细胞工程知识点及重点难点总结

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细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结细胞工程,是一门涉及生命科学和工程学的交叉学科,它关注的是利用细胞和分子技术来实现生物医学和生物工程的应用。

细胞工程的发展不仅对医学诊疗和疾病治疗领域有着重要的意义,也对生物工程的发展起到了推动作用。

在这篇文章中,我们将对细胞工程的一些重要知识点进行总结。

1. 细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程的基础,它是指将细胞从体内或体外分离出来,在适当的环境条件下进行培养、增殖或分化。

细胞培养技术涉及到细胞培养基的配制、细胞传代方法、培养条件的调控等。

对于细胞工程的实验研究以及细胞药物的生产和培养,细胞培养技术都起到了至关重要的作用。

2. 细胞凋亡与细胞增殖细胞凋亡和细胞增殖是细胞工程中两个重要的生物学过程。

细胞凋亡是指受到内部或外部刺激后,细胞通过一系列的生化反应主动死亡。

细胞凋亡在细胞工程中有着广泛的应用,例如用于肿瘤治疗和组织工程的构建。

而细胞增殖则是指细胞的数量增加,通过细胞的分裂和增生来实现。

细胞增殖在组织修复和再生医学方面具有重要的意义。

3. 基因工程技术基因工程技术是一种将外源基因导入目标细胞中的方法,以实现特定功能或表达特定蛋白质的技术。

基因工程技术在细胞工程中被广泛应用,例如用于基因治疗和基因表达的研究。

基因工程技术的主要方法有转染法、电穿孔法、病毒介导转导等。

4. 细胞信号传导与细胞外基质细胞信号传导是细胞与细胞之间或细胞与环境之间进行信息传递的过程。

细胞信号传导是细胞工程领域研究的重点之一,它对细胞内信号传递路径的研究以及细胞外基质的调控具有重要意义。

细胞外基质是细胞外环境中的一种复杂的生物大分子结构,它不仅对身体组织的结构和功能有着重要的影响,同时也对细胞外基质中的信号传导起到了调控作用。

5. 组织工程与再生医学组织工程是一门将细胞、材料科学和工程学相结合的学科,它旨在通过构建人工组织和器官来替代或修复受损的组织和器官。

组织工程在细胞工程领域具有重要的地位,它涉及到细胞培养、支架材料的设计与构建、组织的生物学特性等。

专题2__细胞工程知识点总结

专题2__细胞工程知识点总结

生物选修3专题2 细胞工程知识点总结(一)植物细胞工程1.理论基础(原理):细胞全能性全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞2.植物组织培养技术(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。

(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。

3.植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。

化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。

(3)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。

(二)动物细胞工程1. 动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。

(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。

细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。

(4)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。

通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。

此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。

通常需加入血清、血浆等天然成分。

③温度:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2~7.4。

④气体环境:95%空气+5%CO2。

O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。

(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。

(完整word版)高中生物选修3细胞工程知识点

(完整word版)高中生物选修3细胞工程知识点

细胞工程考点一植物细胞工程1.细胞工程(1)操作水平:细胞水平或细胞器水平。

(2)目的:按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。

2.植物细胞的全能性(1)概念:具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。

(2)原理:细胞内含有本物种的全部遗传信息。

(3)全能性表达条件:具有完整的细胞结构,处于离体状态,提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。

3.植物组织培养技术(1)原理:植物细胞具有全能性。

(2)过程:4.植物体细胞杂交技术(1)概念:将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。

(2)原理:体细胞杂交利用了细胞膜的流动性,杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。

(3)过程(4)意义:克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。

5.植物细胞工程的实际应用(1)植物繁殖的新途径①微型繁殖:用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。

②作物脱毒技术:选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养,获得脱毒苗的技术。

③人工种子:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。

(2)作物新品种的培育①单倍体育种a.实质:花药离体培养过程就是植物组织培养过程。

b.流程:花药单倍体幼苗――――――――→秋水仙素诱导染色体数目加倍纯合子。

c.优点:后代不发生性状分离,都是纯合子,能够稳定遗传,明显缩短了育种年限。

②突变体的利用:筛选出对人们有用的突变体,进而培育成新品种。

(3)细胞产物的工厂化生产1.植物组织培养的关键(1)条件:离体,一定营养物质,激素(生长素、细胞分裂素)等。

(2)培养基状态:固体培养基(需再分化生根培养基及生芽培养基) (3)体内细胞未表现全能性的原因:基因的表达具有选择性。

(4)光照的应用脱分化阶段不需要给予光照,再分化阶段需要给予光照,以利于叶绿素的形成。

2.杂种植物遗传物质的变化(1)遗传特性:杂种植株中含有两种植物的遗传物质,故杂种植株具备两种植物的遗传特性。

细胞工程重难点解析

细胞工程重难点解析

浅谈《植物细胞工程》重难点突破摘要:本节学习的重点是细胞的全能性,它是植物组织培养和植物体细胞杂交的理论基础。

关于植物细胞工程,应理解植物组织培养的基本过程。

关键词:细胞全能性植物组织培养植物体细胞杂交1.细胞全能性的原理及全能性表达的条件:1.1概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能,细胞的这种特性叫做细胞的全能性。

1.2物质基础:每个细胞都包含该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全部基因。

1.3体细胞未表现全能性的原因:基因的表达具选择性。

1.4干细胞的研究及其前景干细胞具有自我更新、高度增殖和多向分化的潜能。

按照分化潜能的大小,干细胞分为以下三类:全能干细胞——比如人的全能干细胞,可以分化,构成心、肾等组织器官,最终发育成一个完整的个体。

受精卵是最初始的全能干细胞,能够生长发育成一个完整的个体;多能干细胞——具有分化为多种细胞组织的潜能,如骨髓造血干细胞、神经干细胞等;专能干细胞——是由多能干细胞分裂、分化形成的,这种干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的细胞分化,如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌干细胞等。

2.植物组织培养2.1离体的植物器官、组织或细胞经过脱分化形成愈伤组织,经过再分化形成根、芽,最后成为整株植物体。

2.2愈伤组织的形成:大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。

起动期是指细胞准备进行分裂的时期。

用于这种接种的外植体细胞,通常都是成熟细胞,处于静止状态。

起动期是通过一些诱导作用,使外植体细胞的活动加强,迅速进行蛋白质和核酸的合成;分裂期是指外植体细胞经诱导以后分化,不断分裂、增生子细胞的过程。

分化期是指在分裂期的末期,使愈伤组织内产生不同形态和功能的细胞。

3. 植物体细胞杂交:植物体细胞融合的过程大致包括:细胞分离,原生质体制备,原生质融合,杂种细胞筛选及其培养,然后再通过愈伤组织诱导分化出根、茎、叶,最后生成完整的体细胞杂种植株。

细胞工程的生物知识点总结

细胞工程的生物知识点总结

细胞工程的生物知识点总结1. 细胞结构与功能细胞是生命的基本单位,由细胞膜、质壁、细胞核、细胞质和细胞器等部分组成。

不同类型的细胞具有不同的结构和功能,请研究人员通过细胞工程技术对细胞的结构和功能进行深入研究,包括细胞的形态特征、生物化学特性、信号传导机制等。

2. 细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程中的重要内容,主要包括细胞的分离、培养、传代、冻存和复苏等技术。

通过细胞培养技术,研究人员可以获取大量的同种或异种细胞用于实验研究和临床应用。

3. 细胞信号传导细胞信号传导是细胞与环境之间相互作用的过程,包括细胞对外界刺激的感知、传导和反应等。

研究人员通过细胞工程技术可以揭示细胞信号传导的机制,以及调控信号传导过程的方法和技术。

4. 细胞分化和再生细胞分化是指未分化的细胞在外部刺激下发生形态和功能上的改变,进而组成不同类型的成熟细胞。

细胞再生是指受损细胞的修复和更新过程,是细胞工程领域的研究热点之一。

5. 干细胞研究干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞,对于细胞工程和再生医学有着重要的意义。

研究人员可以通过细胞工程技术对干细胞的生物学特性和应用潜力进行深入研究。

6. 细胞治疗和再生医学细胞治疗是指利用细胞工程技术治疗疾病的方法,包括干细胞移植、细胞基因治疗、组织工程等。

再生医学是利用细胞工程技术再生、修复和替代受损或疾病组织器官的医学领域。

7. 细胞生物传感器细胞生物传感器是一类利用细胞作为传感元件来检测生物学和化学变化的传感器,具有灵敏度高、选择性好、动态范围广等特点,对于环境监测和疾病诊断有着重要的意义。

8. 细胞克隆技术细胞克隆是人工复制和培育大量相同细胞的技术,包括植物细胞克隆、动物细胞克隆和人类细胞克隆等。

研究人员可以通过细胞工程技术研究细胞克隆的机制和方法,以及开发新的克隆技术。

总之,细胞工程是一门富有挑战和前景的学科,涉及多个学科和领域,将为人类健康、环境保护和生物制造等领域带来新的科技突破和应用。

细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结

细胞工程:以生物细胞或组织为研究对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的的利用或改造生物遗传特性,以获得特定细胞、组织、产品或新型物种的一门综合性学科。

1.微繁殖:是指在离体培养条件下、将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行无菌培养,经过不断地切割和重复培养,使其增殖并再生形成完整植株,在短期内获得大量遗传性均一的个体的方法。

2.繁殖系数:经一次增值培养或在一定时间段内由一个繁殖体所增殖获得的总繁殖体数或苗数。

3.玻璃化:也称超水化作用,是离体培养过程中试管苗发生形态、生理和代谢异常的现象。

4.褐变:是指组织培养中,由于材料被切割而使多酚氧化酶活化将组织中的酚类物质氧化形成棕褐色的醌类物质,并向培养基中扩散,抑制培养物生长甚至导致其死亡的现象。

5.原球茎:兰科植物的种子在萌发初期并不出现胚根,只是胚逐渐膨大,以后种皮的一端破裂,膨大的胚呈小圆锥状,称作原球茎。

6.茎尖分生组织:指茎尖最幼龄叶原基上方的由2或3层分生细胞组成的很小区域、一般最大直径不超过0.1mm,长度0.25mm,最小的茎尖长度仅有几十微米,有时也称顶端分生组织。

7.不定芽:相对于顶芽和腋芽、由植物的其他部位或器官、组织上通过器官发生重新形成的、无固定着生位置的芽统称为不定芽。

细胞细胞工程知识点绪论研究内容(根据操作对象):1)器官组织和细胞培养2)原生质体培养3)植物胚胎培养4)动物胚胎工程5)转基因动植物6)胚胎干细胞7)染色体工程研究内容(研究水平);个体、器官、组织、细胞、亚细胞、分子等不同研究层次动物细胞发展经历了哪些阶段?答:①细胞培养技术②细胞融合技术③动物胚胎移植技术④体外受精技术⑤动物克隆技术⑥转基因动物技术⑦胚胎干细胞技术生物工程:1)发酵工程2) 基因工程3)酶工程4)细胞工程5)蛋白质工程(第二章没有放进来!!!!)第三章培养原理细胞学说:1838年,主要观点:细胞是生物体的基本结构单位,由它构成整个生物个体。

2023年高中生物“细胞工程简介”知识总结

2023年高中生物“细胞工程简介”知识总结

高中生物“细胞工程简介〞知识总结。

一、细胞工程
1. 定义:应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。

2. 理论根底:细胞全能性。

3. 分类:
植物细胞工程:技术手段包含植物组织培养、植物体细胞杂交。

动物细胞工程:技术手段包含动物细胞培养、单克隆抗体、胚胎移植、核移植。

二、细胞的全能性
1. 概念:生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。

2. 细胞分化的原因:基因总在特定的时间和空间条件下选择性表达。

3. 根底:生物体的每一个细胞都含有本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体的全套基因。

4. 完成条件:离体、提供营养物质、激素及其他适宜条件〔pH、温度、无菌操作〕。

5. 分化程度
注:胚胎干细胞为人体内最原始的细胞,存在于骨髓、脐血和脑中。

该细胞的特点是可以无限增殖分化为机体的任何组织器官,经器官移植到自身后不会引起排异反响。

三、各种细胞工程的比拟
1. 植物组织培养与动物细胞培养的比拟
2. 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比拟
3. 核移植技术与胚胎移植的比拟
4. 几种技术手段培养的个体的比拟。

细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结细胞工程的知识点主要涵盖细胞生物学、生物医学工程、材料科学、化学等多个领域的内容,下面将对一些重要的知识点进行总结和介绍。

一、细胞生物学1. 细胞结构和功能:细胞是生物体的基本单位,包括细胞质、细胞核、细胞膜等结构组成,具有营养吸收、代谢、生长繁殖、分化等功能。

2. 细胞信号传导:细胞通过受体、信号分子等进行信号传导,调控生物功能和代谢活动。

3. 细胞分化:在不同环境条件下,细胞可以分化成不同类型的细胞,如干细胞可以分化成心肌细胞、神经细胞等。

4. 细胞凋亡和增殖:细胞在受到损伤或者环境刺激时,会发生凋亡或者增殖,维持细胞组织的稳态。

二、生物医学工程1. 细胞培养技术:包括细胞分离、培养基配制、细胞传代、细胞冻存等技术,用于大规模的生物制品的生产。

2. 细胞毒性和安全性评价:评估材料或者药物对细胞的毒性和安全性,保证产品的安全性和有效性。

3. 细胞治疗和干细胞技术:通过干细胞移植、基因修复等技术,用于治疗各种疾病和损伤。

4. 人工器官和组织工程:将细胞和生物材料结合,构建人工器官和组织,用于替代受损的组织和器官。

三、材料科学1. 生物材料的设计和制备:设计和制备适合细胞生长的生物材料,如生物降解材料、生物亲和材料等。

2. 生物材料的表征和评价:通过表面形貌、力学性能、生物相容性等评价生物材料的性能。

3. 细胞-材料相互作用:研究细胞和材料之间的相互作用机制,改善生物材料的生物相容性和使用性能。

四、化学1. 细胞药物递送系统:设计纳米级的载体或者纳米颗粒,用于细胞内的靶向递送和释放药物。

2. 细胞标记和成像技术:利用高灵敏度的成像设备和生物标记物,在活细胞和组织中进行细胞成像和追踪。

3. 细胞信号调控:通过合成化学的方法来调控和干预细胞信号传导系统,研究细胞功能和代谢途径。

细胞工程的发展趋势主要包括以下几个方向:1. “定制化医疗”:根据个体的基因组信息和生理状态,设计和生产个性化的治疗产品和医疗器械,提高治疗效果。

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第一章绪论1、细胞工程的概念,广义的细胞工程,狭义的细胞工程,⏹细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。

⏹广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术,狭义的细胞工程则是指细胞融合和细胞培养技术。

2、细胞工程的研究内容(研究生物类型,实验操作对象)⏹根据研究生物类型不同,细胞工程可分为动物细胞工程、植物细胞工程、微生物细胞工程。

⏹动物细胞工程包括:细胞培养技术(包括组织培养、器官培养);细胞融合技术;胚胎工程技术(核移植、胚胎分割等);克隆技术(单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆)。

⏹植物细胞工程包括:植物组织、器官培养技术;细胞培养技术;原生质体融合与培养技术;亚细胞水平的操作技术等。

3、细胞工程的重要应用(植物、动物)⏹植物细胞工程的应用:脱毒和快速繁殖细胞工程育种:利用培养变异,筛选优良突变体利用远缘杂交幼胚培养,获得杂种植株,克服其杂交不亲和性利用细胞融合技术,克服远缘杂交不亲和性倍性育种离体种质保存细胞培养生产有用物质⏹动物细胞工程的应用动物细胞培养生产医药产品(单克隆抗体)新品种培育试管动物与婴儿组织工程珍稀动物资源的保存与保护第二章细胞工程基础1、细胞分化:个体细胞发育过程中,后代细胞在形态、结构和生理功能上发生差异的过程。

2、发育潜能:指细胞分化能力的强弱。

3、细胞全能性:指细胞具有发育成完整个体的潜能。

4、细胞多能性:指随着胚胎发育,有的体细胞失去全能性,具有分化出多种组织的潜能。

5、去分化:又称脱分化,指某些条件下分化细胞不稳定,又回到未分化状态的这一过程6、愈伤组织:脱分化后的细胞,经过细胞分裂,产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。

愈伤组织的种类胚性愈伤组织(Embryonenic callus):表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。

胚性愈伤组织容易形成胚状体,所以被称为胚性愈伤组织。

非胚性愈伤组织:表面粗糙、组织结构疏松、细胞大。

第三章细胞工程实验室及实验基本操作(教材第二章)1、什么是灭菌?是么是消毒?(P18)灭菌是指杀灭或者去除物体表面和孔隙内的所有微生物,包括抵抗力极强的细菌芽胞。

消毒是指杀死物体上的病原微生物,但细菌芽胞和非病原微生物可能还存活。

2、常用的灭菌和消毒方法有哪些?物理法(一)紫外线直接照射、表面灭菌、可消毒空气和培养用具(如塑料器皿),消毒的效力和距离有密切关系,故无菌室天花板一般不宜太高。

一般石菌室内空气、桌椅以及培养用具在紫外线有效消毒距离内,照射30分钟,可达到灭菌效果。

紫外线照射使用方便、消毒效果好;缺点是能产生臭氧,污染空气,且对未直接照射的部分无消毒效果。

(二)干热消毒主要用于消毒玻璃器四周,干热、消毒的器皿干燥,易贮存。

但干热传导慢,需加温到160℃,保持90~120分钟,才能杀死芽孢,达到消毒目的。

消毒后不要立即打开箱门,防止冷空气忽然进入影响消毒效果和损坏玻璃器皿。

金属器械和橡胶制品不能用于干热消毒等。

(三)湿热消毒即高压蒸气消毒,是最有效的一种方法。

布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿以及某种液体都可以用这种方法。

(四)滤过消毒不能高温高压灭菌的液体可以用此法,如动物组织的人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶系。

须选一定规格的滤器,液体滤过速度,且保证除菌效果的关键。

一般以肉眼可见液滴滴下为。

滤过后及时分装。

(五)煮沸消毒急需要时的常规方法,金属器械、胶塞在水中煮沸20~30分钟,趁热倒去水分即可使用。

化学法(一)消毒剂灭菌来苏尔、新洁尔灭(1%)、70~75%酒精、安替福氏、贝氯酸钙、乳酸蒸气、环氧乙烷。

(二)抗菌素灭菌:(三)熏蒸灭菌3、什么是平衡盐溶液(BSS)?平衡盐溶液(Balanced Salt Solution;BSS)又称生理盐水或盐溶液。

具有维持渗透压,控制酸碱度的平衡作用,同时也能供给细胞中生存所需的能量和无机盐离子,用作冲洗组织和细胞,配制各种培养用液的基础溶液,也可用于短暂培养。

成分:水,无机盐,葡萄糖组成。

4、什么是生物安全实验室?目前,生物安全实验室的种类有哪些,各有什么特点。

5、动物细胞培养的天然培养基有哪些?天然培养基1.血浆最常用的是鸡血浆,它具有一定的营养,与少量鸡胚浸出液混合后,有良好的凝固作用,利于支持细胞的生长。

缺点易液化,一般常用作各种细胞生长的基质。

2.鼠尾胶原对维持细胞生长有良好作用。

由于鸡血浆存在一定缺点,人们曾试用了很多化药品,其中鼠尾胶原较好。

它能促进组织和细胞的附着,改善生长表面药性。

来源:燃尾键,豚鼠真皮,牛的真皮和牛眼的水晶体,实验室常用大鼠尾制胶原。

3.胚胎浸出液主要成分是大分子核蛋白和小分子氨基酸,有刺激细胞生长的作用。

在动物、细胞培养中应用最早,但由它而作了变到使用合成培养液,并渐渐被合成培养液所代替,但在研究中仍有应用价值。

常用的有鸡胚和牛胚。

4.血清是动物用量最大的天然培养基。

血清含有丰富的营养物质,包括大分子的蛋白质和核酸。

动物细胞的生长和增殖需要血清。

实验证明血清对细胞附着和保护尚有明显作用,且能中和有毒物质的毒性,使细胞不受伤害。

血清种类很多,其中有小牛血清、胎牛血清、马血清、人胚胎血清等,胎牛血清比较理想,但不易得到。

目前各实验室多采用小牛血清。

目前已有出售小牛商品血清。

人血清一般都采用AB型血清,但价格昂贵,很少用。

5.血清代用品血清的来源比较困难,而且成分复杂,人们努力寻找其替代品,其中有聚乙烯、吡咯咆酮(P、V、P)、蛋白胨、水解乳蛋白等,但都不如血清,因而没广泛使用。

第四章植物组织器官培养技术(教材第四、七、八章)1、离体无性繁殖(propagation in vitro) :利用离体培养技术,将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行离体培养,在短期内获得大量遗传形状一致的个体的方法。

也称之为微繁(micropropagation)、快速繁殖(rapid clone progagation)。

2、繁殖系数(breeding coefficient):也叫增殖率,指每块外植体在一个培养周期内增殖的倍数.3、简述离体无性繁殖的程序。

(1)无菌培养物制备,包括:外植体的选择-外植体灭菌-接种-培养等基本过程。

(2)培养物的增殖腋芽增殖:培养方法简单,能高度保持遗传稳定性,能长期继代繁殖不定芽增殖:繁殖系数高,非洲紫罗兰用常规叶插法,每片叶只能产生几个或十几个芽,但在组培条件下可一次形成几十至几百个芽,一年可以培养成千上万个小植株。

遗传稳定性较好。

但继代次数有限。

培养物继代一定次数以后,不定芽形成能力即减弱,需要重新建立起始无菌培养物。

此外,不定芽需要进行生根培养才能形成真正的植株。

诱导不定芽一般需要同时加入外源生长素和细胞分裂素,二者的配比一般是细胞分裂素要略高于生长素,其二者的总体使用浓度应尽可能的低,以免产生过多的愈伤组织。

以保证繁殖品种的遗传稳定性。

胚状体增殖:增长率高,双极性免去生根环节,但胚状体休眠的诱导和解除还难以把握,其成苗率仍不高。

目前除一些特殊用途外(人工种子),这一途径还没有用于快繁技术。

愈伤组织增殖:所有的植物通过组织培养的方法均可以诱导愈伤组织,再进一步分化即可获得小植株。

这一途径经历了组织培养技术的所有过程(愈伤组织诱导-愈伤组织增殖-芽分化-生根-完整植株),它属于真正意义上的组织培养。

一切通过其它增殖方式不能成功的植物,均可以通过此途径获得组培苗。

其特点是成功率高,繁殖系数大,但遗传稳定性较差。

对品种要求遗传稳定性高的作物一般不采用这一途径快繁原球茎增殖:细胞或组织培养经原球茎途径分化成植株。

大部分兰花属于这一类型,即兰花的各个部分的离体组织都能诱导形成原球茎,再经培养分化形成植株。

原球茎是兰花种子萌发时产生的呈珠粒状、缩短的、类似嫩茎的器官。

(3)生根培养:一种是在固体培养基上诱导生根。

当试管苗长到2~3厘米高时,将它从基部切下,转移到固体培养基上生根(生根培养基一般要求降低矿物营养的浓度,提高生长素的浓度,具体应根据植物不同而定)另一种是浸泡的方法,将切下的无根试管苗泡在含有高浓度生长素溶液中,生长素浓度为100毫克/升左右,浸泡时间从几小时到1天,然后取出接种于不加任何激素的MS培养基上或者扦插在人工基质上,十天左右即可生根。

(4)炼苗和移栽:将瓶盖打开,打破无菌环境,湿度逐渐下降,光照逐渐加强,使之形成新的功能强的根和叶片。

一般炼苗时间为2—3d。

移栽时应注意的问题:a、防止菌类滋生;b、保持小苗水分供给平衡(5)再生植株的鉴定4、简述当前脱除植物病毒的方法及原理。

茎尖培养脱毒法;热处理脱毒法;微体嫁接离体培养脱毒法;珠心组织培养法;愈伤组织脱毒茎尖脱毒:依据:病毒在植物体内分布是不均一的,越接近生长点约(0.1-1mm区域),病毒浓度越稀,因此有可能采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒。

热处理脱毒法:①热处理不能杀死病毒。

只能钝化病毒的活性,使病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止,而失去浸染能力。

②热处理是一种物理效应,可以加速植物细胞的分裂,使植物细胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。

微体嫁接离体培养脱毒法:同茎尖脱毒。

珠心组织培养法:一般认为病毒是通过维管组织传播的,珠心组织与维管系统没有直接联系,因此珠心组织培养可获得无病毒植株。

愈伤组织脱毒:病毒在植物体内不同器官或同一器官不同组织中分布不均匀,由那些无病毒细胞产生的愈伤组织就是获得无病毒苗的基础。

5、简述脱毒效果如何检测A 指示植物鉴定(indicator test plants) 所谓指示植物是指具有能够辨别某种病毒的专化性症状的寄主植物。

每种病毒都有自己敏感的植物,指示植物鉴定病毒的方法:a.摩擦接种法:通过汁液传播的病毒,b、嫁接法:通过专门的介体传播的病毒,B 血清鉴定(serologic test) 试管沉淀反应;免疫双扩散;酶联免疫吸附测定(ELISA)。

C 电镜检查法采用电子显微镜,可直接观察样品材料有无病毒存在,还可以进一步鉴定病毒颗粒大小、形状和结构,这些特征相当稳定,因此电镜检查法即准确又有效,但需要有一定的设备和技术。

D 分子检测法例如RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reation)将待测的样品的总RNA与cDNA合成的试剂盒进行反应,合成cDNA,然后利用病毒DNA特有的序列设计引物进行PCR反应,即可知道在寄主中是否有病毒基因的表达6、脱毒苗的保存与繁殖。

⏹脱毒苗的离体保存与繁殖:一般是在实验室进行,一般每月继代一次,可以在培养基中加入生长延缓剂,如B9和矮壮剂可2-3个月继代一次,也可放到液氮或4℃冰箱中保存。

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