分析、讨论】。

抗链球菌溶血素O(ASO)测定

抗链球菌溶血素O(ASO)测定

抗链球菌溶血素O(ASO)测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2原理ASO的测试建立在胶乳免疫测定法基础上,当血清中含有ASO时,它与R2中的SLO反应形成浊度,通过测量反应生成的浊度,并与标准的进行比较,可得出样本中ASO的浓度。

3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1试剂:本科使用浙江伊利康生物技术限公司的试剂盒. (浙食药监械(准)字2014第2400384号 YZB/浙 2314-40-2014)4.1.1试剂盒组成如下:R1:氯化铵缓冲液:0.2mmol/L叠氮钠:0.95g/LR2:抗链球菌溶血素“O”致敏胶乳液:适量叠氮钠:0.95g/L4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。

4.1.5 注意事项:试剂中含有稳定剂,可能存在一定的刺激作用和毒性,请勿直接接触皮肤及眼睛。

一旦接触,即用大量清水冲洗。

请勿吞服。

4.2 校准品:使用浙江伊利康生物技术限公司提供的ASO校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

抗链球菌溶血素O(ASO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求kemei

抗链球菌溶血素O(ASO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求kemei

抗链球菌溶血素O(ASO)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中抗链球菌溶血素O(ASO)的浓度。

1.1包装规格1.1.1试剂1:45mL×1 试剂2:5mL×11.1.2试剂1:45mL×2 试剂2:10mL×11.2主要组成成分试剂1主要成分:氯化铵缓冲液(pH8.2) 0.2mmol/L叠氮钠0.95g/L 试剂2主要成分:抗人抗链O抗体叠氮钠 0.95g/L 2.1外观试剂1应为无色液体,无混浊,无未溶解物;试剂2应为白色乳胶状液体。

2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白吸光度ASO试剂盒在波长540nm处测定试剂的空白吸光度值,应不大于1.2。

2.4分析灵敏度试剂盒测试100U/L抗链球菌溶血素O时,吸光度差值(△A)应不小于0.01。

2.5准确度用本公司ASO试剂盒和已上市公司ASO试剂盒同时测定40个临床样本,相关系数(r2)应不小于0.95,(0,200]U/L区间内,线性偏差应不超过±20U/L;(200,600)U/L区间内,线性偏差应不超过±10%。

2.6精密度2.6.1重复性重复测试(100±10)U/L和(250±25)U/L的样本,所得结果的变异系数CV应不大于5%;2.6.2批间差测试(100±10)U/L的样本,所得结果的批间相对极差应不大于10%。

2.7线性范围ASO试剂盒在(0,600)U/L范围内,线性相关系数(r)应不小于0.990;在(0,200]U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±20U/L;在(200,600)U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃~8℃避光保存,有效期为12个月。

在ASO试剂盒有效期满后2个月内,分别检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项,结果应符合各项目的要求。

抗链球菌溶血素o试验名词解释

抗链球菌溶血素o试验名词解释

抗链球菌溶血素o试验名词解释抗链球菌溶血素O试验相关名词解释•链球菌:一类革兰氏阳性菌,常见于皮肤和黏膜上,引起多种感染疾病,如咽炎、肺炎、脑膜炎等。

•溶血素O:链球菌所产生的一种溶血素,能破坏红细胞,并引发溶血反应。

•抗链球菌溶血素O试验:一种实验方法,用于检测人体血清中是否存在对链球菌溶血素O的免疫反应。

试验过程•采血:从被检测者的静脉采集一定量的血液样本。

•分离血清:将血液离心分离出血清,用于后续实验操作。

•制备试剂:制备链球菌产生的溶血素O,用于抗原溶液的制备。

•配制试剂:将血清稀释为一系列不同浓度,用于后续检测。

•孵育反应:将稀释后的血清与溶血素O抗原混合,放置孵育一段时间。

•观察变化:观察反应管中的溶血现象,根据程度判断血清中对溶血素O的免疫反应强弱。

•数据分析:根据观察结果,绘制曲线图或计算血清免疫强度指数,评估被检测者对链球菌溶血素O的免疫状况。

检测结果解释•阳性结果:反应管出现不同程度的溶血现象,说明被检测者对链球菌溶血素O产生了免疫反应,具有免疫力。

•阴性结果:反应管中无明显溶血现象,说明被检测者对链球菌溶血素O没有明显的免疫反应,缺乏免疫力。

应用领域•临床诊断:用于判断某些感染病的诊断,如链球菌感染、风湿热等。

•疫苗研发:通过检测群体对链球菌溶血素O的免疫水平,评估疫苗的效果和免疫覆盖情况。

•流行病学调查:用于监测链球菌感染的流行情况和免疫水平,指导公共卫生干预措施的制定。

以上是针对“抗链球菌溶血素O试验”的相关名词解释和应用说明。

该试验在医学领域具有重要的应用价值,能够帮助医生判断感染病的诊断和评估疫苗效果,为公共卫生工作提供科学依据。

抗O增高说明什么?

抗O增高说明什么?

抗O增高说明什么?
李严文
【期刊名称】《健康生活》
【年(卷),期】1996(000)002
【摘要】抗O的全称为抗链球菌溶血素O。

溶血性链球菌能分泌二十多种酵素和毒素,其中能够溶解红细胞的溶血素O就是很为重要的一种,它具有抗原性,因而能使机体产生相应抗体以对抗其溶解红细胞,这种抗体简称抗O。

抗O值可以通过实验室予以测定。

人体被链球菌感染后,从8—10天开始血清中抗O抗体逐惭增多,【总页数】1页(P43-43)
【作者】李严文
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R446.62
【相关文献】
1.新型抗IL-4受体α单抗Dupilumab治疗嗜酸粒细胞增高的中重度持续性哮喘的研究进展 [J], 谢林艳;柏芳芳;陈子;周林福
2.血清抗CCP抗体、高敏CRP、淀粉样蛋白A在RF增高病例中应用 [J], 刘海燕;郑英杰;陆一涵;乔伟;种诚;胡安群
3.抗“O”增高引起点滴型银屑病136例临床观察 [J], 才吉甫;向红芬
4.谷丙转氨酶增高说明什么 [J], 隋玉萍
5.转氨酶增高能说明些什么 [J], 兴兴
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抗链球菌溶血素“O”抗体(ASO)定量测定试剂盒标准操作程序

抗链球菌溶血素“O”抗体(ASO)定量测定试剂盒标准操作程序

抗链球菌溶血素“O”定量测定标准操作程序1.摘要本试剂盒适用于体外临床检验,用于测定人血清中溶血素“O”抗体的浓度。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中ASO的浓度。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定ASO浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的抗链球菌溶血素“O”抗体定量测定试剂盒采用的是免疫透射比浊法。

5.原理试剂中的链球菌溶血素“O”(SLO)包被于聚苯乙烯粒子上,样本中ASO与试剂中包被于聚苯乙烯粒子上的SLO结合,形成不溶性免疫复合物,该免疫复合物由于包被的聚苯乙烯粒子而使浊度进一步放大,在SLO足量的情况下,其浊度与人血清中ASO含量成正比,与相同条件下操作的校准品比较,通过剂量/反应曲线求出样品中ASO的含量。

6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:TRIS(PH8.2)缓冲液、0.2M、NaCl、NaN3、包被了SLO的聚苯乙烯粒子。

7.3试剂稳定性:试剂避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期,本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

R1、R2:打开后冷藏于分析仪中可稳定28天。

7.4试剂准备:试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序:使用上海科华生物工程股份有限公司试剂盒内提供的标准品对自动分析仪进行校准。

由a、b、c、d四只组成,浓度见说明书。

按照公司标准品使用要求,使用前请用0.5ml的生理盐水溶解,待完全混合均匀(大约30分钟)后再使用。

经校准测定,仪器自动对校准品反应吸光度通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品使用某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

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抗链球菌溶血素
据我院临床医师和患者反映,部分有明显症状或体征的患者定性检测ASO 总是阴性反应,不支持临床诊断。

我科于2007年6月偿试用定量检测取代定性检测,体会如下:
1材料与方法
1.1资料取172例患者静脉血,分别用免疫胶乳法和生化定量(ASO-Latex)法做抗链菌溶血素“O”试验并做比较。

1.2仪器日立7180自动生化分析仪(日本产)。

1.3试剂免疫胶乳试剂,由上海捷门生物技术合作公司提供;抗链体菌溶血素“O”测定试剂盒,由日本电化生研株式会社提供(进口)。

1.4方法①胶乳法是利用由溶血素“O”和羧化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。

ASO胶乳灵敏度调整到200IU/ml,超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒的原理进行测定,操作方法按其说明书进行。

②生化定量法(ASO-Latex)采用样品中ASO与吸附链球菌溶血素“O”的Latex粒子发生特异性的抗原抗体反应,使Latex粒子发生凝集反应,该凝集反应的吸光度变化与样品中抗链球菌溶血素“O”(ASO)效价相关。

用已知浓度的标准品制作的工作曲线上即可求得样品中ASO效价。

(以下简称胶乳法、定量法)
2结果
172例患者中,临床诊断风湿热14例,风湿性关节炎10例,其他诊断包括急性肾小球肾炎、扁桃体炎、关节痛,待查等148例,其检测结果见表1。

如表1可见,两种方法比较测值在>160 IU/ml已有临床诊断价值,而胶乳法无法测出。

2.1胶乳法灵敏度在200 IU/ml以上,超出此滴度才可出现肉眼可见的凝集。

2.2定量法灵敏度以纯水作样品空白吸光度变化量(△E/min)仅0.0003~0.0011Abs之间,当用ASO效价为500IU/ml的质控品作样品测定,吸光度变化速率在0.0471~0.0510Abs(△E/min)之间。

2.3定量法精密度:将1份测定为阳性的标本连续测定20次,CV<1.65%。

2.4定量法准确度:用已知浓度的质控品测定,测定范围在已知浓度的-2.2±2.7%之间。

2.5测量范围20~1200IU/ml,超出此范围用生理盐水稀释,结果乘以稀释倍数。

3讨论
定量法测定能得到胶乳凝集试验无法得到的数值,而用定性法已远远不能满足临床需要,目前乃至将来定量法取代定性法这是一种发展趋势。

通过我们对上述两种方法的比较,定量法因其准确、精密、敏感、特异操作方便、快捷,结果可靠,试剂效期长等诸多优点而被使用。

克服了胶乳法在操作人员技术(手法、加量、温度、时间及结果判断等)方面的人为误差,并可通过定量客观地反应ASO的存在,为临床诊断及疗效观察和预后判断提供了更有力的实验诊断依据,深受医患的广泛认可。

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